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Isolamento e determinação de sensibilidade e resistência a antimicrobianos de cepas bacterianas presentes na cloaca de Trachemys scripta elegans (Wied, 1839) criadas em cativeiro em Petrolina, PE

Isolation and determination of antimicrobials sensitivity and resistance of bacterial strains present in the cloaca Trachemys scripta elegans (Wied, 1839) raised in captivity in Petrolina/PE, Brazil

RESUMO:

Este estudo isolou e determinou o perfil de sensibilidade e de resistência a antimicrobianos de cepas bacterianas isoladas da cloaca de Trachemys scripta elegans (T. s. elegans) criadas em cativeiro. Após 120 dias de adaptação, amostras de swab cloacal obtidas de 20 animais adultos foram cultivadas e, após a identificação dos patógenos através de testes bioquímicos, submetidas ao teste de suscetibilidade a nove antimicrobianos. Enterobacter aerogenes (85%); Shigella spp. (10%) e Edwadsiella spp. (5%) foram isolados e identificados. Os isolados de E. aerogenes foram sensíveis à gentamicina (86%), enrofloxacina (79%), estreptomicina (50%), sulfazotrim (36%) e ampicilina (29%) e resistentes a penicilina (100%), eritromicina (93%), cefalexina (86%) ampicilina (71%) e sulfazotrim (64%). Isolados de Shigella spp. apresentaram sensibilidade à gentamicina (100%), enrofloxacina (50%), doxicilina (50%), estreptomicina (50%), ampicilina (50%), penicilina (50%) e sulfazotrim (50%) e resistência a doxicilina (50%), estreptomicina (50%), ampicilina (50%), penicilina (100%), cefalexina (50%) e sulfazotrim (50%), enquanto que os de Edwardsiella spp. foram sensíveis apenas à gentamicina (100%) e altamente resistentes (100%) aos demais antimicrobianos. Os resultados sugerem a participação de T. s. elegans na cadeia epidemiológica, como reservatório de patógenos importantes, como E. aerogenes, Shigella spp. e Edwardisiella spp., tornando importante a adoção de medidas preventivas pelo risco zoonótico que apresentam e corretas de tratamento e de controle em cativeiros e domicílios, assim como de estudos que enfoquem as características de sensibilidade e de resistência antimicrobiana dos isolados cloacais, pois a multirresistência a drogas pode ser transmitida aos humanos e comprometer o tratamento de indivíduos com doenças graves.

TERMOS DE INDEXAÇÃO:
Zoonose; Testudines; Enterobacter aerogenes; Shigella spp.; Edwardisiella spp.; antimicrobianos.

ABSTRACT:

This study isolated and determined the profile of susceptibility and antimicrobials resistance of bacterial strains isolated from the cloaca Trachemys scripta elegans (T. s. elegans) raised in captivity. After 120 days of adaptation, cloacal swab samples obtained from 20 adults animals were grown and, after the pathogens identification through biochemical tests, submitted to the test of susceptibility to nine antimicrobials. Enterobacter aerogenes (85%); Shigella spp. (10%) and Edwadsiella spp. (5%) were isolated and identified. Isolates from E. aerogenes were sensitive to gentamicin (86%), enrofloxacin (79%), streptomycin (50%), sulfazotrim (36%) and ampicillin (29%) and resistant to penicillin (100%), erythromycin (93%), cephalexin (86%), ampicillin (71%) and sulfazotrim (64%). Isolates from Shigella spp. showed sensitivity to gentamicin (100%), enrofloxacin (50%), doxycycline (50%), streptomycin (50%), ampicillin (50%), penicillin (50%) and sulfazotrim (50%) and resistance to doxycycline (50 %), streptomycin (50%), ampicillin (50%), penicillin (100%), cephalexin (50%) and sulfazotrim (50%), while the Edwardsiella spp. were sensitive only to gentamicin (100%) and were highly resistant (100%) to other antibiotics. The results suggest the participation of T. s. elegans in the epidemiological chain, as reservoir of important pathogens, such as E. aerogenes, Shigella spp. and Edwardisiella spp., making it important to adopt preventive measures for zoonotic risk that present and correct treatment and control in captivity and households, as well as studies that address the sensitivity characteristics and antimicrobial resistance of isolates from cloaca, as it multidrug resistance to drugs can be transmitted to humans and compromise the treatment of patients with serious diseases.

INDEX TERMS:
Zoonosis; Testudines; Enterobacter aerogenes; Shigella spp.; Edwardisiella spp.; antimicrobes.

Introdução

Répteis têm se tornado cada vez mais objeto de estudos tanto por questões conservacionistas quanto pelo aumento de sua utilização como animais de companhia. Contudo, o aumento de sua popularidade como animais de estimação causa preocupação quanto ao impacto na saúde pública, uma vez que representam fonte potencial de infecção para humanos, pois podem deixar no ambiente, misturados às suas fezes, microrganismos oportunistas e patogênicos (Bringsoe 2006Bringsoe H. 2006. Nobanis - Fact Sheet exóticas invasoras espécies -Trachemys scripta. Banco de dados on-line da Europa do Norte e Báltico - Nobanis. In: < In: http://www.nobanis.org .> Acesso em: 22 jul. 2011.
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).

Este fato ganha particular interesse quando se trata da Trachemys scripta elegans (T. s. elegans) (Wied, 1839), uma tartaruga subaquática, habitante do continente Americano, mas que se apresenta amplamente distribuída desde Illinois até o Golfo do México e é muito difundida como “pet” em todo mundo (Burger 2009Burger J. 2009. Red-eared slider turtles (Trachemys scripta elegans). Disponível em < Disponível em http://depts.washington.edu/oldenlab/wordpress/wp-content/uploads/2013/03/Trachemys-scripta-elegans_Burger.pdf > Acesso em 15 set. 2015.
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, Peris 2012Peris J.C. 2012. Estudo sanitário de Trachemys scripta elegans y Testudo hermanni hermanni en la comunidade Valenciana. Tesis Doctoral, Facultad de Veterinaria, Universidad Cardenal Herrera CEU, Valencia, Espanha. 200p.). No Brasil esta espécie exótica é a mais comercializada, mesmo sendo o comércio ilegal desde 1991 (Fonseca 2001Fonseca F.O. 2001. Olhares sobre o lago Paranoá. SEMARH, Brasília., Souza et al. 2007Souza V.L., Santos T.M., Peña A.P., Luz V.L.F. & Reis I.J. 2007. Caracterização dos répteis descartados por mantenedores particulares e entregues ao Centro de Conservação e Manejo de Répteis e Anfíbios - RAN. Rev. Biol. Neotrop. 4(2):149-160.), o que aumenta a preocupação sobre os patógenos albergados por estes animais, tipos de doenças que podem ser transmitidas, bem como sobre as medidas profiláticas a serem tomadas, tanto como para orientação dos proprietários quanto para com os cuidados com esta espécie. Além deste aspecto, torna-se grave também o abandono de indivíduos desta espécie em rios, lagos e corpos d´água quando atingem grandes tamanhos e deixam de ser atrativos como pets, pois se tornam um perigo à biodiversidade local (Fonseca 2001Fonseca F.O. 2001. Olhares sobre o lago Paranoá. SEMARH, Brasília., Primack & Rodrigues 2001Primack R.B. & Rodrigues E. 2001. Biologia da Conservação. Monograf, Londrina., Souza et al. 2007Souza V.L., Santos T.M., Peña A.P., Luz V.L.F. & Reis I.J. 2007. Caracterização dos répteis descartados por mantenedores particulares e entregues ao Centro de Conservação e Manejo de Répteis e Anfíbios - RAN. Rev. Biol. Neotrop. 4(2):149-160.), podendo comprometer seriamente populações nativas por extinção ou hibridização (Fonseca 2001Fonseca F.O. 2001. Olhares sobre o lago Paranoá. SEMARH, Brasília., Souza et al. 2007Souza V.L., Santos T.M., Peña A.P., Luz V.L.F. & Reis I.J. 2007. Caracterização dos répteis descartados por mantenedores particulares e entregues ao Centro de Conservação e Manejo de Répteis e Anfíbios - RAN. Rev. Biol. Neotrop. 4(2):149-160.) e promover a transmissão de patógenos (Souza et al. 2007Souza V.L., Santos T.M., Peña A.P., Luz V.L.F. & Reis I.J. 2007. Caracterização dos répteis descartados por mantenedores particulares e entregues ao Centro de Conservação e Manejo de Répteis e Anfíbios - RAN. Rev. Biol. Neotrop. 4(2):149-160.).

