Associação de Bacillus subtilis BV02 e produto à base de cobre no controle da ferrugem asiática na soja

Association between Bacillus subtilis BV02 and a copper-based product in controlling Asian soybean rust

RESUMO

O fungo causador da ferrugem asiática na soja, Phakopsora pachyrhizi, apresenta resistência cruzada e múltipla aos três grupos químicos (triazóis, estrobilurinas e carboxamidas) de fungicidas sítio-específicos. Este fato torna evidente a necessidade da implementação de estratégias para o manejo de prevenção da resistência. Uma alternativa pode ser a utilização de microrganismos com capacidade de interferir no desenvolvimento de patógenos, bem como atuarem como indutores da resistência das plantas. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a eficácia de produto biológico à base de Bacillus subtilis BV02 isolado ou associado à produto à base de cobre no controle de ferrugem asiática, bem como desempenho agronômico da soja. Para tanto, foram instalados dois experimentos, sendo um no campo e outro em laboratório. Para o experimento conduzido em campo, o delineamento utilizado foi o de blocos ao acaso, estando os tratamentos dispostos em arranjo fatorial (5x2)+1, com quatro repetições. O primeiro fator correspondeu a aplicação, em pós-emergência da soja, de cinco doses de B. subtilis BV02 (0, 0,5, 1,0, 2,0 ou 4,0 L p.c. ha^-1). O segundo fator correspondeu a associação ou não com produto à base de cobre. O tratamento adicional consistiu na aplicação da associação entre os fungicidas [azoxystrobina + benzovindiflupir] + mancozebe. No experimento em laboratório foi avaliada a germinação dos uredósporos de P. pachyrhizi em placas Elisa, no delineamento inteiramente casualizado com oito repetições. Foram utilizados os mesmos tratamentos do experimento do campo, diferenciando-se apenas o fungicida químico, o qual não foi adicionado mancozebe a calda aplicada. O aumento de dose de B. subtilis BV02, aplicado isoladamente, proporcionou reduções na severidade de ferrugem, não sendo visualizado este comportamento quando associado ao produto à base de cobre. Para a associação entre B. subtilis BV02 e produto à base de cobre, os melhores resultados para o controle de ferrugem asiática foram visualizados em doses iguais ou inferiores a 1,0 L p.c. ha^-1. A produtividade da soja foi superior ao tratamento contendo fungicidas com a utilização de B. subtilis BV02 isolado (1,0 e 2,0 L p.c. ha^-1), com aplicação apenas de produto à base de cobre e com utilização deste micronutriente em associação ao B. subtilis BV02 (2,0 L p.c. ha^-1).

Palavras-chave
controle biológico; doenças foliares; Glycine max ; Phakopsora pachyrhizi

ABSTRACT

The fungus that causes Asian soybean rust, Phakopsora pachyrhizi, shows crossed and multiple resistance to the three chemical groups of site-specific fungicides (triazoles, strobilurins and carboxamides). This fact evidences the need to implement strategies for the preventive management of resistance. An alternative can be the use of microorganisms capable of interfering in the development of pathogens, as well as of acting as resistance inducers in the plants. The objective of the present study was to evaluate the efficacy of a biological product based on Bacillus subtilis BV02, alone or in association with a copper-based product, on Asian soybean rust control, as well as the agronomic performance of soybean. Thus, two experiments were developed, one in the field and another one in the laboratory. For the experiment conducted in the field, a randomized block design was used with (5x2)+1 factorial arrangement of treatments, including four replicates. The first factor corresponded to application, during post-emergence of soybeans, of five B. subtilis BV02 doses (0, 0.5, 1.0, 2.0 or 4.0 L c.p. ha^-1). The second factor corresponded to association or not with a copper-based product. The additional treatment consisted of applying the fungicide association [azoxystrobin + benzovindiflupyr] + mancozeb. In the laboratory experiment, germination of Phakopsora pachyrhizi uredospores in Elisa plates was evaluated in a completely randomized design with eight replicates. Treatments were the same as those adopted in the field experiment, except for the chemical fungicide, since mancozeb was not added to the sprayed broth. Increasing doses of B. subtilis BV02, applied alone, provided reductions in Asian soybean rust severity, and this behavior was not observed when it was applied in association with the copper-based product. Considering the association between B. subtilis BV02 and the copper-based product, the best Asian rust control results were found with doses equal or inferior to 1.0 L c.p. ha^-1. Soybean yield was superior to that of the treatment containing fungicides with the use of B. subtilis BV02 alone (1.0 and 2.0 L c.p. ha^-1), with application of only a copper-based product and with the combination of this micronutrient with B. subtilis BV02 (2.0 L c.p. ha^-1).

