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Resistência por antibiose de Lycopersicon peruvianum à traça do tomateiro

Antibiosis resistance of Lycopersicon peruvianum to tomato leafminer

Resumos

Este trabalho foi realizado em casa de vegetação na Universidade Federal de Viçosa e objetivou estudar a resistência por antibiose do acesso CNPH 101 de Lycopersicon peruvianum a traça do tomateiro Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae) e as possíveis causas químicas desta resistência. Os tratamentos foram as espécies de tomateiro Lycopersicon esculentum (cvs. IPA-5 e Santa Clara: padrões de suscetibilidade) e o acesso de L. peruvianum. As características avaliadas foram: mortalidade larval, peso de pupas e proporção sexual, duração das fases larval e pupal e números de ovos/fêmea de T. absoluta. Realizou-se extração hexânica nas folhas e os extratos obtidos foram submetidos a cromatografia gasosa associada a espectrômetro de massa. O acesso CNPH 101 de L. peruvianum apresentou resistência a T. absoluta afetando a mortalidade larval e duração da fase pupal. Duas substâncias (provavelmente o 4-metil-2,6-di-tert-butilfenol e outra com tempo de retenção 18,8 min. no cromatograma) estiveram associadas ao fato de que L. esculentum é mais suscetível a T. absoluta do que L. peruvianum. Foram detectadas duas substâncias associadas a plantas da cultivar Santa Clara (provavelmente o transcarofileno) e de L. peruvianum (provavelmente o hexadecano) mais suscetíveis a T. absoluta. Foi detectada uma substância (com tempo de retenção 22,796 min. no cromatograma) associada a plantas de L. peruvianum mais resistentes a T. absoluta.

Lycopersicon esculentum; Tuta absoluta; 4-metil-2,6-di-tert-butilfenol; transcarofileno; hexadecano


This work was carried out in a greenhouse in the Federal University of Viçosa, to evaluate the antibiosis of Lycopersicon peruvianum (CNPH 101) to tomato leafminer Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae) and its possible chemical causes. The treatments were represented by the species of tomato Lycopersicon esculentum (cv. Santa Clara and IPA-5: susceptibility patterns to T. absoluta) and the introduction CNPH 101 of L. peruvianum. The characteristics assessed were: larval mortality, pupal weight, sexual proportion, length of larval and pupal phases and the number of eggs/female. Gas chromatography coupled to mass spectrometer was used to identify the substances in the hexanic extract of leaves. The introduction CNPH 101 of L. peruvianum showed resistance to T. absoluta affecting the larval mortality and length of pupal phase. Two compounds (probably the 4-methyl-2,6-di-tert-buthylphenol and another with retention time of 18.8 min. by chromatogram) were associated to fact that L. esculentum is more susceptible to T. absoluta than L. peruvianum. Two compounds were associated to plants of the cultivar Santa Clara (probably the transcarophyllene) and L. peruvianum (probably the hexadecane) most susceptible to T. absoluta. A compound (with retention time in the of 22.796 min. by chromatogram) was associated the plants of L. peruvianum most resistant to T. absoluta.

Lycopersicon esculentum; Tuta absoluta; 4-methyl-2,6-di-tert-buthylphenol; transcarophyllene; hexadecane


PESQUISA

Resistência por antibiose de Lycopersicon peruvianum à traça do tomateiro

Antibiosis resistance of Lycopersicon peruvianum to tomato leafminer

Fábio Akiyoshi SuinagaI; Marcelo Coutinho PicançoII, 1 1 Autor correspondente ; Márcio Dionízio MoreiraII; Altair Arlindo SemeãoII; Sérgio Tinôco Verçosa de MagalhãesII

IEMBRAPA/CNPA, Rua São Paulo, 790 Distrito Industrial, 78850-000 Primavera do Leste, MT; E-mail: suinaga@cnpa.embrapa.br

