Patogenicidade de espécies de Botryosphaeriaceae endofíticas de plantas da Caatinga do estado do Ceará em manga e umbu-cajá

Pathogenicity of endophytic Botryosphaeriaceae species in plants of the Caatinga of Ceará State in mango and Spondias sp.

RESUMO

Espécies de Botryosphaeriaceae são importantes patógenos em diversas plantas lenhosas e não lenhosas, causando diferentes tipos de sintomas. Espécies desta família são usualmente consideradas patógenos fracos, causando doenças apenas quando estas plantas se encontram sob algum tipo de estresse como seca, temperaturas baixas ou elevadas, deficiência nutricional e danos causados por outros patógenos ou pragas. No entanto, pouco se conhece sobre a ocorrência e diversidade de espécies de Botryosphaeriaceae em plantas nativas do bioma Caatinga, localizado no Semiárido, e sobre a presença de fungos endofíticos nessas espécies, e muito menos sobre a sua importância como patógenos. O objetivo do presente estudo foi avaliar a patogenicidade de 74 isolados representando as espécies Botryosphaeria mamane, Pseudofusicoccum adansoniae, P. stromaticum, o complexo Neofusicoccum parvum/ribis, Lasiodiplodia gonubiensis e L. theobromae, identificados pela primeira vez como endofíticos em plantas típicas do bioma Caatinga. Testes de patogenicidade conduzidos em frutos de mangueira e ramos de plantas adultas de Spondias sp., revelaram que todas as espécies de Botryosphaeriaceae desse estudo foram patogênicas, sendo L. theobromae e o complexo N. parvum/ribis as mais agressivas. Este é o primeiro relato sobre fungos endofiticos em plantas do bioma Caatinga cearense, bem como a confirmação de que estas espécies podem atuar como fonte de inóculo para espécies de frutíferas comerciais da região do Semiárido brasileiro.

Palavras-chave
Caatinga; agressividade; diversidade; Mangifera indica

ABSTRACT

Species of the Botryosphaeriaceae are important pathogens in several woody and non-woody plants, causing different types of symptoms. Species of this family are usually regarded as weak pathogens, only causing diseases when plants are under some type of stress such as drought, hot or cold weather, poor nutrition and damage caused by other pathogens or pests. However, little is known about the occurrence and diversity of Botryosphaeriaceae species in native plants of the biome Caatinga, located in the Brazilian Semi-Arid Region, and about the presence of endophytic fungi in these species; even less is known about their importance as pathogens. The aim of the present study was to assess the pathogenicity of 74 isolates representing the species Botyosphaeria mamane, Pseudofusicoccum adansoniae, P. stromaticum, the complex Neofusicoccum parvum/ribis, Lasiodiplodia gonubiensis and L.theobromae, identified for the first time as endophytic in plants typical of the biome Caatinga. Pathogenicity tests conducted in mango fruits and branches of adult plants of Spondias sp. revealed that all Botryosphaeriaceous species of this study were pathogenic, and L. theobromae and the complex N.parvum/ribis were the most aggressive ones. This is the first report of such endophytic fungi in plants of the biome Caatinga in Ceará State, as well as the confirmation that these species can act as a source of inoculum for commercial fruit species of the Brazilian Semi-Arid Region.

Keywords
Caatinga; aggressiveness; diversity; Mangifera indica

Espécies de Botryosphaeriaceae (Dothideomycetes) têm distribuição mundial, sendo encontradas em todas as regiões geográficas, incluindo áreas de clima tropical, temperado e até em ambiente marinho, com exceção das regiões polares ^(2,34,35,38). Já foram relatadas infectando plantas do grupo das monocotiledôneas, dicotiledôneas e gimnospermas, e até liquens ⁽¹⁾. Seus hospedeiros incluem uma diversidade de plantas de importância agronômica, florestal e ornamental ^(1,8). Entre as doenças causadas por espécies de Botryosphaeriaceae estão podridão de frutos, manchas foliares, tombamento e podridão de colo em mudas, cancros, secas em brotos e mudas, gomose, seca descendente, vassoura-de-bruxa e morte de árvores ⁽⁴¹⁾.

Espécies de Botryosphaeriaceae são frequentemente descritas como oportunistas ou patógenos latentes, os quais apresentam longo período de latência antes que algum fator como, por exemplo, estresse hídrico faça com que eles se tornem patogênicos, causando, frequentemente, cancros em seus hospedeiros ^(6,28,42,45). Essas espécies são bem conhecidas como endofíticas em uma variedade de plantas arbóreas. Entre as principais famílias botânicas já estudadas incluem-se Moraceae, Myrtaceae, Proteacea, Leguminosae, Pinaceae, Vitaceae e Anacardiaceae ^{(6,8,9,15,16,24,27,29,42,43,44)}.

No Ceará, o bioma Caatinga cobre uma área de 126.926 km², correspondendo a 85% da área do estado. Trata-se um bioma heterogêneo, com enorme diversidade de plantas endêmicas e introduzidas ^(4,20). Apenas Lasiodiplodia theobromae (Pat.) Griff. & Maubl. foi relatado causando doenças na maioria das espécies de frutíferas estudadas nesse estado ^{(10,11,17,18,19)}. No entanto, estudos realizados em outros locais mostram que espécies de Botryosphaeriacae associadas a estas mesmas frutíferas formam um grupo diverso ^(7,22,23). Além disso, várias plantas exóticas introduzidas no estado do Ceará são hospedeiras de uma diversidade de espécies de Botryosphaeriaceae em outros países ^(5,27,40,42).

Infecção por Botryosphaeriaceae em plantas arbóreas ocorre predominantemente através de transmissão horizontal, ou seja, através de esporos ou órgão vegetais infectados. O movimento de patógenos entre hospedeiros nativos e introduzidos tem sido reconhecido como uma significativa ameaça às populações locais de plantas ^(40,41).

Vários estudos mostram que espécies de Botryosphaeriaceae isoladas de tecidos sadios quando inoculadas artificialmente em seus próprios hospedeiros ou em outras espécies de plantas se comportam como patógenos altamente agressivos ^{(3,30,33,36,46)}. Estudos realizados com espécies de Botryopshaeriaceae isolados de Syzygium cordatum Hochst., nativas da África do Sul, revelaram que eles são capazes de causar sintoma de doença em S. cordatum e no clone Ecaliptus grandis x camaldulensis quando inoculados artificialmente ⁽³⁰⁾. Em um levantamento de espécies de Botryosphaeriaceae associadas a sintomas e endofíticas de EucaliptusL’Her e Myrtaceae nativas do Uruguai, observou-se que os isolados obtidos das espécies nativas e identificados como L. pseudotheobromae A. J. L. Phillips, A. Alves & Crous, Neofusicoccum eucalyptorum (Slippers, Crous & M.J. Wingf.) Crous, Slippers & A.J.L. Phillips e o complexo N. parvum/ribis foram patogênicos a E. grandis W.Hill ex Maiden ⁽³³⁾. Recentemente, plantas como o baobá (Adansonia gregorii F.Muell.) e outras espécies vegetais nativas na Austrália foram investigadas quanto à presença de fungos endofíticos, sendo possível a identificação de 11 espécies de Botryosphaeriaceae. Testes de patogenicidade determinaram que todas estas espécies foram patogênicas a mudas e raízes de baobá ⁽³⁶⁾.

Apesar de muitas espécies de Botryosphaeriaceae, terem sido reportadas como endofíticas em diversas espécies de hospedeiros de diferentes ambientes ⁽⁴¹⁾, pouco se sabe a respeito da sua biologia. A respeito da biodiversidade da Caatinga, muito pouco se conhece sobre sua população fúngica e muito menos sobre suas funções ecológicas. Com relação aos fungos endofíticos no Nordeste, as informações são incipientes ^(12,21,39), e sobre Botryosphaeriaceae pouco é conhecido ⁽¹⁴⁾.

