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Avaliação da resistência de espécies de eucalipto à ferrugem (Puccinia psidii Winter)

Evaluation of the resistance of eucalypt species to rust (Puccinia psidii Winter)

Resumos

A incidência da ferrugem ocorre em mudas no viveiro e em plantas jovens no campo, essa doença causada por Puccinia psidii é uma das mais severas do eucalipto. O presente trabalho teve como objetivo quantificar a resistência parcial das espécies de Eucalyptus propinqua, E. citriodora, E. grandis, E. urophylla, E. microcorys, E. urograndis (E. grandis x E. urophylla), E. robusta, E. saligna, E. dunnie, E. phaeotricha à ferrugem do eucalipto. Para isso foi conduzido experimento em casa de vegetação no Departamento de Entomologia e Fitopatologia da UFRRJ. Foram utilizadas 100 mudas de eucalipto com três meses de idade, obtidas a partir de sementes. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, com dez tratamentos e dez repetições, sendo uma planta por repetição. A inoculação foi realizada por meio da atomização de folhas com suspensão de uredósporos na concentração de 2x10(4) esporos/mL, obtidos a partir de pústulas frescas. Em seguida, as mudas foram incubadas em câmara úmida e escura por 48h. Foram avaliados os parâmetros de resistência: número médio de pústulas por folíolo, severidade, período latente médio e AACPD. Os dados obtidos foram transformados em <img border=0 width=32 height=32 src="../../../../../../img/revistas/sp/v40n1/car01.jpg" align=absmiddle>e arcsen <img border=0 width=32 height=32 src="../../../../../../img/revistas/sp/v40n1/car02.jpg" align=absmiddle>, e submetidos à análise de variância e à comparação de médias pelo teste de Scott-Knott ao nível de 5% de probabilidade, por meio do software SAEG. Foram encontradas diferenças significativas entre as espécies de eucalipto para os parâmetros estudados. Eucalyptus urograndis (E. grandis x E. urophylla) apresentou um menor número médio de pústulas por folíolo, menor severidade, maior período latente médio e valores menores da área abaixo da curva do progresso da doença, tendo dessa forma maior resistência parcial à ferrugem.

Resistência parcial; pústula; severidade; Myrtaceae


Rust incidence is frequent among nursery seedlings and young plants in the field; this disease is caused by Puccinia psidii and is one of the most severe affecting Eucalyptus tree. The present study aimed to quantify the partial resistance to eucalypt rust for the species E. propinqua, E. citriodora, E. grandis, E. urophylla, E. microcorys, E. urograndis (E. grandis x E. urophylla), E. robusta, E. saligna, E. dunni and E. phaeotricha. The experiment was conducted in a greenhouse of the Department of Entomology and Plant Pathology of UFRRJ. A total of 100 eucalypt seedlings aged 3 months were obtained from seeds. Experimental design was completely randomized, with 10 treatments and 10 replicates, i.e., 1 plant per replicate. Inoculation was performed by atomizing the leaves with a suspension of urediniospores at the concentration of 2x 10(4) spores/mL, obtained from fresh pustules. Then, seedlings were incubated in a wet,dark chamber for 48 hours. The evaluated parameters of resistance were: mean number of pustules per leaflet, severity, mean latent period and AUDPC. The obtained data were transformed into <img border=0 width=32 height=32 src="../../../../../../img/revistas/sp/v40n1/car01.jpg" align=absmiddle>and arcsen <img border=0 width=32 height=32 src="../../../../../../img/revistas/sp/v40n1/car02.jpg" align=absmiddle>, and subjected to analysis of variance and comparison of means according to Scott-Knott test at 5% probability, using the software SAEG. Significant differences were found among eucalypt species for the studied parameters. E. urograndis (E. grandis x E. urophylla) had a smaller mean number of pustules per leaflet, lower severity, greater mean latent period and lower values of area under the disease progress curve, showing thus greater partial resistance to rust.

partial resistance; pustule; severity; Myrtaceae


ARTIGOS

Avaliação da resistência de espécies de eucalipto à ferrugem (Puccinia psidii Winter)* * Parte da dissertação de mestrado do primeiro autor - Mestrado em Fitossanidade e Biotecnologia Aplicada, UFRRJ (2012).

