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Homocisteína y polimorfismos de los genes MTHFR y VEGF: impacto en la enfermedad arterial coronaria

Resúmenes

FUNDAMENTO: Polimorfismos en genes relacionados al desarrollo de la aterosclerosis, la angiogénesis y el metabolismo de la homocisteína (Hcy) pueden ser factores de riesgo para la enfermedad arterial coronaria (EAC). OBJETIVO: Evaluar el efecto de los polimorfismos VEGF C-2578A y MTHFR C677T en la EAC y la asociación de esos polimorfismos con la severidad y la extensión de las lesiones ateroscleróticas y concentraciones de Hcy. MÉTODOS: Se evaluaron a 244 individuos por medio de angiografía coronaria y se les incluyeron en el estudio (145 con EAC y 99 individuos-control). Los polimorfismos VEGF C-2578A y MTHFR C677T se investigaron mediante las técnicas de PCR-SSCP y PCR-RFLP, respectivamente. Se midieron los niveles de homocisteína plasmática por medio de cromatografía líquida/espectrometría de masa secuencial (CL/EMS). RESULTADOS: No hubo diferencia significante en relación con la distribución de alelos y genotipos entre los grupos, para ambos polimorfismos. El análisis univariado reveló una frecuencia mayor del genotipo VEGF-2578AA en el grupo con enfermedad en tres vasos (P=0,044). Además de ello, se observó el genotipo VEGF-2578CA con más frecuencia entre individuos con <95% de estenosis (p=0,010). Tras ajuste para otros factores de riesgo para EAC en un modelo multivariado, se evidenció que el polimorfismo VEGF C-2578A no era un correlato independiente de la EAC (p=0,688). El polimorfismo MTHFR no mostró cualquier relación con la extensión y/o severidad de la EAC. El polimorfismo MTHFR C677T no evidenció una asociación directa con hiperhomocisteinemia o aumento de las concentraciones promedio de Hcy en el plasma. CONCLUSIÓN: Si bien existe una aparente asociación entre el polimorfismo VEGF C-2578A y el desarrollo de aterosclerosis coronaria, esa asociación no es independiente de los factores de riesgo cardiovasculares convencionales.

Enfermedad de arteria coronaria; aterosclerosis; polimorfismo genético; homocisteína


FUNDAMENTO: Polimorfismos em genes relacionados ao desenvolvimento da aterosclerose, angiogênese e metabolismo da homocisteína (Hcy) podem ser fatores de risco para a doença arterial coronariana (DAC). OBJETIVO: Avaliar o efeito dos polimorfismos VEGF C-2578A e MTHFR C677T na DAC e a associação desses polimorfismos com a gravidade e a extensão das lesões ateroscleróticas e concentrações de Hcy. MÉTODOS: 244 indivíduos foram avaliados através de angiografia coronariana e incluídos no estudo (145 com DAC e 99 indivíduos-controle). Os polimorfismos VEGF C-2578A e MTHFR C677T foram investigados através das técnicas de PCR-SSCP e PCR-RFLP, respectivamente. Os níveis de homocisteína plasmática foram mensurados através de cromatografia líquida/espectrometria de massa seqüencial (CL/EMS). RESULTADOS: Não houve diferença significante em relação à distribuição de alelos e genótipos entre os grupos, para ambos os polimorfismos. A análise univariada mostrou uma freqüência maior do genótipo VEGF -2578AA no grupo com doença em três vasos (p=0,044). Além disso, o genótipo VEGF -2578CA foi observado mais freqüentemente entre indivíduos com <95% de estenose (p=0,010). Após ajuste para outros fatores de risco para DAC em um modelo multivariado, observou-se que o polimorfismo VEGF C-2578A não era um correlato independente da DAC (p=0,688). O polimorfismo MTHFR não mostrou qualquer relação com a extensão e/ou gravidade da DAC. O polimorfismo MTHFR C677T não mostrou uma associação direta com hiperhomocisteinemia ou aumento das concentrações médias de Hcy no plasma. CONCLUSÃO: Embora haja uma aparente associação entre o polimorfismo VEGF C-2578A e o desenvolvimento de aterosclerose coronariana, essa associação não é independente dos fatores de risco cardiovasculares convencionais.

