Solarização para controle de Phytophthora parasitica em mudas de citros

Solarization to control Phytophthora parasitica on citrus seedlings

Resumos

O uso de solarização tem-se mostrado eficiente para o controle de fitopatógenos habitantes do solo. No caso de Phytophthora parasitica, agente causal de podridão de raízes em viveiros de citros (Citrus spp.), utiliza-se, normalmente, desinfestação com brometo de metila, produto altamente tóxico ao homem e à comunidade microbiana do solo. Neste trabalho, verificou-se a eficiência da solarização em substrato pré-colonizado com P. parasitica por meio de dois métodos: sacos plásticos e coletor solar. Os experimentos foram realizados no inverno e no verão. No inverno, o delineamento foi em blocos ao acaso com oito tratamentos (coletor solar por 24 h e 48 h, saco plástico por 24 h e 48 h, coletor solar por 48 h + Trichoderma spp., Trichoderma spp., testemunha à sombra inoculada e não inoculada) e quatro repetições com 15 plantas. A avaliação foi feita pelo teste de isca para recuperação do patógeno e pelo desenvolvimento das plântulas de citros após três meses do transplantio para os tubetes. No verão, os tratamentos foram um, dois, sete e 14 dias de solarização em sacos plásticos, e a avaliação foi feita apenas pelo teste de isca para recuperação do patógeno. A solarização do substrato para produção de mudas em coletor solar (tubos com 10 cm de diâmetro) por 24 h (inverno e verão) e em sacos plásticos (20 x 25 x 4 cm³) por 48 h no verão eliminou P. parasitica propiciando melhor desenvolvimento das mudas.

energia solar; controle físico; solo

Solarization has been efficient in controlling soil borne pathogens. Phytophthora parasitica, the causal agent of root rot in citrus (Citrus spp.) nurseries, is usually treated by using methyl bromide for soil disinfestations. This product is highly toxic to man as well as to the soil microbial community. Solarization was efficient in both winter and summer P. parasitica pre-colonized substratum. The winter experiment was arranged in a randomized block design with eight treatments (solar collector 24 h and 48 h, plastic bag 24 h and 48 h, solar collector 48 + Trichoderma spp., Trichoderma spp., inoculated and non-inoculated control at shadow), with four repetitions using 15 plants/parcel. Inoculated treatments were solarized and used to fill the containers where seedlings were transplanted. Evaluation was made by means of bait test for recovering pathogen and by citrus seedling development three months later. For summer solarization, the effect in plastic bags was evaluated at one, two, seven and 14 days. This evaluation was made by bait test. Results showed that the solarization of substratum for seedling production eliminates P. parasitica in solar collectors (10-cm-diameter containers) for 24 h in winter as well as in summer (allowing a better seedling growth), and in plastic bags (20 x 25 x 4 cm³) for 48 h in summer.

SOLARIZAÇÃO PARA CONTROLE DE Phytophthora parasitica EM MUDAS DE CITROS^*

LOUISE L. MAY-DE MIO¹, RAQUEL GHINI² & HIROSHI KIMATI³

¹Departamento de Fitotecnia e Fitossanitarismo, Setor de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Paraná, Cx. Postal 2959, CEP 80.035-050, Curitiba, PR, Fax: [phone], e-mail: [e-mail]; ²Embrapa Meio Ambiente, Cx. Postal 69, CEP 13.820-000, Jaguariúna, SP; ³Departamento de Entomologia, Fitopatologia e Zoologia Agrícola, "Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz", Cx. Postal 9, CEP 13.418-900, Piracicaba, SP

(Aceito para publicação em 29/01/2002)