Evaluation of the resistance of eucalypt species to rust (Puccinia psidii Winter)

Diene Elen Miranda da SilvaI; Luís Antônio Siqueira de AzevedoII; Tathianne Pastana de Souza PoltronieriI

IMestre em Fitossanidade e Biotecnologia Aplicada. Instituto de Biologia,Departamento de Fitopatologia e Entomologia - Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, CEP 23890-000, Seropédica/RJ

IIProfessor Adjunto Doutor do Instituto de Biologia. Departamento de Fitopatologia e Entomologia -Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, CEP 23890-000, Seropédica/RJ

Autor para correspondência Autor para correspondência: Diene Elen Miranda da Silva ( dieneelen_ms@hotmail.com)

RESUMO

A incidência da ferrugem ocorre em mudas no viveiro e em plantas jovens no campo, essa doença causada por Puccinia psidii é uma das mais severas do eucalipto. O presente trabalho teve como objetivo quantificar a resistência parcial das espécies de Eucalyptus propinqua, E. citriodora, E. grandis, E. urophylla, E. microcorys, E. urograndis (E. grandis x E. urophylla), E. robusta, E. saligna, E. dunnie, E. phaeotricha à ferrugem do eucalipto. Para isso foi conduzido experimento em casa de vegetação no Departamento de Entomologia e Fitopatologia da UFRRJ. Foram utilizadas 100 mudas de eucalipto com três meses de idade, obtidas a partir de sementes. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, com dez tratamentos e dez repetições, sendo uma planta por repetição. A inoculação foi realizada por meio da atomização de folhas com suspensão de uredósporos na concentração de 2x104 esporos/mL, obtidos a partir de pústulas frescas. Em seguida, as mudas foram incubadas em câmara úmida e escura por 48h. Foram avaliados os parâmetros de resistência: número médio de pústulas por folíolo, severidade, período latente médio e AACPD. Os dados obtidos foram transformados em e arcsen , e submetidos à análise de variância e à comparação de médias pelo teste de Scott-Knott ao nível de 5% de probabilidade, por meio do software SAEG. Foram encontradas diferenças significativas entre as espécies de eucalipto para os parâmetros estudados. Eucalyptus urograndis (E. grandis x E. urophylla) apresentou um menor número médio de pústulas por folíolo, menor severidade, maior período latente médio e valores menores da área abaixo da curva do progresso da doença, tendo dessa forma maior resistência parcial à ferrugem.

Palavras-chave adicionais: Resistência parcial, pústula, severidade, Myrtaceae.

ABSTRACT

Rust incidence is frequent among nursery seedlings and young plants in the field; this disease is caused by Puccinia psidii and is one of the most severe affecting Eucalyptus tree. The present study aimed to quantify the partial resistance to eucalypt rust for the species E. propinqua, E. citriodora, E. grandis, E. urophylla, E. microcorys, E. urograndis (E. grandis x E. urophylla), E. robusta, E. saligna, E. dunni and E. phaeotricha. The experiment was conducted in a greenhouse of the Department of Entomology and Plant Pathology of UFRRJ. A total of 100 eucalypt seedlings aged 3 months were obtained from seeds. Experimental design was completely randomized, with 10 treatments and 10 replicates, i.e., 1 plant per replicate. Inoculation was performed by atomizing the leaves with a suspension of urediniospores at the concentration of 2x 104 spores/mL, obtained from fresh pustules. Then, seedlings were incubated in a wet,dark chamber for 48 hours. The evaluated parameters of resistance were: mean number of pustules per leaflet, severity, mean latent period and AUDPC. The obtained data were transformed into and arcsen , and subjected to analysis of variance and comparison of means according to Scott-Knott test at 5% probability, using the software SAEG. Significant differences were found among eucalypt species for the studied parameters. E. urograndis (E. grandis x E. urophylla) had a smaller mean number of pustules per leaflet, lower severity, greater mean latent period and lower values of area under the disease progress curve, showing thus greater partial resistance to rust.

Additional keywords: partial resistance, pustule, severity, Myrtaceae.

