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Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo

On-line version ISSN 1678-9946

Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo vol.32 no.5 São Paulo Sept./Oct. 1990

http://dx.doi.org/10.1590/S0036-46651990000500011 

ENSAIOS TÉCNICOS

 

Obtenção de exoantígenos de Histoplasma capsulatum em meio de neopeptona, glicose, tiamina e asparagina (NGTA)

 

Histoplasma capsulatum exocellular antigens. Obtention in neopeptone, glucose, thiamine and asparagine medium (NGTA)

 

 

Nilma Maciel GarciaI; Cezar Mendes de AssisII; Gilda Maria Barbaro Del NegroI; Carlos da Silva LacazI

ILaboratório de Micologia Médica do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo. Av. Dr. Arnaldo. 455 - 2º andar. CEP 01246 São Paulo. SP. Brasil
IIInstituto Adolfo Lutz. São Paulo. SP. Brasil

 

 


RESUMO

O presente trabalho teve como objetivo a produção de exoantígenos H e M das amostras 58, B-679, A-811 e O187 de Histoplasma capsulatum, utilizando o meio NGTA (neopeptona, glicose, tiamina e asparagina) em períodos de cultivo de 1, 2 e 3 meses, a 36ºC, sob agitação constante (50 v.p.m.). Os antígenos brutos foram avaliados contra anti-soro e antígeno de Histoplasma capsulatum de referência (Center for Disease Control), 4 soros de pacientes portadores de paracoccidioidomicose, 7 de histoplasmose e soro hiperimune anti-H. capsulatum produzido em coelhos, através da reação de imunodifusão dupla. Verificou-se que, com exceção de B-679 com 1 mês de crescimento, todos os demais exoantígenos apresentaram as frações H e M de precipitação. Os exoantígenos obtidos de A-811 apresentaram só a banda H. Excetuando-se os exoantígenos 58 e B-679 com 1 mês de crescimento, todos os demais exoantígenos reagiram contra soros de pacientes com histoplasmose. Em relação aos soros de pacientes com paracoccidioidomicose, somente os exoantígenos 58 e O187 não apresentaram reação cruzada. Todos os exoantígenos reagiram frente ao soro hiperimune de coelho anti-H. capsulatum. Para obtenção de exoantígenos de H. capsulatum, sugerimos que as amostras sejam cultivadas sob as condições anteriormente descritas, adotando-se o período de 3 meses de crescimento, utilizando-se exoantígenos de referência como controles da reação.

Unitermos: Histoplasma capsulatum; Imunodifusão dupla; Exoantígenos H e M; Meio de NGTA.


SUMMARY

The purpose of this work is obtaining exocellular antigens H and M from 4 H. capsulatum strains using NGTA medium (neopeptone, glucose, thiamine and asparagine) for periods of 1,2 and 3 months, at 36ºC and continuously shaken. The exocellular antigens were evaluated by double immunodiffusion test against H. capsulatum rabbit antiserum, 7 histoplasmosis sera, 4 paracoccidioidomycosis sera and a reference antigen and antibody furnished by C.D.C. (Atlanta — USA).
Except for the exocellular antigen from strain B.679 with 1 month of culture, all exocellular antigens obtained from the strains B.679, 58 and O187 showed the H and M bands. The A.811 strain demonstrated only the fraction H.
All the exocellular antigens reacted positively with sera from histoplasmosis patients, except those obtained from strains 58 and B.679 with 1 month of culture. With regard to paracoc-cidioidomycosis patients sera, the exocellular antigens from strains 58 and O187 did not cross-react with them.


 

 

Texto completo disponível apenas em PDF.

Full text available only in PDF format.

 

 

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. AJELLO, L. — Histoplasmosis — A dual entity: Histoplasmosis capsulati and Histoplasmosis duboisii. L'Igiene mod., 79: 3-30, 1983.         [ Links ]

2. DEL NEGRO, G.M.B.; GIANNINI, M.J.M.; GARCIA, N.M. & ASSIS, C.M. — Occurrence of 43 Kda glycoprotein (GP43) in different culture filtrates of P. brasiliensis (strain FMUSP 113). In: Jornada Científica do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo, 3., São Paulo, 1989. Anais p. 101. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 31 (Supl. 7): 101, 1989.         [ Links ]

3. EVANS, E.E. & KESSEL, J.P. — The antigenic composition of Cryptococcus neoformans. II. Serologic studies with the capsular polysaccharide. J. Immunol., 67: 109-114, 1952.         [ Links ]