Doença de artéria coronariana; aterosclerose; polimorfismo genético; homocisteína


BACKGROUND: Polymorphisms in genes involved in the atherosclerosis development, angiogenesis, and homocysteine (Hcy) metabolism could be risk factors for coronary artery disease (CAD). OBJECTIVE: To evaluate the effect of the VEGF C-2578A and MTHFR C677T polymorphisms on CAD, and the association of these polymorphisms with the severity and extension of atherosclerotic lesions and Hcy concentrations. METHODS: Two hundred and forty-four subjects were evaluated by coronary angiography and included in the study (145 with CAD and 99 controls). The VEGF C-2578A and MTHFR C677T polymorphisms were investigated by the PCR-SSCP and PCR-RFLP techniques, respectively. Plasma Hcy was quantified by liquid chromatography/sequential mass spectrometry (LC-MS/MS). RESULTS: There was no significant difference in allele and genotype distribution between the groups, for both polymorphisms. The univariate analysis showed a higher frequency of the VEGF -2578AA genotype in the group with three-vessel disease (p=0.044). In addition, the VEGF -2578CA genotype was observed more frequently among individuals with <95% stenosis (p=0.010). After adjustment for other risk factors for CAD in a multivariate model, the VEGF C-2578A polymorphism was not found to be an independent correlate of CAD (p=0.688). The MTHFR polymorphism did not show any association with the extension and/or severity of the CAD. The MTHFR C677T polymorphism showed no direct association with hyperhomocysteinemia or increased mean plasma concentrations of Hcy. CONCLUSION: Although there is an apparent association between VEGF C-2578A and the development of coronary atherosclerosis, this association is not independent of conventional cardiovascular risk factors.

Coronary artery disease; atherosclerosis; polymorphism, genetic; homocysteine


ARTÍCULO ORIGINAL

Homocisteína y polimorfismos de los genes MTHFR y VEGF: impacto en la enfermedad arterial coronaria

Alexandre Rodrigues GuerzoniI; Patrícia Matos BiselliI; Moacir Fernandes de GodoyI; Doroteia Rossi Silva SouzaI; Renato HaddadII; Marcos Nogueira EberlinII; Erika Cristina Pavarino-BertelliI; Eny Maria Goloni-BertolloI

IFaculdade de Medicina de São José do Rio Preto - FAMERP, São José do Rio Preto, SP

IIFaculdade de Ciências Médicas, Universidade Estadual de Campinas - UNICAMP, Campinas, SP - Brasil

Correspondencia

RESUMEN

FUNDAMENTO: Polimorfismos en genes relacionados al desarrollo de la aterosclerosis, la angiogénesis y el metabolismo de la homocisteína (Hcy) pueden ser factores de riesgo para la enfermedad arterial coronaria (EAC).

OBJETIVO: Evaluar el efecto de los polimorfismos VEGF C-2578A y MTHFR C677T en la EAC y la asociación de esos polimorfismos con la severidad y la extensión de las lesiones ateroscleróticas y concentraciones de Hcy.

MÉTODOS: Se evaluaron a 244 individuos por medio de angiografía coronaria y se les incluyeron en el estudio (145 con EAC y 99 individuos-control). Los polimorfismos VEGF C-2578A y MTHFR C677T se investigaron mediante las técnicas de PCR-SSCP y PCR-RFLP, respectivamente. Se midieron los niveles de homocisteína plasmática por medio de cromatografía líquida/espectrometría de masa secuencial (CL/EMS).

RESULTADOS: No hubo diferencia significante en relación con la distribución de alelos y genotipos entre los grupos, para ambos polimorfismos. El análisis univariado reveló una frecuencia mayor del genotipo VEGF-2578AA en el grupo con enfermedad en tres vasos (P=0,044). Además de ello, se observó el genotipo VEGF-2578CA con más frecuencia entre individuos con <95% de estenosis (p=0,010). Tras ajuste para otros factores de riesgo para EAC en un modelo multivariado, se evidenció que el polimorfismo VEGF C-2578A no era un correlato independiente de la EAC (p=0,688). El polimorfismo MTHFR no mostró cualquier relación con la extensión y/o severidad de la EAC. El polimorfismo MTHFR C677T no evidenció una asociación directa con hiperhomocisteinemia o aumento de las concentraciones promedio de Hcy en el plasma.

