Evaluación del método de ELISA para detección de antígenos y complejos inmunes circulantes de Trypanosoma cruzi a través de un estudio de campo en una zona endémica de Argentina

Petray, Patricia; Bonardello, Nelsa; Clark, Roberto; Agranatti, Mercedes; Corral, Ricardo; Grinstein, Saúl

doi:10.1590/S0036-46651992000200010

Resúmenes

En una zona endémica de la República Argentina se llevó a cabo un ensayo de campo de la prueba inmunoenzimática ELISA para la detección de antígenos (cAg) y complejos inmunes circulantes (CIC) en sueros de pacientes chagásicos crónicos. Del total de 215 muestras de sangre analizadas, 51 fueron positivas para ELISA-CIC y 45 lo fueron para ELISA-cAg. De los 74 (34,32% de la población) sujetos considerados infectados con dos reacciones serológicas positivas, 49 (66,21%) presentaron CIC en suero, en tanto que en 43 (58,11%) de ellos se encontró cAg por ELISA. Solo en 2 casos serológicamente no reactivos, se detectaron inespecíficamente CIC y cAg. Dentro del grupo considerado no infectado, se observó reactividad inespecífica de bajo título por una de las pruebas serológicas en 16 (11,35%) de 141 individuos. Estos sueros arrojaron resultados consistentemente negativos por ELISA-CIC y cAg demostrando la utilidad de estos métodos de diagnóstico antigénico en casos de serología conflictiva. La determinación de fracciones antigénicas circulantes por ELISA en individuos chagásicos crónicos permite evidenciar la infección por T. cruzi de manera más directa que midiendo la respuesta inmune humoral en el huésped, presentando además mayor sensibilidad que el diagnóstico parasitológico clásico

Trypanosoma cruzi; Antígenos circulantes; Inmunocomplejos; ELISA

The ELISA technique for detection of T. cruzi circulating antigens (cAg) and immune complexes (CIC) in the sera of chronic chagasic patients was field-tested in a well-known endemic area of Argentina (San Luis province). Of 215 individuals screened, 51 were positive for ELISA-CIC and 45 for ELISA-cAg. Seventy four subjects were considered por T. cruzi-infected, as they showed Serologic reactivity at least by two different techniques. In this group, 49 (66.21%) were ELISA-CIC positive, whereas in 43 (58.11%) of them cAg was found by ELISA. Unspecific reactions were observed in only 2 cases with reactive serology for Chagas disease. Within the group considered as noninfected, a false-positive outcome was obtained at low dilution by one of the Serologic tests in 16 (11.35%) of 141 individuals. These sera yielded consistently negative results by ELISA-CIC and cAg, showing the utility of antigen detection in situations of conflictive serology. While antibody determination merely provides an indirect proof of infection, our ELISA tests for demonstration of T. cruzi-specific antigenic fractions in the host's circulation allow a parasitologic diagnosis in chronic patients, with higher sensitivity than that exhibited by traditional methods for detection of the whole parasite

SEROLOGIA

Evaluación del método de ELISA para detección de antígenos y complejos inmunes circulantes de Trypanosoma cruzi a través de un estudio de campo en una zona endémica de Argentina

ELISA technique for detection of Trypanosoma cruzi circulating antigens and immune complexes in San Luis, Argentina

Patricia Petray^I; Nelsa Bonardello^II; Roberto Clark^III; Mercedes Agranatti^I; Ricardo Corral^I; Saúl Grinstein^I

^ILaboratorio de Virología, Hospital de Niños "Ricardo Gutiérrez", Buenos Aires, Argentina

^IILaboratorio de Salud Pública, San Luis, Argentina

^IIIHospital Nogolí, Nogolí, San Luis, Argentina

^Dirección

RESUMEN

En una zona endémica de la República Argentina se llevó a cabo un ensayo de campo de la prueba inmunoenzimática ELISA para la detección de antígenos (cAg) y complejos inmunes circulantes (CIC) en sueros de pacientes chagásicos crónicos.

Del total de 215 muestras de sangre analizadas, 51 fueron positivas para ELISA-CIC y 45 lo fueron para ELISA-cAg. De los 74 (34,32% de la población) sujetos considerados infectados con dos reacciones serológicas positivas, 49 (66,21%) presentaron CIC en suero, en tanto que en 43 (58,11%) de ellos se encontró cAg por ELISA. Solo en 2 casos serológicamente no reactivos, se detectaron inespecíficamente CIC y cAg.

