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Memórias do Instituto Oswaldo Cruz

Print version ISSN 0074-0276On-line version ISSN 1678-8060

Mem. Inst. Oswaldo Cruz vol.83 no.3 Rio de Janeiro July./Sept. 1988

https://doi.org/10.1590/S0074-02761988000300003 

El ensayo inmunoenzimatico en microgotas sobre nitrocelulosa (Dot-ELISA) en el diagnostico de la enfermedad de Chagas: I. Estudio comparativo de dos preparaciones antigenicos de Trypanosoma cruzi

Rosa M. de Hubsch1 

Norma Chiechie2 

Guillermo Comach1 

Rafael Rangel Aldao3 

Renato D'A Gusmao4 

Universidad de Carabobo, Facultad Ciencias de la Salud, Departamento de Parasitología, Maracay, Venezuela

M. S .A. S, Dirección de Endemias rurales, Laboratorio de Chagas, Venezuela

Universidad de Carabobo, Facultad Ciencias de la Salud, Centro de Investigaciones Biomédicas, Maracay, Venezuela

OPS, M.S. A. S, Dirección de Endemias Rurales. Unidad de Investigación, Maracay, Venezuela


ABSTRACT

Using the Dot-ELISA technique, two antigenic preparations of Trypanosoma cruzi epimastigote forms have been compared for the diagnosis of Chagas' disease: (1) The citoplasmic fraction (citoplasmic antigen) and (2) whole fixed epimastigotes (integral antigen). There was been used sera from 95 chagasic patients with chronic cadiomyopathy, positive conventional serology and either positive or negative xenodiagnosis; 74 subjects with negative conventional serology, and either clinically normal or presenting cardiomyopathy; 74 patients with different diseases including siphilis,toxoplasmosis, leisjmaniasis or autoantibodies such as rheumatoid factor and antinuclear antibodies. By defining the diagnostic titers (cut Off): 1:512 for citoplasmatic antigen and 1:128 for the integral antigen, a sensitivity of 100% has been obtained with both antigenic preparations, being the specificity of 96% for the former and 100% for the latter when leishmaniasis sera were not included. A comparative study with conventional serology was carried out using 147 sera from a Laboratory of Chagas' diagnosis; Dot-ELISA with citoplasmic antigen showed co-positivity index of 1.0, co-negativity 0.989 and efficiency of 0.993, and Dot-ELISA with integral antigen 1.0, 0.979 and 0.986 respectively. According to this evaluation, Dot-ELISA using whole formalin fixed epimastigotes might be a practical alternative for the serological diagnosis of Chagas' disease.

RESUMEN

Se estudia el Ensayo Inmunoenzimático en Microgotas sobre Nitrocelulosa (Dot-ELISA)comparando dos preparados antigénicos de formas epimastigotas de cultivo de T. cruzi: 1) la fracción citoplasmática (antígeno citoplasmático y 2) el parásito total fijado previamente con formaldehido (antígeno integral). Se usaron sueros de: 95 pacientes chagásicos con serología convencional positiva, cardiopatía crónica y algunos con xenodiagnóstico positivo; 42 personas sanas y 32 con miocardipatía crónica con serología negativa y 74 pacientes con diferentes patologías incluyendo: sífilis, toxoplasmosis, lupus eritematoso diseminado, con factor reumatoide, leishmaniasis visceral, y leishmaniasis cutánea. Definidos los títulos diagnósticos (cut-off) de 1:512 con antígeno citoplasmático y de 1: 128 con antígeno integral, la especificidad fue 96% para el primero y de 100% para el segundo; mientras que la sensibilidad fue de 100% para ambas. En el estudio comparativo con las pruebas serológicas convencionales examinando 147 sueros tomados de personas referidas al laboratório, Dot-ELISA con antígeno citoplasmático presentó índices deco-positividad de 1,0, co-negatividad de 0,989 y eficiencia 0,993. Dot-ELIS con antígeno integral dió 1,0, 0,979 y 0,986 respectivamente. De acuerdo con esta evaluación, la técnica Dot-ELISA con antígeno integral se presenta como una alternativa práctica para el diagnóstico serológico de la enfermedad de Chagas.

 

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