Diante do exposto, especula-se que as espécies de Botryosphaeriaceae que vivem como endofitícas em plantas do bioma Caatinga são, na verdade, patógenos latentes que podem causar doenças em seus hospedeiros ou em outras espécies quando estes se encontram em condição de estresse. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar a patogenicidade de espécies de Botryosphaeriaceae endofíticas de plantas do bioma Caatinga no estado de Ceará, através de inoculação em ramos de plantas de umbu-cajá (Spondiassp.) e em frutos de mangueira (Mangifera indica L.).

MATERIAL E MÉTODOS

Obtenção dos isolados

Todos os isolados utilizados nesse estudo (Tabel 1) são provenientes da Coleção de Culturas da Embrapa Agroindústria Tropical (CNPAT), os quais foram identificados com base na morfologia e sequências de ITS. Os mesmos se encontram preservados através do método de Castellani e em óleo mineral.

Tabela 1
Espécies de Botryosphaeriaceae utilizadas neste estudo com respectivos hospedeiros, órgãos de onde foram isolados e município de coleta, no estado do Ceará.

Código		Espécie		Hospedeiro		Família botânica		Órgão		Local de coleta
LFP 254		Botryosphaeria mamane		Caesalpinia ferrea		Leguminosae		Folhas		Iguatu
LFP 267		Botryosphaeria mamane		Caesalpinia ferrea		Leguminosae		Sementes		Iguatu
LFP 20		Botryosphaeria mamane		Licania rigida		Chrysobalanaceae		Folhas		Tejussuoca
LFP 57		Botryosphaeria mamane		Miracrodruon urundeuva		Anacardiaceae		Ramos		Tauá
LFP 474		Lasiodiplodia gonubiensis		Croton sp.		Euphorbiaceae		Ramos		Tianguá
LFP 643		Lasiodiplodia gonubiensis		Manilkara triflora		Sapotaceae		Ramos		Crato
LFP 515		Lasiodiplodia theobromae		Astronium fraxinifolium		Anacardiaceae		Ramos		Horizonte
LFP 696		Lasiodiplodia theobromae		Astronium fraxinifolium		Anacardiaceae		Ramos		Ubajara
LFP 700		Lasiodiplodia theobromae		Astronium fraxinifolium		Anacardiaceae		Ramos		Ubajara
LFP 277		Lasiodiplodia theobromae		Auxemma oncocalyx		Boraginaceae		Ramos		Iguatu
LFP 255		Lasiodiplodia theobromae		Caesalpinia ferrea		Leguminosae		Ramos		Iguatu
LFP 74		Lasiodiplodia theobromae		Combretum leprosum		Combretaceae		Sementes		Tejussuoca
LFP 249		Lasiodiplodia theobromae		Combretum leprosum		Combretaceae		Ramos		Iguatu
LFP 73		Lasiodiplodia theobromae		Cordia trichotoma		Boraginaceae		Sementes		General Sampaio
LFP 257		Lasiodiplodia theobromae		Croton campestris		Euphorbiaceae		Ramos		Orós
LFP 258		Lasiodiplodia theobromae		Croton campestris		Euphorbiaceae		Ramos		Quixadá
LFP 71		Lasiodiplodia theobromae		Croton sonderianus		Euphorbiaceae		Ramos		Crateús
LFP 252		Lasiodiplodia theobromae		Croton sonderianus		Euphorbiaceae		Folhas		Iguatu
LFP 378		Lasiodiplodia theobromae		Eugenia uniflora		Myrtaceae		Ramos		Fortaleza
LFP 28		Lasiodiplodia theobromae		Licania rigida		Chrysobalanaceae		Ramos		Tejussuoca
LFP 72		Lasiodiplodia theobromae		Mimosa caesalpinifolia		Leguminosae		Sementes		Tejussuoca
LFP 65		Lasiodiplodia theobromae		Miracrodruon urundeuva		Anacardiaceae		Ramos		Boa Viagem
LFP 519		Lasiodiplodia theobromae		Miracrodruon urundeuva		Anacardiaceae		Ramos		Pentecoste
LFP 256		Lasiodiplodia theobromae		Moringa oleifera		Moringaceae		Ramos		Iguatu
LFP 450		Lasiodiplodia theobromae		Protium heptaphyllum		Burseraceae		Ramos		Ubajara
LFP 717		Lasiodiplodia theobromae		Psidium guajava		Myrtaceae		Ramos		Tianguá
LFP 419		Lasiodiplodia theobromae		Psidium rufum		Myrtaceae		Ramos		Ubajara
LFP 688		Lasiodiplodia theobromae		Psychotria sp.		Rubiacae		Ramos		Ubajara
LFP 693		Lasiodiplodia theobromae		Simarouba amara		Simaroubaceae		Ramos		Ubajara
LFP 517		Lasiodiplodia theobromae		Spondias mombim		Anacardiaceae		Ramos		Pentecoste
LFP 494		Lasiodiplodia theobromae		Spondias sp.		Anacardiaceae		Ramos		Aiuaba
LFP 511		Lasiodiplodia theobromae		Spondias sp.		Anacardiaceae		Ramos		Aiuaba
LFP 719		Lasiodiplodia theobromae		Spondias mombim		Anacardiaceae		Ramos		Tianguá
LFP 518		Lasiodiplodia theobromae		Spondias sp.		Anacardiaceae		Ramos		Pentecoste
LFP 632		Lasiodiplodia theobromae		Spondias sp.		Anacardiaceae		Ramos		J. do Norte
FLP 617		Neofusicoccum parvum/ribis		Birsonima sericea		Malpighiaceae		Folhas		Crato
LFP 583		Neofusicoccum parvum/ribis		Cariocar coriaceum		Caryocaceae		Folhas		Crato
LFP 434		Neofusicoccum parvum/ribis		Centrolobium microchaete		Leguminosae		Ramos		Tianguá
LFP 250		Neofusicoccum parvum/ribis		Combretum leprosum		Combretaceae		Ramos		Lima Campos
LFP 715		Neofusicoccum parvum/ribis		Eugenia florida		Myrtaceae		Ramos		Ubajara
LFP 389		Neofusicoccum parvum/ribis		Eugenia uniflora		Myrtaceae		Ramos		Ubajara
LFP 679		Neofusicoccum parvum/ribis		Mangifera indica		Anacardiaceae		Ramos		Fortaleza
LFP 610		Neofusicoccum parvum/ribis		Maprounea guianensis		Euphorbiaceae		Folhas		Crato
LFP 612		Neofusicoccum parvum/ribis		Maprounea guianensis		Euphorbiaceae		Ramos		Crato
LFP 666		Neofusicoccum parvum/ribis		Myrcia sp.		Myrtaceae		Ramos		Crato
LFP 579		Neofusicoccum parvum/ribis		Psidium cf. myrtoides		Myrtaceae		Ramos		Crato
LFP 527		Neofusicoccum parvum/ribis		Psidium guajava		Myrtaceae		Folhas		Crato
LFP 532		Neofusicoccum parvum/ribis		Psidium guajava		Myrtaceae		Ramos		Crato
LFP 683		Neofusicoccum parvum/ribis		Psidium guajava		Myrtaceae		Ramos		Ubajara
LFP 600		Neofusicoccum parvum/ribis		Psidium guyanensis		Myrtaceae		Folhas		Crato
LFP 603		Neofusicoccum parvum/ribis		Psidium guyanensis		Myrtaceae		Ramos		Crato
LFP 720		Neofusicoccum parvum/ribis		Syzygium jambolanum		Myrtaceae		Ramos		Horizonte
LFP 721		Pseudofusicoccum adansoniae		Chrysobalanus icaco		Chrysobalanaceae		Ramos		Horizonte
LFP 652		Pseudofusicoccum adansoniae		Eugenia sp.		Myrtaceae		Ramos		Crato
LFP 264		Pseudofusicoccum stromaticum		Caesalpinia ferrea		Leguminosae		Ramos		Iguatu
LFP 544		Pseudofusicoccum stromaticum		Cariocar coriaceum		Caryocaceae		Ramos		Crato
LFP 503		Pseudofusicoccum stromaticum		Croton blanchetianus		Euphorbiaceae		Ramos		Aiuaba
LFP 570		Pseudofusicoccum stromaticum		Dimorphandra gardneriana		Leguminosae		Ramos		Crato
LFP 151		Pseudofusicoccum stromaticum		Enterolobium Contortisiliquun		Leguminosae		Ramos		Crateús
LFP 556		Pseudofusicoccum stromaticum		Eucaliptus sp.		Myrtaceae		Ramos		Crato
LFP 444		Pseudofusicoccum stromaticum		Eugenia punicifolia		Myrtaceae		Ramos		Ubajara
LFP 656		Pseudofusicoccum stromaticum		Eugenia punicifolia		Myrtaceae		Ramos		Crato
LFP 367		Pseudofusicoccum stromaticum		Eugenia uniflora		Myrtaceae		Ramos		Fortaleza
LFP 377		Pseudofusicoccum stromaticum		Eugenia uniflora		Myrtaceae		Ramos		Fortaleza
LFP 31		Pseudofusicoccum stromaticum		Licania rigida		Chrysobalanaceae		Ramos		Crateus
LFP 680		Pseudofusicoccum stromaticum		Licania tomentosa		Chrysobalanaceae		Ramos		Fortaleza
LFP 681		Pseudofusicoccum stromaticum		Mangifera indica		Anacardiaceae		Ramos		Quiterianópolis
LFP 642		Pseudofusicoccum stromaticum		Manilkara triflora		Sapotaceae		Ramos		Crato
LFP 53		Pseudofusicoccum stromaticum		Miracrodruon urundeuva		Anacardiaceae		Ramos		Crateus
LFP 58		Pseudofusicoccum stromaticum		Miracrodruon urundeuva		Anacardiaceae		Ramos		Tauá
LFP 660		Pseudofusicoccum stromaticum		Myrcia multiflora		Myrtaceae		Ramos		Crato
LFP 682		Pseudofusicoccum stromaticum		Psidium guajava		Myrtaceae		Ramos		Quiterianópolis
LFP 477		Pseudofusicoccum stromaticum		Schinopsis brasiliensis		Anacardiaceae		Ramos		Aiuaba
LFP 433		Pseudofusicoccum stromaticum		Schinus terebinthifolia		Anacardiaceae		Ramos		Fortaleza
LFP 631		Pseudofusicoccum stromaticum		Spondias sp.		Anacardiaceae		Ramos		J. do Norte