Keywords
biological control; leaf diseases; Glycine max ; Phakopsora pachyrhizi

O Brasil consolidou-se como o maior produtor mundial de soja (⁴). Para que este aumento na produção de soja fosse obtido, diversos fatores foram preponderantes, destacando-se o melhoramento genético, que contribuiu para a criação de materiais adaptados as regiões de cultivo e o aprimoramento de práticas de manejo, tanto as relacionadas à nutrição da cultura, como para o controle fitossanitário.

Mesmo com o aprimoramento nos sistemas de produção de soja, invariavelmente é comum a ocorrência de fatores de origem biótica que interferem negativamente no desenvolvimento da cultura, causando redução na produtividade. Neste sentido, pode se afirmar que o principal desafio fitossanitário na cultura da soja no Brasil, tem sido a ferrugem asiática, que tem como agente causal o fungo biotrófico Phakopsora pachyrhizi Sydow & Sydow (¹⁰). O principal dano verificado na ocorrência desta doença consiste na desfolha precoce das plantas, reduzindo a produção de fotoassimilados que seriam redistribuídos para o processo de enchimento dos grãos, causando quedas na produtividade da cultura que podem chegar à 90% (²⁴).

Desde o primeiro relato de ocorrência da ferrugem asiática em lavouras de soja no Brasil (²⁴), diversas pesquisas vêm sendo realizadas para buscar melhores estratégias de manejo. Ao longo destes anos, foi constatada a suscetibilidade diferencial de cultivares de soja para a doença (¹⁶), foram desenvolvidas cultivares que apresentaram tolerância genética ao fungo (¹³), bem como identificada a necessidade de aplicações preventivas, para diminuir a severidade em áreas com semeaduras mais tardias (¹¹).

Apesar de todos os esforços visando aprimoramento nas práticas de manejo, por vezes os produtores acabam optando apenas pelo controle químico da ferrugem asiática utilizando fungicidas sítio específico, criando grande pressão seletiva na população do fungo. A redução da sensibilidade do fungo P. pachyrhizi a fungicidas do grupo dos inibidores da desmetilação (IDM - triazóis), inibidores da quinona externa (IQe - estrobilurina) e inibidores da succinato desidrogenase (ISDH - carboxamidas) já foi relatada no Brasil (¹⁴, ²¹, ²²), sendo esses os três principais grupos que compõem todos os fungicidas registrados em uso no controle da doença (¹⁹).

É fundamental a busca por alternativas de controle e que não envolvam apenas o uso de fungicidas químicos, as quais podem ser inseridas em programas de manejo integrado de doenças na cultura da soja. Uma das opções é o uso de microrganismos que apresentam capacidade de interferir no desenvolvimento de outros fitoparasitas. Neste contexto, bactérias do gênero Bacillus sp. apresentam capacidade de inibir o crescimento e evolução de outros patógenos (¹⁵, ²⁰), sendo alternativas para serem avaliadas para uso futuro no manejo integrado de ferrugem asiática na soja.

Adicionalmente, bactérias do gênero Bacillus sp. atuam como “multissítios biológicos”, pois possuem ação antifúngica e antibacteriana (ação direta), além de serem capazes de promover o crescimento de plantas e induzir mecanismos de resistência das plantas às doenças (ação indireta) (³, ¹⁸). Dentre essas práticas, cita-se a utilização de produtos à base de cobre, micronutriente o qual já teve sua eficácia relatada para uso no manejo de doenças em diversas culturas (⁷).