O eucalipto é originário da Austrália, Indonésia e Papua Nova Guiné. O gênero Eucalyptus possui grande destaque no setor florestal, devido sua grande adaptabilidade a diversas condições de solos e climas, além do seu alto potencial como matéria prima para indústria madeireira e a produção de celulose e papel.

Atualmente, o Brasil é o 3º maior produtor de celulose, a produção brasileira em 2011 chegou a 14 milhões de toneladas.A área de plantio de Eucalyptus no Brasil é de aproximadamente 4,9 milhões hectares, na sua distribuição, o segmento de papel e celulose concentra 71,2% da área plantada, seguido pelos segmentos de siderurgia e carvão vegetal (18,4%), painéis de madeira industrializada (6,8%) e produtores independentes (3,6%). Os estados de Minas Gerais, São Paulo, Bahia, Mato Grosso do Sul, Rio Grande do Sul, Espírito Santo e Paraná detêm 85,8% da área de plantio no Brasil. A maior concentração de plantios florestais nas regiões Sul e Sudeste do país (73,8%) se justifica em função da localização das principais unidades industriais (6).

Até a década de 70, considerava-se que os plantios de eucalipto eram livres de doenças. Entretanto, com o avanço das áreas reflorestadas para regiões mais quentes e úmidas, o plantio de espécies mais produtivas, porém suscetíveis, e a utilização repetitiva de uma mesma área para plantio criaram condições favoráveis à ocorrência de doenças (18, 20).

A ferrugem do eucalipto também chamada de ferrugem das mirtáceas, causada por Puccinia psidii Winter é umas das principais doenças da cultura, com potencial para causar perdas em áreas tropicais e subtropicais do mundo que possuam florestas desta espécie (4, 15).No Brasil, a ferrugem constitui um sério problema principalmente devido a ocorrência de condições ambientais favoráveis durante todo o ano (5).

A incidência e severidade da doença variam em função da espécie e do genótipo do hospedeiro, região geográfica e época do ano, sendo particularmente exigente quanto às condições de microclima e existência de órgãos juvenis (6).

O controle de P. psidii em eucalipto é baseado principalmente no uso de áreas de escape e de espécies ou progênies resistentes à doença. A ampla variabilidade genética inter e intra-específica para resistência à ferrugem em Eucalyptus spp., permite o controle da doença por meio do plantio de clones, progênies ou espécies resistentes (3).

Segundo Zauza et al. (29), as espécies E. grandis e E. urophylla, possuem ampla variabilidade genética para resistência, apesar de serem consideradas como suscetível e resistente. As demais espécies E. tereticornis, E. pellita e E. camaldulensis são consideradas como resistentes e E. globulus, E. nitens e E. cloeziana como suscetíveis.

A resistência parcial, também chamada de horizontal, quantitativa ou raça não-específica é poligênica e efetiva uniformemente contra uma grande parte ou todas as raças do patógeno (1). Na resistência parcial observa-se uma distribuição contínua de graus de resistência entre as progênies, classificando-as de altamente resistentes até altamente suscetíveis (10).

A resistência parcial afeta principalmente a taxa de velocidade da doença, pois os efeitos na epidemia refletem a atuação da resistência em vários componentes epidemiológicos, como diminuição do tamanho da lesão, do número de esporos produzidos por lesão e do aumento do período latente (10).

A seleção de genótipos para plantios comerciais ou programas de melhoramento tem como principais critérios, as características de crescimento e qualidade da madeira aliadas a resistência a doenças (17).

O presente trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar a resistência parcial em dez espécies de eucalipto à ferrugem causada por P. psidii em condições de casa de vegetação.

MATERIAL E MÉTODOS

Para avaliação da resistência parcial de espécies de eucalipto à ferrugem, foi conduzido experimento em Seropédica, na Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, em casa de vegetação, no período de julho a novembro de 2011. Foram semeadas em tubetes com capacidade de substrato de 53 cm3, dez espécies de eucalipto adquiridas no Instituto de Pesquisa e Estudos Florestais (IPEF). As mudas foram transplantadas para sacos plásticos com capacidade para 2,0 kg de substrato, quando alcançaram uma altura média de quatro centímetros.