Teste de patogenicidade em ramos

Para avaliar a patogenicidade dos isolados em ramos, foram utilizadas plantas de umbu-cajá (Spondias sp.) entre 4 e 6 anos de idade. As plantas foram inoculadas na região próxima às pontas dos ramos, cujo diâmetro era de aproximadamente 8 mm. Neste experimento foram utilizados 74 isolados mais o controle. Cada isolado, bem como o tratamento controle, foram inoculados em seis plantas, totalizando 75 ramos por planta e um total de 450 ramos inoculados. O fungo foi inoculado através da perfuração, com o auxílio de um vazador metálico de 5 mm de diâmetro, possibilitando a retirada da casca e a exposição do lenho. Em cada perfuração foi depositado um disco de BDA com 5 mm de diâmetro contendo as estruturas do fungo, incubado por um período de 5 a 6 dias. Em cada inoculação, buscou-se o contato do disco contendo estruturas do patógeno com o lenho da planta. Em seguida, o inóculo foi coberto com a casca retirada anteriormente, coberto com vaselina sólida e envolvido com Parafilme^® por todo o período do experimento. A testemunha foi inoculada apenas com um disco de BDA estéril com as mesmas dimensões.

Para avaliação do comprimento da lesão interna, ao completar 85 dias após a inoculação, os ramos contendo a lesão causada pelo inóculo foram separados da planta e levados ao laboratório, onde foi feito um corte longitudinal, de modo a expor a lesão interna e possibilitar a medição do comprimento máximo da lesão, realizada com o auxílio de um paquímetro. Foram utilizadas 6 repetições por tratamento (isolado), empregando o delineamento em blocos ao acaso, sendo cada ramo da planta uma unidade experimental. Finalmente, os postulados de Koch foram concluídos através do reisolamento do patógeno em BDA, seguido do cultivo dos mesmos em ágar-água contendo acículas de pinheiro para permitir a esporulação e confirmar a presença do fungo inoculado. Os dados obtidos foram utilizados para o cálculo do comprimento da lesão em ramos (SevF).

Teste de patogenicidade em manga

O experimento foi realizado no Laboratório de Fitopatologia da Embrapa Agroindústria Tropical, localizado no município de Fortaleza-CE. Foram utilizadas frutos de manga da cv. Tommy Atkins no estagio “3” de maturação ⁽¹⁾. Os frutos foram lavados com água corrente e detergente neutro, e em seguida submetidos a uma desinfestação com uma solução de hipoclorito de sódio a 1,5% durante 5 minutos e, posteriormente, lavados com água destilada e secos à temperatura ambiente.

Os isolados utilizados nas inoculações foram cultivados em placas de Petri contendo batata-dextrose-ágar (BDA) por um período de 5 dias a uma temperatura de 26 ± 1 ºC. A inoculação foi realizada depositando-se discos de 5 mm de diâmetro de BDA contendo o crescimento fúngico retirados com um furador metálico com o mesmo diâmetro. O inóculo foi depositado sobre um ferimento na região mediana do fruto previamente realizado com um furador de 5 esiletes à 2 mm de profundidade. A testemunha foi inoculada com um disco de BDA estéril sem o fungo. Após a inoculação, os frutos foram colocados em uma bandeja plástica (6 frutos por bandeja) e submetidos à câmara úmida por 48 horas, sendo, posteriormente, mantidos em uma sala de incubação, no escuro, a uma temperatura de aproximadamente 26 ± 1 ºC.

Foram utilizados 6 frutos por tratamento (isolado), tendo como unidade experimental um fruto de manga, utilizando o delineamento inteiramente casualizado, totalizando 450 frutos. As medições dos diâmetros das lesões foram realizadas a intervalos de 24 horas durante 05 dias, mensurando-se o comprimento da lesão no sentido longitudinal e transversal do fruto com o auxilio de uma fita métrica flexível e um paquímetro. Os dados obtidos foram utilizados para o cálculo do diâmetro da lesão em frutos (SevF), a taxa de progresso da doença em frutos (TPDF), a área abaixo da curva de progresso da doença em frutos (AACPDF) e o período de incubação em frutos (PIF). Para avaliação do período de incubação em frutos (PIF), considerou-se como aparecimento dos sintomas, o dia em que o diâmetro da lesão ultrapassou 5 mm (diâmetro do disco de estruturas do fungo).