CONCLUSIÓN: Si bien existe una aparente asociación entre el polimorfismo VEGF C-2578A y el desarrollo de aterosclerosis coronaria, esa asociación no es independiente de los factores de riesgo cardiovasculares convencionales. (Arq Bras Cardiol 2009;92(4):256-261)

Palabras clave: Enfermedad de arteria coronaria, aterosclerosis, polimorfismo genético, homocisteína.

Introducción

El gen que codifica el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) ha sido estudiado en el desarrollo de enfermedades coronarias1-3. El VEGF, presente en las paredes de los vasos, promueve la proliferación de las células endoteliales vasculares y la angiogénesis, pero su rol en la aterosclerosis todavía está poco aclarado. Hay estudios que señalan que el VEGF es un factor de protección en el desarrollo de la placa aterosclerótica, al operar como un regulador de la integridad endotelial de la pared arterial coronaria4,5. Por otra parte, hay otros que evidencian la neovascularización, mediada por el VEGF, como el factor que influencia la patogénesis de las enfermedades arteriales6.

Alteraciones de las concentraciones de VEGF pueden ser mediadas por polimorfismos genéticos7,8. Se describieron en el gen VEGF diversos polimorfismos de nucleótido único (SNPs). Renner et al.7 describieron tres polimorfismos del gen VEGF (C702T, C936T y G1612A), además de haber observado niveles significantemente más bajos de VEGF en el plasma en portadores del alelo 936T, cuando comparados con no-portadores. Los polimorfismos C702T y G1612 no evidenciaron asociación con los niveles de VEGF. También se asociaron niveles elevados con el alelo G en el nucleótido VEGF -11548. En un estudio con pacientes sometidos a angiografía coronaria, se consideró el polimorfismo C-2578A como un factor de riesgo para el desarrollo de aterosclerosis1. Ya se ha asociado esa variación genética con una menor expresión del VEGF8.

La hiperhomocisteinemia, es decir, el aumento de la concentración de homocisteína (Hcy) en la sangre, se la considera como un factor de riesgo independiente para la aterosclerosis y la enfermedad arterial coronaria (EAC)9. El aumento de las concentraciones de Hcy es encontrado en el 40% de los pacientes con una enfermedad arterial coronaria, arterial cerebral o arterial periférica y en solamente el 15% de individuos sanos10.

El mecanismo mediante el cual la hiperhomocisteinemia induce el desarrollo de lesiones vasculares es todavía poco conocido. Evidencias experimentales sugieren que la Hcy puede estar involucrada en la aterogénesis y la trombogénesis, conllevando a la hiperplasia de la célula muscular y la fibrosis10,11. Concentraciones anormales de Hcy pueden resultar de la interacción de factores genéticos y nutricionales12. La enzima metilenotetrahidrofolato reductasa (MTHFR), que desempeña un rol importante en el metabolismo de la Hcy, presenta la reducción de la actividad como resultado del polimorfismo en la posición 677 del gen MTHFR y conlleva al aumento de las concentraciones de Hcy13. La variante alélica MTHFR 677T ha sido encontrada con alta frecuencia en pacientes con enfermedades vasculares14-17.

En el presente estudio, analizamos la frecuencia de los polimorfismos VEGF C-2578A y MTHFR C677T en pacientes con EAC y en un grupo de individuos sin señales angiográficos de la enfermedad. Evaluamos también la asociación entre esos polimorfismos y la severidad y extensión de las lesiones ateroscleróticas y las concentraciones plasmáticas de Hcy.

