Fungos microscópicos da Mata Atlântica de Paranapiacaba, São Paulo, Brasil

Fungos microscópicos da Mata Atlântica de Paranapiacaba, São Paulo, Brasil¹

IRACEMA HELENA SCHOENLEIN-CRUSIUS² e ADAUTO IVO MILANEZ²

(recebido em 02/05/96; aceito em 18/06/97)

ABSTRACT - (Microscopical fungi of the Atlantic rainforest of Paranapiacaba, São Paulo, Brazil). In the Atlantic rainforest of Paranapiacaba, state of São Paulo, 1770 occurrences of different fungal taxa were registered from July 1988 to May 1990. For stream water 319 occurrences were reported, 405 for the soil, 565 on submerged leaves of Alchornea triplinervia (Spreng.) M. Arg., and 481 on leaves placed on the soil surface. Mastigomycotina was represented by 20 taxa with 316 occurrences, Zygomycotina by 13 taxa with 266 occurrences, Deuteromycotina by 82 taxa with 1107 occurrences, and Ascomycotina by eight taxa with 81 records. The fungi were isolated by the leaf disk washing method, soil plate method, and baiting with chitinic, cheratinic and cellulosic substrates. The decomposing leaves of A. triplinervia supported the highest number of fungal taxa and total occurrences, followed by the soil and stream water.

RESUMO - (Fungos microscópicos da Mata Atlântica de Paranapiacaba, São Paulo, Brasil). Na Mata Atlântica de Paranapiacaba, no estado de São Paulo, 1770 ocorrências de diferentes táxons de fungos foram registradas de julho de 1988 a maio de 1990. Para a água do riacho foram reportadas 319 ocorrências, 405 para o solo, 565 em folhas submersas de Alchornea triplinervia (Spreng.) M. Arg. e 481 em folhas dispostas sobre o solo. Mastigomycotina representou 316 ocorrências com 20 espécies, Zygomycotina 266 ocorrências com 13 espécies, Deuteromycotina 1107 ocorrências com 82 táxons e Ascomycotina 81 ocorrências com oito espécies. Os fungos foram isolados pelos métodos da lavagem de discos de folhas, placa de solo e iscagem utilizando substratos quitínicos, queratínicos e celulósicos. As folhas de A. triplinervia suportaram o maior número de táxons e de ocorrências de fungos, seguidas pelo solo e pela água do riacho.

Key words - Fungi, Atlantic rainforest, diversity

Introdução

Na Reserva Biológica de Paranapiacaba, SP, foram realizados diversos estudos sobre fungos, porém têm sido poucos os resultados publicados. Entre os principais estudos conduzidos na região, que efetivamente contribuíram para o conhecimento da diversidade da micota nativa, destacam-se aqueles relativos aos fungos micorrízicos do solo (Trufem &Viriato 1990) e aos Hyphomycetes associados a folhas de Alchornea triplinervia (Spreng.) M. Arg. e de Euterpe edulis Mart. (Grandi 1993). Antunes et al. (1993) constataram o rápido poder de recuperação da diversidade dos fungos do solo da Mata Atlântica de Paranapiacaba, acidentalmente submetido ao fogo.

No ambiente aquático foram estudados os fungos zoospóricos (Rogers et al. 1970) e os Hyphomycetes (Schoenlein-Crusius & Milanez 1990 a,b). Posteriormente, Schoenlein-Crusius et al. (1992) compararam a micota zoospórica e a de Hyphomycetes aquáticos em folhas submersas de Alchornea triplinervia, Ficus microcarpa e Quercus robur, sendo abordados aspectos qualitativos da diversidade dos fungos. Mais recentemente, Pires-Zottarelli et al. (1993) apresentaram método para estimar o potencial de colonização de fungos decompositores.

O objetivo do presente artigo é apresentar metodologia e dados globais sobre a distribuição dos fungos, em termos de ocorrências e grupos taxonômicos registrados para os substratos utilizados nos diferentes ambientes estudados na Reserva Biológicade Paranapiacaba (SP).