Análise dos dados

Os dados coletados neste estudo, referentes a cada variável observada, foram submetidos à análise de variância e as médias agrupadas por meio do teste de Scott-Knott, utilizando o programa estatístico Sisvar 5.3. Os dados de todas as variáveis foram empregados em análises de correlação realizadas pelo método de Pearson.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Os frutos inoculados com os isolados das espécies de Botryosphaeriaceae desenvolveram lesões úmidas de coloração marrom após o quinto dia de inoculação. Para alguns isolados, foram observadas rachaduras que se desenvolveram a partir do ponto de inoculação, apresentando crescimento micelial e escorrimento de um líquido cor de vinho (Figura 1A-B). Além disso, foi possível observar pontos escuros sob a epiderme dos frutos, representados pelos primórdios picnidiais (Figura 1C-D). Os ramos inoculados apresentaram lesões de cor marrom a marrom escura sobre a casca e no interior dos tecidos (Figura 1E-F). Para vários isolados observou-se o desenvolvimento de rachaduras sobre a casca bem como uma exudação abundante de goma sobre o ponto inoculado Além disso, o surgimento de pontos escuros correspondente a picnídios foram observados sobre a casca de alguns ramos inoculados.

Figura 1
Sintomas causados por espécies de Botryosphaeriaceae em manga e ramos de umbu-cajá. A (LFP 389 = N. parvum/ribis); B (LFP 518 = L. theobromae); C (LFP 20 = B. mamane); D (LFP 570 = P. stromaticum); E (LFP 378 = L. theobromae); F (LFP 715 = N. parvum/ribis).

O comprimento de lesão em ramos (SevR) foi avaliado para 74 isolados de Botryosphaeriaceae e a maioria foram patogênicos. A SevR da doença variou entre espécies (Figura 2) e entre isolados dentro da mesma espécie. Foram formados três grupos designados de “a”, “b” e “c” (Tabela 2). O grupo “a” com comprimentos de lesões entre 13,7 e 52 mm, ficou formado por 90% dos isolados e foi considerado o menos agressivo. Neste mesmo grupo, 32,8% dos isolados eram L. theobromae, 29,8% Pseudofusicoccum stromaticum (Mohali, Slippers & M.J. Wingf.) Mohali, Slippers & M.J. Wingf e 25,3% do complexo N. parvum/ribis. Todas as espécies de Botryosphaeria mamane D. E. Gardner, Lasiodiplodia gonubiensisPavlic, Slippers & M.J. Wingf. e Pseudofusicoccum adansoniaePavlic, T. I. Burgess & M. J. Wingf. se agruparam em “a”. O grupo “b” com comprimentos de lesões entre 59 e 94,7 mm foi considerado de agressividade moderada e ficou formado por 8,1 % dos isolados. Todos os isolados do grupo “b” eram da espécie L. theobromae. O grupo “c” ficou formado apenas pelo isolado LFP 252 da espécie L. theobromae com comprimento de lesão de 157,5 mm. Este grupo foi considerado o mais agressivo e corresponde a 1,9% dos isolados.

Figura 2
Comprimento de lesão em ramos (SevR) para as espécies de Botryosphaeraceae inoculadas em ramos de umbú-cajá (Spondias sp.). Médias seguidas pela mesma letra não diferem entre si pelo teste de Scott-Knott ao nível de 5% de significância.

Tabela 2
Componentes epidemiológicos testados sobre 74 isolados de Botryosphaeriaceae, distribuídos em seis espécies fúngicas.