Para a preparação do inóculo foram coletadas folhas com pústulas de ferrugem de E. urograndis (E. grandis x E. urophylla) com dois anos de idade. As folhas foram imersas e agitadas por cinco minutos em erlemeyers com 500 mL de água destilada esterilizada (ADE) e três gotas de Tween 80%. A determinação e calibração da concentração de inóculo foram estimadas com o auxílio do hemocitômetro. A suspensão de uredósporos foi calibrada para a concentração de 2 x 104 esporos/mL.

O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com dez tratamentos e dez repetições, sendo uma planta por repetição, totalizando 100 mudas. Foram avaliados os seguintes parâmetros de resistência parcial: número médio de pústulas por folíolo, severidade da ferrugem, período latente médio (PLM) e área abaixo da curva do progresso da doença (AACPD).

Para a quantificação das variáveis monocíclicas, plantas das dez espécies de eucalipto com três meses de idade foram inoculadas com o fungo. A inoculação foi realizada por meio da atomização de folhas com suspensão de uredosporos na concentração de 2x104 esporos/mL, obtidos a partir de pústulas de ferrugem (7). A atomização das folhas foi realizada ao final da tarde em casa de vegetação, com um pulverizador manual de capacidade para um litro. Em seguida, as mudas foram incubadas em câmara úmida e escura por 48 horas. As variáveis temperatura e umidade relativa da casa de vegetação não puderam ser registradas devido à ausência de equipamento adequado para isso.

As avaliações consistiram na contagem do número de pústulas por folíolo e a quantificação da severidade em quatro folhas marcadas. A primeira avaliação foi realizada aos dez dias após a inoculação e as demais no espaço de quatro em quatro dias, totalizando cinco avaliações. Para avaliação da severidade da doença utilizou-se a escala diagramática de quantificação da resistência à ferrugem do eucalipto, elaborada por Junghans et al. (21). A partir do número de pústulas encontradas foi calculado o Índice de infecção de Mckinney (24) com emprego da equação:

Para calcular o período latente médio (PLM), foi empregada a equação de Shaner e Hess (28):

PLM = Σ Pi Ti em que:

Pi = proporção de pústulas novas surgidas na i-ésima observação, em relação ao número final de pústulas na n-ésima observação;

Ti = número de dias decorridos desde a inoculação até a i-ésima observação, e

n = número total de observações.

Com base também nessas variáveis, calculou-se a área abaixo da curva do progresso da doença (11), tomando-se como referência os dados de severidade e número médio de pústulas por folíolo.

AACPD = Σ [ (Yi + Y i + 1 ) / 2 ] x [ X i + 1 - Xi ] em que:

Yi = média da doença (por unidade de tempo) na i-ésima observação;

Xi = tempo em dias na i-ésima observação, e

n = número total de observações.

Os dados dos parâmetros número médio de pústulas por folíolo, PLM e AACPD foram transformados em e os da variável de severidade em arcsen , e submetidos à análise de variância e à comparação de médias pelo teste de Scott-Knott ao nível de 5% de probabilidade, por meio do software SAEG. Realizou-se ainda a correlação residual entre os parâmetros avaliados, por meio do software GENES.

Figura 1


RESULTADOS E DISCUSSÃO

Número médio de pústulas por folíolo

A média do número de pústulas por folíolo variou de 1,21 a 12,77. Houve diferenças significativas entre as médias das espécies, pelo teste de Scott Knot ao nível de 5%. Neste ensaio quatro espécies apresentaram um menor número de pústulas por folíolo: E. grandis x E. urophylla, E. propinqua, E. dunni e E. robusta, o que permite afirmar que essas espécies comportaram-se como mais resistentes à ferrugem do eucalipto (P. psidii).

No progresso da doença a partir do parâmetro do número médio de pústulas por folíolo observa-se que a doença manteve-se praticamente estável no decorrer das cinco avaliações nas espécies E. robusta, E. dunni, E. pronpinqua e E. grandis x E. urophylla, demonstrando que essas espécies comportaram-se como mais resistentes já que ocorreu uma redução da taxa de epidemia através da diminuição do número de pústulas.