Na rotina clínica de répteis, as principais emergências infecciosas bacterianas são representadas por gastroenterites severas, processos bacterianos pneumônicos e mesmo septicêmicos, especialmente quando as condições de cativeiro são inadequadas (Goulart 2007Goulart C.E.S. 2007. Ordem Squamata - Subordem Sáuria (Lagarto, Teiú, Iguana), p.58-67. In: Cubas Z.S., Silva J.C.R. & Catão-Dias J.L. (Eds), Tratado de animais selvagens - Medicina Veterinária. Roca, São Paulo .). Embora muitos patógenos possam ser encontrados em répteis, a maioria é representada por bactérias Gram - negativas, como Salmonella spp., Pseudomonas spp., Klebsiella spp., Aeromnas spp., Protteus spp. e Escherichia coli, as quais podem causar doenças tanto por invasão tecidual quanto por produção de toxina (Cubas & Baptistotte 2007Cubas P.H. & Baptistotte C. 2007. Chelonia (Tartaruga, Cágado, Jabuti), p.86-119. In: Cubas Z.S., Silva J.C.R. & Catão-Dias J.L. (Eds), Tratado de animais selvagens - Medicina Veterinária. Roca, São Paulo.). Cabe ressaltar que, tanto as tartarugas quanto outros répteis, são reservatórios regulares de certas bactérias patogênicas para humanos (Aguirre et al. 2006Aguirre A.A., Gardner S.C., Marsh J.C., Delgado S.G., Limpus C.J. & Nichols W.J. 2006. Hazards associated with the consumption of sea turtle meat and eggs: a review for health care workers and the general public. EcoHealth 3(3):141-153.).

Sá & Solari (2001)Sá I.V.A. & Solari C.A. 2001. Salmonella in Brazilian and imported pet reptiles. Braz. J. Microbiol. 32(4): 293- 297. (Apud Pessoa 2009).apudPessoa (2009)Pessoa C.A. 2009. Avaliação da microbiota bacteriana e fúngica na cloaca de jabutis (Geochelone carbonaria) criados em domicílio e análise do potencial de risco à saúde humana. Dissertação de Mestrado em Epidemiologia Experimental Aplicada a Zoonoses, Universidade de São Paulo, São Paulo, SP. 96p. constataram que 93,3% dos quelônios estavam contaminados por Salmonella. Embora este patógeno faça parte da microflora intestinal dos quelônios e seja encontrada nas fezes, na urina, nos ovos e na carne dos animais portadores, somente quando estes entram em estado de estresse ou doença e têm sua resistência orgânica diminuída é que ela se torna patogênica (Santoro et al. 2006Santoro M., Hernandéz G., Gaballero M. & Garcia F. 2006. Aerobic bacterial flora of nesting green turtle (Chelonia mydas) from Tortuguero National Park, Costa Rica. J. Zoo Will. Med. 37(4):549-552.), podendo causar gastroenterite, hepatite necrótica, pneumonia e septicemia (Francisco 1997Francisco L.R. 1997. Répteis do Brasil. Amaro, São José dos Pinhais. (Apud Foti et al. 2009).apudFlosi et al. 2001Flosi M.F., Garcia J.M., Pugliese C., Sanchez A.A. & Lai A. 2001. Manejo e enfermidades de quelônios brasileiros no cativeiro doméstico. Rev. Educ. Cont. J. CRMV·SP 4(2):65·72). Além disso, tartarugas, tanto de cativeiro quanto as selvagens, têm sido incriminadas por serem vetores de Salmonella (Saelinger et al. 2006Saelinger C.A., Lewbart G.A., Christian L.S. & Lemons C.L. 2006. Prevalence of Salmonella spp. in cloacal, fecal, and gastrointestinal mucosal samples from wild North American turtles. J. Am. Vet. Med. Assoc. 229(2):266-268., Gaertner et al. 2008Gaertner J.P., Hahn D., Jackson J., Forstner M.R.J. & Rose F.L. 2008. Detection of Salmonellae in captive and free-ranging turtles using enrichment culture and polymerase chain reaction. J. Herpetol. 42(2):223-231.) e por albergarem patógenos entéricos humanos (Santoro et al. 2006Sá I.V.A. & Solari C.A. 2001. Salmonella in Brazilian and imported pet reptiles. Braz. J. Microbiol. 32(4): 293- 297. (Apud Pessoa 2009).).

Ademais, quando quelônios são criados com outras espécies, em especial mamíferos, que também possuem enterobactérias em sua flora intestinal, estas podem provocar doenças cutâneas ulcerativas e, assim, levar ao desenvolvimento de quadros septicêmicos, como necrose hepática, anorexia, caquexia e morte (Jacobson 2007Jacobson E.R. 2007. Bacterial diseases of reptiles, p.461-527. In: Jacobson E.R. (Ed.), Infectious diseases and pathology of reptiles: color atlas and text. CRC Press, Boca Raton, USA.). Portanto, é de extrema importância o conhecimento da microbiota inerente aos répteis para melhor promover-se uma relação humana e animal segura e saudável, pois alguns dos microrganismos desta microbiota apresentam alto potencial zoonótico e poucas pesquisas abordam este tema.

Assim, este estudo objetivou realizar a identificação e a avaliação da sensibilidade e da resistência a antimicrobianos de cepas bacterianas isoladas na cloaca de T. s. elegans, cujo comércio ilegal e abandono causa sérias consequência ao meio ambiente, e também levanta a questão sobre risco de saúde para as populações humanas e nativas em contato com esses animais.

Material e Métodos

Este estudo foi realizado com 20 espécimes de Trachemys scripta elegans (Wied, 1839), 10 machos e 10 fêmeas, adultos, de idades variáveis, provenientes do Centro de Triagem de Animais Silvestres (CETAS) do Parque Ecológico do Tietê, São Paulo (SP) (23o29’23.15”S e 46o31’10.90”W) (licença IBAMA nº 136/2011 e 048/2012). Os animais foram transportados (Processo SMA/DeFau nº 13461/2012) até o Laboratório de Anatomia dos Animais Domèsticos e Silvestres, Campus de Ciências Agrárias da Universidade Federal do Vale do São Francisco, Petrolina (PE) (9°23’34”S e 40°30’’28”W) onde foram mantidos em cativeiro. O transporte foi realizado em caminhão baú, dentro de gaiolas que permitiam a ampla movimentação dos espécimes, havendo baixa densidade de carga, boa ventilação e alimentação a base de vegetais, manobras importantes para reduzir o estresse, injúrias e o óbito. Em Petrolina (PE) os animais foram descarregados com o mínimo de barulho e movimentação e acomodados em aquaterrário, onde receberam alimentação industrializada comercial uma vez ao dia. A substituição total da água e limpeza do recinto era promovida a cada 48 h e, para evitar proliferação de microrganismos, a água e o recinto eram periodicamente tratados com solução aquosa de azul de metileno.