Autor para correspondência: Louise Larissa May-De Mio

RESUMO

O uso de solarização tem-se mostrado eficiente para o controle de fitopatógenos habitantes do solo. No caso de Phytophthora parasitica, agente causal de podridão de raízes em viveiros de citros (Citrus spp.), utiliza-se, normalmente, desinfestação com brometo de metila, produto altamente tóxico ao homem e à comunidade microbiana do solo. Neste trabalho, verificou-se a eficiência da solarização em substrato pré-colonizado com P. parasitica por meio de dois métodos: sacos plásticos e coletor solar. Os experimentos foram realizados no inverno e no verão. No inverno, o delineamento foi em blocos ao acaso com oito tratamentos (coletor solar por 24 h e 48 h, saco plástico por 24 h e 48 h, coletor solar por 48 h + Trichoderma spp., Trichoderma spp., testemunha à sombra inoculada e não inoculada) e quatro repetições com 15 plantas. A avaliação foi feita pelo teste de isca para recuperação do patógeno e pelo desenvolvimento das plântulas de citros após três meses do transplantio para os tubetes. No verão, os tratamentos foram um, dois, sete e 14 dias de solarização em sacos plásticos, e a avaliação foi feita apenas pelo teste de isca para recuperação do patógeno. A solarização do substrato para produção de mudas em coletor solar (tubos com 10 cm de diâmetro) por 24 h (inverno e verão) e em sacos plásticos (20 x 25 x 4 cm³) por 48 h no verão eliminou P. parasitica propiciando melhor desenvolvimento das mudas.

Palavras-chave adicionais: energia solar, controle físico, solo.

ABSTRACT

Solarization to control Phytophthora parasitica on citrus seedlings

Solarization has been efficient in controlling soil borne pathogens. Phytophthora parasitica, the causal agent of root rot in citrus (Citrus spp.) nurseries, is usually treated by using methyl bromide for soil disinfestations. This product is highly toxic to man as well as to the soil microbial community. Solarization was efficient in both winter and summer P. parasitica pre-colonized substratum. The winter experiment was arranged in a randomized block design with eight treatments (solar collector 24 h and 48 h, plastic bag 24 h and 48 h, solar collector 48 + Trichoderma spp., Trichoderma spp., inoculated and non-inoculated control at shadow), with four repetitions using 15 plants/parcel. Inoculated treatments were solarized and used to fill the containers where seedlings were transplanted. Evaluation was made by means of bait test for recovering pathogen and by citrus seedling development three months later. For summer solarization, the effect in plastic bags was evaluated at one, two, seven and 14 days. This evaluation was made by bait test. Results showed that the solarization of substratum for seedling production eliminates P. parasitica in solar collectors (10-cm-diameter containers) for 24 h in winter as well as in summer (allowing a better seedling growth), and in plastic bags (20 x 25 x 4 cm³) for 48 h in summer.

INTRODUÇÃO

O controle das doenças ocasionadas por fungos do gênero Phytophthora compreende o uso de produtos químicos (fungicidas), medidas culturais, escolha do porta-enxerto, desinfestação de solos para produção de mudas, dentre outros. No Estado de São Paulo, o índice de contaminação em viveiros é alto, o que pode comprometer o bom desenvolvimento das mudas no campo. O uso do limão cravo (Citrus limonia Osb.) (resistente à Tristeza, mas altamente suscetível ao Declínio) é superior a 90% e os porta enxertos indicados para substituição, por serem tolerantes ao Declínio, são laranja Caipira (Citrus aurantium L.), tangerina Cleópatra (Citrus reshni Hort.) e tangerina Sunki (Citrus sunki Hort.) (Feichtenberger, 1990). Limão Cravo e tangerina Cleópatra são moderadamente suscetíveis à Phytophthora spp., enquanto a laranja Caipira e a tangerina Sunki são altamente suscetíveis, principalmente à P. parasitica Dastur (Feichtenberger et al., 1992).