Dentro del grupo considerado no infectado, se observó reactividad inespecífica de bajo título por una de las pruebas serológicas en 16 (11,35%) de 141 individuos. Estos sueros arrojaron resultados consistentemente negativos por ELISA-CIC y cAg demostrando la utilidad de estos métodos de diagnóstico antigénico en casos de serología conflictiva.

La determinación de fracciones antigénicas circulantes por ELISA en individuos chagásicos crónicos permite evidenciar la infección por T. cruzi de manera más directa que midiendo la respuesta inmune humoral en el huésped, presentando además mayor sensibilidad que el diagnóstico parasitológico clásico.

Unitermos: Trypanosoma cruzi; Antígenos circulantes; Inmunocomplejos; ELISA.

SUMMARY

The ELISA technique for detection of T. cruzi circulating antigens (cAg) and immune complexes (CIC) in the sera of chronic chagasic patients was field-tested in a well-known endemic area of Argentina (San Luis province). Of 215 individuals screened, 51 were positive for ELISA-CIC and 45 for ELISA-cAg. Seventy four subjects were considered por T. cruzi-infected, as they showed Serologic reactivity at least by two different techniques. In this group, 49 (66.21%) were ELISA-CIC positive, whereas in 43 (58.11%) of them cAg was found by ELISA. Unspecific reactions were observed in only 2 cases with reactive serology for Chagas disease. Within the group considered as noninfected, a false-positive outcome was obtained at low dilution by one of the Serologic tests in 16 (11.35%) of 141 individuals. These sera yielded consistently negative results by ELISA-CIC and cAg, showing the utility of antigen detection in situations of conflictive serology.

While antibody determination merely provides an indirect proof of infection, our ELISA tests for demonstration of T. cruzi-specific antigenic fractions in the host's circulation allow a parasitologic diagnosis in chronic patients, with higher sensitivity than that exhibited by traditional methods for detection of the whole parasite.

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AGRADECIMIENTOS

Este estudio fue financiado a través del subsidio Nº 3-P-84-0267 de International Development Research Centre, Ottawa, Canadá. Los autores desean agradecer especialmente al Sr. Juan Carlos Ostanelli, Ministro de Salud Pública de la Provincia de San Luis, Argentina, y al Sr. José Luis Amieba, Intendente de Nogolí, Provincia de San Luis, sin cuyo apoyo y colaboración hubiera resultado imposible de concretar el presente trabajo.

Ricardo Corral es becario del Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Argentina.

Dirección:

Laboratório de Virología, Hospital de Niños "Ricardo Gutiérrez"

Gallo 1330. (1425)

Buenos Aires. Argentina

Recebido para publicação em 21/1/1991

Aceito para publicação em 4/2/1992

1. ALONSO, J.M.; PIVIDORI, S. & GUILLERÓN, C. - Antígenos circulantes de Trypanosoma cruzi en chagásicos de área endémica. Medicina (B. Aires), 46: 69-72, 1986.
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16. MARCIPAR, A.; BARNES, S.; LENTWOJT, E. & BROUN, G. - Immunoenzymatic determination of antibody-bound soluble antigens of Trypanosoma cruzi. Appl. Biochem. Biotech., 7: 459-462,1982.
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20. SILVA, J.C.; PIRMEZ, C.; MORGADO, M.G. & GALVĂO-CASTRO, B. - Immunopathological aspeas of experimental Trypanosoma cruzi infection: correlation of immune complexes and other serological features with muscle lesions during the infection. Paras. Immunol., 7: 457-466,1985.
21. SOKAL, R.R. & ROHLF, F.J. - Biometry. San Francisco, W. H. Freeman & Co., 1969. p. 776.
22. VATTUONE, N.H. & YANOVSKY, J.F. - Trypanosoma cruzi: Agglutination activity of enzyme treated epimastigotes. Exp. Parasit., 30: 359-363,1971.
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Fechas de Publicación

Publicación en esta colección
14 Set 2006
Fecha del número
Abr 1992

Histórico

Acepto
04 Feb 1992
Recibido
21 Ene 1991

This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.

[1] 1. ALONSO, J.M.; PIVIDORI, S. & GUILLERÓN, C. - Antígenos circulantes de Trypanosoma cruzi en chagásicos de área endémica. Medicina (B. Aires), 46: 69-72, 1986.

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[3] 3. ARAUJO, F.G. - Detection of circulating antigens of Trypanosoma cruzi by enzyme immunoassay. Ann. trop. Med. Parasit., 76: 25-36,1982.