A coleta de swabs da região cloacal foi realizada para avaliação da flora bacteriana presente. O swab estéril era introduzido e, então, rotacionado no interior da cloaca por aproximadamente um minuto e, em seguida, acondicionado em meio de transporte Stuart e encaminhado sob refrigeração ao Laboratório de Microbiologia e Imunologia Animal da UNIVASF, mantendo-o a 4°C até até o processamento (em média, 8 horas após a coleta). Os swabs foram semeados com auxílio de alça de platina em meios de cultura com Ágar base enriquecidos com sangue ovino a 8%, sendo as placas incubadas por 48 horas a 37oC (Carter 1990Carter G.R. 1990. Diagnostic procedures in veterinary Bacteriology and mycology. 5th ed. Academic press Inc., California.). Após este período, colônias foram identificadas por suas características, morfológicas e bioquímicas, utilização de açúcares e citrato, produção de enxofre, motilidade e produção de indol e Gof, sendo utilizados os meios TSI e SIM, e características tintoriais (Quinn et al. 1994Quinn P.J., Carter M.E., Markey B. & Carter G.R. 1994. Clinical Veterinary Microbiology. WOLFE. 648p.).

O perfil de sensibilidade a antimicrobianos dos microrganismos isolados foi determinado através do método de difusão em disco Kirby-Bauer modificado (Bauer et al. 1966)Bauer A.W., Kirby W.M., Sherris J.C. & Turck M. 1966. Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method. Am. J. Clin. Pathol. 45(4):493-496.. Os isolados foram semeados em caldo Muller Hinton (Laborclin, Vargem Grande, Paraná - PR, Brasil) e incubados a 37 oC até a obtenção de turvação conforme a escala 0,5 de Mac Farland. Com auxilio de swab, os isolados foram semeados em placas de Petri contendo meio de cultura Ágar Muller Hinton (Laborclin, Vargem Grande, Paraná - PR, Brasil). Logo após, foram aplicados os discos impregnados com as seguintes drogas antimicrobianas: Estreptomicina (EST) (10,0 mcg), cefalexina (CEF) (30,0 mcg), eritromicina (ERI) (10,0 mcg), doxicilina (DOX) (30,0 mcg), gentamicina (GEN) (10,0 mcg), sulfazotrim (SUT) (25,0 mcg), penicilina (PEN) (10,0 mcg), ampicilina (AMP) (10mcg), enrofloxacina (ENO) (0,5 mcg). As placas foram incubadas em estufa durante 24 horas a 37oC e após aleitura dos halos formados, foi determinado o perfil de sensibilidade dos patógenos isolados.

A análise dos resultados foi realizada de acordo com os diferentes microorganismos e drogas testadas, utilizando-se como método estatístico a análise descritiva com porcentagem simples. Este estudo foi aprovado pelo CEDEP da UNIVASF (Protocolo nº 0002/130314).

Resultados

Após o cultivo foram identificadas colônias brancas, mucoides e exibindo hemólise e na coloração de Gram cocobacilos Gram negativos. Foram identificadas três espécies de bactérias Gram-negativas em T. s. elegans, sendo a espécie mais frequente Enterobacter aerogenes; seguida por Shigella spp. e Edwadsiella spp. (Quadro 1).

Quadro 1:
Espécies bacteriana e sua frequência de ocorrência na cloaca de Trachemys scripta elegans adultas provenientes do Centro de Triagem de Animais Silvestres (CETAS) do Parque Ecológico do Tietê, São Paulo/SP

Em três amostras (15%) não foi possível avaliar-se o perfil de sensibilidade aos antimicrobianos testados. A variação geral de sensibilidade aos antimicrobianos está exibida na Figura 1. Nota-se que em 85% (17/20) das amostras as bactérias isoladas foram altamente sensíveis à gentamicina (15/17= 88%), seguida da enrofloxacina (12/17= 70%) e estreptomicina (8/17= 47%), moderadamente sensíveis a doxicilina (6/17= 35%) e o sulfazotrim (6/17= 35%) e pouco sensíveis a ampicilina (5/17= 19%); cefalexina (1/17= 6%); penicilina (1/17= 6%) e eritromicina (1/17= 6%). Por outro lado, observou-se elevada resistência a penicilina (16/17= 94%); eritromicina (15/17= 88%); cefalexina (13/17= 76%); ampicilina (12/17= 70%); sulfazotrim (11/17= 65%) e a doxicilina (10/17= 59%), moderada resistência à estreptomicina (4/17= 23%), enrofloxacina (3/17= 18%) e baixa resistência a gentamicina (1/17= 6%).

Fig.1:
Variação de sensibilidade (%) das bactérias isoladas de Trachemys scripta elegans aos antimicrobianos testados. GEN = gentamicina, ENO = enrofloxacina, DOX = doxicilina, EST = estreptomicina, ERI = eritromicina, AMP = ampicilina, PEN = penicilina, CEF = cefalexina, SUT = sulfazotrim.

Os isolados de E. aerogenes foram sensíveis à gentamicina (86%), enrofloxacina (79%), estreptomicina (50%), sulfazotrim (36%) e ampicilina (29%) e resistentes a penicilina (100%), eritromicina (93%), cefalexina (86%) ampicilina (71%) e sulfazotrim (64%) (Fig.2A). Isolados de Shigella spp. apresentaram sensibilidade à gentamicina (100%), enrofloxacina (50%), doxicilina (50%), estreptomicina (50%), ampicilina (50%), penicilina (50%) e sulfazotrim (50%) e resistência a doxicilina (50%), estreptomicina (50%), ampicilina (50%), penicilina (100%), cefalexina (50%) e sulfazotrim (50%) (Fig.2B), enquanto que os de Edwardsiella spp. foram sensíveis apenas à gentamicina (100%) e altamente resistentes (100%) aos demais antimicrobianos (Fig.2C).

Fig.2:
(A) Variação da sensibilidade das amostras de Enterobacter aerogenes; (B) Shigella spp. e (C) Edwardsiella spp. de Trachemys scripta elegans a cada um dos antimicrobianos testados. GEN = gentamicina, ENO = enrofloxacina, DOX = doxicilina, EST = estreptomicina, ERI = eritromicina, AMP = ampicilina, PEN = penicilina, CEF = cefalexina, SUT = sulfazotrim.

Discussão

Com o crescente interesse por répteis de estimação, torna-se fundamental o conhecimento dos patógenos albergados por estes, assim como dos perfis de sensibilidade e resistência que estes apresentam aos antimicrobianos. Estes conhecimentos são também necessários quando se considera os riscos de contaminação nas criações em cativeiro, pois microrganismos da microbiota natural de quelônios podem se tornar patogênicos tanto para seus hospedeiros quanto para humanos. Por isto, os estudos sobre a flora bacteriana são importantes para se compreender o papel que as bactérias exercem como agentes patogênicos em quelônios.