Atualmente, preconiza-se a produção de mudas em tubetes preenchidos com substratos comerciais. O controle do patógeno nesses substratos é realizado por meio de fumigação com brometo de metila. Além das muitas desvantagens, principalmente em relação ao ambiente e à saúde do homem, o uso desse produto provocou enfezamento das mudas em vários viveiros da Flórida, Estados Unidos (Tucker & Anderson, 1972). Outro efeito negativo é a menor colonização por micorrizas, o que acarreta um menor desenvolvimento das plantas posteriormente no campo (Kleinschmidt & Gerdemann, 1972).

Devido a tantas desvantagens, outros métodos físicos e biológicos, têm sido pesquisados como alternativa ao químico. O controle físico, através da solarização por exemplo, é um método seguro, não produz resíduos fitotóxicos, é relativamente barata e fácil de usar (Katan, 1980). Além disso, a solarização tem a capacidade de promover a manutenção da microbiota no solo (Baker & Cook, 1974).

Atualmente, a solarização é indicada como alternativa viável para o controle de várias espécies do gênero Phytophthora (Juarez-Palacios et al., 1991, Ghini et al, 2000; Coelho et al., 2000; Pinkerton et al., 2000). Como métodos para solarização tem-se a cobertura do solo com um filme plástico (Katan et al., 1976; Barbercheck & von Broembsen, 1986), a utilização de sacos plásticos transparentes para quantidade menores de solo ou substratos (Kaewruang et al.,1989) e o coletor solar, tubos pretos de ferro galvanizado colocados paralelamente em uma caixa de madeira e cobertos com um plástico transparente (Ghini, 1993).

O presente trabalho avaliou a eficiência de dois métodos de solarização, de sacos plásticos e de coletor solar no controle de P. parasitica em substrato para produção de mudas de limão cravo.

MATERIAL E MÉTODOS

Infestação do solo e quantificação de inóculo

Os isolados de P. parasitica e de Trichoderma spp. foram obtidos conforme descrito por May & Kimati (1999). O solo foi infestado com secções de folhas de citros de aproximadamente 9 mm² colonizadas previamente com o patógeno. O inóculo foi obtido a partir de quarenta secções de folhas colocadas em placas de Petri contendo 30 ml de água destilada e dois discos de 4 mm de diâmetro de meio de cenoura (Daucus carotae L.) com micélio de Phytophthora. As colônias do patógneo, com sete dias de idade, foram cultivadas em meio de cenoura (50 g de cenoura, 10 g de dextrose e 20 g de ágar/l d'água). As placas, contendo os discos de meio colonizados com o patógeno e as secções de folhas, foram mantidas sob luz fluorescente branca contínua durante uma semana à 28 ^oC. Após a incubação, as secções de folhas estavam inteiramente rodeadas por esporângios e foram colocadas a 4 ^oC (geladeira) por 20 min, para liberação dos zoósporos. Em seguida, o conteúdo de cada placa foi misturado com 200 ml de substrato comercial utilizado para produção de mudas de citros em tubetes.

Para quantificação do inóculo, adaptou-se a metodologia descrita por Matheron & Matejka (1991), que contaram o número de esporângios em volta de discos de ágar colonizados com Phytophthora spp., contando-se o número de esporângios em secções de folhas de citros. Outra forma utilizada para quantificação do patógeno seguiu o método idealizado por Tsao (1960) para estimar o potencial da doença através do ponto final de diluição do solo até quando se pode recuperar o patógeno (May & Kimati, 1999).

Solarização em coletor solar e em sacos plásticos

A solarização do substrato pré-infestado com P. parasitica foi realizada na Embrapa Meio Ambiente em Jaguariúna-SP, em duas etapas. Na primeira etapa solarizou-se o substrato em coletor solar e em sacos plásticos durante os dias 25 e 26 de junho de 1993 (inverno). O coletor utilizado foi o de tubos de 10 cm de diâmetro. Nesses tubos, preenchidos com solo, foram colocados quatro saquinhos de tela de nylon contento 500 ml de substrato infestado com P. parasitica aleatoriamente dispostos dentro do tubo. Ao mesmo tempo, os sacos plásticos transparentes, medindo 20 x 25 x 4 cm e contendo 2 l de solo infestado, foram expostos ao sol ao lado do coletor solar. A temperatura foi registrada por medidor digital multisensor, a cada meia hora, tanto no interior do coletor solar como nos sacos plásticos.

