Acessibilidade / Reportar erro

Legionelose associada a pneumopatias em São Paulo: estudo da comprovação etiológica por isolamento e sorologia

Legionellosis associated to pneumopaties in São Paulo: etiological confirmation by means of isolations and sorology

Resumos

A presença de Legionella sp como patógeno atuante em nosso país não fora bem documentada, embora a literatura refira a importância deste agente em grande número de países. O presente trabalho teve como objetivo a detecção do microrganismo ou evidenciar sua resposta imunológica em pacientes portadores de pneumopatias infecciosas na cidade de São Paulo. Para tanto foi introduzida metodologia laboratorial específica para o cultivo e identificação do agente e aplicada reação sorológica para verificação de níveis de anticorpos correspondentes. Foram estudados pacientes de 2 centros universitários em São Paulo, correspondentes a 100 do Hospital Universitário U.S.P. com pneumopatias infecciosas em geral e 100 do Hospital das Clínicas F.M.U.S.P. com pneumopatias infecciosas previamente selecionados para afastar outras etíologias bacterianas e dentre estes 30 pertencentes a Unidade de Transplante Renal. O material biológico destinado ao cultivo de Legionella sp foi constituído por: escarro, secreção traqueal, líquido pleural, lavado brônquico ou biópsia de tecido pulmonar. As tentativas de isolamento do agente foram realizadas em meio de BCYE com e sem antibióticos, a identificação das colônias, foram realizadas através de provas de crescimento em placas de BCYE sem cisteína, provas bioquímicas, imunofluorescência direta e soroaglutinação em lâmina. A pesquisa do agente em material biológico foi realizado pelo método de imunofluorescência direta. A pesquisa de anticorpos específicos para Legionella pneumophila sorogrupo 1 foi efetuada pela reação de imunofluorescência indireta. Procedeu-se ainda a estudo sorológico) nos comunicantes de pacientes com legionelose para evidenciar possível transmissão do agente. Em 2 casos obteve-se isolamento em cultura e em 4 casos, somente reação de imunofluorescência direta positiva para L. pneumophila sorogrupo 1, à partir do material biológico, representando um total de 6% entre pacientes da comunidade e hospitalares, comprovando desta forma a existência do agente entre nós. A reação sorológica de imunofluorescência indireta permitiu estabelecer infecção atual ou pregressa por Legionella pneumophila sorogrupo 1, em 16 dos 100 pacientes estudados no Hospital das Clínicas e em apenas 1 dos 100 pertencentes ao Hospital Universitário. Pacientes considerados como grupo de risco do Hospital das Clínicas correspondentes a transplantados renais mostraram evidências sorológicas de legionelose atual ou pregressa em 10 dos 30 estudados, isto é 33%, ficando com 8,5% para pacientes da comunidade, 6 dos 70 estudados, sendo 3 destes debilitados por doença sistêmica severa (4,28%). Nos profissionais de saúde comunicantes dos pacientes com legionelose internados no Hospital das Clínicas, apenas 1 em 28 revelou sorologia compatível com infecção pregressa, confirmando dados da literatura de não ser usual a transmissão de pessoa a pessoa

Legionelose em São Paulo; Doença dos Legionários; Legionella pneumophila


The role of Legionella sp as an important pathogen, although reported in many countries, had not been well documented in Brazil. The main objetive of the present study is to detect this organism or it's immunological response in patients with pulmonary infections in the city of São Paulo. For this purpose, specific laboratory methodology was introduced to cultivate the agent and demonstrate specific antibodies by serology. Patients from two University centers in São Paulo were studied: 100 from the Hospital Universitario, University of São Paulo with general pulmonary infections and 100 from Hospital das Clínicas, Faculdade de Medicina, University of São Paulo. The latter woe selected to exclude pulmonary infections of other bacterial aetiology, and 30 of these were selected from the Renal Transplant Unit. Clinical specimens for cultures included sputum tracheal secretion, pleural, fluid, bronchial washing or lung tissue biopsy. Isolation of Legionella sp was attempted in BCYE medium with and without antibiotics, presumptive diagnosis by biochemical methods and identification through direct immunofluorescence staining and slide agglutination test. Direct evidence of the organism in tissue was attempted by direct immunofluorescence staining. Specific antibodies for Legionella pneumophila serogroup 1 were tested by the indirect immunofluorescence assay. Serology was also carried out in specimens from human contacts with Legionnaires' Disease. Legionella pneumophila serogroup 1 was isolated from two patients, demonstrating the presence of the pathogen in this country. Serology was able to estabilish present or past infection with the agent in 16 of the 100 patients from Hospital das Clinicas and in only one from Hospital Universitário. In patients considered as high risk groups from Hospital das Clínicas with renal transplantation, serology for present or past Legionellosis was positive in 33% and in 8.5% for community acquired infections. Serology in specimens from Medical personnel in contact with patients of Legionnaires' disease was positive for past infection in one single subject, confirming information already published that direct transmission from person to person is unusual. The introduction of specific methods for laboratorial evidence of Legionella sp infections at the Hospital das Clínicas - Faculdade de Medicina USP community has permited diagnosis in able time to allow use of specific anti-microbial therapy, with good results