Nos 20 swabs cloacais de T. s. elegans foram isoladas Bactérias Gram-negativas pertencentes à família Enterobacteriaceae. Estas bactérias foram representadas primeiramente por Enterobacter aerogenes, em 17 amostras (85%), seguida, respectivamente, por Shigella spp., em 2 amostras (10%), e Edwardisiella spp., em uma amostra (5%). Ampla variedade de bactérias Gram-negativas pode ser isolada em tartarugas e répteis, contudo a diversidade de ambientes e técnicas microbiológicas de processamento das amostras torna difícil estabelecer qual gênero prevalece sobre o outro. Embora a associação entre tartarugas e Klebsiella spp. (Cubas & Baptistotte 2007Cubas P.H. & Baptistotte C. 2007. Chelonia (Tartaruga, Cágado, Jabuti), p.86-119. In: Cubas Z.S., Silva J.C.R. & Catão-Dias J.L. (Eds), Tratado de animais selvagens - Medicina Veterinária. Roca, São Paulo., Ferronato et al. 2009Ferronato B.O., Marques T.S., Souza F.L., Verdade L.M. & Matushima E.R. 2009. Oral bacterial microbiota and traumatic injuries of freeranging Phrynops geoffranus (Testudines, Chelidae) in southeastern Brazil. Phyllom.: J. Herpetol. 8(11):19-25., Germino et al. 2008Germino G.F.S., Franco I., Peixoto R.M., Seabra A.G.L., Gamosa E.A., Dutra V., Krewer C.C. & Costa M.M. 2008. Isolamento e sensibilidade aos antimicrobianos de isolados de répteis mantidos em cativeiro em Petrolina-PE. Disponível em <Disponível em http://www.sovergs.com.br/conbravet2008/anais/cd/resumos/R0579-3.pdf. > Acesso em 15 set. 2015.
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, Pessoa 2009Pessoa C.A. 2009. Avaliação da microbiota bacteriana e fúngica na cloaca de jabutis (Geochelone carbonaria) criados em domicílio e análise do potencial de risco à saúde humana. Dissertação de Mestrado em Epidemiologia Experimental Aplicada a Zoonoses, Universidade de São Paulo, São Paulo, SP. 96p., Foti et al. 2009Foti M., Giacopello C., Bottari T., Fisichella V., Rinaldo D. & Mammina C. 2009. Antibiotic resistance of Gram negatives isolates from loggerhead sea turtles (Caretta caretta) in the central Mediterranean Sea. Mar. Pollut. Bull. 58(9):1363-1366., Liu et al. 2013Liu D., Wilson C., Hearlson J., Singleton J., Thomas R.B. & Crupper S.S. 2013. Prevalence of antibiotic-resistant gram-negative bacteria associated with the red-eared slider (Trachemys scripta elegans). J. Zoo. Wildl. Med. 44(3):p.666-671.) e Pseudomonas spp. (Cubas & Baptistotte 2007Cubas P.H. & Baptistotte C. 2007. Chelonia (Tartaruga, Cágado, Jabuti), p.86-119. In: Cubas Z.S., Silva J.C.R. & Catão-Dias J.L. (Eds), Tratado de animais selvagens - Medicina Veterinária. Roca, São Paulo., Foti et al. 2009Foti M., Giacopello C., Bottari T., Fisichella V., Rinaldo D. & Mammina C. 2009. Antibiotic resistance of Gram negatives isolates from loggerhead sea turtles (Caretta caretta) in the central Mediterranean Sea. Mar. Pollut. Bull. 58(9):1363-1366., Liu et al. 2013Liu D., Wilson C., Hearlson J., Singleton J., Thomas R.B. & Crupper S.S. 2013. Prevalence of antibiotic-resistant gram-negative bacteria associated with the red-eared slider (Trachemys scripta elegans). J. Zoo. Wildl. Med. 44(3):p.666-671.) seja frequente, este fato não foi observado neste estudo.

O crescimento de bactérias Gram negativas da família Enterobacteriaceae, frequentemente associadas a doenças gastrointestinais, em 100% das amostras deste estudo, denota o risco zoonótico e de circulação destes patógenos, tornando as medidas de controle e profilaxia imprescindíveis. Enfermidades zoonóticas têm sido estudadas desde a antiguidade, tendo a transmissão de patógenos de Trachemys ao homem sido causa de algumas infecções importantes em Saúde Pública (CDC 2008CDC. 2008. Multistate Outbreak Human Salmonella Infections Associated with Exposure to Turtles - United States, 2007-2008. Morbid. and Mortal. Weekly Rep. 57:69-72.). Apesar de qualquer pessoa ser susceptível a contrair infecções pelos patógenos isolados neste estudo, os sintomas mais severos são observados em idosos, crianças e indivíduos imunodeprimidos. Em qualquer um dos casos, a higiene pessoal, em particular a lavagem adequada das mãos, é a principal estratégia de prevenção (Kenneth 2012Kenneth T. 2012. Shigella and Shigellosis. Todar’s Online Textbook of Bacteriology. Disponível em <Disponível em http://textbookofbacteriology.net/Shigella.html > Acesso em 12 set. 2015.
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), bem como a educação de crianças para que adquiram práticas e hábitos de higiene corretos. Salvador (2008)Salvador T.R. 2008. Estudo bacteriológico de répteis em cativeiro com pneumonia e/ou estomatite e suas correlações microbiológicas. Dissertação de Pós-Graduação em Clínica Médica e Cirúrgica de Animais Selvagens e Exóticos, Universidade Castelo Branco, Qualittas Instituto de Pós Graduação, São Paulo. SP. 49p. Disponível em <http://www.qualittas.com.br/uploads/documentos/Estudo%20Bacteriologico%20de%20Repteis%20em%20Cativeiro%20-%20Thiago%20Rodrigo%20Salvador.PDF> Acesso em 10 set. 2015.
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verificou que, em répteis, as infecções ocorrem porque muitos proprietários criam os animais soltos em quintais ou varandas, que são ambientes errôneos para eles, submetendo-os a situações de estresse e, consequentemente, de baixa de imunidade, favorecendo o desenvolvimento de infecções bacterianas que podem causar pneumonia e/ou estomatite.

