Avaliação de parâmetros monocíclicos e da intensidade da ferrugem asiática (Phakopsora pachyrhizi) em diferentes genótipos de soja e posições de copa

Evaluation of monocyclic parameters and intensity of the Asian soybean rust (Phakopsora pachyrhizi) in both several soybean genotypes and canopy position

ARTIGOS

Avaliação de parâmetros monocíclicos e da intensidade da ferrugem asiática (Phakopsora pachyrhizi) em diferentes genótipos de soja e posições de copa

Evaluation of monocyclic parameters and intensity of the Asian soybean rust (Phakopsora pachyrhizi) in both several soybean genotypes and canopy position

Elisandra Batista Zambenedetti^{I, II}; Eduardo Alves^II,*; Edson Ampélio Pozza^II; Dejânia Vidira de Araújo^II; Claudia Vieira Godoy^III

^IBolsista do CNPq

^IIDepartamento de Fitopatologia, Universidade Federal de Lavras, Cx. Postal 3037, CEP 37200-000, Lavras, MG, e-mail: [e-mail]

^IIIEmbrapa Soja, Cx. Postal 231, CEP 86001-970, Londrina, PR; Parte da dissertação do primeiro autor apresentada ao curso de Mestrado em Fitopatologia, UFLA (2005), Lavras, MG

RESUMO

A ferrugem da soja destacou-se nas últimas safras devido à alta severidade que vem causando nas lavouras de soja. Diversos estudos estão em andamento, para buscar informações sobre a resistência genética dos cultivares atualmente plantados. O objetivo do trabalho foi estudar parâmetros monocíclicos e o progresso da ferrugem da soja em diferentes genótipos e posições da copa, em casa-de-vegetação. Foram utilizados 7 cultivares (Uirapuru e BRS 134 Pintado, BRS 154, BRS 215, FT 2, BRS 231) e uma PI 459025 com gene de resistência Rpp4, inoculados com suspensão de esporos de Phakopsora pachyrhizi. Foram estudados para cada genótipo os períodos de incubação e latente. A avaliação de incidência da ferrugem foi realizada na planta toda e a da severidade a partir do aparecimento dos sintomas, a cada cinco dias, até o declínio das plantas em três posições na copa. Os valores foram transformados em área abaixo da curva de progresso da incidência (AACPI) e da severidade (AACPS) da doença. O período de incubação foi de seis dias para todos genótipos avaliados. Entretanto, o período latente variou de 6 a 12 dias. Houve diferença significativa entre os cultivares para AACPI. Os cultivares BRS 134, FT 2 e BRS 231 apresentaram maior valor de AACPI, diferenciando dos demais cultivares. Entre os cultivares com menor valor de AACPI destacou-se a PI 459025. Variação na intensidade da doença nos 8 genótipos avaliados, em relação à posição da copa, só pode ser observada para o terço médio da planta.

Palavras-chave adicionais:Glycines max (L.) Merrill, progresso de doença.

ABSTRACT

Soybean rust caused by the fungus Phakopsora pachyrhizi, has been known to drastically reduce yields. Diverse studies are now in progress, to search information on the genetic resistance of cultivar currently planted. The objective of this study was to evaluate the both incubation and latent period and the progress of soybean rust on several genotypes and three canopy position in greenhouse. The cultivars used were Uirapuru, BRS 134 Pintado, BRS 154, BRS 215, BRS 231, FT 2 and PI 459025 with a Ppp4 gene of resistance for soybean rust. Inoculations were performed by spraying inoculum suspension on the leaves. Disease incidence and severity were assessed every five days after the first disease symptoms were observed until plants were dead. The incubation period was six days for all genotypes evaluated. However, the latent period varied from six to twelve days. The incidence and severity values were transformed in proportion as the area under the disease incidence curve (AUDIC) and area under the disease severity curve (AUDSC). The cultivars BRS 134 Pintado, FT 2 and BRS 231 showed high values for AUDIC and were significant different from the others. PI 459025 showed the lowest value for AUDIC. AUDSC for PI 459025 cultivar was the lowest and FT 2 showed the highest value. Difference from disease intensity on eight genotypes, in function of the canopy position, only was observe to plant medium part.

Additional keywords:Glycines max (L.) Merrill, disease progress.