ARTIGOS ORIGINAIS

Legionelose associada a pneumopatias em São Paulo. Estudo da comprovação etiológica por isolamento e sorologia(1 (1 ) Sumário de Tese de Mestrado. )

Legionellosis associated to pneumopaties in São Paulo. Etiological confirmation by means of isolations and sorology

Neusa Augusta de Oliveira MazieriI; Cid Viera Franco de GodoyII

IFarmacêutica-Bioquímica, Laboratório de Investigação Médica, Bacteriologia (LIM/54) - HCFMUSP - São Paulo, Brasil

IIProf. Resp. Disc. Patol. Clínica - Departamento de Patologia da FMUSP - LIM/54 e Instituto de Medicina Tropical de São Paulo, SP, Brasil

Endereço para correspondência Endereço para correspondência: Neusa Augusta de Oliveira Mazieri Rua Fernão Dias, 128/191, Pinheiros CEP 05427-000 - São Paulo, Brasil

RESUMO

A presença de Legionella sp como patógeno atuante em nosso país não fora bem documentada, embora a literatura refira a importância deste agente em grande número de países.

O presente trabalho teve como objetivo a detecção do microrganismo ou evidenciar sua resposta imunológica em pacientes portadores de pneumopatias infecciosas na cidade de São Paulo.

Para tanto foi introduzida metodologia laboratorial específica para o cultivo e identificação do agente e aplicada reação sorológica para verificação de níveis de anticorpos correspondentes.

Foram estudados pacientes de 2 centros universitários em São Paulo, correspondentes a 100 do Hospital Universitário U.S.P. com pneumopatias infecciosas em geral e 100 do Hospital das Clínicas F.M.U.S.P. com pneumopatias infecciosas previamente selecionados para afastar outras etíologias bacterianas e dentre estes 30 pertencentes a Unidade de Transplante Renal.

O material biológico destinado ao cultivo de Legionella sp foi constituído por: escarro, secreção traqueal, líquido pleural, lavado brônquico ou biópsia de tecido pulmonar.

As tentativas de isolamento do agente foram realizadas em meio de BCYE com e sem antibióticos, a identificação das colônias, foram realizadas através de provas de crescimento em placas de BCYE sem cisteína, provas bioquímicas, imunofluorescência direta e soroaglutinação em lâmina. A pesquisa do agente em material biológico foi realizado pelo método de imunofluorescência direta.

A pesquisa de anticorpos específicos para Legionella pneumophila sorogrupo 1 foi efetuada pela reação de imunofluorescência indireta. Procedeu-se ainda a estudo sorológico) nos comunicantes de pacientes com legionelose para evidenciar possível transmissão do agente.

Em 2 casos obteve-se isolamento em cultura e em 4 casos, somente reação de imunofluorescência direta positiva para L. pneumophila sorogrupo 1, à partir do material biológico, representando um total de 6% entre pacientes da comunidade e hospitalares, comprovando desta forma a existência do agente entre nós.

A reação sorológica de imunofluorescência indireta permitiu estabelecer infecção atual ou pregressa por Legionella pneumophila sorogrupo 1, em 16 dos 100 pacientes estudados no Hospital das Clínicas e em apenas 1 dos 100 pertencentes ao Hospital Universitário. Pacientes considerados como grupo de risco do Hospital das Clínicas correspondentes a transplantados renais mostraram evidências sorológicas de legionelose atual ou pregressa em 10 dos 30 estudados, isto é 33%, ficando com 8,5% para pacientes da comunidade, 6 dos 70 estudados, sendo 3 destes debilitados por doença sistêmica severa (4,28%). Nos profissionais de saúde comunicantes dos pacientes com legionelose internados no Hospital das Clínicas, apenas 1 em 28 revelou sorologia compatível com infecção pregressa, confirmando dados da literatura de não ser usual a transmissão de pessoa a pessoa.

Unitermos: Legionelose em São Paulo; Doença dos Legionários; Legionella pneumophila.