Os resultados deste estudo divergiram de Santos et al. (2011)Santos K.F.R., Petri B., Milanelo L., Dias Neto R. & Fitorra L.S. 2011. Avaliação da microbiota bacteriana cloacal de Trachemys scripta elegans, recebidos no CRAS, Parque Ecológico do Tietê, SP. In: Congresso MEDVEP de Especialidades Veterinárias, ExpoUnimed, Curitiba, PR. Proceedings, p.650-652. Disponível em Disponível em http://medvep.com.br/wp-content/uploads/2015/09/Artigo-Mv031-12.pdf. Acesso em 12 set 2016.
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sob dois aspectos: primeiro porque estes isolaram em T. s. elegans recebidos no Centro de Recuperação de Animais Silvestres do Parque Ecológico do Tietê, São Paulo (SP) uma porcentagem maior de Edwardsiella spp. (62%) do que de Enterobacter spp. (3%) e, segundo, porque foram também isolados E. coli (24%), Salmonella spp. (10%), Citrobacter spp. (3%) e Klebsiella spp. (3%). A ausência de isolamento de Salmonella foi um achado importante, pois os animais deste estudo foram provenientes de captura pelo Parque Ecológico do Tietê como os utilizados por Santos et al. (2011)Santos K.F.R., Petri B., Milanelo L., Dias Neto R. & Fitorra L.S. 2011. Avaliação da microbiota bacteriana cloacal de Trachemys scripta elegans, recebidos no CRAS, Parque Ecológico do Tietê, SP. In: Congresso MEDVEP de Especialidades Veterinárias, ExpoUnimed, Curitiba, PR. Proceedings, p.650-652. Disponível em Disponível em http://medvep.com.br/wp-content/uploads/2015/09/Artigo-Mv031-12.pdf. Acesso em 12 set 2016.
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e também porque este patógeno é tradicionalmente o mais importante em T. s. elegans (Peris 2012Peris J.C. 2012. Estudo sanitário de Trachemys scripta elegans y Testudo hermanni hermanni en la comunidade Valenciana. Tesis Doctoral, Facultad de Veterinaria, Universidad Cardenal Herrera CEU, Valencia, Espanha. 200p.), por isto é que tanto nos Estados Unidos quanto no Canadá sua venda é proibida devido à transmissão de salmonelose a humanos (Bringsoe 2002Bringsoe H. 2002. Review of the status of Trachemys scripta elegans en European Union. In: Adrados L.C. & Briggs L. (Eds). Study of application of EU wildlife trade regulations in relation to species which from an ecological threat to EU fauna and flora, with case studies of American bullfrog (Roma catesbelana).- Unpubl. Study report to the European Commission. Ref. nº B4-3040/2001/32066/MAR/E.3. p.1127-1140. (Apud Peris 2012).apudPeris 2012Peris J.C. 2012. Estudo sanitário de Trachemys scripta elegans y Testudo hermanni hermanni en la comunidade Valenciana. Tesis Doctoral, Facultad de Veterinaria, Universidad Cardenal Herrera CEU, Valencia, Espanha. 200p.). Soma-se a estes fatores o fato de que a persistência e a capacidade de invasão tecidual da Salmonella em Trachemys infectadas experimentalmente se mostraram termo dependente, com colonização intestinal à temperatura de 26°C, particularmente do íleo, ceco e cólon, porém sem invasão da parede intestinal seguida de lesões histopatológicas ou colonização interna de órgãos, e a 37°C a colonização do fígado e baço e aumento do número de bactérias no trato intestinal (Pasmans et al. 2002Pasmans F., De Herdt P., Dewulf J. & Haesebrouck F. 2002. Pathogenesis o infections with Salmonella enterica subsp. Enteric serovar Muenchen in the turtle Trachemys scripta elegans. Vet. Microbiol. 87(4):315-325. (Apud Peris 2012).apudPeris 2012Peris J.C. 2012. Estudo sanitário de Trachemys scripta elegans y Testudo hermanni hermanni en la comunidade Valenciana. Tesis Doctoral, Facultad de Veterinaria, Universidad Cardenal Herrera CEU, Valencia, Espanha. 200p.). Considerando as altas temperaturas observadas em Petrolina (PE), cujas médias são de 26,3°C; máximas médias de 32,5°C e máximas absolutas de 44,1°C (INM 2014INM. 2014. Instituto Nacional de Meteorologia. «Série Histórica - Dados Diários - Temperatura Máxima (°C) - Petrolina» Consultado em 10 set. 2016.) era esperado que houvesse colonização e presença de Salmonellas no trato intestinal destes animais.

Bactérias do gênero Enterobacter foram isoladas também em Caretta caretta (Foti et al. 2009Foti M., Giacopello C., Bottari T., Fisichella V., Rinaldo D. & Mammina C. 2009. Antibiotic resistance of Gram negatives isolates from loggerhead sea turtles (Caretta caretta) in the central Mediterranean Sea. Mar. Pollut. Bull. 58(9):1363-1366.), T s. elegans (Peris 2012Peris J.C. 2012. Estudo sanitário de Trachemys scripta elegans y Testudo hermanni hermanni en la comunidade Valenciana. Tesis Doctoral, Facultad de Veterinaria, Universidad Cardenal Herrera CEU, Valencia, Espanha. 200p., Liu et al. 2013Liu D., Wilson C., Hearlson J., Singleton J., Thomas R.B. & Crupper S.S. 2013. Prevalence of antibiotic-resistant gram-negative bacteria associated with the red-eared slider (Trachemys scripta elegans). J. Zoo. Wildl. Med. 44(3):p.666-671.), Phrynops geoffroanus (Ferronato et al. 2009Ferronato B.O., Marques T.S., Souza F.L., Verdade L.M. & Matushima E.R. 2009. Oral bacterial microbiota and traumatic injuries of freeranging Phrynops geoffranus (Testudines, Chelidae) in southeastern Brazil. Phyllom.: J. Herpetol. 8(11):19-25.) e E. aerogenes em tartarugas da Amazônia de vida livre (Meyer Junior 2007Meyer Junior J.C. 2007. Determinação qualitativa de enterobactérias presentes em tartarugas da Amazônia (Podocnemis expansa) de vida livre e cativeiro. Dissertação de Mestrado em Ciência Animal, Universidade Federal do Pará, Belém, PA. 61p.), cloaca de jabutis (Pessoa 2009Pessoa C.A. 2009. Avaliação da microbiota bacteriana e fúngica na cloaca de jabutis (Geochelone carbonaria) criados em domicílio e análise do potencial de risco à saúde humana. Dissertação de Mestrado em Epidemiologia Experimental Aplicada a Zoonoses, Universidade de São Paulo, São Paulo, SP. 96p.) e em Pododermis expansa mantidas em cativeiro (Meyer Junior 2007Meyer Junior J.C. 2007. Determinação qualitativa de enterobactérias presentes em tartarugas da Amazônia (Podocnemis expansa) de vida livre e cativeiro. Dissertação de Mestrado em Ciência Animal, Universidade Federal do Pará, Belém, PA. 61p.). E. aerogenes é um bastonete anaeróbio facultativo, oportunista, que se prolifera em ambientes com pouco ou nenhum oxigênio, tais como esgotos, solo e fezes, podendo provocar bacteremia, osteomielite, pneumonia, septicemia (Watson et al. 2005Watson J.T., Jones R.C., Siston A.M., Fernandez J.R., Martin B.E., Sokalski S., Jensen B.J., Arduino M.J., Srinivasan A. & Gerber S. 2005. Outbreak of catheter-associated Klebsiella oxytoca and Enterobacter cloacae bloodstream infection in an oncology chemotherapy center. Arch. Intern. Med. 165(22):2639-2643.), e também infecções do trato gastrointestinal, respiratório, urinário e da pele (Paterson 2006Paterson D.L. 2006. Resistance in gram-negative bacteria: Enterobacteriaceae. Am. J. Med. 119(6):S20-S28.). O aumento na patogenicidade e da resistência de bactérias do gênero Enterobacter é crescente e tem se tornado uma grande preocupação em saúde pública (Davin-Regli & Pagès 2015Davin-Regli A. & Pagès J.M. 2015. Enterobacter aerogenes and Enterobacter cloacae; versatile bacterial pathogens confronting antibiotic treatment. Front. Microbiol. 6(art. 392):1-10.). Os resultados indicaram que as mostras de E. aerogenes isoladas neste estudo apresentaram alta sensibilidade (> 80%) à gentamicina e enrofloxacina e multirresistência a drogas (MDR), caracterizada como a resistência a três ou mais agentes antimicrobianos, a 66,7% (6/9) dos antimicrobianos testados (Fig.2A). Este último achado reforça a necessidade de educação sanitária e ambiental para pessoas que manejam estes animais, pois a MDR pode ser transmitida aos humanos através da colonização direta do intestino por cepas oriundas dos animais ou pela transmissão de genes de resistência a bactérias residentes no intestino humano (Guimarães et al. 2015Guimarães R.A., Lugo Neto D.F., Saraiva M.M.S., Lima R.P., Barros M.R., Costa M.M., Oliveira C.B. & Stipp D.T. 2015. Caracterização filogenética molecular e resistência antimicrobiana de Escherichia coli isoladas de caprinos neonatos com diarreia. Cienc. Anim. Bras. 16(4):615-622.). Isto se torna mais relevante quando se considera a antibioticoterapia em pacientes graves, pois as cepas de E. aerogenes estão entre as que mais causam problemas nestes (Monteiro 2009Monteiro E.O. 2009. Resistência bacteriana. Rev. Bras. Med. 66:3-6. Disponível em: Disponível em: http://www.moreirajr.com.br/revistas.asp?fase=r003&id_materia=4147. Acesso em 12 set. 2016.
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). Ademais, a MDR impede o êxito da terapêutica empregada, prolonga as internações hospitalares e aumenta a mortalidade dos pacientes (Gaite et al. 2008Gaite F.B., Sáenz A.J., Vidal M.V. & Perelló C. 2008. Nuevas opciones terapêuticas para el tratamiento de las bactérias multirresistentes en Unidades de Cuidados Intensivos. Rev. Esp. Quimioter. 21:9-13.).

