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Adubação orgânica na produção, rendimento e composição do óleo essencial da alfavaca quimiotipo eugenol

Organic fertilization in the production, yield and chemical composition of basil chemotype eugenol

Resumos

Este trabalho foi realizado na UFPR, município de Pinhais-PR, de outubro de 2005 a junho de 2006. Avaliou-se a resposta do Ocimum gratissimum à adubação orgânica com composto de esterco de carneiro, verificando a viabilidade dessa prática para o aumento no rendimento de biomassa, na quantidade e qualidade de seu óleo essencial. As mudas foram plantadas com espaçamento de 0,5 m entre plantas dentro das parcelas e 1 m entre as parcelas. Testaram-se 3 doses de adubação com composto orgânico (4; 8 e 12 kg m-2) e uma testemunha, com 5 repetições e 8 plantas por parcela. As colheitas foram realizadas aos 150 e 226 dias após o plantio, sendo avaliado o rendimento de massa fresca e massa seca total e de folhas, flores e caule, o teor de óleo essencial das folhas e flores e a sua composição por cromatógrafo a gás acoplado a um detector de massas (CG-MS). Houve diferença entre os tratamentos, quanto ao rendimento de biomassa na primeira colheita, onde o tratamento com 8 kg m-2 de composto orgânico foi superior à testemunha sem adubação, para a massa fresca de flores por planta e massa seca total e de flores por planta, mas não diferiu dos outros níveis de adubação. Na segunda colheita não houve diferença entre os tratamentos. Quanto ao rendimento de óleo essencial não houve diferença entre os tratamentos nas duas colheitas. Também não foram observadas grandes variações nos componentes do óleo essencial decorrente dos tratamentos aplicados. Entretanto, ocorreram variações na composição do óleo essencial quando extraído das folhas e das flores, sendo o teor médio de eugenol de 90,4% nas folhas e 80,8% nas flores, na colheita em março. Já na colheita em junho, houve uma redução do teor de eugenol nas folhas e uma elevação dos teores, principalmente de alfa trans trans farneseno, beta bisaboleno, beta cariofileno, germacrene D e alfa selineno.

Ocimum gratissimum; composto orgânico; produtividade


This work was carried out at the Universidade Federal do Parana, Paraná State, Brazil, from October 2005 to June 2006. The effect of organic fertilization with sheep manure was evaluated on Ocimum gratissimum development and the viability of this practice was determined to increase biomass and essential oil yield and quality. The plants were spaced 0.5 m from each other in the experimental units which were separated in 1 m. Three rates of organic fertlization (4; 8 and 12 kg m-2) were compared to control (without fertilizers), with 5 replications and 8 plants by experimental unit. Plants were harvested 150 and 226 days after planting, and the total, leaves, flowers and stems fresh and dried biomass, essential oil yield from leaves and flowers and composition by GC/MS beign evaluated. There was significant difference among the treatments on biomass production at the first harvest, where the plants treated with 8 kg m-2 of organic fertilizer presented higher flowers fresh biomass, and flowers and total dry biomass than plants without fertilizer (control plants), but with no difference compared to other organic fertilization levels. At the second harvest there were no differences among treatments. Regarding the essential oil yield no differences were found comparing the organic fertilization levels in both harvest times. In addition, the essential oil composition was similar on plants from all treatments. However, some variations in composition were observed when the essential oil was extracted from flowers and leaves, where the eugenol percentage was 90.4% on leaves and 80.8% on flowers at the first harvest. At the second harvest, a reduction of eugenol content and an increase of alpha trans trans farnesene, beta bisabolene, beta cariophilene, germacrene D and alfa selineno was found.

