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Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo

On-line version ISSN 1678-9946

Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo vol.31 no.3 São Paulo May/June 1989

http://dx.doi.org/10.1590/S0036-46651989000300005 

ARTIGO ORIGINAL

 

Imunofluorescência indireta no pênfigo foliáceo endêmico. contribuição para sua padronização

 

Indirect immunofluorescent reaction in endemicus pemphigus foliaceus

 

 

Horácio FriedmanI; Iphis T. CampbellI; Rosicler Rocha AlvarezI; Luis A. DiazII; Raymundo Martins De CastroIII; Isaac RoitmanIV; Rosa M. ParreirasI; Alberto N. RaickI

ILaboratório de Patologia e Serviço de Dermatologia da Fundação Universidade de Brasília. Brasília, DF, Brasil
IIImmunodermatology Unit, Department oí Dermatology, Johns Hopkins Medical Institutions. Baltimore, MD, USA
IIIDepartamento de Dermatologia, Escola Paulista de Medicina. São Paulo, SP, Brasil
IVLaboratório de Microbiologia e Imunologia da Fundação Universidade de Brasília. Brasília, DF, Brasil

Endereço para correspondência

 

 


RESUMO

O propósito da presente investigação foi padronizar a reação de imunofluorescência indireta para Pênfigo Foliáceo Endêmico (Fogo Selvagem). Verificamos que a pele humana normal é o substrato ideal e que pode proceder de prepúcio, cabeça, pescoço ou da parede abdominal anterior. A lavagem prévia da pele precedendo a incubação com o soro deve ser evitada pois a antigenicidade pode ser diminuída. O TAS-cálcio preserva as propriedades antigênicas da pele e deve ser preferido como diluente para os soros. Lâminas cobertas com albumina são úteis porque aumentam a aderência dos cortes de pele. A diluição apropriada do conjugado é convenientemente determinada pelo teste de imunodifusão radial (método de Ouch-terlony). Com referência à correlação entre título de anticorpos e atividade clínica, concluímos que um título igual ou maior do que 160 era de mau prognóstico pois estava associado à forma generalizada da doença ou à casos de forma localizada refratários à terapêutica usual. Contudo, esta obervação requer confirmação através de estudos que envolvam uma abordagem clínica apropriada.

Unitermos: Pênfigo foliáceo endêmico; Imunofluorescência indireta.


SUMMARY

The aim of the present research was to standardize the indirect immunofluorescence reaction for Endemic Pemphigus Foliaceus (Fogo Selvagem). We found that fresh human skin was the ideal substrate and could proceed from foreskin, head, neck, or anterior abdominal wall. PBS pre-washing of the skin preceding the incubation with the serum should be avoided since the antigenicity might be diminished. TAS-calcium preserves the Pemphigus antigenic properties of the skin and shall be preferred as the diluent for the sera. Albumin-coated slides are useful because they increase the adherence of the skin sections. The conjugate appropriate dilution is convenientely determined by the radial immunodiffusion test (Ouchterlony method). So far as the correlation between the antibody titer and the clinical activity is concerned, we concluded that a titer of 160 or more was of bad prognosis, since it was associated with the generalized form of the disease or with cases of the localized form refractory to the usual therapy. Nevertheless, this assumption needs confirmation by further studies involving an appropriate clinical approach.


 

 

Texto completo disponível apenas em PDF.

Full text available only in PDF format.

 

 

AGRADECIMENTOS

Agradecemos o auxílio técnico de Paula Bonitz, Gerardine M. M. Finn, Pedro B. Araújo e Bráulio S. Santos Filho e a assistência fotográfica de Paulo H. B. Leite. Esta pesquisa foi em parte amparada financeiramente pelo Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq (projeto 40.6319/84) e pelo Decanato de Pesquisa e Pós-Graduação da Fundação Universidade de Brasília (projeto 54025).

 

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. ACOSTA, E. & IVANYL, L. - Comparison of the reactivity of various epithelial substrates for the titration of Pemphigus antibodies by indirect immunofluorescence. Brit. .J. Derm., 107: 537-541, 1982.         [ Links ]

2. AHMED, A. R. - Clinical features of Pemphigus. Clin. Derm., 1: 13-21, 1983.         [ Links ]

3. AHMED, A. R.; GRAHAM, J.; JORDON, R. E. & PROVOST, T. T. - Pemphigus current concepts. Ann. intern. Med., 92: 396-405, 1980.         [ Links ]