A solarização realizada no verão teve como tratamentos: 1) sacos plásticos contendo substrato e P. parasitica, solarizados por 24 h; 2) solarizados por 48 h; 3) solarizados por uma semana; 4) solarizados por duas semanas e 5) testemunha inoculada, deixada à sombra. Os sacos plásticos foram preenchidos com substrato esterilizado, sendo distribuídos aleatoriamente em seu interior seis saquinhos contendo 5 g de inóculo por tratamento. A avaliação foi feita pelo teste de isca, utilizando-se o conteúdo de cada saquinho de nylon para recuperação do patógeno ao final do experimento. A presença de esporângios ao redor dos pedacinhos de folhas, utilizados como isca, sobre o substrato inoculado dos respectivos tratamentos, indicava resposta positiva (+) e a ausência foi considerada resposta negativa (-).

Para o teste de isca utilizado, coletou-se solo ou raízes das plantas crescidas nos diferentes tratamentos. Estes foram colocados em placas de Petri contendo 30 ml de água esterilizada. Sobre a água, foram depositados dez discos de folhas de citros de aproximadamente 3 mm de diâmetro. A avaliação foi feita passando-se os discos de folhas para outra placa com apenas água, onde se identificou, com o auxílio de microscópio ótico, o número de discos infetados com o patógeno.

Obtenção das plantas e preparo dos tubetes

Sementes de limão cravo foram pré-germinadas em bandeja contendo solo esterilizado. As mudas foram transplantadas para tubetes e cada tubete foi preenchido colocando-se o volume equivalente a um terço do total do tubete de substrato esterilizado. Na porção mediana do tubete, onde fica a maior concentração de radicelas da plântula, foram depositados 30 ml da mistura de substrato e P. parasítica. Por último, o tubete foi preenchido com substrato esterilizado. Os tubetes foram preparados logo após a solarização de inverno e as plântulas foram então transplantadas das bandejas para os tubetes.

Efeito da solarização no crescimento das plantas produzidas em tubetes e na recuperação da P. parasitica do substrato pelo teste de isca

Com o substrato inoculado e solarizado no inverno foi instalado um experimento em blocos ao acaso com oito tratamentos e quatro repetições (15 plantas) para verificar a eficiência da solarização em coletor solar comparado com sacos plásticos.

Além dos tratamentos com solarização, testou-se Trichoderma spp. aplicado através da rega com 100 ml da suspensão (10⁷ conídios/ml) por 2 l de solo, sendo utilizada uma mistura dos cinco melhores isolados do trabalho de May & Kimati (1999). Os tratamentos foram: (1) testemunha sem inóculo; (2) testemunha inoculada; (3) solarização em sacos plásticos por 24 h; (4) solarização em sacos plásticos por 48 h; (5) solarização em coletor solar por 24 h; (6) solarização em coletor solar por 48 h; (7) solarização em coletor solar por 48 h + Trichoderma spp.; (8) Trichoderma spp. Os solos foram regados diariamente e a avaliação foi feita, primeiramente, pela contagem do número de plantas sobreviventes (% de sobrevivência) ao final de três meses. Após a retirada das plantas dos tubetes, mediram-se o comprimento de raiz, a altura das plantas e o peso da parte aérea e das raízes por parcela. Avaliou-se, também, a infestação do solo pelo teste de isca com pedaços de folhas de citros para recuperação de P. parasitica.