Embora Shigella spp raramente seja associada com tartarugas, Liu et al. (2013)Liu D., Wilson C., Hearlson J., Singleton J., Thomas R.B. & Crupper S.S. 2013. Prevalence of antibiotic-resistant gram-negative bacteria associated with the red-eared slider (Trachemys scripta elegans). J. Zoo. Wildl. Med. 44(3):p.666-671. também as isolaram das amostras de swab cloacal (23,9%) de T. s. elegans capturadas no estado do Kansas; Morais et al. (2011)Morais P.B., Souza D.R., Sousa F.M.P., Oliveira K.W. & Pimenta R.S. 2011. Enterobacteriaceae in mouth and cloaca of Podocnemis expansa and P. unifilis (Testudines: Chelonia) populations of National Park of Araguaia plains, Brazil. Braz. J. Microbiol. 42(2):526-530. isolaram Shigella flexnerii na cloaca de P. expansa e Podocnemis unifilis adultos em quatro praias do Rio Javaés, fronteira do Parque Nacional do Araguaia; e Mahmoud et al. (2008)Mahmoud I.Y., Al-Zadjali M., Al-Bahry S.N., Elshafie A., Alkindi A.Y., Al-Alawi W., Al-Harthy A. & Khan T. 2008. Multiple antibiotic resistant gram negative bacteria from the oviductal fluid of the green turtles (Chelonia mydas) during egg laying. NOAA Technical Memorandum NMFS SEFSC [NOAA Tech. Mem. NMFS SEFSC] 569:22. isolaram Shigella spp. do fluido ovidutal de Chelonya midas. Shigella spp. é um bastonete (bacilo) imóvel, habitante do trato intestinal humano, tem como reservatório o intestino grosso de animais doentes, convalescentes ou assintomáticos e a principal via de transmissão é a fecal-oral ou fômites. Ainda que sua dose infecciosa seja baixa, ou seja, a ingestão de poucas dezenas de células é suficiente para causar a infecção, seu crescimento em alimentos é pouco relevante, porém portadores de Shigelose desenvolvem diarreia, febre, dores de estômago a partir de um ou dois dias após a exposição às bactérias. Outro fator relevante reside no fato de que mesmo quando a pessoa infectada não apresenta os sintomas ela ainda pode transmitir a bactéria a outras pessoas (Kenneth 2012Kenneth T. 2012. Shigella and Shigellosis. Todar’s Online Textbook of Bacteriology. Disponível em <Disponível em http://textbookofbacteriology.net/Shigella.html > Acesso em 12 set. 2015.
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). A shigelose é considerada uma importante causa de diarreia aguda em todo o mundo, tanto por sua alta prevalência, como pela gravidade da doença (Orrett 2008Orrett F.A. 2008. Prevalence of Shigella serogroups and their antimicrobial resistance patterns in southern Trinidad. J. Health Popul. Nutr. 26(4):456-62., Kosek et al. 2010Kosek M., Yori P.P. & Olortegui M.P. 2010. Shigellosis update: advancing antibiotic resistance, investment empowered vaccine development, and green bananas. Curr. Opin. Infect. Dis. 23(5):475-80., Moreno 2010Moreno A.C., Filho A. F., Gomes T. do A., Ramos S.T., Montemor L.P., Tavares V.C., Filho L dos. S., Irino K. & Martinez M.B. 2010. Etiology of childhood diarrhea in the northeast of Brazil: significant emergent diarrheal pathogens. Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 66(1):50-57.). Neste estudo, as bactérias do gênero Shigella spp não apresentaram resistência à gentamicina; tiveram sensibilidade e resistência equivalentes para doxicilina, eritromicina, ampicilina, penicilina, cefalexina e sulfazotrim e não apresentaram resistência à estreptomicina e enrofloxacina. Liu et al. (2013)Liu D., Wilson C., Hearlson J., Singleton J., Thomas R.B. & Crupper S.S. 2013. Prevalence of antibiotic-resistant gram-negative bacteria associated with the red-eared slider (Trachemys scripta elegans). J. Zoo. Wildl. Med. 44(3):p.666-671. também não observaram resistência a gentamicina, todavia 80% dos isolados de Shigella foram resistentes ao imipenem, cefalotina, ampicilina-sulbactam e ampicilina.