IIUFV, Deptº de Biologia Animal, 36571-000 Viçosa - MG; E-mail: picanco@ufv.br

RESUMO

Este trabalho foi realizado em casa de vegetação na Universidade Federal de Viçosa e objetivou estudar a resistência por antibiose do acesso CNPH 101 de Lycopersicon peruvianum a traça do tomateiro Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae) e as possíveis causas químicas desta resistência. Os tratamentos foram as espécies de tomateiro Lycopersicon esculentum (cvs. IPA-5 e Santa Clara: padrões de suscetibilidade) e o acesso de L. peruvianum. As características avaliadas foram: mortalidade larval, peso de pupas e proporção sexual, duração das fases larval e pupal e números de ovos/fêmea de T. absoluta. Realizou–se extração hexânica nas folhas e os extratos obtidos foram submetidos a cromatografia gasosa associada a espectrômetro de massa. O acesso CNPH 101 de L. peruvianum apresentou resistência a T. absoluta afetando a mortalidade larval e duração da fase pupal. Duas substâncias (provavelmente o 4-metil-2,6-di-tert-butilfenol e outra com tempo de retenção 18,8 min. no cromatograma) estiveram associadas ao fato de que L. esculentum é mais suscetível a T. absoluta do que L. peruvianum. Foram detectadas duas substâncias associadas a plantas da cultivar Santa Clara (provavelmente o transcarofileno) e de L. peruvianum (provavelmente o hexadecano) mais suscetíveis a T. absoluta. Foi detectada uma substância (com tempo de retenção 22,796 min. no cromatograma) associada a plantas de L. peruvianum mais resistentes a T. absoluta.

Palavras-chave:Lycopersicon esculentum, Tuta absoluta, 4-metil-2,6-di-tert-butilfenol, transcarofileno, hexadecano.

ABSTRACT

This work was carried out in a greenhouse in the Federal University of Viçosa, to evaluate the antibiosis of Lycopersicon peruvianum (CNPH 101) to tomato leafminer Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae) and its possible chemical causes. The treatments were represented by the species of tomato Lycopersicon esculentum (cv. Santa Clara and IPA-5: susceptibility patterns to T. absoluta) and the introduction CNPH 101 of L. peruvianum. The characteristics assessed were: larval mortality, pupal weight, sexual proportion, length of larval and pupal phases and the number of eggs/female. Gas chromatography coupled to mass spectrometer was used to identify the substances in the hexanic extract of leaves. The introduction CNPH 101 of L. peruvianum showed resistance to T. absoluta affecting the larval mortality and length of pupal phase. Two compounds (probably the 4-methyl-2,6-di-tert-buthylphenol and another with retention time of 18.8 min. by chromatogram) were associated to fact that L. esculentum is more susceptible to T. absoluta than L. peruvianum. Two compounds were associated to plants of the cultivar Santa Clara (probably the transcarophyllene) and L. peruvianum (probably the hexadecane) most susceptible to T. absoluta. A compound (with retention time in the of 22.796 min. by chromatogram) was associated the plants of L. peruvianum most resistant to T. absoluta.

Keywords:Lycopersicon esculentum, Tuta absoluta, 4-methyl-2,6-di-tert-buthylphenol, transcarophyllene, hexadecane.

A traça do tomateiro, Tuta (=Scropipalpuloides) absoluta (Meyrick) é uma das principais pragas da cultura do tomateiro nas regiões produtoras do Brasil (Picanço et al., 1997 e 1998). Com o objetivo de diminuir os prejuízos ocasionados por esta praga tem-se utilizado, inseticidas de forma indiscriminada o que tem acarretado problemas de ordem ecotoxicológica (Moreira & Oliveira, 1997; Siqueira et al., 2000).

Neste contexto, o desenvolvimento de cultivares resistentes de tomate a esta praga, mostra-se como importante alternativa ao controle químico. Diversas espécies do gênero Lycopersicon, como L. hirsutum e L. peruvianum podem ser exploradas como fontes de resistência a T. absoluta (Giustolin & Vendramim, 1994 e 1996; Leite et al., 1995; Picanço et al., 1995). No processo de obtenção de variedades resistentes a pragas é de fundamental importância o estudo dos mecanismos e causas da resistência.

