Abstracts
Supernatant of boiled spleen saline-suspensions of Yersinia pestis experimentally infected animals were used as template for PCR amplification without DNA extraction. PCR sensitivity was enhanced by a second round of amplification (Nested). No amplification was observed from non-infected animals.
Plague; Yersinia pestis; Rodents; PCR; Diagnosis
Triturados de baços de animais infectados experimentalmente com Y. pestis, suspensos em salina foram fervidos e os sobrenadantes usados diretamente para amplificação do PCR sem prévia extração do DNA. O limiar de detecção poda ser aumentado por uma segunda etapa de amplificação (Nested-PCR). Não houve amplificação a partir das amostras dos animais não infectados usados como controle.
BRIEF COMMUNICATION
A simple PCR-based procedure for plaque diagnosis
Um método simples para o diagnóstico de peste por PCR
Nilma Cintra Leal; Frederico Guilherme Coutinho Abath; Luis Carlos Alves; Alzira Maria Paiva de Almeida
Centra de Pesquisas Aggeu Magalhães - FIOCRUZ/MS
Correspondence to Correspondence to: Nilma Cintra Leal CPqAM/FIOCRUZ/MS Caixa Postal 7472 Cidade Universitária, 50670-420 Recife, PE, Brazil FAX (081) 453 1911, TELEPHONE (081) 271 4000
SUMMARY
Supernatant of boiled spleen saline-suspensions of Yersinia pestis experimentally infected animals were used as template for PCR amplification without DNA extraction. PCR sensitivity was enhanced by a second round of amplification (Nested). No amplification was observed from non-infected animals.
Keywords: Plague; Yersinia pestis; Rodents; PCR; Diagnosis.
RESUMO
Triturados de baços de animais infectados experimentalmente com Y. pestis, suspensos em salina foram fervidos e os sobrenadantes usados diretamente para amplificação do PCR sem prévia extração do DNA. O limiar de detecção poda ser aumentado por uma segunda etapa de amplificação (Nested-PCR). Não houve amplificação a partir das amostras dos animais não infectados usados como controle.
Full text available only in PDF format.
Texto completo disponível apenas em PDF.
ACKNOWLEDGEMENT
We are grateful to Pan American Health Organization - PAHO/WHO (Reg. file: HDP/HDR/RG/BRA/1079 and Conselho Nacional de Pesquisa - CNPq (Process N°. 52.0572-94.7) for financial support.
Recebido para publicação em 08/07/1996
Aceito para publicação em 25/09/1996
- 1. ALMEIDA, A.M.P.; LEAL, N.C.; CARVALHO, F.G.; DANTAS SOBRINHO, J. & ALMEIDA, C.R. - Plague surveillance in Brazil: 1983-1992. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 37: 511-516, 1995.
- 2. BAHMANYAR, M. & CAVANAUGH, D.C. - Plague manual. Geneva, WHO, 1976.
- 3. CAMPBELL, J.; LOWE, J.; WALZ, S. & EZZEL, J. - Rapid and specific identification of Yersinia pestis by using a nested polymerase chain reaction procedure. J. clin. Microbiol., 3: 758-759, 1993.
- 4. GALYOV, E.E.; SMIRNOV, O.Y.; KARLISHEV, A.V. et al. - Nucleotide sequence of the Yersinia pestis gene encoding F1 antigen and the primary strucutre of protein. FEBS Letters, 277: 230-232, 1990.
- 5. HINNEBUSCH, J. & SCHWAN, T.G. - New method for plague surveillance using polymerase chain reaction to detect Yersinia pestis in fleas. J. clin. Microbiol., 31: 1511-1514, 1993.
- 6. NORKINA, O.V.; KULICHENKO, A.N.; GINISBURG, A.L. et al. - Development of a diagnostic test for Yersinia pestis by the polymerase chain reaction. J. appl. Bact., 76: 240-245, 1994.
- 7. OHHARA, M.; KUROSU, Y. & ESUMI, M. - Direct PCR of whole blood and hair shafts by microwave treatment. Biotechniques, 17: 726-728, 1994.
- 8. POLAND, J. & BARNES, A.M. - Plague. In: STEEL, J.H., ed. CRC handbook series in zoonoses. Section A: bacterial, rickettsial and mycotic diseases. Boca Raton, CRC Press, 1979.
- 9. ROSSEN, L.; NORRSKOV, K.H. & RASMUSSEN, O.F. - Inhibition of PCR by components of food samples, mibrobial diagnostic assays and DNA-extraction solutions. Int. J. Food Microbiol., 17: 37-45, 1992.
Correspondence to:
Publication Dates
-
Publication in this collection
22 Sept 2006 -
Date of issue
Oct 1996
History
-
Accepted
25 Sept 1996 -
Received
08 July 1996