Isolado		Espécie		SevR1 (mm)		Isolado		Espécie		SevF2 (mm)		Isolado		Espécie		TPDF3 (mm/d)		Isolado		Espécie		AACP4		Isolado		Espécie		PIF5 (dias)
Controle				11,2 a*		Controle				0,0 a		Controle				0,0 a		Controle				0,0 a		FLP 277		L. theobromae		1,5 a
LFP 719		L. theobromae		13,7 a		FLP 151		P. stromaticum		0,0 a		FLP 151		P. stromaticum		0,0 a		FLP 151		P. stromaticum		0,0 a		FLP 494		L. theobromae		1,5 a
LFP 656		P. stromaticum		14,2 a		FLP 721		P. adansoniae		7,8 a		FLP 721		P. adansoniae		2,0 a		FLP721		P. adansoniae		9,2 a		FLP 679		N. parvum/ribis		1,5 a
LFP 682		P. stromaticum		15,0 a		FLP 377		P. stromaticum		9,1 a		FLP 377		P. stromaticum		2,3 a		FLP 377		P. stromaticum		11,4 a		FLP 688		L. theobromae		1,5 a
LFP 683		N. parvum/ribis		15,0 a		FLP 544		P. stromaticum		14,0 a		FLP544		P. stromaticum		3,5 a		FLP 264		P. stromaticum		12,8 a		FLP 378		L. theobromae		1,6 a
LFP 151		P. stromaticum		15,2 a		FLP 264		P. stromaticum		15,0 a		FLP 264		P. stromaticum		3,8 a		FLP544		P. stromaticum		14,4 a		FLP 515		L. theobromae		1,6 a
LFP 503		P. stromaticum		15,5 a		FLP 254		B. mamane		17,5 a		FLP 254		B. mamane		4,4 a		FLP 254		B. mamane		14,8 a		FLP 717		L. theobromae		1,6 a
LFP 681		P. stromaticum		15,6 a		FLP 643		L. gonubiensis		20,1 a		FLP 643		L. gonubiensis		5,0 a		FLP 642		P. stromaticum		18,5 a		FLP 28		L. theobromae		1,7 a
LFP 700		L. theobromae		15,8 a		FLP 57		B. mamane		21,5 a		FLP 57		B. mamane		5,4 a		FLP 433		P. stromaticum		23,6 a		FLP 255		L. theobromae		1,7 a
LFP 20		B. mamane		16,4 a		FLP 433		P. stromaticum		21,9 a		FLP 433		P. stromaticum		5,5 a		FLP 267		B. mamane		24,2 a		FLP 256		L. theobromae		1,7 a
LFP 643		L. gonubiensis		16,5 a		FLP 267		B. mamane		22,6 a		FLP 267		B. mamane		5,7 a		FLP 57		B. mamane		28,2 a		FLP 65		L. theobromae		1,8 a
LFP 679		N. parvum/ribis		16,6 a		FLP 642		P. stromaticum		23,3 a		FLP 642		P. stromaticum		5,8 a		FLP 656		P. stromaticum		28,8 a		FLP 696		L. theobromae		1,8 a
LFP 720		N. parvum/ribis		16,8 a		FLP 660		P. stromaticum		25,8 a		FLP 660		P. stromaticum		6,4 a		FLP 660		P. stromaticum		29,4 a		FLP 252		L. theobromae		1,8 a
LFP 367		P. stromaticum		17,0 a		FLP 682		P. stromaticum		31,5 b		FLP 682		P. stromaticum		7,9 b		FLP 682		P. stromaticum		36,8 a		FLP 257		L. theobromae		1,8 a
LFP 721		P. adansoniae		17,4 a		FLP 20		B. mamane		33,0 b		FLP 679		N. parvum/ribis		8,1 b		FLP 20		B. mamane		41,3 a		FLP 517		L. theobromae		1,8 a
LFP 254		B. mamane		18,0 a		FLP 656		P. stromaticum		33,5 b		FLP 20		B. mamane		8,2 b		FLP 643		L. gonubiensis		42,6 a		FLP 693		L. theobromae		1,8 a
LFP 666		N. parvum/ribis		18,0 a		FLP 679		N. parvum/ribis		34,0 b		FLP 656		P. stromaticum		8,4 b		FLP 652		P. adansoniae		46,9 a		FLP 719		L. theobromae		1,8 a
LFP 53		P. stromaticum		18,1 a		FLP 474		L. gonubiensis		35,5 b		FLP 474		L. gonubiensis		8,9 b		FLP 679		N. parvum/ribis		53,4 b		FLP 73		L. theobromae		2,0 a
LFP 544		P. stromaticum		18,2 a		FLP 58		P. stromaticum		41,2 b		FLP 58		P. stromaticum		10,3 b		FLP 474		L. gonubiensis		54,0 b		FLP 74		L. theobromae		2,0 a
LFP 57		B. mamane		18,3 a		FLP 612		N. parvum/ribis		41,3 b		FLP 612		N. parvum/ribis		10,3 b		FLP 681		P. stromaticum		55,7 b		FLP 249		L. theobromae		2,0 a
LFP 264		P. stromaticum		18,3 a		FLP 652		P. adansoniae		41,5 b		FLP 652		P. adansoniae		10,4 b		FLP 612		N. parvum/ribis		56,5 b		FLP 617		N. parvum/ribis		2,0 a
LFP 642		P. stromaticum		19,2 a		FLP 53		P. stromaticum		41,6 b		FLP 53		P. stromaticum		10,4 b		FLP 434		N. parvum/ribis		57,5 b		FLP 643		L. gonubiensis		2,0 a
LFP 717		L. theobromae		19,2 a		FLP 258		L. theobromae		42,5 b		FLP 258		L. theobromae		10,6 b		FLP 53		P. stromaticum		59,3 b		FLP 700		L. theobromae		2,0 a
LFP 31		P. stromaticum		19,4 a		FLP 31		P. stromaticum		43,7 b		FLP 31		P. stromaticum		10,9 b		FLP 503		P. stromaticum		60,7 b		FLP 450		L. theobromae		2,2 b
LFP 652		P. adansoniae		19,4 a		FLP 434		N. parvum/ribis		45,2 b		FLP 434		N. parvum/ribis		11,3 b		FLP 58		P. stromaticum		61,2 b		FLP 603		N. parvum/ribis		2,2 b
LFP 556		P. stromaticum		19,6 a		FLP 367		P. stromaticum		45,8 b		FLP 367		P. stromaticum		11,4 b		FLP 477		P. stromaticum		64,3 b		FLP 72		L. theobromae		2,2 b
LFP 267		B. mamane		20,4 a		FLP 579		N. parvum/ribis		46,7 b		FLP 579		N. parvum/ribis		11,7 b		FLP 258		L. theobromae		64,3 b		FLP 519		L. theobromae		2,2 b
LFP 444		P. stromaticum		21,2 a		FLP 477		P. stromaticum		48,3 b		FLP 477		P. stromaticum		12,1 b		FLP 579		N. parvum/ribis		67,2 b		FLP 419		L. theobromae		2,3 b
LFP 696		L. theobromae		21,6 a		FLP 681		P. stromaticum		50,2 b		FLP 681		P. stromaticum		12,6 b		FLP 31		P. stromaticum		71,7 b		FLP 583		N. parvum/ribis		2,3 b
LFP 600		N. parvum/ribis		21,6 a		FLP 527		N. parvum/ribis		52,9 b		FLP 527		N. parvum/ribis		13,2 b		FLP 367		P. stromaticum		74,7 b		FLP 600		N. parvum/ribis		2,3 b
LFP 688		L. theobromae		22,0 a		FLP 532		N. parvum/ribis		57,0 b		FLP 532		N. parvum/ribis		13,7 b		FLP 444		P. stromaticum		75,4 b		FLP 666		N. parvum/ribis		2,3 b
LFP 527		N. parvum/ribis		22,1 a		FLP 503		P. stromaticum		57,1 b		FLP 503		P. stromaticum		14,3 b		FLP 527		N. parvum/ribis		80,2 b		FLP 715		N. parvum/ribis		2,3 b
LFP 494		L. theobromae		22,2 a		FLP 444		P. stromaticum		60,0 c		FLP 444		P. stromaticum		15,0 c		FLP 532		N. parvum/ribis		91,9 b		FLP 610		N. parvum/ribis		2,4 b
LFP 660		P. stromaticum		22,2 a		FLP 683		N. parvum/ribis		64,7 c		FLP 683		N. parvum/ribis		15,6 c		FLP 683		N. parvum/ribis		93,6 b		FLP 58		P. stromaticum		2,5 b
LFP 570		P. stromaticum		22,2 a		FLP 556		P. stromaticum		65,8 c		FLP 65		L. theobromae		15,7 c		FLP 570		P. stromaticum		93,7 b		FLP 389		N. parvum/ribis		2,5 b
LFP 58		P. stromaticum		22,2 a		FLP 518		L. theobromae		66,3 c		FLP 556		P. stromaticum		16,5 c		FLP 556		P. stromaticum		96,5 b		FLP 511		L. theobromae		2,5 b
LFP 631		P. stromaticum		22,8 a		FLP 65		L. theobromae		67,1 c		FLP 518		L. theobromae		16,6 c		FLP 518		L. theobromae		100,5 b		FLP 527		N. parvum/ribis		2,5 b