A utilização de multissítios biológicos e inorgânicos são fundamentais para a sustentabilidade do controle químico de doenças. Neste sentido, a hipótese formulada no presente trabalho é de que a associação entre agentes de biocontrole associados à produto à base de cobre pode servir de alternativa para ser implementada em sistemas de controle de doenças na cultura da soja em associação aos fungicidas químicos. Portanto, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a eficácia do controle de B. subtilis BV02 isolado ou associado à produto contendo cobre no controle de ferrugem asiática, bem como desempenho agronômico da soja.

MATERIAL E MÉTODOS

Experimento no campo

O experimento foi conduzido na área experimental da Universidade de Rio Verde - UniRV, localizada no município de Rio Verde (GO) (17º47’18.50”S; 50º57’26.43”W; 745 m acima do nível do mar). O período de condução do experimento foi de dezembro de 2018 a marco de 2019.

Segundo classificação Köppen, o clima para a localidade é do tipo Aw, que recebe o nome de clima tropical com estação seca, apresentando como principal característica a ocorrência de chuvas mais intensas no verão em comparação com o inverno (²³). Os dados climáticos durante a condução do experimento foram obtidos de uma estação meteorológica da UniRV, localizada próximo ao experimento. Durante o período de condução do experimento, foi registrado volume acumulado de precipitação equivalente a 676,2 mm, temperatura média 23,9°C e umidade relativa do ar média 74,1%.

Precedendo a instalação do experimento, foi realizada coleta de amostras de solo (camada de 0-20 cm) na área experimental, as quais foram homogeneizadas para avaliação das características físicas e químicas do solo. Após análise, estas revelaram os seguintes valores: pH (H₂O) = 5,2, P = 6,72 mg dm^-3, matéria orgânica = 35,6 g kg^-1, argila = 48,5 g kg^-1, silte = 12 g kg^-1 e areia = 39,5 g kg^-1 (textura argilosa).

O delineamento experimental foi de blocos ao acaso dispostos em arranjo fatorial (5x2)+1, com quatro repetições. O primeiro fator correspondeu a aplicação em pós-emergência da soja de cinco doses de B. subtilis BV02 (código Sisgen: ACF02CA, Bio-Imune^®, Vittia, São Joaquim da Barra - SP), incluindo uma testemunha sem aplicação: 0, 0,5, 1,0, 2,0 e 4,0 L p.c. ha^-1. O segundo fator correspondeu a aplicação do B. subtilis BV02 associado ou não com produto à base de cobre (NHT^® Cobre Super, Vittia, São Joaquim da Barra - SP), na dose de 0,15 L p.c. ha^-1 (41,75% de Cu). O tratamento adicional consistiu na aplicação da associação de fungicidas químicos: azoxistrobina + benzovindiflupir (Elatus^®, Syngenta) + mancozebe (Unizeb Gold^®, UPL), na dose de 90 + 45 + 2250 g i.a. ha^-1, respectivamente.

Ao longo do ciclo da soja, foram realizadas quatro aplicações em cada tratamento. A unidade experimental constituiu-se de oito fileiras de soja, espaçadas a 0,5 m entre fileiras, com cinco metros de comprimento. A área útil utilizada foi de quatro fileiras centrais da unidade experimental, com bordadura de 0,5 m em cada extremidade, totalizando área equivalente a 8 m².

Figura 1
Temperatura média e precipitação pluvial registrada durante o período de condução do experimento

A semeadura foi realizada em 06 de dezembro de 2018, utilizando sementes da cultivar M7739 IPRO^®, com densidade de semeadura de 18 sementes por metro (¹⁷). As sementes de soja foram tratadas com 1,2 mL p.c. kg^-1 de semente do inoculante Bradyrhizobium SEMIA 5079 e 5080 (Biomax^® Premium Líquido, Vittia, São Joaquim da Barra - SP).