Severidade

A média da severidade da ferrugem nas espécies de eucalipto em casa de vegetação variou de 12,81 a 35,64% de área foliar infectada (Tabela 2). Houve diferença significativa entre as médias. A partir dos resultados obtidos, é possível afirmar que as espécies E. saligna, E. robusta e E. microcorys podem ser consideradas como mais resistentes à ferrugem. A espécie E. urograndis (E. grandis x E. urophylla) apresentou uma severidade média de 18,80% porém diferenciou-se estatisticamente do grupo das mais resistentes.

Observa-se na evolução da doença, no que se refere à severidade, que as espécies E. dunni, E. phaeotricha e E. citriodora foram as que apresentaram maior severidade da doença, comportando-se como suscetíveis. Enquanto, que na espécie E. robusta a enfermidade manteve-se estável durante as avaliações, podendo ser considerada como mais resistente à ferrugem. As espécies E. grandis x E. urophylla e E. saligna exibiram baixa evolução da ferrugem durante as avaliações, classificando-as como mediamente resistentes.

Figura 2


Figura 3


As diferenças nos resultados de espécies resistentes entre os parâmetros de número médio de pústulas por folíolo e severidade podem ser explicadas pela escala de notas utilizada na avaliação do parâmetro em questão, que leva em consideração a classe de severidade de acordo com o tamanho da pústula. Segundo Junghans et al. (21), não existe relação direta entre o tamanho de pústulas e sua distribuição na folha, neste caso, a resistência reflete a capacidade do hospedeiro de restringir o crescimento e desenvolvimento do patógeno no órgão inoculado, enquanto o número e a distribuição de pústulas, relaciona-se também com a distribuição de esporos do patógeno durante a inoculação.

Os resultados deste ensaio corroboram com Santos (27), que em estudo sobre a resistência genética à ferrugem através do parâmetro de severidade avaliada pela escala de notas para avaliação da resistência à ferrugem do eucalipto de Junghans, verificou que E. urophylla apresentou maior número de plantas resistentes que E. grandis.

Período latente médio (PLM)

A média do período latente médio das espécies variou entre 8,42 a 16,03 dias neste ensaio (Tabela 2). Não houve diferença estatisticamente significativa entre as médias pelo teste de Scott Knott ao nível de 5% de probabilidade.

Porém se considerarmos que o período latente de P. psidii é relativamente curto, variando em média de cinco a sete dias (2, 26), espécies com período latente médio superior a doze dias, poderiam ser classificadas como possuidoras de resistência parcial, como as espécies E. propinqua, E. grandis x E. urophylla, E. grandis, E. dunni e E. citriodora.

A variação das médias de período latente médio entre as espécies observada neste trabalho também tem sido verificada por diversos autores, com outras espécies e procedências de Eucalyptus spp. (12, 13, 25).

AZEVEDO et al. (8) e MARTINS et al. (23), avaliando a resistência em casa de vegetação de genótipos de soja à P. pachyrhizi também utilizaram o período latente médio como parâmetro de resistência, já que a ferrugem lenta é considerada como uma forma de resistência parcial.

Área abaixo da curva do progresso da doença (AACPD)

A média dos valores da área abaixo da curva do progresso da doença (AACPD) para número médio de pústulas por folíolo variou de 21,20 a 207,85 e para a área abaixo da curva do progresso da doença (AACPD) para severidade variou de 237,86 a 519,40. Houve diferença significativa entre as médias. As espécies E. citriodora, E. dunni, E. phaeotricha e E. grandis apresentaram valores significativamente mais elevados de AACPD, logo foram mais suscetíveis à ferrugem. Por outro lado, as espécies E. urophylla, E. grandis x E. urophylla, E. microcorys, E. propinqua, E. saligna e E. robusta comportaram-se como mais resistentes à ferrugem do eucalipto, devido aos mais baixos valores de AACPD.

A área abaixo da curva do progresso da doença também tem sido utilizada por diversos autores para quantificar níveis de resistência parcial com outros patossistemas (8, 9, 14, 16, 22, 23). Porém não há estudos epidemiológicos sobre o patossistema P. psidii x eucalipto que utilizem esse parâmetro policíclico na avaliação da resistência quantitativa ou parcial.