SUMMARY

The role of Legionella sp as an important pathogen, although reported in many countries, had not been well documented in Brazil. The main objetive of the present study is to detect this organism or it's immunological response in patients with pulmonary infections in the city of São Paulo. For this purpose, specific laboratory methodology was introduced to cultivate the agent and demonstrate specific antibodies by serology.

Patients from two University centers in São Paulo were studied: 100 from the Hospital Universitario, University of São Paulo with general pulmonary infections and 100 from Hospital das Clínicas, Faculdade de Medicina, University of São Paulo. The latter woe selected to exclude pulmonary infections of other bacterial aetiology, and 30 of these were selected from the Renal Transplant Unit.

Clinical specimens for cultures included sputum tracheal secretion, pleural, fluid, bronchial washing or lung tissue biopsy. Isolation of Legionella sp was attempted in BCYE medium with and without antibiotics, presumptive diagnosis by biochemical methods and identification through direct immunofluorescence staining and slide agglutination test. Direct evidence of the organism in tissue was attempted by direct immunofluorescence staining.

Specific antibodies for Legionella pneumophila serogroup 1 were tested by the indirect immunofluorescence assay. Serology was also carried out in specimens from human contacts with Legionnaires' Disease.

Legionella pneumophila serogroup 1 was isolated from two patients, demonstrating the presence of the pathogen in this country. Serology was able to estabilish present or past infection with the agent in 16 of the 100 patients from Hospital das Clinicas and in only one from Hospital Universitário. In patients considered as high risk groups from Hospital das Clínicas with renal transplantation, serology for present or past Legionellosis was positive in 33% and in 8.5% for community acquired infections. Serology in specimens from Medical personnel in contact with patients of Legionnaires' disease was positive for past infection in one single subject, confirming information already published that direct transmission from person to person is unusual.

The introduction of specific methods for laboratorial evidence of Legionella sp infections at the Hospital das Clínicas - Faculdade de Medicina USP community has permited diagnosis in able time to allow use of specific anti-microbial therapy, with good results.

Texto completo disponível apenas em PDF.

Full text available only in PDF format.

AGRADECIMENTOS

Ao Dr. Heitor Franco de Andrade Júnior, responsável pela seção de apoio visual em computação, do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo; as Dras. Ana Cristina Hablitzel e Anna Sara Shafferman Levin, pela ajuda na coleta do material e dados clínicos dos pacientes, respectivamente, do HU-USP e HC-FMUSP; ao Dr. Dahir Ramos de Andrade, responsável pelo Laboratório de Investigação Médica LIM/54.