Durante o desenvolvimento da soja foram realizados tratos culturais de acordo com os recomendados pela Embrapa (⁸), procedendo ao controle de plantas daninhas e pragas sem deixar que estes influenciassem negativamente no desenvolvimento da cultura. Todas as aplicações de manutenção foram realizadas por meio de pulverizador de arrasto, adotando-se volume de calda aplicada equivalente a 150 L ha^-1.

As aplicações dos tratamentos foram realizadas com pulverizador costal pressurizado à CO₂, com uma barra de contendo cinco pontas espaçadas a 0,5 m. As regulagens do pulverizador, bem como velocidade de operação, proporcionaram taxa de pulverização de 200 L ha^-1. Na Tabela 1 estão apresentados os dados climáticos na ocasião de cada aplicação, bem como o estádio fenológico em que as plantas de soja se encontravam. Em todas as aplicações foi adicionado adjuvante Naft^® (Vittia, São Joaquim da Barra - SP) na dose de 0,1 L p.c. ha^-1.

Tabela 1
Dados climáticos e estádio fenológico da soja na ocasião das aplicações na cultura visando ao manejo de ferrugem asiática

	Data da aplicação
	10/01/2019	26/01/2019	11/02/2019	27/02/2019
Temperatura (oC)	29,3	22,2	30,4	20,7
Umidade relativa do ar (%)	41	87	48	93
Velocidade do vento (km h-1)	2,2	3,0	2,3	0,4
Estádio fenológico da soja	V6	R1	R3	R5

Para mensurar o desempenho dos tratamentos no controle de ferrugem asiática, foi avaliada a severidade e área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD). A ocorrência de ferrugem asiática na área experimental foi tardia, fato que fez com que as avaliações de severidade e AACPD fossem realizadas aos 7 e 14 dias após a terceira (69 e 76 dias após a emergência - DAE) e quarta aplicação (85 e 92 DAE). A avaliação da severidade foi baseada na escala diagramática proposta por Godoy et al. (¹²), procedendo a amostragem de cinco folhas do terço inferior e cinco folhas do terço médio das plantas por unidade experimental.

A colheita, foi realizada em 23/03/2019, obtendo a produtividade em kg ha^-1 e massa de 100 grãos. A determinação da produtividade foi realizada por meio da colheita manual de todas as plantas presentes na área útil das unidades experimentais e trilhadas, pesadas e realizada a correção da umidade dos grãos para 13%.

Experimento em laboratório

No experimento conduzido no laboratório para avaliar a germinação de uredósporos de P. pachyrhizi em placas Elisa, utilizaram-se concentrações crescentes de produto à base de B. subtilis BV02 isolado ou associado ao cobre. O referido trabalho foi instalado no delineamento inteiramente casualizado com oito repetições, sendo o experimento repetido por duas vezes. Para este experimento utilizou-se os mesmos tratamentos utilizados no trabalho realizado em campo, diferenciando-se apenas o fungicida químico, no qual não foi adicionada à calda aplicada o ingrediente ativo mancozebe.

Os uredósporos de P. pachyrhizi foram coletados de folhas de soja naturalmente infectadas, obtendo-se uma suspensão de inóculo contendo concentração ajustada para 10.000 uredósporos mL^-1, adicionado de uma solução do dispersante Tween 80 a 1% (⁵). Foram colocados 100 μL da calda de cada tratamento por célula da placa Elisa. Em seguida, pipetou-se 100 μL da suspensão de esporos em cada célula. As placas com os tratamentos foram mantidas em incubadora a ±22ºC.

O efeito dos tratamentos foi avaliado pela germinação dos esporos às 6, 12, 24, 36 e 48 horas após a aplicação dos tratamentos em microscópio de objetiva invertida. Considerou-se como germinado, o esporo com o comprimento do tubo germinativo duas vezes maior que o diâmetro do esporo.

Análise estatística

A análise estatística dos dados foi realizada no software SISVAR (⁹). Os dados foram submetidos à análise de variância pelo teste F (p≤0,05) e quando constatado efeito significativo entre os fatores, ou entre os níveis de cada fator, as médias do fator qualitativo (associação ao produto à base de cobre) foram comparadas pelo teste F (p≤0,05) e para o fator quantitativo (dose de B. subtilis BV02), foi empregada a análise de regressão (p≤0,05). A comparação do tratamento adicional com os demais foi realizada por meio do intervalo de confiança (p≤0,05).