Material e métodos

A Reserva Biológica de Paranapiacaba, SP, localizada no município de Santo André, a 23º46'S, 46º18'W e 750-890 m de altitude, possui 336 ha e está sob a responsabilidade do Instituto de Botânica. Apresenta clima do tipo Cfb segundo o sistema de Köppen, com precipitações anuais em torno de 3400 mm e umidade relativa próxima a 100%. Segundo Setzer (1966) a temperatura média nos meses mais frios (junho/julho) é inferior a 18ºC e permanece abaixo de 22ºC nos meses mais quentes (janeiro/fevereiro). O elevado índice de precipitação durante todo o ano caracteriza o clima como super-úmido, sem estações secas (Funari et al. 1986).

No presente trabalho considerou-se Mata Atlântica a vegetação que se desenvolveu sobre toda a cadeia montanhosa justamarítima e de planalto, que se estende desde o Rio Grande do Sul até o extremo nordeste (Rizzini 1979). Descrições detalhadas sobre as características da vegetação são apresentadas por Coutinho (1962) e De Vuono et al. (1989).

Para estudar os fungos no ambiente aquático, foi escolhido um dos riachos que percorre toda a Reserva, sendo que o trecho amostrado apresenta distância aproximada de 4 m entre as margens, profundidade média de 80 a 100 cm na época chuvosa (dezembro a fevereiro) e de 30 a 50 cm na época de menores índices pluviométricos (junho a agosto). O leito é arenoso e macio. A água apresenta-se transparente, porém não é potável, apresentando em torno de 300 bactérias coliformes fecais por 100 ml de amostra, segundo exames realizados pelo Instituto Adolfo Lutz e CETESB, em maio de 1988 e de 1989. No presente trabalho foram escolhidos cinco pontos de coleta ao longo do riacho, com distância de aproximadamente 50 m entre eles, demarcados por estacas.

Também foram escolhidas cinco áreas de 50 m² próximas ao riacho para o estudo dos fungos no ambiente terrestre.

Em junho de 1988 e de 1989, folhas recém-caídas de Alchornea triplinervia (Spreng.) M. Arg., uma das espécies mais abundantes na Reserva, foram coletadas em peneiras de tela de náilon e em sacos plásticos abertos, estendidos e amarrados entre as árvores. Estas folhas foram triadas, divididas em amostras de 20 g e confinadas em 400 sacos de tela de náilon com 20 cm de comprimento, 20 cm de largura e malha com 1 mm de diâmetro. Duzentos sacos foram distribuídos nos cinco pontos de coleta ao longo do riacho, sendo que 40 unidades foram amarradas na base de cada estaca. Procedimento semelhante foi conduzido no ambiente terrestre, distribuindo-se 40 sacos contendo folhas sobre a superfície de cada área pré-definida.

As coletas mensais de 15 sacos contendo folhas do ambiente terrestre, 15 sacos contendo folhas submersas, cinco amostras compostas de solo (aproximadamente 300 g de cada área demarcada) e cinco amostras compostas de água do riacho (aproximadamente 250 ml de cada ponto) foram realizadas em dois períodos, sendo o primeiro de julho de 1988 a junho de1989 e a repetição, de julho de 1989 a maio de 1990.

As folhas submersas e as dispostas sobre o solo foram coletadas mensalmente e tratadas pela técnica de lavagem de discos de folhas (Pugh et al. 1972), que consiste em lavar os discos com diâmetro de 5 mm (500 unidades no presente estudo), com água destilada estéril (50 ml) sucessivamente por 30 vezes, eliminando propágulos aderidos à superfície foliar. Após a lavagem, os discos foram enxutos em folhas de papel de filtro previamente esterilizadas e dispostos de modo eqüidistante em 20 placas de Petri (cada uma com cinco discos), onde foram colocados um dos seguintes meios de cultura: batatadextrose-ágar (Difco Manual 1972), amido-ágar (Coelho &Drozdowicz 1976 in Costa 1983), celulose-ágar (Eggins & Pugh 1962) e pectina-ágar (Difco Manual 1972), perfazendo 80 placas de Petri contendo discos de folhas submersas e 80 placas contendo discos de folhas coletadas do solo.

Vinte discos de folhas também foram incubados em água destilada estéril contendo iscas para fungos quitinofílicos (iscas de ecdise de cobra e exoesqueleto de camarão), queratinofílicos (iscas de fios de cabelo loiro) e celulolíticos (iscas de palha de milho e celofane). Para fungos zoospóricos que apresentam afinidade por substâncias de reserva foram utilizados grãos de pólen de Pinus sp. e para o isolamento dos Oomycetes (Mastigomycotina) os discos de folhas foram colocados em contato com sementes de sorgo, partidas ao meio, previamente fervidas (Milanez 1984). Foram preparadas cinco placas de Petri contendo as iscas com os discos de folhas coletadas do solo e cinco com os discos de folhas submersas.