Métodos

Sujetos del estudio

El presente estudio fue aprobado por la Comisión Nacional de Ética en Investigación - CONEP, DF, Brasil. Tras la obtención del Consentimiento Informado, se incluyeron en el estudio a 244 individuos caucasoides (145 con EAC y 99 sin la enfermedad). Se eliminó o se confirmó el diagnóstico de EAC mediante angiografía coronaria, analizada por dos observadores independientes en un análisis ciego cuantitativo, llevada a cabo en el Laboratorio de Cateterismo. Se excluyeron del estudio tanto a los individuos que habían sido sometidos a cirugía cardiaca como aquellos con prótesis coronaria. Aunque el mestizaje en el Brasil es ampliamente común, consideramos como caucasoides aquellos individuos que no presentaban otros grupos étnicos en las tres generaciones precedentes18.

Se determinó la extensión de la EAC de acuerdo con el número de vasos coronarios involucrados (0 a 3) y la severidad con base en el grado de obstrucción arterial (estenosis <50%, >50-75%, >75-95%, y >95%). Se consideró la fracción de eyección (FE) < 40% como daño ventricular. Se consideró la angina típica como presente o ausente. Los factores de riesgo clásicos para EAC también se investigaron. Los criterios para la definición de diabetes fueron el uso de agentes hipoglucemiantes orales o tratamiento con insulina, o niveles glucémicos > 126 mg/dL; para hipertensión, el uso de fármaco antihipertensivo o presión arterial > 140/90 mmHg; para sedentarismo, la ausencia de ejercicios regulares y controlados; para alcoholismo, la ingestión de alcohol con una frecuencia definida sin un análisis cuantitativo; a individuos que habían fumado >100 cigarrillos durante su vida y en el momento fumaban todos los días o en algunos días, se les consideraron como fumadores.

Análisis bioquímico

Se colectaron muestras de sangre periférica de los pacientes, durante el examen angiográfico, tras ayuno de 12 horas. Se hizo la separación del plasma en hasta una hora tras la colecta de la sangre para la medición de la Hcy, de acuerdo con el método de cromatografía líquida/espectrometría de masa secuencial (CL/EMS)19. Las concentraciones de Hcy >15µmol/mL se las consideraron como caracterizadoras de hiperhomocisteinemia20. Los procedimientos para determinación del perfil lipídico tuvieron lugar en el Laboratorio de Análisis Clínicos del Hospital de Base de la Facultad de Medicina de São José do Rio Preto.

Se midieron los triglicéridos (TG), el colesterol total (CT), las lipoproteínas de alta densidad (HDLc) y las lipoproteínas de baja densidad (LDLc) con el método colorimétrico enzimático.

Determinación de genotipo

Se extrajo el DNA genómico de leucocitos de sangre periférica21. Se investigó el polimorfismo VEGF C-2578A con el método de Reacción en Cadena de la Polimerasa - Polimorfismo de Conformación Monocatenaria (PCR-SSCP), de acuerdo con Brogan et al.22. Se realizaron 30 ciclos de amplificación (95ºC por 30s, 62ºC por 30s, y 72ºC por 60s) para amplificar un producto de 309 pb. Así, 6 µL del producto de la PCR se desnaturalizaron a 95ºC por 5 minutos, con 6 µl de solución colorante para electroforesis (80% v/v formamida; 10mM NaOH; 1 mM EDTA, pH 8,0; 0,1% w/v de azul de bromofenol y el 1,1% xilenocianol). Se analizaron los productos desnaturalizados por medio de electroforesis en gel de poliacrilamida y tras tinción con nitrato de plata se los visualizaron.

La genotipificación para el polimorfismo MTHFR C677T se llevó a cabo por medio de PCR, seguida por digestión enzimática16. Se ejecutaron 35 ciclos (94ºC por 60s, 58ºC por 60s, y 72ºC por 60s) para amplificar un producto de 198 pb. Se digirieron los productos de PCR con la enzima de restricción Hinf I y se analizaron los fragmentos en gel de poliacrilamida a un 9,6%, tras tinción con nitrato de plata. No se digirió el alelo C, mientras que se dividió el alelo T en dos fragmentos de 175 y 23 pb, respectivamente.