A resistência de plantas a insetos pode ser devido a três mecanismos: antibiose, antixenose e tolerância (Painter, 1951). Em Lycopersicon spp., diversos trabalhos (Giustolin & Vendramim, 1994; Picanço et al., 1995) têm demonstrado que a antibiose (efeito adverso da planta sobre a praga devido principalmente a compostos químicos) geralmente é o principal mecanismo de resistência. Com relação as causas de resistência de L. peruvianum a T. absoluta nada se conhece, entretanto Barona et al. (1989), Leite et al. (1995) e Picanço et al. (1995) hipotetizaram que as desta resistência são substâncias químicas ou características morfológicas das plantas.

Assim, este trabalho objetivou estudar a resistência por na antibiose de L. peruvianum bem como as possíveis causas químicas desta resistência.

MATERIAL E MÉTODOS

Esta pesquisa foi conduzida em casa de vegetação no campus da Universidade Federal de Viçosa (UFV). Foi realizado bioensaio de abril a junho de 1997 para avaliar a resistência do acesso CNPH 101 de Lycopersicon peruvianum a Tuta absoluta e estudar as possíveis causas químicas da resistência destes tomateiro. Os tratamentos foram as cultivares IPA-5 (tomate industrial) e Santa Clara (destinada ao consumo in natura) de Lycopersicon esculentum (padrões de suscetibilidade) além do acesso CNPH 101 de L. peruvianum. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, com cinco repetições. A parcela experimental foi constituída por vaso de polietileno de cinco litros de capacidade contendo uma planta de tomateiro com 45 dias de idade no início das avaliações.

Para avaliação da resistência 10 ovos de T. absoluta com idade máxima de dois dias, foram colocados no terceiro folíolo da porção mediana do dossel das plantas. Após a eclosão, estas folhas foram acondicionadas em sacolas de organza de 0,2 x 0,28 m de dimensão (Leite et al., 1999). Durante a fase larval do inseto avaliaram-se a mortalidade (%) e o período larval (dias) de T. absoluta. Quando ocorreu a pupação, avaliaram-se o peso, o sexo e a proporção sexual das pupas. As pupas foram separadas por sexo, data da pupação, parcela e alojadas em placas de Petri de 9 cm de diâmetro x 2 cm de altura e levadas para estufa incubadora a 25 ± 0,5ºC e fotoperíodo de 12 horas (Giustolin & Vendramim, 1994). Por ocasião da emergência dos adultos, avaliaram-se a mortalidade (%) e os períodos pupais (dias).

Com o objetivo de identificar os aleloquímicos presentes nas plantas, coletaram-se 5 g de folhas de cada um dos genótipos. Essas folhas foram imersas em 50 mL de hexano destilado em erlenmeyers de 250 mL por seis horas. Após a extração, a solução hexânica foi desidratada com Na2SO4, anidro e concentrada em evaporador rotativo a 30ºC e desidratada em nitrogênio gasoso, obtendo-se um concentrado que foi conservado em congelador para análises químicas posteriores (Silva et al., 1998).

As análises químicas foram realizadas em Cromatógrafo Gasoso associado a Espectro de Massa (CG/EM), modelo GCMS-QP 5000. Na cromatografia foi utilizada coluna DB 1 (W & J Scientific), com temperatura do injetor a 180ºC e interface a 230ºC. A temperatura inicial da coluna foi de 33ºC e crescente até 80ºC (3 minutos); 180ºC (6 minutos) e 220ºC (10 minutos). O fluxo dos gás foi ajustado para 2,5 mL/ minuto. Foram selecionados nos cromatogramas os picos com concentração relativa maior que 106 x íons x segundo (Eigenbrode & Trumble, 1993). Para os picos selecionados, foi registrado o tempo de retenção e calculado a concentração relativa média (Figura 1).