A ferrugem asiática da soja, cujo agente etiológico é o fungo Phakopsora pachyrhizi H. Sydow & P. Sydow, é um problema recente para a sojicultura nacional. Essa doença foi identificada pela primeira vez no Brasil em maio de 2001 (22). Os sintomas iniciais da doença são pequenas pústulas foliares, de cor castanha a marrom-escura. Na face inferior da folha, pode-se observar um ou mais soros urediniais que se rompem liberando os urediniósporos (18). As lesões formadas nas folhas podem ser classificadas como do tipo castanho clara com muitos soros urediniais e abundante esporulação(TAN) ou castanho avermelhada com poucos soros urediniais e com pouca ou nenhuma esporulação (RB – Reddish Brown) (1).

Lesões do tipo RB são típicas de materiais com genes dominantes de resistência ou de efeito principal a essa doença (1; 2, 3), também conhecida como resistência vertical ou qualitativa (4). Este tipo de lesão pode ser descrito como uma reação de hipersensibilidade. Nessa, as células do hospedeiro, próximas ao local de infecção do patógeno, morrem logo após a infecção. O patógeno P. pachyrhizi necessita de células vivas para sobreviver e se multiplicar e, com a morte dessas células, o crescimento do patógeno é limitado ao local de infecção. Do ponto de vista do melhoramento genético, a planta com reação de hipersensibilidade é extremamente resistente, devido ao patógeno nessas condições, ter sua reprodução limitada, cessando o processo epidêmico no campo (4). No entanto, foi verificado, em nível mundial, que a resistência qualitativa não foi duradoura, devido à grande variabilidade do patógeno (1), tendo sido identificadas 18 raças do patógeno no Japão (20). No Brasil, estudos realizados pela Embrapa Soja identificaram 11 cultivares com resistência à ferrugem (23), sendo essa resistência quebrada rapidamente com isolado do fungo proveniente do Mato Grosso. A necessidade de se encontrar formas de resistência mais eficientes para o controle da ferrugem asiática da soja é uma realidade cada vez mais premente. Neste sentido, a resistência horizontal, também chamada de parcial, incompleta ou quantitativa, condicionada por genes de efeitos menores, pode ser uma alternativa de controle viável neste patossistema (15). Neste tipo de resistência, os genótipos apresentam reações dentro de uma amplitude contínua de variação, podendo exibir de nenhum até bons níveis de resistência (16). O progresso lento é o resultado dos efeitos combinados de fatores, como baixa freqüência de infecção, período latente longo, pústulas pequenas, baixa produção de esporos por pústula e período infeccioso curto (9; 14; 19; 15; 24).

A investigação detalhada do comportamento de genótipos, em relação ao progresso da doença é fator essencial para direcionar programas de melhoramento visando resistência. Para a ferrugem da soja, no Brasil, tem-se pouca informação a respeito do comportamento de genótipos e de métodos de avaliação da doença, principalmente, em relação a qual é a melhor posição de copa para encontrar diferenças entre genótipos. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi determinar, em 8 genótipos de soja, o período de incubação, latente e verificar se ocorre diferença entre os genótipos na intensidade da ferrugem asiática em três posições de copa.

MATERIAL E MÉTODOS

O trabalho foi conduzido em casa-de-vegetação, localizada no Departamento de Fitopatologia da Universidade Federal de Lavras. Foram utilizados sete cultivares de soja e uma PI, escolhidas entre os materiais avaliados, quanto à resistência à P. pachyrhizi, por Yorinori et al. (23), sendo esses, Uirapuru e BRS 134 com ciclo tardio, Pintado, BRS 154 e BRS 215 com ciclo médio, o cultivar FT-2 de ciclo precoce e o cultivar BRS 231 de ciclo semiprecoce, e uma PI459025 com gene de resistência Rpp4. Sementes da cultivar BRS 154 foram plantadas em vasos de plástico contendo 5Kg de mistura de terra, areia e esterco (2:1:2) deixando-se quatro plantas por vaso. As plantas foram mantidas em casa-de-vegetação e inoculadas com urediniósporos de P. pachyrhizi de isolado proveniente da EMBRAPA Soja Londrina-PR. Os urediniósporos produzidos constituíram fonte de inóculo para os trabalhos posteriores. Folhas com soros urediniais foram coletadas e lavadas com pincel, para retirar os urediniósporos. Em seguida, preparou-se suspensão de esporos em água destilada contendo tween 20 (0,1mL/l). Para a inoculação foram utilizados 10mL da suspensão (3x10⁴ urediniósporos/mL) por vaso. A suspensão de urediniósporos foi pulverizada uma vez, sobre as plantas quando estas apresentavam dois pares de folhas trifoliadas completamente expandidas, até o ponto de escorrimento. Após a inoculação as plantas foram mantidas em casa-de-vegetação com umidade próxima a 100%, controlada por nebulizador, para favorecer a germinação e a penetração do patógeno (11).