Análisis estadístico

Se presentan los datos como promedios + desviaciones estándar (DE) o números (porcentajes). La comparación entre los grupos se realizó con la utilización de la prueba de Chi-cuadrado, el test t de Student o la prueba de Mann-Whitney, cuando necesario. Se utilizó el análisis de dependencia para examinar las diferencias de las frecuencias de genotipo entre los grupos con una, dos o tres arterias afectadas, y entre grupos con diferentes grados de estenosis. Se diseñaron los valores de Hcy con base en una distribución normal en la escala logarítmica. La concentración de Hcy ante el polimorfismo MTHFR se la evaluó mediante el análisis de varianza (ANOVA). Se probó por medio de análisis de regresión logística múltiple la relación independiente de los polimorfismos VEGF C-2578A y MTHFR C677T con los factores de riesgo en la presencia de EAC. Un valor de p < 0,05 se utilizó para establecer la significancia estadística.

Resultados

Las características de la población estudiada están detalladas en la Tabla 1. Los resultados significantemente diferentes obtenidos para individuos con y sin EAC están de acuerdo con los factores de riesgo cardiovascular previamente establecidos.

Polimorfismo del gen del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF)

No hubo diferencia significante entre los grupos respecto a las frecuencias de alelos (p=0.995) y genotipo (p=0.254) del polimorfismo VEGF C-2578A. Los cálculos para la prueba de equilibrio de Hardy-Weinberg (EHW) revelaron que la distribución genotípica observada se mostró similar a la que se esperaba, en el grupo con EAC y en el grupo control (x21 = 3,12; p=0,077 y x21 = 0,46; p=0,496, respectivamente).

Las frecuencias genotípicas de acuerdo con el número de vasos involucrados y el grado de obstrucción arterial están detalladas en las Tablas 2 y 3, respectivamente. Una frecuencia significantemente más alta del genotipo VEGF -2578AA se observó en individuos con tres arterias afectadas (p=0,044). Respecto al grado de obstrucción arterial, el genotipo VEGF -2578CA se observó con mas frecuencia en individuos con < 95% de estenosis (p=0,010).

Polimorfismo del gen de la metilenotetrahidrofolato reductasa (MTHFR) y concentraciones de homocisteína

No hubo diferencia significante entre los grupos respecto a las frecuencias de alelos (p=0,895) y genotipo (p=0,884) del polimorfismo MTHFR C677T. La distribución genotípica observada fue semejante a la que se esperaba en el grupo control (x21 =2,23; p=0,135). Sin embargo, en el grupo con EAC, presentó desequilibrio de Hardy-Weinberg, con una diferencia significante entre las frecuencias observada y esperada (x21 =5,76; p=0,016).

Ninguna asociación se observó entre el polimorfismo MTHFR C677T y el número de vasos involucrados y/o el grado de obstrucción arterial (Tablas 2 y 3). La concentración promedio de Hcy no difirió significantemente entre los grupos (p= 0,222), así como la presencia de hiperhomocisteinemia (p=0,266). El promedio de la concentración de Hcy no presentó ninguna asociación con el número de vasos involucrados (p= 0,793) o el grado de obstrucción arterial (p= 0,700).

El polimorfismo MTHFR C677T no evidenció una relación directa con la hiperhomocisteinemia (p=0,860) o aumento de la concentración promedio de Hcy (p=0,758).

Análisis multivariado

La regresión logística múltiple se utilizó para probar los correlatos independientes para la presencia de EAC. El modelo incluyó: tabaquismo, hipertensión, diabetes, niveles de HDLc y los polimorfismos VEGF C-2578A y MTHFR C677T. Tabaquismo (p=0,006), diabetes (p=0,041), y niveles de HDLc <40 mg/dL (p=0,0008) se correlacionaron independientemente de la presencia de EAC. La hipertensión evidenció una tendencia a la asociación con EAC (p=0,061). Los polimorfismos VEGF C-2578A (p=0,688) y MTHFR C677T (p=0,981) no fueron predictores independientes de EAC.