Edwardsiella spp não é rara em ambientes aquáticos (Janda & Abbott 2006Janda J.M. & Abbott S.L. 2006. The enterobactérias. 2.ed. American Society for Microbiology, Washington, DC. 411p.), sendo comum na microbiota intestinal normal de animais aquáticos (Moraes & Martins 2004Moraes F.R. & Martins M.L. 2004. Condições predisponentes e principais enfermidades de teleósteos em piscicultura intensiva, p.343-386. In: Cyrino J.E.P., Urbinati E.C., Fraca Lossi D.M. & Castagnolli N. (Eds), Tópicos especiais em Piscicultura de água doce tropical intensiva. TecArt, São Paulo ., Leotta et al. 2009Leotta G.A., Piñeyro P., Serena S. & Vigo G.B. 2009. Prevalence of Edwardsiella tarda in Antarctic wildlife. Polar Biol. 32(5):809-812., Nimmervoll et al. 2011Nimmervoll H., Wenker C., Robert N. & Albini S. 2011. Septicemia caused by Edwardsiella tarda and Plesiomonas in captive penguin chicks. Schw. Arch. Tierh. 153(3):117-121.) e em fezes humanas (Moraes & Martins 2004Moraes F.R. & Martins M.L. 2004. Condições predisponentes e principais enfermidades de teleósteos em piscicultura intensiva, p.343-386. In: Cyrino J.E.P., Urbinati E.C., Fraca Lossi D.M. & Castagnolli N. (Eds), Tópicos especiais em Piscicultura de água doce tropical intensiva. TecArt, São Paulo .), assim como de cobras, rãs, tartarugas e aves (Costa 2004Costa A.B. 2004. Estratégias para o estudo de bactérias potencialmente patogênicas na piscicultura, p.387-403. In: Cyrino J.E.P., Urbinati E.C., Fracalossi D.M. & Castagnolli N. (Eds), Tópicos especiais em piscicultura de água doce tropical intensiva. TecArt, São Paulo.). Este patógeno ocorre também no sedimento e na água dos tanques de criação, se manifestando quando os hospedeiros em situação de estresse se encontram na presença de grande quantidade de matéria orgânica na água (Albinati et al. 2006Albinati A.C.L., Albinati R.C.B., Oliveira E.M.D., Laborda S.S. & Vidal L.V.O. 2006. Edwardsielose em Tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus). Rev. Bras. Saúde Prod. Anim. 7(2):164-168.). Edwardsiella tarda e Edwardsiella hoshinae foram isoladas da cavidade oral de P. geoffroanus (Ferronato et al. 2009Ferronato B.O., Marques T.S., Souza F.L., Verdade L.M. & Matushima E.R. 2009. Oral bacterial microbiota and traumatic injuries of freeranging Phrynops geoffranus (Testudines, Chelidae) in southeastern Brazil. Phyllom.: J. Herpetol. 8(11):19-25.), da cloaca de jabutis-piranga (Benites et al. 2013Benites N.R., Pessoa C., Bandini L., Saidenberg A., Moreno A., Sakata S., Gomes C. & Melville P. 2013. Microbiota bacteriana e fúngica presentes na cloaca de Jabutis-piranga (Geochelone carbonaria) criados em domicílio. Vet. e Zootec. 20(1):102-110.) e em P. expansa de vida livre e de cativeiro (Meyer Junior 2007Meyer Junior J.C. 2007. Determinação qualitativa de enterobactérias presentes em tartarugas da Amazônia (Podocnemis expansa) de vida livre e cativeiro. Dissertação de Mestrado em Ciência Animal, Universidade Federal do Pará, Belém, PA. 61p.). Dentre as espécies de Edwardisiella, a E. tarda é a mais importante, mais isolada e a única reconhecidamente patogênica para humanos, nos quais pode causar distúrbios intestinais e extra intestinais (Arya et al. 2011Arya A.V., Rostom A., Dong W.F. & Flynn A.N. 2011. Crohn’s disease exacerbation induced by Edwardsiella tarda gastroenteritis. Case Rep. Gastroenterolog. 5(3):623-627.), como infecções no aparelho reprodutor feminino (Mikano et al. 2003Mikano H., Ninomiya M., Sawamura H. & Tamaya T. 2003. Puerperal intrauterine infection caused by Edwardsiella tarda. J. Infec. Cemoth. 9:341-343.). As bactérias do gênero Edwardisiella spp. isoladas neste estudo não apresentaram resistência à gentamicina, mas apresentaram multirresistência a todos os demais antimicrobianos testados (89%, 8/9) (Fig.2C). Este achado ressalta a importância de medidas profiláticas ao se manter contato com estes animais, pois a resistência bacteriana é o ponto crítico na antibioticoterapia de pacientes graves (Monteiro 2009Monteiro E.O. 2009. Resistência bacteriana. Rev. Bras. Med. 66:3-6. Disponível em: Disponível em: http://www.moreirajr.com.br/revistas.asp?fase=r003&id_materia=4147. Acesso em 12 set. 2016.
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).

As Enterobacteriaceae isoladas neste estudo eram parte do microbiota cloacal dos animais estudados, corroborando com Morais et al. (2011)Morais P.B., Souza D.R., Sousa F.M.P., Oliveira K.W. & Pimenta R.S. 2011. Enterobacteriaceae in mouth and cloaca of Podocnemis expansa and P. unifilis (Testudines: Chelonia) populations of National Park of Araguaia plains, Brazil. Braz. J. Microbiol. 42(2):526-530. e discordando de David et al. (2009)David O.M., Wandili B., Kakai R. & Waindi E.N. 2009. Isolation of Salmonella and Shigella from fish harvested from the west gulf of Lake Victoria, Kenya. JIDC 3:99-104., que associaram o isolamento de Shigella em peixes à poluição da água. Contudo, mesmo que estas bactérias não fossem patogênicas para as tartarugas estudadas, pois as mesmas não apresentavam sinais de doença, as bactérias isoladas são patogênicas tanto para répteis quanto para humanos, requerendo cuidados no seu manuseio.

A evolução das bactérias, pela mutação espontânea e recombinação de genes, cria variabilidade genética sobre a qual atua a seleção natural aos mais aptos e resistentes aos antimicrobianos (Andrade 2002Andrade S.P. 2002. Manual de terapêutica veterinária. 2ª ed. Rocca, São Paulo.). Esta resistência é um dos grandes problemas da medicina, tanto humana quanto animal, pois a possibilidade de transferência de bactérias resistentes dos animais ao homem é real e de extrema importância para a saúde pública (Guimarães et al. 2015Guimarães R.A., Lugo Neto D.F., Saraiva M.M.S., Lima R.P., Barros M.R., Costa M.M., Oliveira C.B. & Stipp D.T. 2015. Caracterização filogenética molecular e resistência antimicrobiana de Escherichia coli isoladas de caprinos neonatos com diarreia. Cienc. Anim. Bras. 16(4):615-622.). Dezenove isolados apresentaram o fenótipo de multirresistência, ou seja, além da resistência aos β-lactâmicos (penicilina e/ou cefalexina) foram resistentes a outras três classes de drogas, concordando com Idrees et al. (2009)Idrees F., Jabeen K., Khan M. & Zafar A. 2009. Antimicrobial resistance profile of methicillin resistant staphylococcal aureus from skin and soft tissue isolates. J.P.M.A. 59(5):266-269.. As drogas não β- lactâmicas para as quais um maior número de isolados foi resistente foram eritromicina, ampicilina, sulfazotrim e doxicilina. Germino et al. (2008)Germino G.F.S., Franco I., Peixoto R.M., Seabra A.G.L., Gamosa E.A., Dutra V., Krewer C.C. & Costa M.M. 2008. Isolamento e sensibilidade aos antimicrobianos de isolados de répteis mantidos em cativeiro em Petrolina-PE. Disponível em <Disponível em http://www.sovergs.com.br/conbravet2008/anais/cd/resumos/R0579-3.pdf. > Acesso em 15 set. 2015.
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observaram resistência em todos os isolados das cavidades bucal e cloacal de serpentes, jacaré e jabutis.

Neste estudo as bactérias Gram-negativas isoladas foram sensíveis à gentamicina, a qual pode constituir-se em uma excelente alternativa para o tratamento de infecções causadas por estes patógenos. Foram também sensíveis, na sequência, à enrofloxacina e estreptomicina e resistentes à ampicilina; cefalexina; penicilina e eritromicina. Germino et al. (2008)Germino G.F.S., Franco I., Peixoto R.M., Seabra A.G.L., Gamosa E.A., Dutra V., Krewer C.C. & Costa M.M. 2008. Isolamento e sensibilidade aos antimicrobianos de isolados de répteis mantidos em cativeiro em Petrolina-PE. Disponível em <Disponível em http://www.sovergs.com.br/conbravet2008/anais/cd/resumos/R0579-3.pdf. > Acesso em 15 set. 2015.
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observaram resistência em todos os isolados das cavidades bucal e cloacal de serpentes, jacaré e jabutis. A alta sensibilidade à gentamicina concordou com Liu et al. (2013)Liu D., Wilson C., Hearlson J., Singleton J., Thomas R.B. & Crupper S.S. 2013. Prevalence of antibiotic-resistant gram-negative bacteria associated with the red-eared slider (Trachemys scripta elegans). J. Zoo. Wildl. Med. 44(3):p.666-671. que não observaram resistência à gentamicina nas bactérias isoladas de T. s. elegans e discordou de Ebani et al. (2005)Ebani V.V., Cerri D., Fratini F., Meille N., Valentini P. & Andreani E. 2005. Salmonella enterica isolates from feces of domestic reptiles and a study of their antimicrobial in vitro sensibility. Res. Vet. Sci. 78(2):117-121., que observaram em répteis grande proporção de isolados resistentes à mesma.