4. ANHALT, G. J.; DIAZ, L. A.; LABIB, R. S. & PROVOST, T. T. - Procedures Manual. Baltimore, Dermatology Unit, Johns Hopkins Medical Institutions, 1987.         [ Links ]

5. ANHALT, G. J.; LABIB, R. S.; VOORHEES, J. J.; BEALS, T. F. & DIAZ, L. A. - Induction of Pemphigus in neonatal mice by passive transfer of IgG from patients with the disease. New Engl. J. Med., 306: 1189-1196, 1982.         [ Links ]

6. AUAD, A. - Pênflgo foliáceo sul-americano no estado de Goiás. Rev. Pat. trop., 1: 293-346, 1972.         [ Links ]

7. AVALOS, E.; PATEL, H. P.; ANHALT, G. J. & DIAZ, L. A. - Autoimmune injury of squamous epithelium by Pemphigus autoantibodies. Brit. J. Derm., 111: 359-365, 1984.         [ Links ]

8. BEUTNER, E. H.; JABLONSKA, S.; CHORZELSKI, T. P. & NISENGARD, R. J. - Reliability of indirect immunofluorescence testing. Arch. Derm, 116: 1228-1229, 1980.         [ Links ]

9. BEUTNER, E. H.; JORDON, R. E. & CHORZELSKI, T. P. - The immunopathology of Pemphigus and Bullous Pemphigoid. J. invest. Derm., 51: 63-80, 1968.         [ Links ]

10. BEUTNER, E. H.; LEVER, W. F.; WITBESKY, E.; JORDON, R. E. & CHERTOCK, B. - Autoantibodies in Pemphigus Vulgaris: response to an intercellular substance of epidermis. J. Amer. med. Ass., 192: 682, 1965.         [ Links ]

11. CASTRO, R. M.; CHORZELSKI, T.; JABLONSKA, S. & MARQUART JR., A. - Antiepithelial antibodies in healthy people living in an endemic area of South American Pemphigus Foliaceus (Fogo Selvagem). Preliminary report. Castellania, 4: 111-112, 1976.         [ Links ]

12. CASTRO, R. M.; ROSCOE, J. T. & SAMPAIO, S. A. P.-  Brazilian Pemphigus Foliaceus. Clin. Derm., 1: 22-41, 1983.         [ Links ]

13. CHORZELSKI, T. P. & BEUTNER, E. H. - Factors contributing to occasional failures in demonstration of Pemphigus antibodies by the immunofluorescence test. J. invest. Derm., 53: 188-191, 1969.         [ Links ]

14. CRESWELL, S. N.; BLACK, M. M.; BHOGAL, B. & SKEETE, M. V. H. - Correlation of circulating intercellular antibody titres in Pemphigus with disease activity. Clin. exp. Derm., 6: 477-483, 1981.         [ Links ]

15. CUNHA, P. R. - Estudo soro-epidemiológico em foco de pènfigo foliáceo endêmico (Fogo selvagem) no Estado de São Paulo. São Paulo, 1988. (Tese de Doutoramento -  Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo).         [ Links ]

16. DIAZ, L. A.:. SAMPAIO, S. A. P.; RIVITTI, E. A.; MARTINS, C. R.; CUNHA, P. R.; LOMBARDI, C; ALMEIDA, F. A.; CASTRO, R. M.; MACCA, M. L.; LAVRADO, C; BORGES, P.; MINELLI, L.; EMPINOTTI, J. C; FRIEDMAN, H.; CAMPBELL, I. T.; LABIB, R. S. & ANHALT, G. J. - I. Endemic P emphigus Foliaceus (Fogo selvagem). J. Amer. Acad. Derm., 1988. (in press).         [ Links ]

17. DIAZ, L. A.; SAMPAIO, S. A. P.; RIVITTI, E. A.; MARTINS, C. R.; CUNHA, P. R.; LOMBARDI, C; ALMEIDA, F. A.; CASTRO, R. M.; MACCA, M. L.; LAVRADO, C; BORGES, P.; MINELLI, L.; EMPINOTTI, J. C; FRIEDMAN, H.; CAMPBELL, I. T.; LABIB, R. S. & ANHALT, G. J. - Endemic Pemphigus Foliaceus (Fogo Selvagem): II. Current and historic epidemiologic studies. J. invest. Derm., 1988 (in press).         [ Links ]

18. FEIBELMAN, C; STOLZNER, G. & PROVOST, T. T. - Superior sensitivity of monkey esophagus in the determination of Pemphigus antibody. Arch. Derm., 117: 561-563, 1981.         [ Links ]