Os resultados das características biológicas do inseto foram submetidos a teste de normalidade de Lilliefors, análise de variância e teste de média de Scott-Knott a 5% de probabilidade (Scott & Knott, 1974). Os dados das características biológicas do inseto foram correlacionados com a concentração relativa de cada pico dos cromatogramas a p < 0,05.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Observou-se maior mortalidade de larvas de Tuta absoluta no acesso CNPH 101 de Lycopersicon peruvianum, do que nas cultivares Santa Clara e IPA-5 de L. esculentum. Fato semelhante foi observado quanto a duração do período pupal deste inseto, que também foi maior no acesso CNPH 101 de L. peruvianum. As pupas de T. absoluta apresentaram maior peso corporal na cultivar IPA-5 de L. esculentum (Tabela 1).

A proporção sexual de T. absoluta foi maior na cultivar IPA 5 do que na cultivar Santa Clara de L. esculentum e no acesso CNPH 101. Tal fato indica que para essa característica, a cultivar IPA-5 foi hospedeira mais adequada a praga. Segundo Coelho & França (1987), a maior proporção sexual de T. absoluta seria resultado de maior sobrevivência de fêmeas nas fases de ovo e larva, fato que asseguraria a manutenção desta espécie no agroecossistema, uma vez que a fêmea é a propagadora da espécie.

Os resultados obtidos demonstram que o acesso CNPH 101 de L. peruvianum possui resistência a T. absoluta por antibiose, uma vez que demonstrou efeito adverso na biologia desta espécie. Efeito semelhante foi observado por Barona et al. (1989), os quais postularam que as causas da resistência de L. peruvianum à traça do tomateiro são voláteis presentes na planta e a estrutura da epiderme foliar. Além destes autores, Silva et al. (1998) verificaram que açúcares redutores apresentaram efeito negativo sobre a oviposição de T. absoluta.

Foram identificados 69 picos nos cromatogramas do extrato hexânico das folhas dos tomateiros. Esses picos apresentaram tempos de retenção que variaram de 11,28 minutos (pico 1) a 24,91 minutos (pico 69). Os picos 42 e 47 apresentaram as maiores concentrações relativas (3,96 ± 1,32 e 4,74 ± 1,58 x 106 íons*s, respectivamente). As concentrações relativas intermediárias ocorreram para os picos 6 e 37 (2,48 ± 0,83 e 2,07 ± 0,69 íons*s, respectivamente). Os demais picos apresentaram as concentrações relativas mais baixas que variaram de 0,06 ± 0,01 (pico 13) a 5,64 ± 0,00 íons*s (pico 52). Dos 69 picos, verificaram-se correlações significativas (p < 0,05) das concentrações relativas das substâncias associadas aos picos 8, 42, 47, 56 e 66 com a duração da fase pupal e a proporção sexual de T. absoluta (Tabela 2). Analisando-se a concentração relativa dos picos dos cromatogramas (Tabela 2) e a significância das correlações (entre as concentrações e as características biológicas) verifica-se que nem todos os picos que apresentaram as maiores concentrações relativas foram os que se relacionaram com a resistência dos tomateiros a T. absoluta.

Os picos 8 e 42 foram detectados nos três genótipos estudados (Tabela 2), sendo que as concentrações relativas das substâncias associadas a estes picos apresentaram correlações significativas e positivas (r = 0,35 e 0,46, respectivamente e p<0,05) com a duração da fase pupal de T. absoluta. Então as substâncias associadas aos picos 8 e 42 estiveram associadas a maior suscetibilidade de L. esculentum do que de L. peruvianum a T. absoluta

