Influência das células epiteliais mamárias malignas na expressão gênica de células estromais originárias de linfonodo axilar comprometido ou não-comprometido de pacientes com câncer de mama

RESUMO DE TESE THESIS ABSTRACT

Influência das células epiteliais mamárias malignas na expressão gênica de células estromais originárias de linfonodo axilar comprometido ou não–comprometido de pacientes com câncer de mama

Autora: Ticiana Thomazine Benvenuti.

Orientadora: Maria Aparecida Azevedo Koike Folgueiral.

[Dissertação de Mestrado]. São Paulo: Universidade de São Paulo; 2008.

O desenvolvimento da metástase depende, entre outros fatores, de um microambiente propício, e é possível que as células do câncer de mama influenciem o perfil da expressão gênica das células estromais, tanto no tumor primário como no linfonodo regional. Para estudar este último evento, obtivemos fibroblastos de linfonodos comprometidos (n = 3) ou não (n = 3) de pacientes com câncer de mama, os quais foram co–cultivados com células de câncer de mama MDA–MB–231, separados fisicamente por membranas porosas por 72 horas.

O perfil da expressão gênica foi determinado utilizando–se uma plataforma de cDNA microarray. A presença de células MDA–MB231 modulou a expressão de 415 genes em fibroblastos de linfonodos não–comprometidos e 779 genes em fibroblastos de linfonodos comprometidos, em relação a células mantidas em monocultura, sendo que 120 genes tiveram sua expressão regulada em ambas as comparações. A expressão destes genes determinou a separação dos fibroblastos mantidos em co–cultura daqueles mantidos isoladamente em cultura por análise de agrupamento hierárquico, indicando que a presença das células de câncer de mama influencia o perfil da expressão gênica das células. Entre as funções reguladas pela presença de células MDA–MB231 encontram–se tradução e receptor de superfície ligado à transmissão de sinal, em fibroblastos de linfonodos não–comprometidos e autofosforilação de proteína e ciclo celular, em fibroblastos de linfonodos comprometidos.

Para determinar se a expressão gênica diferencial é um fenômeno que pode ser generalizado para o câncer de mama, realizamos ensaios utilizando outras amostras de fibroblastos obtidos de linfonodos comprometidos de cinco pacientes e de linfonodos não–comprometidos de outras cinco pacientes (incluindo as seis amostras de fibroblastos previamente analisadas), as quais foram co–cultivadas com três linhagens celulares de câncer de mama (MDA–MB231, MDA–MB435 e MCF–7). A expressão relativa de MAP2K3, AKAP8L e CREG1, inicialmente identificados como diferencialmente expressos em análise de cDNA microarray, foi então determinada por RT–PCR em tempo real. Observamos que nenhuma das três linhagens celulares influenciou a expressão de AKAP8L e CREG1, tanto em fibroblastos de linfonodos comprometidos quanto não–comprometidos. MAP2K3 foi hiperexpresso tanto em fibroblastos de linfonodos comprometidos quanto em não–comprometidos co–cultivados com células MDA–MB231, mas não com células MDA–MB435 ou MCF–7.

Nossos resultados indicam que a presença de células MDA–MB231 influencia o perfil de expressão gênica de fibroblastos originários tanto de linfonodos comprometidos quanto de não–comprometidos. Alguns genes comumente regulados em fibroblastos de linfonodo comprometido ou não–comprometidos, incluindo MAP2K3, podem estar envolvidos no estabelecimento de metástase regional.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  15 Maio 2008
• Data do Fascículo
  Abr 2008