Recebido para publicação em 10/06/1992

Aceito para publicação em 06/10/1992

  • 1. BETHLEM, N. & GUSMĂO, J.M. - Descriçăo de um caso de pneumonia por Legionella pneumophila. J. Pneumol., 8 (supl): 207, 1982.
  • 2. BERGEY'S Manual of systematic bacteriology. 9 ed. Baltimore, Williams & Wilkins, 1984. v. 1.
  • 3. BOLLIN, G.E.; PLOUFFE, J.F.; PARA, M.F. & HACKMAN, B. - Aerosols containing Legionella pneumophila generated by shower heads and hot-water faucets. Appl. environ. Microbiol., 50: 1128-1131, 1985.
  • 4. BROOME, C.V.; GOING, S.A.; THACKER, S.B.; VOGT, R.L.; BEATY, H.N. & FRASER, D.W. - The Vermont epidemic of Legionnaires' disease. Ann. intern. Med., 90: 573-577, 1979.
  • 5. CHERRY, W.B. & McKINNEY, R.M. - Detection of Legionnaires' disease bacteria in clinical specimens by direct immunofluorescence. In: JONES, A.L.; HE, A.L. & HERBERT, G.A., ed. Legionnaires: the disease, the bacterium and methodology. Atlanta, Centers for Disease Control, 1979. p. 91-103.
  • 6. DENNIS, P.J.; GREEN, D. & JONES, B.P. - A note on the temperature tolerance of Legionella. J. appl. Bact., 56: 349-350, 1984.
  • 7. DE PAULA, A.B.; CALAZANS, C.A.C.; VILELA, A.L. & FERREIRA, E. - Doença dos Legionários em Itatinga, M.G. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE INFECTOLOGIA, 3., Petrópolis, RJ, 1986. Anais. p. 79.
  • 8. DONDERO Jr., T.J.; RENDTORFF, R.C.; MALLISON, G.F.; WEEKS, R.M.; LEVY, J.S.; WONG, E.W. & SCHAFFNER, W. - An outbreak of Legionnaires' disease associated with a contaminated air-conditioning cooling tower. New Engl. J. Med., 302: 365-370, 1980.
  • 9. EDELSTEIN, P.H. - Improved semiselective medium for isolation of Legionella pneumophila from contaminated clinical and environmental specimens. J. clin. Microbiol., 14: 298-303, 1981.
  • 10. EDELSTEIN, P.H. - Legionella. In: LENNETTE, E.H.; BALOWS, A.C.; HAUSLER Jr., W.J. & SHADOMI, H.J., ed. Manual of clinical microbiology. 4 ed. Washington, American Society for Microbiology, 1985. p. 373-381.
  • 11. ENGLAND, A.C.; FRASER, D.W.; PLIKAYTIS, B.D.; TSAL, T.F.; STORCH, G. & BROOME, C.V. - Sporadic legionellosis in the United States: the first thousand cases. Ann. intern. Med., 94: 164-170, 1981.
  • 12. FLESHER, A.R.; KASPER, D.L.; MODERN, P.A. & MASON Jr., E.O. - Legionella pneumophila: Growth inhibition by human pharyngeal flora. J. infect. Dis., 142: 313-317, 1980.
  • 13. FRASER, D.W.; TSAI, T.R.; ORENSTEIN, W.; PARKIN, W.E.; BEECHAM, H.J.; SHARRAR, R.G.; HARRIS, J.; MALLISON, G.F.; MARTIN, S.M.; McDADE, J.E.; SHEPARD, C.C. & BRACHMAN, P.S. -Legionnaires' disease: description of an epidemic of pneumonia. New. Engl. J. Med., 297: 1189-1197, 1977.
  • 14. GUMP, D.W.; FRANK, R.O.; WINN Jr., W.C.; FOSTER Jr., R.S.; BROOME, C.V. & CHERRY, W.B. - Legionnaires' disease in patients with associated serious disease. Ann. intern. Med., 90: 538-542, 1979.
  • 15. HAFIZ, S.; HAMEDANI, P.; LYALL, N.; ALI, J.; MEMON, R.; ALI, S. & ALI, M. - Legionella pneumophila: laboratory in developing countries like Pakistan. J. Pak. med. Ass., 39: 229-230, 1989.
  • 16. HEBERT, G.A.; MOSS, C.W.; McDOUGAL, L.K.; BOZEMAN, F.M.; McKINNEY, R.M. & BRENNER, D.J. - The rickettsia-like organisms TATLOCK (1943) and HEBA (1959): bacteria phenotypical similar to but genetically distinct from Legionella pneumophila and the WIGA bacterium. Ann. intern. Med., 92: 45-52, 1980.
  • 17. HELMS, C.M.; MASSANARI, R.M.; ZEITLER, R.; STREED, S.; GILCHRIST, M.J.; HALL, N.; HAUSTER Jr., W.J.; JOHNSON, W.; WINTERMEYER, L. & HIERHOLZER Jr., W.J. - Legionnaires' disease associated with a hospital water system: a cluster of 24 nosocomial cases. Ann. intern. Med., 99: 172-178, 1983.
  • 18. HELMS, C.M.; VINER, J.P.; WEISENBURGER, D.D.; CHIU, L.C.; RENNER, E.D. & JOHNSON, W. - Sporadic Legionnaires' disease: clinical observations on 87 nosocomial and comunity-acquired cases. Amer. J. med. Sci., 288: 2-12, 1984.
  • 19. KIRBY, B.D.; SNYDER, K.M.; MEYER, R.D. & FINEGOLD, S.M. - Legionnaires' disease: report of sixty-five nosocomially acquired cases of review of the literature. Medicine (Baltimore), 59: 188-205, 1980.