19. FITZPATRICK, R. E. & NEWCOMER, V. D. - The correlation of disease activity and antibody titers in Pemphigus. Arch. Derm., 116: 285-290, 1980.         [ Links ]

20. GOLAN, D.; GUILHAR, A.; SHMUEL, Z. & MOSHKOWITZ, M. - Autoantibodies to epithelial cells (intercellular substance) and their correlation with clinical activity of Pemphigus Vulgaris. Dermatológica (Basel), 169: 339-341, 1984.         [ Links ]

21. JUDD, K. P. & LEVER, W. F. - Correlation of antibodies in skin and serum with disease severity in Pemphigus. Arch. Derm., 115: 428-432, 1979.         [ Links ]

22. JUDD, K. P. & MESCON, H. - Comparison of different epithelial substrates useful for indirect immunofluorescence testing of sera from patients with active Pemphigus. J. invest. Derm., 72: 314-316, 1979.         [ Links ]

23. KATZ, S. I.; HALPRIN, K. M. & INDERBITZIN, T. M. - The use of human skin for the detection of anti-epithelial auto-antibodies. A diagnostic and prognostic test. J. invest. Derm., 53: 390-399, 1969.         [ Links ]

24. LEVER, W. F. & SCHAUMBURG-LEVER, G. - Histopathology of the skin. 6th. ed. Philadelphia, J. B.Lippincott., 1983.         [ Links ]

25. MATIS, W. L.; ANHALT, G. J.; DIAZ, L. A.; RIVITTI, E. A.; MARTINS, C. R. & BERGER, R. S. - Calcium enhances the sensitivity of immunofluorescence for Pemphigus antibodies. J. invest. Derm., 88: 302-304, 1987.         [ Links ]

26. OGAWA, H.; TANEDA, A. & MORIOKA, S. - Characterization of Pemphigus antigen. J. invest. Derm., 70: 194-196, 1978.         [ Links ]

27. PROENÇA, N. & CASTRO, R. M. - Pênfigo foliáceo sul-americano. Rev. Hosp. Clin. Fac. Med. S. Paulo, 26: 115-122, 1971.         [ Links ]

28. RIVITTI, E. A. - Eletroforese, imunoeletroforese, antiestreptolisina O e anticorpos anti-epitélio no pênfigo foliáceo sul-americano. Estudo evolutivo. São Paulo, 1972 (Te se de doutoramento - Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo).         [ Links ]

29. ROSCOE, J. T.; NAYLOR, P. H.; DIAZ, L. A.; LABIB, R. S.; PATEL, H. P.; GOLDSTEIN, A. L.; SAMPAIO, S. A. P. & ANHALT, G. J. - Elevated thymosin alpha 1 levels in Brazilian Pemphigus Foliaceus. Brit. J. Derm., 115: 147-150, 1986.         [ Links ]

30. SABOLINSKI, M. L.; BEUTNER, E. H.; KRASNY, S.; KUMAR, V.; HUANG, J.; CHORZELSKI, T. P.; SAMPAIO, S. A. P. & BYSTRYN, J. C. - Substrate specificity of anti-epithelial antibodies of Pemphigus Vulgaris and Pemphigus Foliaceus sera in immunofluorescence tests on monkey and guinea pig esophagus sections. J. invest. Derm., 88: 545-543, 1987.         [ Links ]

31. SEVADJIAN, C. - Nosology of Brazilian Pemphigus Foliaceus. Int. J. Derm., 18: 781-786, 1979.         [ Links ]

32. SISON-FONACIER, L. & BYSTRYN, J. C. - Regional variations in antigenic properties of skin. J. exp. Med., 164: 2125-2130, 1986.         [ Links ]

33. TAKAHASHI, M. D. F. - Imunopatologia do pênfigo foliáceo sul-americano. Estudo por imunofluorescência direta e indireta. São Paulo, 1981. (Dissertação de mestrado - Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo).         [ Links ]

34. WEISSMAN, V.; FEUERMAN, E. J.; JOSHUA, H. & HAZA, B. - The correlation between the antibody titers in sera of patients with Pemphigus Vulgaris and their clinical state. J. invest. Derm., 71: 107-109, 1978.         [ Links ]

35. WENK, P. A. - Pre-coated slides can save time and headaches for histotechs. Detroit, Lab Tips from Lipshaw, 1986.         [ Links ]

 

 

Endereço para correspondência:
Dr. Horácio Friedman
Laboratório de Patologia
Faculdade de Ciências da Saúde
Universidade de Brasília
CEP 70910. Brasília, DF, Brasil

Recebido para publicação em 16/9/1988.

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