O experimento foi conduzido em blocos ao acaso, com oito tratamentos e quatro repetições. A unidade experimental foi constituída por um vaso com quatro plantas. Os parâmetros avaliados foram o período de incubação (período de tempo entre a inoculação e o aparecimento de lesões) e o período latente (período de tempo entre a inoculação e a produção de esporos). O período de incubação foi determinado com base no aparecimento dos sintomas, lesões do tipo RB ou TAN. Para determinar o início da esporulação (período latente) em cada cultivar as plantas foram avaliadas diariamente a partir do quinto dia após a inoculação. Com esse propósito, marcou-se um cm² no folíolo central de dois trifólios de cada planta. Nesses quadrados foram realizadas amostragens diárias utilizando-se fita adesiva. Após o contato da fita adesiva com a área marcada no folíolo, colocou-se a mesma sobre lâminas para microscopia contendo lactoglicerol + azul de tripan, na qual, foi observada a presença ou ausência de urediniósporos em microscópio de luz.

As avaliações da incidência e da severidade foram realizadas a cada cinco dias, num total de sete, iniciando-se também no sexto dia após a inoculação. Para quantificar a incidência foram utilizadas todas as folhas da planta, sendo considerado o número de folhas infectadas em relação ao total. Para quantificar a severidade a planta foi dividida em três partes (posições da copa), ou seja, terço inferior, médio e superior. Em cada uma das posições foram utilizadas duas folhas trifolioladas, sendo a avaliação realizada no folíolo central de cada folha marcada com linha colorida. Os dados de severidade foram obtidos por contagem do número de lesões/cm² fazendo-se duas amostragens por folíolo central. O número de lesões/cm² foi calculado pela média das amostragens. Os dados da incidência e da severidade foram integrados usando-se a área abaixo da curva de progresso da incidência (AACPI) e da severidade (AACPS) de acordo com Campbell & Madden (5).

Para melhor visualizar o progresso da doença ao longo do tempo, plotaram-se as curvas de progresso da doença. Os tratamentos foram comparados utilizando-se a AACPI e AACPS da ferrugem da soja. No caso da severidade, a análise de variância foi realizada em esquema fatorial, sendo considerada a interação genótipo x posição de copa (terços inferior, médio e superior). As análises foram feitas no programa SISVAR (6). As variáveis significativas no teste F, da análise de variância foram comparadas por teste de médias de Scott-Knott (P < 0,05).

A temperatura e umidade relativas foram monitoradas por termo-hidrógrafo durante o período de avaliação da doença. A temperatura apresentou variação de 21,75ºC a 26,95ºC, com média de 24,35ºC e a umidade relativa do ar variou entre 53,57% e 85,50%, com média de 69,53%.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Em todos os cultivares foram observadas lesões do tipo TAN, apenas na PI 459025 foi observada lesão do tipo RB, o que está de acordo com o observado por Bonde et al. (1). Quanto ao período de incubação todos os genótipos avaliados apresentaram sintomas no sexto dia após a inoculação. Entretanto, o período latente foi variável em função dos genótipos. Nos cultivares Uirapuru, Pintado e BRS 154 foi de seis dias, no cultivar BRS 134 de sete dias, no BRS 215 de oito dias, nos cultivares BRS 231 e FT-2 de nove dias e na PI 459025, com gene de resistência completa Rpp4 foi de doze dias. Na literatura são citados períodos latentes entre 7 e 9 dias (7, 10; 13; 17; 19), no entanto no material com o gene Rpp4, o período latente foi superior ao relatado. Novos soros urediniais continuaram sendo formados durante quatro a cinco semanas depois da inoculação.