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Experimento no campo

Os resultados das quatro avaliações de severidade, AACPD para ferrugem asiática na soja e produtividade de grãos, encontram-se na Tabela 2. Na primeira avaliação de severidade (69 DAE), constatou-se que as plantas de soja que não foram tratadas com B. subtilis BV02 apresentaram maiores valores de severidade de ferrugem asiática quando comparadas àquelas que receberam produto à base de cobre.

Tabela 2
Severidade e AACPD da ferrugem asiática e produtividade de grãos de soja submetida a aplicação de doses crescentes B. subtilis BV02 isolado e associado ao cobre

B. subtilis BV02 (L p.c. ha-1)	Severidade - 69 DAE (%)				Severidade - 76 DAE (%)
	Sem cobre		Com cobre		Sem cobre		Com cobre
0,0	4,43	b(+)	1,87	a(+)	6,94	a(+)	6,47	a(+)
0,5	3,73	a(+)	2,09	a(+)	4,36	b(+)	1,58	a
1,0	2,31	a(+)	1,53	a(+)	6,26	b(+)	2,28	a(+)
2,0	3,27	a(+)	1,79	a(+)	3,86	a(+)	3,83	a(+)
4,0	1,39	a(+)	1,78	a(+)	4,68	a(+)	2,64	a(+)
Químico	0,79 (±0,20)				1,42 (±0,44)
CV (%)	56,44				33,03
	Severidade - 85 DAE (%)				Severidade - 92 DAE (%)
	Sem cobre		Com cobre		Sem cobre		Com cobre
0,0	21,73	b(+)	10,94	a(+)	29,85	b(+)	17,25	a(+)
0,5	16,16	b(+)	9,28	a(+)	15,88	a(+)	12,95	a(+)
1,0	10,84	a(+)	8,45	a(+)	27,96	b(+)	13,70	a(+)
2,0	12,72	a(+)	9,47	a(+)	22,40	a(+)	17,81	a(+)
4,0	11,46	a(+)	11,69	a(+)	23,66	a(+)	25,01	a(+)
Químico	4,92 (±1,82)				4,72 (±2,32)
CV (%)	33,52				33,07
	AACPD - 69 DAE (%)				AACPD - 76 DAE (%)
	Sem cobre		Com cobre		Sem cobre		Com cobre
0,0	39,77	b(+)	29,19	a(+)	100,35	b(+)	60,93	a(+)
0,5	28,32	b(+)	12,83	a(+)	71,82	b(+)	38,00	a(+)
1,0	30,02	b(+)	13,33	a(+)	59,88	b(+)	37,55	a(+)
2,0	24,93	a(+)	19,67	a(+)	58,01	a(+)	46,55	a(+)
4,0	21,22	a(+)	15,47	a(+)	56,45	a(+)	50,17	a(+)
Químico	7,72 (±1,81)				22,17 (±6,09)
CV (%)	28,63				25,66
	AACPD - 85 DAE (%)				AACPD - 92 DAE (%)
	Sem cobre		Com cobre		Sem cobre		Com cobre
0,0	180,53	b(+)	98,66	a(+)	320,65	b(+)	188,78	a(+)
0,5	112,11	a(+)	77,81	a(+)	212,25	b(+)	128,63	a(+)
1,0	135,80	b(+)	77,53	a(+)	225,69	b(+)	128,41	a(+)
2,0	122,92	a(+)	95,47	a(+)	205,85	a(+)	161,69	a(+)
4,0	122,89	a(+)	128,47	a(+)	200,57	a(+)	194,12	a(+)
Químico	33,73 (±10,55)				63,62 (±12,62)
CV (%)	23,45				19,36
	Produtividade (kg ha-1)
	Sem cobre				Com cobre
0,0	1957,25		b		2428,66		a(+)
0,5	1945,26		a		2098,14		a
1,0	2193,39		a(+)		2071,34		a
2,0	2263,76		a(+)		2197,21		a(+)
4,0	1918,81		a(-)		1884,45		a(-)
Químico	2040,76 (±99,41)
CV (%)	9,79

• ^{(+) ; (-)}
  Média superior e inferior, respectivamente
• ao tratamento químico pelo intervalo de confiança (p≤0,05). * Médias seguidas por letras distintas na linha diferem entre si pelo teste F (p≤0,05).

