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Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo

On-line version ISSN 1678-9946

Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo vol.32 no.4 São Paulo July/Aug. 1990

http://dx.doi.org/10.1590/S0036-46651990000400007 

SOROEPIDEMIOLOGIA

 

Detección de portadores asintomáticos de quistes hidatídicos: aumento de la especificidad del ensayo inmunoenzimático

 

Detection of asymptomatic hydatic cysts carriers by an enzymatic immunoassay

 

 

E. A. ColtortiI; E. FernándezII; E. R. MarguetII; J. D. ScozzinaII; E. A. GuarneraI

ICentro Panamericano de Zoonosis, Programa de Salud Pública Veterinaria, OPS/OMS, C.C. 3092, Correo Central, 1000 Buenos Aires, Argentina
IIDepartamento de Control de Patologías Prevalentes, Subsecretaria de Salud, 9103 Rawson, Chubut, Argentina

 

 


RESUMEN

Una de las actividades que realizan los programas de control de hidatidosis causada por Echinococcus granulosus en la República Argentina es la búsqueda de portadores asintomáticos de quistes hidatídicos entre la población general que habita las áreas de riesgo, mediante un ensayo inmunoenzimático (EIE) con antígeno de liquido hidatídico total (EIE-ALHT) que selecciona los posibles portadores. En base a la experiencia recogida se ha observado que dependiendo de la prevalencia del área, entre el 10% y el 30% de las personas seleccionadas por el EIE con valores de densidad óptica (DO > DO + 4S no presentan imagenes compatibles con quistes hidatídicos. El propósito del estudio fue mejorar la especificidad de la prueba. Con ese fin, se evaluó la influencia de la modificación de la oferta antigénica y el efecto de la absorción de los anticuerpos anti-componentes séricos ovinos y anti-fosforilcolina de los sueros en estudios. 114 sueros no hidatídicos seleccionados por su alto nivel de reacciones cruzadas en EIE-ALHT y 118 sueros hidatídicos se estudiaron frente a 4 fracciones antigénicas de liquido hidatídico ovino. El EIE que empleo la fracción antigénica S2B conjuntamente con la absorción previa de los sueros (EIE-S2B/A) fue el sistema que mejor discriminó los sueros hidatídicos de los no hidatídicos con altos niveles de anticuerpos no relacionados con la presencia de quistes. Se propone el empleo del sistema EIE-S2B/A para la búsqueda a campo de portadores asintomáticos de quistes hidatídicos en reemplazo del EIE-ALHT actualmente en uso. Las 4 fracciones antigénicas fueron analizadas por doble difusión y SDS-PAGE. La fracción S2B se caracterizó como enriquecida en componentes parasitarios de menos de 30 Kd entre los cuales se encontrarian el antígeno B y subunidades o fragmentos del antígeno 5.

Unitermos: Hidatidosis; E. granulosus; Seroepidemiologia; Inmunodiagnóstico.


SUMMARY

An enzymoimmunoassay (EIE) as a screening test to select potential asymptomatic cyst carriers among the general population of areas under risk is being used in programs for the control of hydatic diseases caused by Echinococcus granulosus in Argentina. The experience obtained up to date, applying this assay in population surveys, indicates that depending on the prevalence in the area 10% to 30% of the individuals selected did not show images compatible with hydatic cysts. The purpose of the present study was to improve the specificity of the test. To this purpose, the influence of the modification of the antigenic availability and the effect of the absorption from the serum samples of antibodies anti-normal ovine sera and anti-phosphorylcholine was evaluated. One hundred and fourteen non hydatic sera selected because of their high cross reactivity in EIE using the whole hydatid antigen (WHA) and 118 hydatid sera, were studied with four fractions of ovine hydatid cyst fluid. The EIE employing the S2B antigenic fraction with previous absorption of the sera (EIE-S2B/A) was the system that discriminated better hydatid sera from non hydatid sera with high levels of cross reactivity. The replacement of the EIE employing WHA by the EIE-S2B/A system, for the active search of asymptomatic cyst carriers in field conditions, is proposed. The four antigenic fractions were analyzed by double diffusion and SDS-PAGE. The S2B fraction revealed a high content of parasitic components of less than 30 Kd which probably includes antigen B and subunits or fragments of antigen 5.


 

 

Texto completo disponible sólo en PDF.

Full text available only in PDF format.

 

 

AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecen al Sr. Roberto O. Garcia por su esmerada colaboración técnica. Al Dr. Giuseppe Vicari por habernos cedido gentilmente el anticuerpo monoclonal 3E5 y al Dr. Naum Marchewsky por su colaboración en el análisis estadístico.

 

REFERENCIAS

1. CAPRON, A.; VERNES, A. & BIGUET, J. — Le diagnostic immunoelectrophorétique de l'hidatidose. In: Le kyste hydatique du foie. Journnaises Lyonnaises d'hydatidologie. Lyon, Simep, 1967. p. 27-40.         [ Links ]

2. CENTRO PANAMERICANO DE ZOONOSIS, OPS/OMS. Diagnóstico inmunológico de la hidatidosis humana mediante la prueba de doble difusión arco 5. Ramos Mejia, Buenos Aires, Centro Panamericano de Zoonosis, 1979. 40 p. Nota Técnica, Nº 22.         [ Links ]

3. COLTORTI, E.A. — Standardization and evaluation of an enzyme immunoassay as a screening test for the seroepidemiology of human hydatidosis. Amer. J. trop. Med. Hyg., 35: 1000-1005, 1986.         [ Links ]