As análises estatísticas foram feitas com auxílio do programa SANEST por meio de ANOVA e comparações de médias com o teste Tukey a 5% de significância.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Observou-se que as temperaturas com o coletor solar foram superiores às do saco plástico, tanto no verão como no inverno. Apenas 24 h de solarização no inverno em coletor solar foram suficientes para eliminar totalmente o patógeno do solo infestado com níveis variando de 27 a 85 esporângios/g de solo. A eficiência da solarização para controle de fitopatógenos habitantes do solo tem sido comprovada por muitos autores (Ghini, 1993). No presente trabalho, o método de diluição do solo detectou presença de P. parasitica na testemunha inoculada, não solarizada, até 1/64, ou seja, uma parte de substrato infestado para 64 partes de solo esterilizado, comprovando a alta infestação do substrato utilizado no experimento.

Em sacos plásticos, o fungo não foi controlado durante o inverno por 24 ou 48 h, provavelmente por que a temperatura máxima esteve em torno de 40 ^oC, insuficiente para inativar o patógeno em questão.

Segundo Hough et al. (1979), a sensibilidade de P. parasitica ao tratamento térmico, através do uso de uma máquina para aquecimento das bordas da lesão no tronco da árvore, é similar às temperaturas para eliminação do patógeno de semente e de frutos relatados por Klotz & DeWolfe (1961) e Klotz et al. (1960). Os primeiros autores concluíram que temperaturas iguais ou superiores a 60 ^oC eliminavam P. parasitica, impedindo o crescimento da lesão no tronco. Os dados do presente trabalho confirmaram a mesma faixa de temperatura como letal ao patógeno (Tabelas 1 e 2). Com base nos resultados da Tabela 1 pode-se notar que no inverno, apenas as temperaturas acima de 60 ^oC (em coletor solar) foram capazes de eliminar o patógeno. No verão, a solarização em sacos plásticos (Tabela 2) mostrou-se eficiente com exposição por dois ou mais dias, onde a temperatura no horário mais quente atingiu 60 ^oC e a média dos dias, tanto na primeira como na segunda semana, foram iguais ou superiores a 50 ^oC, enquanto a temperatura ambiente média no mesmo período foi de 30,5 ^oC.

Matheron & Porchas (1996) estudaram a colonização de raízes de citros por P. citrophthora (RE Sm & EH Sm) Leonian e P. parasitica em flutuações diárias de temperatura entre os níveis favoráveis e inibitórios. Esses autores afirmaram que, dependendo do período de exposição á temperatura limite, ocorre redução no grau de colonização das radicelas devido ao atraso na taxa de formação do esporângio e produção de zoósporos. Os mesmos autores ainda comentam que a eficiência dos fungicidas para controle de podridão de raiz de citros poderia ser melhorada aplicandoos somente quando a temperatura do solo estivesse favorável ao desenvolvimento da doença.

Em casa de vegetação, a solarização em coletor solar do substrato pré-infestado com P. parasitica para produção de mudas de porta-enxerto de citros promoveu um aumento no peso de parte aérea, peso de raiz e altura de plantas quando comparado com a testemunha, substrato inoculado e não solarizado (Tabela 3). Os tratamentos no coletor solar por 48 h, acrescidos ou não de Trichoderma spp., não diferiram entre si e o tratamento apenas com Trichoderma spp. não foi eficiente. A aplicação de antagonistas via rega de suspensão de conídios muitas vezes é ineficiente, pois não propicia energia necessária para o desenvolvimento e colonização inicial do Trichoderma spp. (Kelley, 1976; Deacon & Berry, 1993).

Sumarizando, a solarização do substrato para produção de mudas elimina eficientemente P. parasitica, quando exposta por 24 h no inverno e no verão em coletor solar (tubos com 10 cm de diâmetro), ou por 48 h em sacos plásticos transparentes (20 x 25 x 4 cm³) no verão. Além disso, os tratamentos com coletor solar propiciaram o melhor desenvolvimento das mudas.

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^*

Parte da dissertação de mestrado do primeiro autor. ESASLQ/USP.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  20 Ago 2002
• Data do Fascículo
  Jun 2002

Histórico

• Aceito
  29 Jan 2002