Discusión

En el presente estudio, la frecuencia alélica y la genotípica del polimorfismo VEGF C-2578A no difirieron entre pacientes con y sin EAC. Sin embargo, se observó una mayor frecuencia del genotipo VEGF-2578AA en individuos con tres arterias afectadas. Este resultado corrobora los hallazgos de un estudio reciente de Howell et al.1 que consideró el genotipo VEGF-2578AA como un factor de riesgo para el desarrollo de aterosclerosis, mientras que el genotipo VEGF -2578CC evidenció tener un efecto protector. De acuerdo con ese estudio, la frecuencia del genotipo VEGF -2578AA aumentó gradualmente con el número de vasos involucrados, cuando comparada con el genotipo salvaje (wild-type) VEGF -2578CC. Eso sugiere que la reducción de la expresión del VEGF resultante del genotipo VEGF-2578AA podría promover el desarrollo de aterosclerosis. La mayor frecuencia del genotipo VEGF-2578CA entre individuos con < 95% de estenosis sugiere una asociación entre ese genotipo y la progresión más lenta de la lesión aterosclerótica, posiblemente a causa de la presencia del alelo salvaje. No obstante, no se encontró ninguna asociación con relación al genotipo salvaje VEGF-2578CC, posiblemente en función del número reducido de individuos en la muestra.

Si bien nuestros resultados en relación con el polimorfismo del VEGF y la severidad y extensión de la EAC son significantes, tras el ajuste para otros factores de riesgo en un modelo multivariado, la asociación positiva entre el polimorfismo VEGF C-2578A y la severidad de la EAC perdió significancia estadística. Ya que el polimorfismo VEGF C-2578A no fue un factor de riesgo independiente para la EAC, esos datos no confirman la relación casual entre el polimorfismo VEGF C-2578A y la aterosclerosis coronaria.

El rol del VEGF en la aterosclerosis es motivo de discusión en la literatura. Algunos estudios evidenciaron que la administración de VEGF humano recombinante en animales aumenta la progresión de la placa aterosclerótica23. Otros observaron que el VEGF humano opera como un factor anti-aterosclerótico, y promueve la reendotelización, reduciendo el espesor de la capa íntima, lo que previene la formación de coágulos5.

No analizamos en el presente estudio las correlaciones entre genotipos y expresión. Sin embargo, un estudio realizado por Shahbazi et al.8 con receptores de transplante renal, reveló una asociación entre el alelo salvaje VEGF 2578C y el aumento de las concentraciones de VEGF. Otros polimorfismos del gen VEGF ya se asociaron a variaciones en la expresión de la proteína7,8. Según Howell et al.1, el genotipo VEGF -2578AA se podría considerar como un factor de riesgo para aterosclerosis, en función de la reducción de la expresión de la proteína. Ese resultado es consistente con la acción do VEGF en la regulación endógena de la integridad endotelial de la pared de la arteria coronaria4. Por otra parte, la neovascularización de la placa aterosclerótica, mediada por el VEGF, dispone nutrientes y componentes de la placa, aumentando su volumen. En paredes arteriales con oclusión total por placas ateroscleróticas, como observado en estudio prospectivo, se correlacionaron -en su anatomía y cantidad-, los microvasos denominados vasa vasorum, al grado de inflamación de la placa intimal24. Moulton et al.25 observaron una reducción en la progresión de la aterosclerosis secundaria a la inhibición de la neovascularización mediada por el VEGF. De ese modo, se necesitan más estudios para aclarar el verdadero rol del VEGF en la EAC.

En ese estudio, las frecuencias alélica y genotípica del polimorfismo MTHFR C677T no fueron diferentes entre pacientes y controles. Sin embargo, en el grupo con EAC, la distribución genotípica observada fue diferente de la que se esperaba de acuerdo con el equilibrio de Hardy-Weinberg (EHW). Estudios de caso-control con análisis de SNPs mostraron fuga del EHW en pacientes, en controles o en ambos grupos26-28. Se puede esperar ese desequilibrio para diversas enfermedades genéticas, considerando que haya probablemente un aporte genético significante en enfermedades complejas29. Aunque algunos estudios han encontrado evidencia de asociación entre el alelo polimórfico MTHFR 677T y enfermedades vasculares, aterosclerosis carotídea, enfermedad arterial oclusiva e infarto de miocárdio15-17,30-32, otros no confirmaron esas hipótesis11,33.