4. HEIMER, D.C. — Diagnosis of histoplasmosis using precipitin reaction in agar gel. Pediatrics, 22: 616-627, 1958.        [ Links ]

5. KAUFMAN, L. — Micro agar-gel immunodiffusion tests. In: Manual of Standardized Serodiagnostic Procedures for Systemic Mycoses. Part 1: Agar Immunodiffusion tests. Washington, Pan American Health Organization, Department of Research Development and Coordination, 1972. p. 9-14.         [ Links ]

6. KAUFMAN, L. & STANDARD, P. — Improved version of the exoantigen tests for identification of Coccidioides immitis and Histoplasma capsulatum cultures. J. clin. Microbiol., 8: 42-45, 1978.        [ Links ]

7. KAUFMAN, L. & STANDARD, P. — Immuno-identification of cultures of fungi pathogenic to man. Curr. Microbiol., 1: 135-140, 1978.         [ Links ]

8. KAUFMAN, L. — Mycoserology: Its Vital Role in Diagnosis Systemic Mycotic Infections. Jap. J. med. Mycol., 24: 1-8, 1983.         [ Links ]

9. KLEGER, B. & KAUFMAN, L. — Detection and Identification of Diagnostic Histoplasma capsulatum precipitates by counterimmunoelectrophoresis. Appl. Microbiol., 26: 231-238, 1973.        [ Links ]

10. NEGRONI, R. — Nuevos estudios sobre antígenos para las pruebas serologicas en la blastomicosis sudamericana. Derm. ibero lat. amer., 4: 409-416, 1968.         [ Links ]

11. OUCHTERLONY, O. — Diffusion in gel methods for immunological analysis. Progr. Allergy, 6: 30-154, 1962.         [ Links ]

12. PINE, L. — Studies on the growth of Histoplasma capsulatum. III. Effect of thiamin and vitamin on the growth of the yeast and mycelial phases of Histoplasma capsulatum. J. Bact., 74: 239-245, 1957.         [ Links ]

13. PINE, L. & PEACOCK, C.L. — Studies on the growth of Histoplasma capsulatum. IV. Factors influencing conversion of the mycelial phase to the yeast phase. J. Bact., 75: 167-174, 1958.        [ Links ]

14. PINE, L. — Growth of Histoplasma capsulatum. VI. Maintenance of the mycelial phase. Appl. Microbiol., 19: 413-420, 1970.         [ Links ]

15. PINE, L.; GROSS, H.; MALCOM, G.B.; GEORGE, J.R.; GRAY, S.B. & MOSS, C.W. — Procedures for the production and separation of the H and M antigens in histoplasmin: Clinical and serological properties of the isolated products. Mycopathologia (Den Haag), 61: 131-141, 1977.        [ Links ]

16. SIQUEIRA, A.M. de — Avaliação da sensibilidade e especificidade de algumas provas sorológicas no diagnóstico, prognóstico e o controle de cura da paracoccidioidomicose. Caracterização imunoquímica do antígeno E2 do Paracoccidioides brasiliensis. São Paulo, 1982. (Tese de Doutoramento — Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo).         [ Links ]

17. SMITH, C.D. & GOODMAN, N.L. — Improved culture method for the isolation of Histoplasma capsulatum and Blastomyces dermatitides from contaminated specimens. Amer. J. clin. Path., 63: 276-280, 1975.         [ Links ]

18. STANDARD, P.G. & KAUFMAN, L. — Specific Immunological test for the rapid identification of members of the genus Histoplasma. J. clin. Microbiol., 3: 191-199, 1976.        [ Links ]

19. U. S. Public Health Service. Standardized diagnostic complement fixation method and adaptation to micro test. Washington, D.C., U.S. Govt. Printing Office, 1965. (PH monograph nº 74, U.S. Public Health Serv. Publ. 1228)         [ Links ]

20. WIGGINS, G.L. & SCHUBERT, J.H. — Relationship of histoplasmin agar-gel bands and complement fixation titers in histoplasmosis. J. Bact., 89: 589-596, 1965.         [ Links ]

21. YOSHINO, M.K.; TEIXEIRA, C.C.; SOARES, M.C.P.; FERREIRA, N.A.F. & RODRIGUES, M.S. — Histoplasmose. Arq. bras. Med., 61: 89-92, 1987.         [ Links ]

 

 

Recebido para publicação em 07/03/1990

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