LFP 477		P. stromaticum		23,2 a		FLP 600		N. parvum/ribis		68,6 c		FLP 600		N. parvum/ribis		17,2 c		FLP 720		N. parvum/ribis		102,2 b		FLP 532		N. parvum/ribis		2,5 b
LFP 511		L. theobromae		23,4 a		FLP 666		N. parvum/ribis		69,9 c		FLP 666		N. parvum/ribis		17,5 c		FLP 631		P. stromaticum		103,4 b		FLP 632		L. theobromae		2,5 b
LFP 610		N. parvum/ribis		24,0 a		FLP 631		P. stromaticum		70,4 c		FLP 631		P. stromaticum		17,6 c		FLP 600		N. parvum/ribis		113,4 c		FLP 720		N. parvum/ribis		2,5 b
LFP 693		L. theobromae		24,4 a		FLP 715		N. parvum/ribis		71,4 c		FLP 715		N. parvum/ribis		17,8 c		FLP 666		N. parvum/ribis		117,0 c		FLP 518		L. theobromae		2,6 b
LFP 603		N. parvum/ribis		25,0 a		FLP 570		P. stromaticum		74,4 c		FLP 570		P. stromaticum		18,6 c		FLP 715		N. parvum/ribis		122,3 c		FLP 631		P. stromaticum		2,8 b
LFP 433		P. stromaticum		25,3 a		FLP 720		N. parvum/ribis		74,4 c		FLP 720		N. parvum/ribis		18,6 c		FLP 632		L. theobromae		122,3 c		FLP 250		N. parvum/ribis		2,8 b
LFP 249		L. theobromae		25,6 a		FLP 250		N. parvum/ribis		75,3 c		FLP 389		N. parvum/ribis		18,8 c		FLP 250		N. parvum/ribis		126,2 c		FLP 556		P. stromaticum		2,8 b
LFP 579		N. parvum/ribis		26,0 a		FLP 249		L. theobromae		76,0 c		FLP 250		N. parvum/ribis		18,8 c		FLP 610		N. parvum/ribis		127,5 c		FLP 31		P. stromaticum		3,0 c
LFP 474		L. gonubiensis		26,0 a		FLP 389		N. parvum/ribis		76,9 c		FLP 249		L. theobromae		19,0 c		FLP 389		N. parvum/ribis		127,5 c		FLP 71		L. theobromae		3,0 c
LFP 434		N. parvum/ribis		26,7 a		FLP 610		N. parvum/ribis		78,9 c		FLP 610		N. parvum/ribis		19,7 c		FLP 65		L. theobromae		128,9 c		FLP 258		L. theobromae		3,0 c
LFP 277		L. theobromae		27,8 a		FLP 632		L. theobromae		79,3 c		FLP 517		L. theobromae		19,8 c		FLP 583		N. parvum/ribis		134,2 c		FLP 367		P. stromaticum		3,0 c
LFP 583		N. parvum/ribis		28,0 a		FLP 511		L. theobromae		81,8 c		FLP 632		L. theobromae		19,8 c		FLP 511		L. theobromae		141,7 c		FLP544		P. stromaticum		3,0 c
LFP 612		N. parvum/ribis		29,0 a		FLP 517		L. theobromae		82,6 c		FLP 511		L. theobromae		20,4 c		FLP 517		L. theobromae		143,0 c		FLP 683		N. parvum/ribis		3,0 c
LFP 715		N. parvum/ribis		30,0 a		FLP 583		N. parvum/ribis		83,3 c		FLP 583		N. parvum/ribis		20,8 c		FLP 249		L. theobromae		145,2 c		FLP 579		N. parvum/ribis		3,2 c
LFP 519		L. theobromae		30,6 a		FLP 450		L. theobromae		83,4 c		FLP 450		L. theobromae		20,9 c		FLP 603		N. parvum/ribis		146,2 c		FLP 612		N. parvum/ribis		3,2 c
LFP 617		N. parvum/ribis		31,0 a		FLP 72		L. theobromae		86,4 c		FLP 277		L. theobromae		20,9 c		FLP 71		L. theobromae		146,8 c		FLP 474		L. gonubiensis		3,2 c
LFP 518		L. theobromae		34,4 a		FLP 700		L. theobromae		88,1 c		FLP 494		L. theobromae		21,2 c		FLP 450		L. theobromae		148,3 c		FLP 53		P. stromaticum		3,4 c
LFP 389		N. parvum/ribis		35,0 a		FLP 603		N. parvum/ribis		88,6 c		FLP 603		N. parvum/ribis		21,4 c		FLP 72		L. theobromae		153,5 c		FLP 570		P. stromaticum		3,4 c
LFP 419		L. theobromae		37,0 a		FLP 277		L. theobromae		89,3 c		FLP 256		L. theobromae		21,4 c		FLP 617		N. parvum/ribis		154,7 c		FLP 652		P. adansoniae		3,4 c
LFP 377		P. stromaticum		37,2 a		FLP 256		L. theobromae		89,6 c		FLP 72		L. theobromae		21,6 c		FLP 700		L. theobromae		158,3 d		FLP 377		P. stromaticum		3,5 c
LFP 257		L. theobromae		37,8 a		FLP 494		L. theobromae		90,5 c		FLP 700		L. theobromae		22,0 c		FLP 693		L. theobromae		161,7 d		FLP 477		P. stromaticum		3,5 c
LFP 515		L. theobromae		39,0 a		FLP 257		L. theobromae		90,7 c		FLP 693		L. theobromae		22,1 c		FLP 519		L. theobromae		161,8 d		FLP 681		P. stromaticum		3,5 c
LFP 255		L. theobromae		39,7 a		FLP 419		L. theobromae		91,7 c		FLP 257		L. theobromae		22,2 c		FLP 257		L. theobromae		162,8 d		FLP 444		P. stromaticum		3,6 c
LFP 532		N. parvum/ribis		39,8 a		FLP 617		N. parvum/ribis		91,9 c		FLP 617		N. parvum/ribis		22,5 c		FLP 419		L. theobromae		165,9 d		FLP 503		P. stromaticum		3,8 d
LFP 258		L. theobromae		40,5 a		FLP 693		L. theobromae		91,9 c		FLP 419		L. theobromae		22,9 c		FLP 696		L. theobromae		166,0 d		FLP 660		P. stromaticum		3,8 d
LFP 632		L. theobromae		41,2 a		FLP 519		L. theobromae		94,0 c		FLP 519		L. theobromae		23,0 c		FLP 277		L. theobromae		166,7 d		FLP 20		B. mamane		3,8 d
LFP 256		L. theobromae		42,4 a		FLP 74		L. theobromae		94,5 c		FLP 74		L. theobromae		23,1 c		FLP 74		L. theobromae		166,8 d		FLP 682		P. stromaticum		3,8 d
LFP 450		L. theobromae		49,5 a		FLP 696		L. theobromae		95,0 c		FLP 28		L. theobromae		23,1 c		FLP 494		L. theobromae		181,3 d		FLP 264		P. stromaticum		4,0 d
LFP 250		N. parvum/ribis		49,6 a		FLP 71		L. theobromae		95,1 c		FLP 696		L. theobromae		23,2 c		FLP 256		L. theobromae		182,5 d		FLP 267		B. mamane		4,0 d
LFP 517		L. theobromae		50,2 a		FLP 73		L. theobromae		96,7 c		FLP 515		L. theobromae		23,6 c		FLP 719		L. theobromae		183,2 d		FLP 433		P. stromaticum		4,0 d
LFP 378		L. theobromae		52,0 a		FLP 515		L. theobromae		97,7 c		FLP 71		L. theobromae		23,8 c		FLP 252		L. theobromae		185,5 d		FLP 721		P. adansoniae		4,0 d
LFP 65		L. theobromae		59,0 b		FLP 28		L. theobromae		97,9 c		FLP 378		L. theobromae		23,8 c		FLP 378		L. theobromae		187,0 d		FLP 57		B. mamane		4,3 d
LFP 72		L. theobromae		65,2 b		FLP 252		L. theobromae		99,6 c		FLP 717		L. theobromae		24,2 c		FLP 28		L. theobromae		188,3 d		FLP 656		P. stromaticum		4,3 d
LFP 28		L. theobromae		66,2 b		FLP 378		L. theobromae		99,7 c		FLP 73		L. theobromae		24,2 c		FLP 717		L. theobromae		192,1 d		FLP 254		B. mamane		4,3 d
LFP 73		L. theobromae		67,2 b		FLP 717		L. theobromae		100,1 c		FLP 252		L. theobromae		24,4 c		FLP 515		L. theobromae		193,7 d		FLP 434		N. parvum/ribis		4,3 d
LFP 71		L. theobromae		90,4 b		FLP 719		L. theobromae		102,6 c		FLP 255		L. theobromae		24,7 c		FLP 73		L. theobromae		197,2 d		FLP 642		P. stromaticum		4,8 d
LFP 74		L. theobromae		94,7 b		FLP 255		L. theobromae		102,7 c		FLP 719		L. theobromae		25,2 c		FLP 255		L. theobromae		206,8 d		FLP 151		P. stromaticum		5+
LFP 252		L. theobromae		157,5 c		FLP 688		L. theobromae		108,7 c		FLP 688		L. theobromae		25,8 c		FLP 688		L. theobromae		214,5 d