  • 20. KLAUCKE, D.N.; VOGT, R.L.; LaRUE, D.; WITHERELL, L.E.; ORCIARI, L.A.; SPITALNY, K.C.; PELLETIER, R.; CHERRY, W.B. & NOVICK, L.F. - Legionnaires' disease: the epidemiology of two outbreaks in Burlington. Vermont, 1980. Amer. J. Epidemiol., 119: 382-391, 1984.
  • 21. MARRIE, T.J.; GEORGE, J.; MACDONALD, S. & HAASE, D. - Are health care workers at risk for infection during an outbreak of nosocominal Legionnaires' disease? Amer. J. infect Control, 14: 209-213, 1986.
  • 22. MAZIERI, N.A.O. - Legionelose associada a pneumopatias em Săo Paulo. Estudo da comprovaçăo etiológica por isolamento e sorologia. Săo Paulo, 1990. (Dissertaçăo de mestrado - Instituto de Cięncias Biomédicas USP).
  • 23. McDADE, J.E.; BRENNER, D.J. & BOZEMAN, F.M. - Legionnaires' disease bacterium isolated in 1947. Ann. intern. Med., 90: 659-661, 1979.
  • 24. MITCHELL, E.; O'MAHONY, M.; WATSON, J.M.; LYNCH, D.; JOSEPH, C.; QUIGLEY, C.; CONSTABLE, G.N.; FARRAND, RJ. & MAXWELL, S. - Two outbreaks of Legionnaires' disease in Boston Health District. Epidem. infect, 104: 159-170, 1990.
  • 25. MUDER, R.R.; YU, V.L. & WOO, A.H. - Mode transmission of Legionella pneumophila A critical review. Arch. intern. Med., 146: 1607-1612, 1986.
  • 26. PEREIRA E SILVA, J.L. - Doenças dos legionários: relato do primeiro caso do Brasil. J. Pneumol., 11: 26-30, 1985.
  • 27. PEREIRA GOMES, J.C.; GODOY, C.V.F.; MAZIERI, N.A.O. & ROCHA, A.S. - Síndrome do desconforto respiratório do adulto (SIDRA) por Legionella pneumophila comprovada por isolamento e sorologia. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE PNEUMOLOGIA E TISIOLOGIA, 24, Curitiba, 1988.
  • 28. PEREIRA GOMES, J.C.; MAZIERI, N.A.O.; GODOY, C.V.F. & ROCHA, A.S. - Legionella Pneumophila associada a insuficięncia respiratória aguda. Primeiro isolamento no Brasil. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 31: 368-376, 1989.
  • 29. PORTO, N.S.; PALOMBINI, B.C.; PETRILLO, V.F. & ALVES, M.R.A. - Pneumonia por Legionella pneumophila - relato do segundo caso brasileiro. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 28: 368-370, 1986.
  • 30. THACKER, W.L.; PLIKAYTIS, B.B. & WILKINSON, H.W. - Identification of 22 Legionella species and 33 serogroups with the slide agglutination test. J. clin. Microbiol., 21: 779-782, 1985.
  • 31. VERONESI, R.; BARBOSA, S.F.C.; COSCINA, A.L. & LIMA, A.C.C. - Legionelose no Brasil. Inquérito sorológico entre doadores de sangue e trabalhadores em unidades de terapia intensiva de tręs hospitais de Săo Paulo. Rev. Hosp. Clín. Fac. Med. S. Paulo, 39: 257-259, 1984.
  • 32. WILKINSON, H.W. - Hospital-Laboratory diagnosis of Legionella infections. Atlanta, Centers for Disease Control, 1987. p. 1-42.
  • 33. WILKINSON, H.W. & FIKES, B J. - Detection of cell-asociated or soluble antigens of Legionella pneumophila serogroups 1 to 6, L. bozemanii, Legionella dumoffii, Legionella gormanii, and Legionella micdadei by staphylococcal coagglutination tests. J. clin. Microbiol., 14: 322-325, 1981.
  • 34. WINN, W.C., Jr. - Legionnaires disease: historical perspective. Clin. Microbiol. Rev., 1: 60-81, 1988.
  • 35
    WORLD HEALTH ORGANIZATION. - Epidemiology, prevention and control of legionellosis: Memorandum from a WHO meeting. Bull. Wld. Hlth. Org., 68: 155-164, 1990.
  • 36. YU, V.L.; ZURAVLEFF, J.J.; GAVILIK, L. & MAGNUSSEN, M.H. - Lack of evidence for person-to-person transmission of Legionnaires' disease. J. infect. Dis., 147: 362, 1983.
  • Endereço para correspondência:
    Neusa Augusta de Oliveira Mazieri
    Rua Fernão Dias, 128/191, Pinheiros
    CEP 05427-000 - São Paulo, Brasil
  • (1
    ) Sumário de Tese de Mestrado.
  • Datas de Publicação

    • Publicação nesta coleção
      11 Set 2006
    • Data do Fascículo
      Fev 1993

    Histórico

    • Aceito
      06 Out 1992
    • Recebido
      10 Jun 1992
    Instituto de Medicina Tropical de São Paulo Av. Dr. Enéas de Carvalho Aguiar, 470, 05403-000 - São Paulo - SP - Brazil, Tel. +55 11 3061-7005 - São Paulo - SP - Brazil
    E-mail: revimtsp@usp.br