4. COLTORTI, E.A.; FERNÁNDEZ, E.; GUARNERA, E.; LAGO, J. & IRIARTE, J. — Field evaluation of an enzyme immunoassay for detection of asymptomatic patients in a hydatic control program. Amer. J. trop. Med. Hyg., 38: 603-607, 1988.         [ Links ]

5. COLTORTI, E.A.; GUARNERA, E.; LARRIEU, E.7 SANTILLAN, G. & AQUINO, A. — Seroepidemiology of human hydatidosis: use of dried blood samples on filter paper. Trans. roy. Soc. trop. Med. Hyg., 82: 607-610, 1988.         [ Links ]

6. COLTORTI, E.A. & VARELA DÍAZ, V.M. — IgG levels and host specificity in hydatic cyst fluid. J. Parasit., 58: 753-756, 1972.         [ Links ]

7. COLTORTI, E.A. & VARELA DÍAZ, V.M. — Detection of antibodies against Echinococcus granulosus arc 5 antigens by double diffusion test. Trans. roy. Soc. trop. Med. Hyg., 72: 226-229, 1978.         [ Links ]

8. DI FELICE, G.; PINI, C.; AFFERNI, C. & VICARI, G. — Purification and partial characterization of the mayor antigen of Echinococcus granulosus (antigen 5) with monoclonal antibodies. Molec. Biochem. Parasit., 20: 133-142, 1986.         [ Links ]

9. LAEMMLI, U.K. — Cleavage of strutural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature, 227: 680-685, 1970.         [ Links ]

10. LARRIEU, E.; DE ZABALETA, O.; IRIARTE, J. & BITSCH, A. — Sistema de vigilancia epidemiológica de la hidatidosis en la región patagónica argentina. Vet. argent., 2: 843-853, 1985.         [ Links ]

11. LARRIEU, E.; RODRÍGUEZ JAUREGUI, J.; ODRIOZZOLA, M. & MEDINA, M. — Epidemiología de la hidatidosis humana en la Provincia de Rio Negro. Acta gastroent. latinoamer., 16: 93-108, 1986.         [ Links ]

12. MADDISON, S.E.; SLEMENDA, S.B.; SCHANTZ, P.M.; FRIED, J.A.; WILSON, M. & TSANG, V.C.W. — A specific diagnostic antigen of Echinococcus granulosus with an apparent molecular weight of 8 Kda. Amer. J. trop. Med. Hyg., 40: 337-383, 1989.         [ Links ]

13. MAIZELS, R.M.; BURKE, J. & DENHAM, D.A. — Phosphorylcholine-bearing antigens in filarial and infection sera from Brugia malayi and B. pahangi. Paras. Immunol., 9: 49-66, 1987.         [ Links ]

14. ORIOL, R.; WILLIAMS, J.F.; PÉREZ ESANDI, M. & ORIOL, C. — Purification of lipoprotein antigens of Echinococcus granulosus from sheep hydatid fluid. Amer. J. trop. Med. Hyg., 20: 569-575, 1971.         [ Links ]

15. PERY, P.; LUFFAU, G.; CHARLEY, J.; PETIT, A.; ROUZE, P. & BERNARD, S. — Phosphorylcholine antigens form Nippostrongylus brasiliensis. I. Anti-phosphorylcholine antibodies in infected rats and locations of phosphorylcholine antigens. Ann. Immunol. (Paris), 130C: 879-888, 1979.         [ Links ]

16. PIANTELLI, M.; POZZUOLI, R.; ARRU, F. & MUSIANI, P. — Echinococcus granulosus: identification of subunits of the mayor antigens. J. Immunol., 119: 1382-1386, 1977.         [ Links ]

17. POZZUOLI, R.; PIANTELLI, M.; PERUCCI, C.; ARRU, E. & MUSIANI, P. — Isolation of the most immunoreactive antigens of Echinococcus granulosus from sheep hydatid fluid. J. Immunol., 115: 1459-1463, 1975.         [ Links ]

18. SHEPHERD, J.C. & McMANUS, D.P. — Specific and cross-reactive antigens of Echinococcus granulosus hydatic cyst fluid. Molec. Biochem. Parasit., 25: 143-154, 1987.         [ Links ]

19. TERRY, D. & BRUNELL, P. — Anti-bovine antibody in human sera as a cause of nonspecificity in enzyme immunoassay. J. clin. Microbiol., 25: 987-990, 1987.         [ Links ]

20. TSANG, V.C.W.; PERALTA, J.M. & SIMONS, R. — Enzyme-linked immunoelectrotransfer blot techniques (EITB) for studying the specificities of antigens and antibodies separated by gel electrophoresis. Meth. Enzymol., 92: 377-391, 1983.         [ Links ]

21. UBEIRA, F.M.; LEIRO, J.; SANTAMARINA, M.T.; VILLA, T.G. & SAN MARTIN-DURÁN, M.L. — Immune response of Trichinella epitopes; the antiphosphorylcholine plaque-forming cell response during the biological cycle. Parasitology, 94: 543-553, 1987.         [ Links ]

22. VARELA DÍAZ, V.M.; COLTORTI, E.A.; RICARDES, M.I.; GUISANTES, J.A.; YARZABAL, L.A. — The immunoelectrophoretic characterization of sheep hydatic cyst fluid antigens. Amer. J. trop. Med. Hyg., 23: 1092-1096, 1974.         [ Links ]

23. ZINGALES, B. — Analysis of proteins by sodium dodecil sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. In: MOREL, C., ed. Genes and antigens of parasites. Rio de Janeiro, Fundação Oswaldo Cruz, 1984. p. 357-363.        [ Links ]

 

 

Recebido para publicação em 23/10/1989.

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