• ^*
  Em cada componente epidemiológico, médias seguidas pela mesma letra não diferem entre si pelo teste de Scott-Knott ao nível de 5% de significância;
• ¹
  SevR = comprimento de lesão em ramos de umbu-cajá;
• ²
  SevF = diâmetro da lesão em frutos de manga;
• ³
  TPDF = taxa de progresso da doença em frutos de manga;
• ⁴
  AACPDF = área abaixo das curva de progresso da doença em frutos de manga;
• ⁵
  PIF = período de incubação em frutos de manga.

De acordo com o teste de Scott Knott (P<0,05), para comprimento de lesão em ramos (SevR), L. theobromae diferiu das demais espécies se apresentando como a mais agressiva. Já as demais espécies por sua vez, não diferiram entre si e foram consideradas espécies menos agressivas (Figura 2).

O diâmetro de lesão em frutos (SevF) causado por 74 isolados de Botryosphaeriaceae está representado na Tabela 2. Com exceção do isolado LFP 151 (P. stromaticum), todos os demais foram considerados patogênicos sobre manga durante o período de avaliação, que foi finalizado cinco dias após à inoculação. Porém a severidade da doença variou entre espécies (Figura 3A) e entre isolados dentro da mesma espécie.

De acordo com o teste de agrupamento de médias de Scott-Knott (P<0,05), formaram-se três grupos em ordem crescente de agressividade, representados pelas letras “a”, “b” e “c” (Tabela. 2). O grupo “a” ficou composto por 16,2% dos isolados e a SevF variou entre 7,8 e 25,8 mm para os isolados patogênicos. Este grupo ficou composto principalmente pelas espécies B. mamane e P. stromaticum e foi considerado o grupo menos agressivo. No grupo “b”, considerado de agressividade moderada, ficaram 25,7% dos isolados, representados por todas as espécies dos fungos testados. Neste grupo o diâmetro das lesões variou entre 31,5 e 57,1 mm. Com diâmetro de lesão variando entre 60 e 108,7 mm, o grupo “c” ficou representado por 58,1% dos isolados e foi considerado o grupo mais agressivo. Proporcionalmente, este grupo ficou assim representado: 65,1% por L. theobromae, 25,6% pelo complexo N. parvum/ribis e 9,3% por P. stromaticum. Com exceção do isolado LFP 258, todos os isolados de L. theobromae ficaram neste grupo.

Quando foi comparada a agressividade entre as espécies, L. theobromae e N. parvum/ribis não diferiram entre si e foram as espécies mais agressivas. P. stromaticum, juntamente com B. mamane, L. gonubiensis e P. adansoniae não diferiram entre si e foram as espécies menos agressivas (Figura 3A).

Figura 3
Componentes epidemiológicos testados em oito espécies fúngicas; Para cada componente epidemiológico, médias seguidas pela mesma letra não diferem entre si pelo teste de Scott-Knott ao nível de 5% de significância; (A) SevF = diâmetro da lesão em frutos de manga; (B) AACPDF = área abaixo das curva de progresso da doença em frutos de manga; (C) TPDF = taxa de progresso da doença em frutos de manga; (D) PIF = período de incubação em frutos de manga.

A taxa de progresso da doença em frutos (TPDF) foi calculada para 74 isolados. Segundo o teste de Scott-Knott (P<0,05), foram formados os seguintes grupos: “a”, “b” e “c” (Tabela 2). O grupo “a”, com valores de TPDF que variou entre 2,0 e 6,4, ficou formado por 16,2 % dos isolados e foi considerado o grupo menos agressivo. Além disso, este grupo ficou formado, principalmente, pelas espécies B. mamane e P. stromaticum. No grupo “b”, com valores de TPDF entre 7,9 e 14,3, ficaram 25,7% dos isolados e foi considerado de agressividade moderada. Este grupo ficou representado por isolados de todas as espécies testadas. O grupo “c”, considerado o mais agressivo, ficou composto por 58,1% dos isolados. Todos os isolados de L. theobromae ficaram agrupados em “c”, com exceção do isolado LFP 258. Assim, este grupo ficou composto por 65,1% de L. theobromae, 25,6% pelo complexo N. parvum/ribis e 9,3% por P. stromaticum.

Comparando a agressividade entre as espécies, L. theobromae e N. parvum/ribis não diferiram entre si e foram as mais agressivas. As demais espécies não diferiram entre si e foram consideradas as menos agressivas (Figura 3C).

Foi calculada a área abaixo da curva de progresso da doença em frutos (AACPDF) para 74 isolados. Através do teste de Scott-Knott (P<0,05), formaram-se em ordem crescente de agressividade os seguintes grupos: “a”, “b”, “c” e “d” (Tabela 2). O grupo “a” ficou formado por 21,6% dos isolados com predominância das espécies B. mamane, e P. stromaticum. Neste grupo, os valores da AACPDF variaram entre 9,2 e 46,9 e agrupou os isolados menos agressivos. O grupo “b” com predominância das espécies do complexo N. parvum/ribis e P. stromaticum ficou com 29,7% dos isolados e os valores da AACPDF variaram entre 53,4 e 103,4. Já o grupo “c” com valores de AACPDF variando entre 113,4 e 154,7 ficou com formado por 23% dos isolados. Formaram esse grupo as espécies do complexo N. parvum/ribis, L. theobromae e P. stromaticum. Nos grupos “b” e “c” ficaram aqueles isolados de agressividade moderada. O grupo “d” ficou formado por 25,7% dos isolados e os valores da AACPDF variaram entre 158,3 e 214,5. Neste grupo ficaram aqueles isolados mais agressivos e todos da espécie L. theobromae.

Com relação à AACPDF, L. theobromae diferiu das demais espécies e foi a mais agressiva, seguida pelo complexo N. parvum/ribis de agressividade moderada. Já as espécies P. stromaticum, L. gonubiensis, B. mamane, P. adansoniae não diferiram entre si e foram consideradas as menos agressivas (Figura 3B).

Foram avaliados 74 isolados para o período de incubação em frutos (PIF) que, por sua vez, variou entre 1,5 e 4,8 dias. Para esta variável foram formados os grupos “a”, “b”, “c” e “d” (Tabela 2). O grupo “a” ficou composto por 31% dos isolados e apresentou PIF entre 1,5 e 2,0 dias. A maioria dos isolados foram representados por L. theobromae com os menores PIF e, portanto o grupo com os isolados mais agressivos. O grupo “b” apresentou PIF entre 2,2 e 2,8 dias e ficou formado por 27% dos isolados com predominância das espécies do complexo N. parvum/ribis. Agruparam-se em “c” 23% dos isolados com PIF entre 3,0 e 3,6 dias e com predominância de P. stromaticum. Os grupos “b” e “c” ficaram formados por isolados de PIF mediano e, portanto, de agressividade moderada. No grupo “d” ficaram aqueles isolados com os maiores PIF variando entre 3,8 e 4,8 dias e, portanto, os menos agressivos. As espécies predominates nesse grupo foram B. mamane (100% dos isolados) e P. stromaticum.

De acordo com o teste de Scott-Knott (P<0,05), para a variável PIF, a espécie L. theobromae diferiu das demais, se apresentando como a mais agressiva. A espécie L. gonubiensis e o complexo N. parvum/ribis não diferiram entre si, apresentando agressividade moderada. Finalmente, as espécies P. stromaticum, P. adansoniae, B. mamane não diferiram entre si, e foram menos agressivas (Fig. 3D).

De acordo com o índice de correlação de Pearson, houve interação significativa entre todas as variáveis estudadas (Tabela 3). Assim, houve altas correlações entre SevR, AACPDF, TPDF e SevF. A maior correlação ocorreu entre AACPDF e SevF que foi de 0,97, enquanto a menor correlação aconteceu entre SevF e TPDF que foi de 0,63. As correlações entre PIF e as demais variáveis foram negativas, ou seja, os isolados que apresentaram menores PIF, foram aqueles que apresentaram maiores SevR, TPDF, SevF e AACPDF. Esses resultados sugerem que o estudo da agressividade de espécies de Botryosphaeraceae pode ser realizado observando-se apenas um dos componentes epidemiológicos abordados neste estudo, visto que todas estas variáveis mostraram interação significativa entre si.

Tabela 3
Coeficiente de correlação de Pearson entre as variáveis analisadas sobre ramos de umbu-cajá e frutos de manga.