Houve diferença significativa entre os cultivares para AACPI. Os cultivares BRS 134, FT2 e BRS 231 apresentaram maior valor da AACPI, e foram significativamente diferentes dos demais cultivares. Entre os genótipos com menor valor de AACPI destacou-se a PI 459025 (Rpp4) (Figura 1).

Para AACPS ocorreu interação entre os genótipos e os terços avaliados. Não houve diferença significativa entre os cultivares, para a AACPS, no terço inferior e no superior. Entretanto diferença significativa foi observada no terço médio, no qual, o genótipo PI 459025 apresentou menor valor de AACPS (931.172), não diferindo estatisticamente dos cultivares BRS 134, BRS 231 e Uirapuru, e o cultivar BRS 215 apresentou maior valor de AACPS (1997,89), os demais cultivares não apresentaram diferença estatística com valores variando de 1465,62 a 1585,23 (Tabela 1). No entanto, observou-se que o genótipo PI 459025 apresentou menor valor de AACPS em todos os terços avaliados.

Os cultivares BRS 134 e FT-2, classificados por Yorinori et al. (23) como resistentes, em função da presença de lesões RB, apresentaram lesões do tipo TAN nesse ensaio. Como se trata do mesmo isolado a explicação para o fato dos cultivares comportarem-se de maneira diferente, pode ser devido às diferenças entre as variáveis do ambiente.

A PI 459025 apresentou menor incidência em todas as avaliações e o cultivar FT-2 apresentou a maior, sendo que aos dezesseis DAI foi observada a incidência máxima nesse cultivar (Figura 2A), tendo esta, caído em seguida devido à queda de folhas infectadas.

Em todos os cultivares a maior severidade ocorreu no terço inferior com média de 1717,464 e a menor no superior com média de 447,77. Essa maior severidade pode ser explicada pelo fato de esta ter sido a região inoculada inicialmente, por estar recebendo constantemente esporos produzidos nos terços superiores, pelo próprio micro-clima formado nesta região da planta, e por estar mais próxima ao substrato, apresentando maior período de molhamento foliar. A avaliação no terço médio foi a que possibilitou diferenciar os cultivares e apresentou um valor médio de AACPS 1377,324. Portanto a avaliação nesta parte da planta foi a mais eficiente para discriminar diferenças de resistência em termos de severidade e incidência, entre os materiais, pois a alta pressão de inóculo, ocasionada pela inoculação no terço inferior e a baixa severidade no terço superior, fez com que os materiais não apresentassem diferenças em relação as variáveis estudadas.

Para severidade da doença houve aumento no número de lesões da primeira para a segunda avaliação em todos os cultivares com exceção da PI 459025 que só apresentou aumento no número de lesões dezesseis dias após a inoculação. Esse fato ocorreu devido a PI ter iniciado a esporulação aos doze dias após a inoculação, evidenciando que além da resistência qualitativa (1) essa PI pode ter também resistência quantitativa. Aos 21 dias após a inoculação todos os cultivares apresentaram aumento na porcentagem de lesões e, aos 26 dias após a inoculação foi observado o maior número de lesões/cm² de área foliar. Na avaliação seguinte houve estabilidade e na última avaliação houve um novo aumento na porcentagem de lesões (Figura 2B).

Os resultados aqui apresentados poderão contribuir para o melhor entendimento da complexa interação entre P. pachyrhizi e soja e auxiliar em programas de melhoramento genético da soja para a ferrugem asiática.

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Data de chegada: 21/01/2005.

Aceito para publicação em: 10/10/2006.

• 1. Bonde, M. R.; Nester, S. E.; Autin, C. N.; Stone, C. L.; Frederick, R. D. Hartman, G. L.; Miles, M. R. Evaluation of virulence of Phakopsora pachyrhizi and P. meibomiae isolates. Plant Disease, St. Paul, v.90, n.6, p.708-716, 2006

*

Autor para correspondência: Eduardo Alves

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  03 Out 2007
• Data do Fascículo
  Jun 2007

Histórico

• Aceito
  10 Out 2006
• Recebido
  21 Jan 2005