O uso de produto à base de cobre no experimento proporcionou redução na severidade de 62% em comparação com a testemunha. O desempenho verificado pela adição de produto à base de cobre na redução da severidade já foi comprovado na literatura que este micronutriente proporciona ativação de enzimas que atuam na defesa da planta contra patógenos (⁷).

Ainda em relação à primeira avaliação de severidade, nota-se que independentemente da dose de B. subtilis BV02, não foi visualizado melhor desempenho dos tratamentos quando adicionado o produto à base de cobre. Nas avaliações subsequentes de severidade (76, 85 e 92 DAE), o benefício da associação de cobre ao B. subtilis BV02 na redução de severidade de ferrugem asiática passou a ser constatado, nos tratamentos em que foram utilizadas doses do produto contendo microrganismos iguais ou inferiores a 1,0 L p.c. ha^-1 (Tabela 2).

Ao longo das quatro avaliações da severidade, quando se procedeu a comparação dos tratamentos contendo B. subtilis BV02 isolado ou associado ao cobre com aquele em que foi utilizado a associação fungicida [azoxistrobina + benzovindiflupir] + mancozebe, constatou-se que em 97,5% dos casos, sempre a severidade onde se empregou controle químico foi menor em relação aos demais tratamentos. A visualização deste comportamento pode ser explicada pelo fato de tanto o B. subtilis BV02 como o cobre, podem atuar como multissítios (biológico e inorgânico, respectivamente), os quais agem em processos morfológicos e bioquímicos visando indução da resistência das plantas ao processo de infecção de patógenos (², ³, ⁶, ¹⁷).

Por outro lado, a associação entre fungicidas químicos empregada no presente trabalho apresenta ação curativa e protetora (preventiva) sobre o fungo causador da ferrugem asiática (¹), o que assegura a eficácia destes no manejo da doença.

Quanto a AACPD, o comportamento verificado foi semelhante nas diferentes datas em que estas foram realizadas, sendo constatado que a associação de cobre se faz interessante quando utilizadas doses de B. subtilis BV02 iguais ou inferiores à 1,0 L p.c. ha^-1 (Tabela 2). Para as duas maiores doses de B. subtilis BV02, não foram constatadas diferenças no progresso da doença quando houve a adição ou não do produto à base de cobre. Em relação à comparação entre os tratamentos contendo B. subtilis BV02, isolado ou associado ao cobre, e com aplicação dos fungicidas [azoxistrobina + benzovindiflupir] + mancozebe, verifica-se que sempre as plantas que receberam como medida de controle o método químico, apresentaram uma curva de progresso da ferrugem asiática inferior.

Para a massa de mil grãos, não foi observado efeito significativo dos tratamentos utilizados. Para produtividade de grãos, procedendo a comparação entre a utilização ou não de produto à base de cobre, verifica-se que a única situação foi no tratamento sem aplicação de B. subtilis BV02 (Tabela 2). O acréscimo na produtividade foi de 24% quando se utilizou apenas produto à base de cobre em relação à testemunha.

Em relação à comparação de todos os tratamentos contendo B. subtilis BV02, isolado ou associado ao cobre, com o composto pela aplicação da associação [azoxistrobina + benzovindiflupir] + mancozebe, verifica-se que o B. subtilis BV02 isolado, nas doses de 1,0 e 2,0 L p.c. ha^-1, B. subtilis BV02 (2,0 L p.c. ha^-1) associado ao cobre, bem como produto à base de cobre isolado, apresentaram produtividade superior tratamento com uso de fungicidas químicos. No entanto, o B. subtilis BV02 na maior dose (4,0 L p.c. ha^-1), independentemente da associação com cobre, apresentou menor produtividade em relação ao tratamento químico.