O pico 47 esteve presente somente cultivar Santa Clara (Tabela 2), sendo que a concentração relativa da substância associada a este pico apresentou correlação significativa e positiva (r = 0,28 e p<0,05) com a proporção sexual. Portanto a substância associada ao pico 47 esteve associada a plantas da cultivar Santa Clara mais suscetíveis a T. absoluta. O pico 56 esteve presente somente no acesso CNPH 101 de L. peruvianum (Tabela 2), sendo que a concentração relativa da substância associada a este pico apresentou correlação significativa e positiva (r = 0,28 e p<0,05) com a proporção sexual. Portanto a substância associada ao pico 56 esteve associada a plantas do acesso CNPH 101 de L. peruvianum mais suscetíveis a T. absoluta. Já o pico 66 esteve presente somente no acesso CNPH 101 de L. peruvianum (Tabela 2), sendo que a concentração relativa da substância associada a este pico apresentou correlação significativa e negativa (r = -0,31 e p<0,05) com a proporção sexual. Portanto a substância associada ao pico 56 esteve associada a plantas do acesso CNPH 101 de L. peruvianum mais resistentes a T. absoluta. Também Ecole et al. (1999) verificaram a existência de variabilidade na concentração de aleloquímicos nas folhas e na suscetibilidade a T. absoluta entre plantas de um mesmo genótipo do tomateiro Lycopersicon hirsutum f. typicum.

Baseando-se no índice de similaridade dos espectros de massas obtidos através do cromatógrafo a gás acoplado a espectrômetro de massa, a provável substância associada ao pico 8 foi o 4-metil-2,6-di-tert-butilfenol [índice de similaridade (i.s.) = 80%]. Já as prováveis substâncias associadas aos picos 47 e 56 foram o transcarofileno (i.s. = 93%) e o hexadecano (i.s. = 89%), respectivamente (Figuras 1 e 2). Nenhuma substância com índice de similaridade maior que 80% esteve associada aos picos 42 e 66. Estas substâncias estiveram relacionadas com o aumento da suscetibilidade dos tomateiros a T. absoluta. Gunasena et al. (1988), observaram que o transcarofileno, quando adicionado à dieta de Heliothis virescens (F.) (Lepidoptera: Noctuidae) promoveu diminuição no período larval desta espécie. Thibaut et al. (1994) observaram que o hexadecano exerceu efeito atraente sobre Acrolepiopsis assectella (L.) (Lepidoptera: Yponomeutidae). Em relação ao 4-metil-2,6-di-tert-butilfenol não foi observada nenhuma citação deste composto como responsável por alterações na biologia de insetos.


Não foram detectadas correlações entre a mortalidade larval e o peso de pupas de T. absoluta com as concentrações relativas das substâncias associadas aos 69 picos dos cromatogramas do extrato hexânico das folhas dos tomateiros. Esse fato indica que as causas da resistência de L. peruvianum a T. absoluta não são somente devido a ação de substâncias químicas, podendo também ser influenciada por fatores morfológicos das plantas. Segundo Luckwill (1943) e Bin (1979) L. peruvianum possui grande quantidade de pêlos não glandulares e uma pequena quantidade de pêlos glandulares curtos e esparsos os quais Channarayappa et al. (1992) observaram que estão associados com resistência desta espécie a Bemisia tabaci (Genn.) (Homoptera: Aleyrodidae).

Em conclusão, o acesso CNPH 101 de L. peruvianum possui resistência a T. absoluta afetando a mortalidade larval e duração da fase pupal deste inseto. Foram detectadas duas substâncias (provavelmente o 4-metil-2,6-di-tert-butilfenol e outra com tempo de retenção 18,8 min. no cromatograma) que estiveram associadas a maior suscetibilidade de L. esculentum do que de L. peruvianum a T. absoluta. Foram detectadas duas substâncias que estiveram associadas a plantas da cultivar Santa Clara (provavelmente o transcarofileno) e de L. peruvianum (provavelmente o hexadecano) mais suscetíveis a T. absoluta. Foi detectada uma substância (com tempo de retenção 22,796 min. no cromatograma) que esteve associada a plantas de L. peruvianum mais resistentes a T. absoluta.

AGRADECIMENTOS

Ao CNPq, CAPES e FAPEMIG pelas bolsas e recursos concedidos.

LITERATURA CITADA

Recebido para publicação em 24 de março de 2003 e aceito em 23 de março de 2004

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  • 1
    Autor correspondente
  • Datas de Publicação

    • Publicação nesta coleção
      10 Ago 2004
    • Data do Fascículo
      Jun 2004

    Histórico

    • Aceito
      23 Mar 2004
    • Recebido
      24 Mar 2003
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