Alíquotas de 1 ml das amostras compostas de água do riacho foram distribuídas em 40 placas de Petri, dez unidades para cada um dos meios de cultura utilizados para o isolamento dos fungos das folhas, adaptando-se analogamente a técnica de Warcup (1950). Também foram preparadas cinco placas de Petri contendo 10 ml de cada uma das amostras de água do riacho, adicionando-se as iscas quitínicas, queratínicas e celulósicas para isolar os fungos zoospóricos (Mastigomycotina).

Para isolar os fungos das cinco amostras compostas de solo foi utilizado o método da placa de solo (Warcup 1950), modificado pela diluição das alíquotas. Foram preparadas 40 placas de solo utilizando-se os mesmos meios de cultura empregados para as folhas submersas e as dispostas sobre o solo, bem como cinco placas de Petri, cada uma contendo 1 g de amostra composta, aproximadamente 10 ml de água destilada estéril e o conjunto de substratos quitínicos, queratínicos e celulósicos para o isolamento de fungos zoospóricos.

Após sete dias à temperatura ambiente (20 a 25ºC), as colônias que se desenvolveram ao redor dos discos de folhas, nas placas de solo e nas das alíquotas de água, foram transferidas para novo meio de cultura. As iscas começaram a ser observadas ao microscópio óptico após o quinto dia de crescimento. Os substratos colonizados por fungos zoospóricos foram transferidos para placas de Petri contendo água destilada estéril e novos substratos.

As identificações dos fungos foram realizadas com o apoio da bibliografia corrente para Mastigomycotina, Zygomycotina, Ascomycotina e Deuteromycotina mencionada em Schoenlein-Crusius (1993).

Após as identificações, as colônias foram repicadas em tubos contendo meios de cultura específicos para cada grupo e armazenados em geladeira a 4ºC na Coleção de Culturas da Seção de Micologia e Liquenologia do Instituto de Botânica.

As ocorrências apresentadas referem-se a presença do fungo no substrato, independentemente do número de colônias observadas do mesmo, durante a fase de isolamento.

Com base nas ocorrências totais dos fungos nos diferentes ambientes e substratos, foi calculado o índice de similaridade de Morisita (Brown & Zar 1984).

Resultados e Discussão

O experimento conduzido na Reserva Biológica de Paranapiacaba resultou no registro de 1770 ocorrências de fungos (tabela 1). As folhas submersas apresentaram maior número de ocorrências, seguido pelas folhas do ambiente terrestre, o solo e a água do riacho. O número total de táxons isolados apresentou-se maior nas folhas submersas, seguido pelas folhas colocadas sobre o solo, água e solo, o que sugere que as folhas, especialmente as submersas, ofereceram condições favoráveis para a colonização por fungos. Este resultado ressalta a importância das mesmas como fonte de nutrientes e inóculo para o ambiente aquático (Barlocher & Kendrick 1974).

Do número total de ocorrências, 1107 corresponderam a Deuteromycotina, 266 a Zygomycotina, 316 a Mastigomycotina (incluindo Chytridiomycetes e Oomycetes) e 81 a Ascomycotina. O número total de táxons foi 123, sendo 82 pertencentes a Deuteromycotina, 13 a Zygomycotina, 20 a Mastigomycotina (incluindo Chytridiomycetes e Oomycetes) e oito a Ascomycotina (tabela 1).

O predomínio de Deuteromycotina em termos de diversidade e ocorrência tem sido freqüentemente reportado em diversos ecossistemas, como a mata de planalto do Parque Estadual das Fontes do Ipiranga, São Paulo (Schoenlein-Crusius & Milanez 1989, Ninomiya et al. 1993), a mata da região de Itapecerica da Serra (Schoenlein-Crusius et al. 1990) e a Mata Atlântica da Reserva de Juréia-Itatins, São Paulo (Attili 1994, Garlipp 1995). Incluídos em Deuteromycotina, a presença de diversos Hyphomycetes tem sido observada sobre folhas em decomposição de Cedrella fissilis Vell. em Maringá, PR (Grandi & Gusmão, 1995) e em mata secundária em São Paulo (Grandi et al. 1995).