		SevR1		TPDF2		SevF3		AACPDF4		PIF5
SevR		1
TPDF		0,87**		1
SevF		0,66*		0,63*		1
AACPDF		0,82*		0,75*		0,97**		1
PIF		-0,85**		-0,82**		-0,71*		-0,85**		1

• ^*,**
  = Significativo ao nível de 5 e 1%, respectivamente, de acordo com o teste t de Student;
• ¹
  SevR = comprimento de lesão em ramos de umbu-cajá;
• ²
  TPDF = taxa de progresso da doença em frutos de manga;
• ³
  SevF = diâmetro da lesão em frutos de manga;
• ⁴
  AACPDF = área abaixo das curva de progresso da doença em frutos de manga;
• ⁵
  PIF = período de incubação em frutos de manga.

A maioria das espécies de Botryosphaeriaceae isoladas neste estudo foi de L. theobromae a qual representou 38,6% do total de isolados. Esta espécie também foi a mais agressiva e foi isolada como endofítica de 19 hospedeiros nativos e introduzidos na Caatinga do estado do Ceará. Vários estudos mostram que L. theobromae não apresenta especificidade por hospedeiro ^(17,18,19) e, o comportamento dessa espécie como fungo endofítico e patógeno latente já foi relatado em uma diversidade de plantas hospedeiras ^(24,30). Este estudo reforça a elevada frequência de L. theobromae como patógeno latente e/ou endofítico em plantas do bioma Caatinga, situando-o como uma ameaça as plantas de interesse agrícola e florestal nessa área.

Representantes do complexo N. parvum/ribis foram a segunda espécie mais agressiva e ficou representada por 22,6% do total de isolados, oriundas a partir de 13 espécies de plantas hospedeiras. A natureza agressiva de espécies do complexo N. parvum/ribis já foi relatada em alguns estudos, chegando a superar L. theobromae em agressividade ⁽²⁶⁾. Além disso, espécies do complexo N. parvum/ribis isoladas como endofíticas são capazes de causar doenças em plantas quando inoculadas artificialmente, além de se colocar como a segunda espécie mais agressiva quando comparada a L. theobromae^(30,33,36). No Uruguai, representantes do complexo N. parvum/ribis têm ampla ocorrência em Eucaliptus introduzido e Myrtaceae nativas ⁽³³⁾. Espécies pertencentes ao complexo N. parvum/ribis têm sido recentemente relatadas associadas à morte descedente e podridão peduncular em mangueira no Nordeste do Brasil ^(7,22). Os resultados desse estudo apontam que a frequência de espécies do complexo N. parvum/ribis em plantas do bioma Caatinga é ampla. Portanto, se fazem necessários estudos envolvendo um número mais abrangente de plantas hospedeiras dessas espécies, bem como, para o melhor conhecimento do comportamento dessas espécies, testando sua patogenicidade em outras plantas de importância econômica para a região.

Com 28% de todos os isolados desse estudo, P. stromaticum formou o segundo grupo mais representativo de Botryosphaeriaceae. Esses foram isolados a partir 18 espécies de plantas hospedeiras. Esta espécie foi relatada pela primeira vez como Fusicoccum stromaticum Mohali, Slippers M. J. Wingf., associada a sintoma e como endofítica sobre espécies de Eucalyptuse Acacia mangium Willd., na Venezuela ⁽²⁷⁾. Verificou-se que P. stromaticum, apesar de menos agressiva do que L. theobromae e que o complexo N. parvum/ribis, foi capaz de causar doença em manga e ramos de umbu-cajá. Alguns isolados apresentaram agressividade elevada superando alguns isolados de L. theobromae e do complexo N. parvum/ribis. Inoculações com Botryosphaeriaceae em clones de Eucaliptus mostram que a espécie P. stromaticum é mais agressiva do que L. theobromae e B. mamane, porém, menos agressiva do que N. parvum e N. ribis⁽²⁶⁾. Isso sugere que esse grupo de fungos também representa uma ameaça às plantas de importância agronômica e florestal na Caatinga e áreas vizinhas.

Apenas 4 isolados de B. mamane foram obtidos associados a 3 espécies botânicas. Esta espécie foi primeiramente descrita associada à vassoura de bruxa em Sophora chrysophyalla (Salisb.) Seem., nativa do Havaí ⁽¹³⁾. Posteriormente, foi isolada como endofítica de Eucalyptus na Venezuela ⁽²⁵⁾ e, recentemente, foi isolada associada à mangueira (M. indica) no Brasil ⁽²²⁾. Neste estudo, B. mamane foi isolada pela primeira vez, como endofítica em Caesalpinia ferrea Mart. ex Tul., Licania rigida Benth e Miracroduon urundeuva (Allemão) Engl. Esta espécie foi capaz de causar pequenas lesões em manga e ramos de umbu-cajá. Resultados similares foram obtidos com inoculações em Eucalyptus e M. indica^(22,26). Este estudo mostra que a presença de B. mamane associadas como endofiticas em plantas da Caatinga parece ser ampla, indicando que estudos aprofundados sobre a presença e ecologia dessa espécie nesse bioma são necessários para esclarecer sua função.

Dois isolados de L. gonubiensis foram obtidos neste estudo associados a Croton sp. e Manilkara triflora(Allemão) Monach. Ambos os isolados apresentaram baixa agressividade. Este fungo foi descrito pela primeira vez como endofítico sobre Syzygium cordatumna África do Sul ⁽³¹⁾, mostrando baixa agressividade quando inoculado sobre clones de Eucalyptus⁽³⁰⁾. L. gonubiensis apresentou baixa agressividade neste estudo. Trata-se de uma espécie de baixa frequência em estudos de isolamento de endofíticos. Isso sugere sua baixa importância como uma ameaça a plantas cultivadas. A agressividade de L. gonubiensis continua indeterminada até aqui, visto que os estudos realizados são pouco conclusivos.

Dois isolados de P. adansoniae foram encontrados como endofíticos em Eugenia crenata Vell. e Chrysobalanus icaco L. Esta espécie apresentou pouca agressividade, similar a P. stromaticum. Isto confirma os resultados obtidos em estudos anteriores com esta espécie ⁽³⁶⁾. Já em inoculações em ramos e frutos de mangueira, esta espécie produziu lesões que foram significativamente diferentes do controle ⁽³⁷⁾. Esta espécie foi primeiramente descrita por Pavlic et al. ⁽³²⁾, causando morte em ramos de Adansonia gibbosa F. Muell. e como endofítica em Acacia synchronica, Eucaliptus sp. e Ficus opposita Miq.

Esse é o primeiro estudo sobre fungos endofíticos realizado no Brasil, que envolve um número significativo de isolados oriundos de plantas nativas e exóticas no Bioma Caatinga no estado do Ceará. A maioria das plantas investigadas neste estudo é nativa desse Bioma. Além disso, os relatos de espécies de Botryosphaeriaceae associadas a cada hospedeiro são, na maioria dos casos, inéditos. Portanto, muito pouco se conhece sobre a presença e ecologia dessas espécies nesse ambiente. A presença de espécies de fungos comuns a plantas nativas e exóticas sugere um alto grau de transmissão horizontal desses fungos no bioma estudado. Em testes de patogenicidade realizados neste estudo, todas as espécies foram capazes de causar lesões em manga e/ou ramos de umbu-cajá. Além disso, algumas espécies se mostraram extremamente agressivas sobre os hospedeiros avaliados. Logo, este estudo aponta que espécies de Botryosphaeriaceae endofiticas de plantas no Bioma Caatinga, constituem uma ameaça a agricultura local, como patógenos em fase latente nesses hospedeiros. Investigações mais profundas envolvendo um maior número de isolados e um maior número de espécies hospedeiras além de testes de patogenicidade em outras espécies de frutíferas são essenciais para estimar o real perigo dessas espécies.

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  Jan-Mar 2016

Histórico

• Recebido
  01 Jun 2015
• Aceito
  12 Ago 2015