Alrededor del 40% de los pacientes con EAC presentaban hiperhomocisteinemia34. En nuestro estudio, un 49,7% de los pacientes con EAC y un 45,2% de los controles presentaban concentraciones de Hcy >15 µmol/l, y esa diferencia no fue significante. Otro estudio brasileño evidenció una diferencia significante en concentraciones de Hcy entre el grupo control y el grupo con ateromatosis severa. Esos autores también observaron una correlación positiva entre niveles más altos de Hcy y EAC35. En nuestro estudio, encontramos concentraciones promedio más altas de Hcy en el grupo con EAC cuando comparados al grupo control, pero la diferencia no fue significante (datos no revelados), lo que está de acuerdo con los hallazgos de Yilmaz et al.36.

Estudios clínicos involucrando tratamientos para reducir los niveles de homocisteína han demostrado que la suplementación con folato no redujo el riesgo de complicaciones y muerte por causas cardiovasculares, a pesar de una reducción substancial en los niveles plasmáticos totales de Hcy37,38. Aunque estudios observacionales han demostrado que el nivel plasmático total de Hcy es un predictor de eventos cardiovasculares39, ningún rol causativo de la Hcy fue substanciado por los resultados de estudios de intervención implicando tratamiento para reducción de niveles de homocisteína.

En el estudio prospectivo de Frederiksen et al.40, la concentración promedio de Hcy era más elevada en portadores del genotipo MTHFR 677TT cuando comparados a otros genotipos. Sin embargo, el polimorfismo MTHFR C677T no fue asociado con enfermedad isquémica cardiovascular o tromboembolismo. Huh et al.41 y Yilmaz et al.36 relataron observaciones semejantes en estudios de EAC. En las poblaciones estudiadas en el presente estudio, el polimorfismo MTHFR C677T no presentó una relación directa con la hiperhomocisteinemia o aumento de las concentraciones promedio de Hcy, en los grupos con EAC o control. Lima et al.35 también observaron una correlación entre la presencia de esa mutación y la hiperhomocisteinemia, en un estudio brasileño.

El tamaño de la muestra es un factor importante en estudios de caso-control, principalmente en investigaciones de polimorfismos genéticos con alta frecuencia en la población en general. Aunque el número de individuos evaluados en ese estudio es suficiente para demostrar una diferencia estadística en la distribución del genotipo entre los subgrupos con diferentes grados de obstrucción arterial y número de arterias involucradas, ninguna diferencia se observó entre el grupo con EAC y el grupo control. Los estudios en la literatura utilizan muestras mayores, principalmente para evaluarse la asociación entre polimorfismos y EAC o Hcy. Además de ello, la investigación de alteraciones en otras enzimas implicadas en el metabolismo de la Hcy y en las concentraciones plasmáticas de folato y vitaminas B6 y B12, e ingestión de vitaminas, podría suministrar datos más consistentes para la discusión sobre el efecto de los polimorfismos en las concentraciones de Hcy.

En resumen, existe una aparente asociación entre el polimorfismo VEGF C-2578A y el desarrollo de aterosclerosis. Sin embargo, esa asociación no es independiente de los factores de riesgo cardiovasculares convencionales.

Agradecimientos

Los autores agradecen a Celso Pereira Reis Filho por la gestión del banco de datos y al Prof. Dr. José Antônio Cordeiro por el análisis estadístico y reconocen el apoyo financiero de la Fundación de Amparo a la investigación del Estado de São Paulo (FAPESP).

Potencial Conflicto de Intereses

Declaro no haber conflicto de intereses pertinentes.

Fuentes de Financiación

El presente estudio fue financiado por FAPESP y CNPq.

Vinculación Académica

Este artículo forma parte de tesis de Doctorado de Alexandre Rodrigues Guerzoni, por la Facultad de Medicina de São José do Rio Preto - FAMERP.

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  • Correspondência:
    Patrícia Matos Biselli
    Av. Brigadeiro Faria Lima, 5416
    São Pedro, 15.090-000
    São José do Rio Preto, SP - Brasil
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  • Fechas de Publicación

    • Publicación en esta colección
      23 Jun 2009
    • Fecha del número
      Abr 2009

    Histórico

    • Recibido
      15 Jun 2007
    • Revisado
      17 Oct 2007
    • Acepto
      27 Ene 2008
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