Correlação residual entre os parâmetros de resistência parcial

Houve correlação residual significativa entre todos os parâmetros com o r crítico de 0,267 a 1%. As mais altas correlações entre os parâmetros de resistência parcial foram observadas entre o número médio de pústulas por folíolo e a severidade (r = 0,73), bem como entre área abaixo da curva do progresso da doença baseada na variável de número médio de pústulas (AACPD Pus) e a severidade (r = 0,73), e entre área abaixo da curva do progresso da doença baseada na variável de severidade (AACPD Sev) e o número médio de pústulas (r = 0,73). Dessa forma, concluem-se que as variáveis severidade e número médio de pústulas por folíolo devem ser avaliadas nos estudos epidemiológicos de P. psidii versus eucalipto. As correlações entre a área abaixo da curva do progresso da doença baseada no parâmetro de número médio de pústulas (AACPD Pus) e número médio de pústulas (r = 0,99) e área abaixo da curva do progresso da doença baseada no parâmetro de severidade (AACPD Sev) e severidade (r = 0,99), não foram consideradas como as mais altas correlações por serem dependentes matemáticas.

Curva de progresso da ferrugem nas espécies de eucalipto

Através dos gráficos com a curva de progresso da ferrugem, nas dez espécies avaliadas, observa-se um crescimento linear da doença com o coeficiente de determinação (R2) variando de 80,67 a 96,38% no parâmetro de número médio de pústulas por folíolo e R2 de 50,00 a 98,43% no parâmetro de severidade.

Tabela 4

Figura 4


Figura 5


Figura 6


Figura 7


Figura 8


Figura 9


Figura 10


Figura 11


Figura 12


Figura 13


As espécies E. propinqua, E. urograndis (E. grandis x E. urophylla), E. robusta e E. saligna apresentaram uma menor taxa de infecção da doença comportando-se como mais resistentes à ferrugem quando avaliado o número médio de pústulas por folíolo. Enquanto que as espécies E. citriodora, E. dunni e E. phaeotricha exibiram um maior número de pústulas por folíolo, com o desenvolvimento da ferrugem mais acentuado, o que as caracteriza como suscetíveis.

No parâmetro severidade verifica-se que o E. robusta, E. saligna, E. urograndis (E. grandis x E. urophylla) e E. urophylla apresentaram menor desenvolvimento micelial intercelular, resultando em pústulas com menores diâmetros, classificando-as como espécies mais resistentes à ferrugem. As espécies E. citriodora, E. dunni e E. phaeotricha exibiram pústulas maiores comportando-se como mais suscetíveis.

A maior suscetibilidade da espécie E. phaeotricha à ferrugem possivelmente está relacionada com a taxa de crescimento mais lenta nessa espécie em relação às demais.

CONCLUSÕES

De acordo com os dados obtidos neste trabalho, conclui-se que a espécie Eucalyptus urograndis (E. grandis x E. urophylla) apresentou resistência parcial à Puccinia psidii exibindo uma somatória de efeitos sobre as variáveis analisadas, apresentando menor número médio de pústulas por folíolo, menor severidade, maior período latente médio e valores menores da área abaixo da curva do progresso da doença.

As espécies E. saligna e E. urophylla foram moderadamente resistentes apenas quando se avaliou número médio de pústulas por folíolo, severidade e AACPD e E. robusta quando se quantificou número médio de pústulas por folíolo e severidade.

7. Azevedo, L. A. S. Resistência parcial de genótipos de soja a Phakopsorapachyrhizi e sua interação com fungicidas. 2005. 68 f. Tese (Doutorado em Agronomia - Produção Vegetal) - Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal.

Data de chegada: 25/02/213.

Aceito para publicação em: 06/01/2014.

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  • Autor para correspondência:
    Diene Elen Miranda da Silva (
  • *
    Parte da dissertação de mestrado do primeiro autor - Mestrado em Fitossanidade e Biotecnologia Aplicada, UFRRJ (2012).
  • Datas de Publicação

    • Publicação nesta coleção
      09 Maio 2014
    • Data do Fascículo
      Mar 2014

    Histórico

    • Aceito
      06 Jan 2014
    • Recebido
      25 Fev 2013
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