Á exceção do único isolado de Edwardsiella spp. (100%), a resistência a enrofloxacina, uma quinolona de segunda geração ampla e restritamente utilizada na Medicina Veterinária (Spinosa et al. 2002Spinosa H.S., Górniak S.L. & Bernardi M.M. 2002. Farmacologia aplicada à medicina veterinária. 3ª ed. Guanabara Koogan, Rio de Janeiro.), foi muito baixa (7% para E. aerogenes e 0% para Shigella spp.), podendo constituir-se numa alternativa para o tratamento de infecções causadas por estes patógenos. Estes resultados concordaram com os de Ebani et al. (2005)Ebani V.V., Cerri D., Fratini F., Meille N., Valentini P. & Andreani E. 2005. Salmonella enterica isolates from feces of domestic reptiles and a study of their antimicrobial in vitro sensibility. Res. Vet. Sci. 78(2):117-121. e Lopes (2008)Lopes L.F.L. 2008. Salmonella sp em répteis e aves silvestres no estado e São Paulo: frequência de isolamento, caracterização dos isolados e as consequências para o manejo em cativeiro e introdução. Dissertação de Mestrado em Patologia Experimental e Comparada, Universidade de São Paulo, São Paulo, SP. 123p. que observaram em répteis poucos isolados resistentes a enrofloxacina.

O amplo uso da ampicilina na medicina veterinária, particularmente no tratamento de infecções causadas por bactérias Gram-negativas, pode ser a causa de seu baixo desempenho neste estudo. Resistência à penicilina foi também descrita por Germino et al. (2008)Germino G.F.S., Franco I., Peixoto R.M., Seabra A.G.L., Gamosa E.A., Dutra V., Krewer C.C. & Costa M.M. 2008. Isolamento e sensibilidade aos antimicrobianos de isolados de répteis mantidos em cativeiro em Petrolina-PE. Disponível em <Disponível em http://www.sovergs.com.br/conbravet2008/anais/cd/resumos/R0579-3.pdf. > Acesso em 15 set. 2015.
http://www.sovergs.com.br/conbravet2008/...
. Segundo Davin-Regli & Pagès (2015)Davin-Regli A. & Pagès J.M. 2015. Enterobacter aerogenes and Enterobacter cloacae; versatile bacterial pathogens confronting antibiotic treatment. Front. Microbiol. 6(art. 392):1-10. a resistência aos antimicrobianos, em especial aos Beta-Lactâmicos, é algo crescente e preocupante em E. aerogenes, dada a versatilidade destes micro-organismos em detectar e responder à presença das drogas antimicrobianas presentes no meio onde se encontram.

Segundo Srinivisan et al. (2007)Srinivisan V., Gillespie B.E., Lewis M.J., Nguyen L.T., Headrick S.I., Schukken Y.H. & Oliver S.P. 2007. Phenotypic and genotypic antimicrobial resistance patterns of Escherichia coli isolated from dairy cows with mastitis. Vet. Microbiol. 124(3):319-328., os exemplos de aumento da resistência aos antimicrobianos em diversas espécies animais são inúmeros, inclusive até a antimicrobianos de uso humano. Este fato é preocupante, pois as bactérias isoladas podem ser reservatório de genes resistentes e disseminar esta resistência às bactérias patogênicas e comensais. O uso abusivo de antimicrobianos em seres humanos e animais são responsáveis pelo desenvolvimento de resistência (Singer et al. 2003Singer R.S., Finch R., Wegener H.C., Bywater R., Walters J. & Lipsitich M. 2003. Antibiotic resistance - the interplay between antibiotic use in animals and human beings. Lancet Inf. Dis. 3(1):47-51., Beovic 2006Beovic B. 2006. The issue of antimicrobial resistance in human medicine. Int. J. Food Microbiol. 112(3):280-287.). Contudo, deve-se ter em mente que a resistência aos antimicrobianos é um problema multifacetado, cuja solução requer esforços ativos (Umber & Bender 2009Umber J.K. & Bender J.B. 2009. Pets and antimicrobial resistance. Vet. Clin. N. Am. Small Anim. Pract. 39(2):279-292.). Assim, deve ser considerada a epidemiologia das bactérias, a interação entre seres humanos e animais, o uso correto de antimicrobianos em todas as espécies e a aplicação de princípios gerais de controle de infecção (Weese & Duijkeren 2010Weese J.S. & Van Duijkeren E. 2010. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus and Staphylococcus pseudointermedius in veterinary medicine. Vet. Microbiol. 140(3):418-429., Woolhouse et al. 2015Woolhouse M., Ward M., Van Bunnik B. & Farrar J. 2015. Antimicrobial resistance in humans, livestock and the wider environment. Philos. Trans. R. Soc. Lond. B.Biol. Sci. 5(artigo 370):1-7.). Além disto, a água pode se constituir num excelente meio para transferência de genes de resistência e seleção de micro-organismos resistentes, os quais podem facilmente alcançar os seres humanos (Cantas et al. 2013Cantas L., Shah S.Q., Cavaco L.M., Manaia C.M., Walsh F., Popowska M., Garelick H., Bürgmann H. & Sørum H. 2013. A brief multi-disciplinary review on antimicrobial resistance in medicine and its linkage to the global environmental microbiota. Front. Microbiol. 4(artigo 96):1-14.). Soma-se a estas medidas a utilização dos fármacos em doses corretas e por tempo adequado somente após o conhecimento dos agentes infecciosos por meio do isolamento bacteriano e o uso de testes de sensibilidade antimicrobiana (Mateu & Martin 2001Mateu E. & Martin M. 2001. Why is anti-microbial resistance a veterinary problem as well? J. Vet. Med. Ser. B-Infect. Dis. Vet. Public Health 48(8):569-581. (Apud Arias & Carrilho 2012).).

Conclusões

A participação da T. s. elegans na cadeia epidemiológica, como reservatório de alguns patógenos importantes como Enterobacter aerogenes, Shigella spp. e Edwardisiella spp., ressalta a importância da adoção de medidas preventivas pelo risco zoonótico que apresentam e corretas de tratamento e de controle em cativeiros e domicílios.

É indispensável também a realização de estudos que enfoquem as características de sensibilidade e de resistência antimicrobiana dos isolados, pois a multirresistência às drogas pode ser transmitida aos humanos e comprometer o tratamento de indivíduos com doenças graves.

O não isolamento de Salmonella deveria ser mais bem investigado visto que por sua origem e pelas condições climáticas em Petrolina-PE seria esperada a colonização e presença deste patógeno no trato intestinal destes quelônios.

Agradecimentos

Ao CETA pela doação dos animais.

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Datas de Publicação

  • Publicação nesta coleção
    Mar 2017

Histórico

  • Recebido
    24 Out 2015
  • Aceito
    13 Out 2016
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