[4] 4. BONGERTZ, V.; HUNGERER, K.D. & GALVĂO-CASTRO, B. - Trypanosoma cruzi, circulating antigens. Mem. Inst. Oswaldo Cruz, 76: 71-82,1981.

[5] 5. BRENER, Z. - Immunity to Trypanosoma cruzi. Advanc. Parasit., 18: 247-292,1980.

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[9] 9. CERISOLA, J.A.; RABINOVICH, A.; ÁLVAREZ, M.; CORLETO, C.A. & PRUMEDA, J. - Enfermedad de Chagas y la transfusión de sangre. Bol. Ofic. sanit. panamer., 73: 203-221,1972.

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[11] 11. CHAVES, J.; FERRI, R.G.; KLIEMANN, T.A.; IRULEGUI, I. & SOUZA, H.B.W.T. - Complexos imunes circulantes na doenca de Chagas experimental. Identificacăo de antígenos parasitários nos complexos. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 21: 77-81,1979.

[12] 12. CHIARI, E.; DIAS, J.C.P.; LANA, M. & CHIARI, C.A. - Hemocultures for the parasitological diagnosis of human Chagas' disease in the chronic phase. In: CONGRESSO INTERNACIONAL DOENÇA DE CHAGAS, Rio de Janeiro, 1979. Anais. p. N1-N5.

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[14] 14. KAHN, T.; CORRAL, R.; FREILIJ, H. & GRINSTEIN, S. - Detection of circulating immune complexes, antigens and antibodies by enzyme-linked immunosorbent assay in human T. cruzi infection. IRCS Med. Sci., 12: 949-950,1984.

[15] 15. LUQUETTI, O.A.; REZENDE, J.M. de; STEFANI, M.M.A. & POTENSANO, O. - Electrophoresis of sera from patients with megaesophagus and negative serology for American trypanosomiasis, preliminary results. In: ANNUAL MEETING ON BASIC RESEARCH IN CHAGAS'DISEASE, 12ş, Caxambu, Brasil, 1986. Proceedings. p. IM-44

[16] 16. MARCIPAR, A.; BARNES, S.; LENTWOJT, E. & BROUN, G. - Immunoenzymatic determination of antibody-bound soluble antigens of Trypanosoma cruzi. Appl. Biochem. Biotech., 7: 459-462,1982.

[17] 17. MARTIN, V.O.; AFCHAIN, D.; DE MARTELEUR, A.; LEDESMA, O. & CAPRON, A. - Complejos inmunes circulantes en los distintos estados evolutivos de la enfermedad de Chagas. Medicina (B. Aires), 47: 159-162,1987.

[18] 18. MORETTI, E.R.A.; BASSO, B. & VOTTERO-CIMA, E. - Exoantigens of Trypanosoma cruzi. I. Conditions for their detection and immunogenic properties in experimental infections. J. Protozool., 32: 150-153,1985.

[19] 19. SCHENONE, H.; ALFARO, E. & ROJAS, A. - Bases y rendimiento del xenodiagnóstico en la infección chagásica humana. Bol. chil. Parasit., 29: 24-26,1974.

[20] 20. SILVA, J.C.; PIRMEZ, C.; MORGADO, M.G. & GALVĂO-CASTRO, B. - Immunopathological aspeas of experimental Trypanosoma cruzi infection: correlation of immune complexes and other serological features with muscle lesions during the infection. Paras. Immunol., 7: 457-466,1985.

[21] 21. SOKAL, R.R. & ROHLF, F.J. - Biometry. San Francisco, W. H. Freeman & Co., 1969. p. 776.

[22] 22. VATTUONE, N.H. & YANOVSKY, J.F. - Trypanosoma cruzi: Agglutination activity of enzyme treated epimastigotes. Exp. Parasit., 30: 359-363,1971.

[23] 23. WISNIVESKY-COLLI, C.; GURTLER, R.E.; SOLARZ, N.; SALOMÓN, D. & RUIZ, A. - Feeding patterns of Triatoma infestans (Hemiptera: Reduviidae) in relation to transmission of American trypanosomiasis in Argentina. J. med. Entomol., 19: 645-654,1982.

Brasil

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Evaluación del método de ELISA para detección de antígenos y complejos inmunes circulantes de Trypanosoma cruzi a través de un estudio de campo en una zona endémica de Argentina

ELISA technique for detection of Trypanosoma cruzi circulating antigens and immune complexes in San Luis, Argentina

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