Nas Figuras 2, 3 e 4 estão apresentados, respectivamente os resultados das avaliações da severidade e da AACPD, bem como de produtividade de grãos, levando em consideração o comportamento do fator doses de B. subtilis BV02 avaliadas. Para severidade de ferrugem asiática, independentemente da época em que a avaliação foi realizada, verifica-se que todas as doses de B. subtilis BV02, quando o produto foi aplicado isoladamente, proporcionaram redução dos sintomas. Provavelmente, tal comportamento pode ser atribuída ação dos lipopeptídeos (fengicinas, iturinas e surfactinas) presentes no Bacillus sp. e que comprovadamente atuam no controle de doenças (¹⁸). Na última avaliação de severidade (92 DAE) não foi observado efeito significativo das doses de B. subtilis BV02 influenciando esta variável-resposta, seja para aplicação deste microrganismo isolada ou associada ao cobre.

Figura 2
Severidade de ferrugem asiática em plantas de soja submetidas a aplicação de doses crescentes B. subtilis BV02 isolado e associado ao cobre

Figura 3
AACPD de ferrugem asiática em plantas de soja submetidas a aplicação de doses crescentes B. subtilis BV02 isolado e associado ao cobre

Figura 4
Produtividade de soja submetida a aplicação de doses crescentes B. subtilis BV02 isolado e associado ao cobre

Em nenhuma das avaliações foi observado efeito das doses de B. subtilis BV02, quando aplicado em associação com produto à base de cobre, influenciando a severidade de ferrugem asiática, o que expressa nesta situação que não há benefícios de redução na severidade da doença com o aumento de dose do biocontrole quando se adiciona o micronutriente (Figura 2). Em relação ao efeito dos fungicidas químicos, verifica-se em todas as avaliações menores valores de severidade de ferrugem asiática em comparação com os demais tratamentos.

Ao longo de todas as avaliações de AACPD, o comportamento observado em relação ao incremento de dose de B. subtilis BV02, em aplicações isoladas, foi semelhante, havendo redução na evolução dos sintomas da ferrugem asiática em todas as doses aplicadas do agente de biocontrole quando comparadas à testemunha (Figura 3). Estes resultados indicam potencial de inserção do B. subtilis BV02 em programas de manejo integrado de doenças na soja.

Ainda em relação à avaliação de AACPD de ferrugem asiática, verifica-se que quando se procede a associação do B. subtilis BV02 ao produto à base de cobre, o fator dose do agente de biocontrole passa a ser indiferente, uma vez que em nenhuma das épocas de avaliação foi observado ajustes de modelos que expliquem o comportamento dos tratamentos influenciando a variável-resposta analisada. Para o tratamento com aplicação de fungicidas, verifica-se que este foi o que apresentou menores valores de AACPD ao longo das quatro avaliações quando comparado aos demais tratamentos.

Os dados de produtividade de soja influenciados pelas doses de B. subtilis BV02 aplicadas isoladas ou em associação com produto à base de cobre estão apresentados na Figura 4. Em relação ao B. subtilis BV02 isolado, não foi verificado efeito direto na produtividade da soja em função do acréscimo de dose aplicada, observando valor de produtividade equivalente a 2055,69 kg ha^-1 na média de todas as doses avaliadas.

Quando se procedeu a aplicação de B. subtilis BV02 associado ao produto à base de cobre, verificou-se tendência de redução na produtividade de soja à medida que se procedeu o incremento de dose aplicada. Este comportamento indica que visando associar B. subtilis BV02 ao cobre para programas de manejo de doenças na soja, ajustes de dose são necessários, uma vez que o aumento de concentração do agente de biocontrole aplicado, conjuntamente com o micronutriente, proporcionou efeito deletério na produtividade da cultura.