O predomínio de Deuteromycotina em substratos em decomposição no ambiente terrestre foi verificado em folhedo na mata pluvial em Pernambuco (Maia 1983) e na sucessão fúngica em folhas de Ocotea pulchella (Nees) Mez no cerrado de Corumbataí (Schoenlein-Crusius & Tauk 1991), em que mais de 80% da micota constituiu-se de gêneros de Hyphomycetes.

Os resultados obtidos estão de acordo com os de Attili (1994) que isolou 67 táxons de fungos celulolíticos do solo, da Reserva Ecológica Juréia-Itatins, sendo 55 de Deuteromycotina, dez de Ascomycotina e dois de Zygomycotina. Na mesma região, Garlipp (1995) isolou 63 táxons, distribuídos em 59 de Deuteromycotina, três de Zygomycotina e um representante de Ascomycotina, de amostras de solo.

Antunes et al. (1993) isolaram 32 táxons, distribuídos em 12 de Deuterormycotina, dez de Zygomycotina, dois de Ascomycotina e oito de Mastigomycotina do solo na Mata Atlântica de Paranapiacaba, enquanto Ninomiya et al. (1993) obtiveram 30 táxons distribuídos em 22 de Deuteromycotina, sete de Mastigomycotina e um de Ascomycotina no solo da mata de planalto do Parque Estadual das Fontes do lpiranga.

Os resultados encontrados para as folhas de A. triplinervia submersas (tabela 1) são comparáveis aos observados em folhas de Ficus microcarpa L. f. submersas em um lago no Parque Estadual das Fontes do lpiranga, com o isolamento de 30 táxons, sendo 16 fungos imperfeitos terrestres, quatro tetrarradiados (Deuteromycotina), oito fungos zoospóricos (Mastigomycotina) e duas espécies de Zygomycotina (Schoenlein-Crusius & Milanez 1989). Em folhas de Quercus robur L. foram encontrados 36 táxons, sendo 17 Hyphomycetes terrestres, oito Hyphomycetes aquáticos (Deuteromycotina), três espécies de Zygomycotina e oito fungos zoospóricos (Mastigomycotina) (Schoenlein-Crusius et al. 1990).

Nas folhas de A. triplinervia colocadas sobre o solo foram encontradas 305 ocorrências de Deuteromycotina, 102 de Zygomycotina, 49 de Mastigomycotina e 25 de Ascomycotina. Foram isolados 74 táxons sendo 48 de Deuteromycotina, 13 de Zygomycotina, nove de fungos zoospóricos e quatro Ascomycotina (tabela 1). Grandi (1993) obteve 37 táxons de Hyphomycetes sobre folhas de A. triplinervia e E. edulis na mesma região. O número de ocorrências e de táxons de fungos imperfeitos (Deuteromycotina) encontrados no presente estudo pode ter sido maior devido ao uso de metodologias que permitem o desenvolvimento de fungos esporulantes sobre os meios de cultura, o que normalmente se traduz na ampliação da diversidade da micota obtida.

Segundo o índice de Morisita o maior índice de similaridade (83%) foi encontrado entre a micota da água e a das folhas submersas, enquanto o menor índice (74%) foi encontrado entre a micota da água e a do solo. As micotas das folhas colocadas no solo e as submersas apresentaram similaridade de 81%. A micota aquática e a das folhas colocadas sobre o solo apresentaram 76% de similaridade. A micota do solo apresentou 75% de similaridade em relação à micota das folhas colocadas no ambiente terrestre e 76% de semelhança com a micota das folhas submersas no riacho. Segundo Christensen (1989), índices de similaridade em torno de 70% podem ser considerados elevados, indicando proximidade entre as populações fúngicas. No entanto, considera-se que ainda há falta de dados cumulativos para as regiões de clima tropical, que possam indicar o significado dos índices de similaridade encontrados. A diversidade dos fungos em Paranapiacaba pode ser considerada elevada, o que confirma, pelo menos em parte, a adequação da metodologia utilizada para estudos de biodiversidade da micota nativa.

2. Instituto de Botânica, Caixa Postal 4005, 01061-970 São Paulo, SP, Brasil.

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1

. Parte da tese de doutorado de I. H. Schoenlein-Crusius.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  13 Set 2010
• Data do Fascículo
  Abr 1998