Em relação à aplicação exclusiva de fungicidas para o manejo de doenças na soja, verifica-se que a média de produtividade deste tratamento foi de 2040,76 kg ha^-1, não havendo diferenças estatísticas deste quando comparado com B. subtilis BV02 aplicado isolado na dose de 0,5 L p.c. ha^-1, bem como do B. subtilis BV02 associado ao cobre nas doses de 0,5 e 1,0 L p.c. ha^-1 (Figura 4). Por outro lado, os tratamentos compostos pela aplicação isolada de B. subtilis BV02 nas doses de 1,0 e 2,0 L p.c. ha^-1, bem como tratamento com aplicação apenas de produto à base de cobre e deste micronutriente associado ao B. subtilis BV02 na dose de 2,0 L p.c. ha^-1, proporcionaram acréscimo de produtividade em comparação ao tratamento com aplicação de fungicidas.

Experimento em laboratório

Na avaliação de germinação dos esporos no ensaio in vitro, seis horas após a exposição, as doses de 2,0 e 4,0 L p.c. ha^-1 de B. subtilis BV02 combinado ao produto à base de cobre obtiveram os melhores índices de redução, apresentando controle de 94% em relação à testemunha, diferindo estatisticamente dos demais tratamentos, inclusive da testemunha química (Figura 5).

Figura 5
Avaliação da germinação de esporos de P. pachyrhizi em diferentes períodos de exposição aos tratamentos contendo doses crescentes B. subtilis BV02 isolado e associado ao cobre

Os tratamentos B. subtilis BV02 e produto à base de cobre apresentaram melhor índice de controle quando aplicados em associação do que quando utilizados isoladamente, podendo-se afirmar um possível efeito aditivo dos tratamentos. Além disso, o tratamento composto pelo micronutriente isolado (produto à base de cobre) apresentou maior eficiência no experimento realizado em condições controladas do que no trabalho desenvolvido à campo. Neste caso, ao que tudo indica, os esporos tiveram um contato prolongado e direto com o produto, favorecendo sua ação de controle. No caso dos tratamentos com B. subtilis BV02, propõe-se que há uma ação indireta no manejo, com proteção no filoplano da planta e/ou indução de resistência, e uma ação direta sobre os urediniósporos, atrasando e/ou impedindo sua germinação.

Com base nos resultados, a utilização de produtos biológicos (B. subtilis BV02) com ação de multissítios e inorgânicos (produtos à base de cobre) são alternativas na estratégia de prevenção da resistência em P. pachyrhizi à fungicidas na soja, pois além de diminuírem a severidade de doença, quando comparadas à testemunha, também atuam na indução de resistência (⁶). Contudo, tais estratégias devem ser consideradas como ferramentas para manejo integrado de doenças e são fundamentais para manutenção do sistema de cultivo produtivo da soja e sustentável ao longo dos anos.

O aumento de dose de B. subtilis BV02, aplicado isoladamente, proporciona reduções na severidade de ferrugem asiática da soja;

A aplicação de doses crescentes de B. subtilis BV02 em associação com produto à base de cobre não reduz a severidade da doença;

A associação entre B. subtilis BV02 e produto à base de cobre apresenta melhores resultados quando utilizadas doses iguais ou inferiores a 1,0 L p.c. ha^-1 do agente de biocontrole;

A produtividade de grãos da soja foi superior ao tratamento contendo fungicidas com a utilização de B. subtilis BV02 isolado nas doses de 1,0 e 2,0 L p.c. ha^-1, com aplicação apenas de produto à base de cobre e com utilização deste micronutriente em associação ao B. subtilis BV02 na dose de 2,0 L p.c. ha^-1.

AGRADECIMENTOS

À Universidade de Rio Verde, pela disponibilização de recursos financeiros por meio do Edital de Bolsa Pesquisador. À Vittia pela cessão dos produtos utilizados no presente trabalho.

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Editado por

Editor associado para este artigo: Luadir Gasparotto

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  20 Out 2023
• Data do Fascículo
  2023

Histórico

• Recebido
  20 Jul 2020
• Aceito
  24 Jun 2023