Ocimum gratissimum; organic compost; yield


PESQUISA RESEARCH

Adubação orgânica na produção, rendimento e composição do óleo essencial da alfavaca quimiotipo eugenol

Organic fertilization in the production, yield and chemical composition of basil chemotype eugenol

Luiz Antonio BiasiI; Eliana M MachadoII; Ana Paula de J KowalskiII; Diana SignorII; Márcia A AlvesII; Francine I de LimaII; Cícero DeschampsI; Lílian C CôccoIII; Agnes de Paula ScheerIII

IUFPR-Depto de Fitotecnia e Fitossanitarismo, C. Postal 19061, 81531-990 Curitiba-PR

IIUFPR-Agronomia

IIIUFPR/LACAUT-Depto de Engenharia Química; biasi@ufpr.br

RESUMO

Este trabalho foi realizado na UFPR, município de Pinhais-PR, de outubro de 2005 a junho de 2006. Avaliou-se a resposta do Ocimum gratissimum à adubação orgânica com composto de esterco de carneiro, verificando a viabilidade dessa prática para o aumento no rendimento de biomassa, na quantidade e qualidade de seu óleo essencial. As mudas foram plantadas com espaçamento de 0,5 m entre plantas dentro das parcelas e 1 m entre as parcelas. Testaram-se 3 doses de adubação com composto orgânico (4; 8 e 12 kg m-2) e uma testemunha, com 5 repetições e 8 plantas por parcela. As colheitas foram realizadas aos 150 e 226 dias após o plantio, sendo avaliado o rendimento de massa fresca e massa seca total e de folhas, flores e caule, o teor de óleo essencial das folhas e flores e a sua composição por cromatógrafo a gás acoplado a um detector de massas (CG-MS). Houve diferença entre os tratamentos, quanto ao rendimento de biomassa na primeira colheita, onde o tratamento com 8 kg m-2 de composto orgânico foi superior à testemunha sem adubação, para a massa fresca de flores por planta e massa seca total e de flores por planta, mas não diferiu dos outros níveis de adubação. Na segunda colheita não houve diferença entre os tratamentos. Quanto ao rendimento de óleo essencial não houve diferença entre os tratamentos nas duas colheitas. Também não foram observadas grandes variações nos componentes do óleo essencial decorrente dos tratamentos aplicados. Entretanto, ocorreram variações na composição do óleo essencial quando extraído das folhas e das flores, sendo o teor médio de eugenol de 90,4% nas folhas e 80,8% nas flores, na colheita em março. Já na colheita em junho, houve uma redução do teor de eugenol nas folhas e uma elevação dos teores, principalmente de alfa trans trans farneseno, beta bisaboleno, beta cariofileno, germacrene D e alfa selineno.

Palavras-chave:Ocimum gratissimum, composto orgânico, produtividade.

ABSTRACT

This work was carried out at the Universidade Federal do Parana, Paraná State, Brazil, from October 2005 to June 2006. The effect of organic fertilization with sheep manure was evaluated on Ocimum gratissimum development and the viability of this practice was determined to increase biomass and essential oil yield and quality. The plants were spaced 0.5 m from each other in the experimental units which were separated in 1 m. Three rates of organic fertlization (4; 8 and 12 kg m-2) were compared to control (without fertilizers), with 5 replications and 8 plants by experimental unit. Plants were harvested 150 and 226 days after planting, and the total, leaves, flowers and stems fresh and dried biomass, essential oil yield from leaves and flowers and composition by GC/MS beign evaluated. There was significant difference among the treatments on biomass production at the first harvest, where the plants treated with 8 kg m-2 of organic fertilizer presented higher flowers fresh biomass, and flowers and total dry biomass than plants without fertilizer (control plants), but with no difference compared to other organic fertilization levels. At the second harvest there were no differences among treatments. Regarding the essential oil yield no differences were found comparing the organic fertilization levels in both harvest times. In addition, the essential oil composition was similar on plants from all treatments. However, some variations in composition were observed when the essential oil was extracted from flowers and leaves, where the eugenol percentage was 90.4% on leaves and 80.8% on flowers at the first harvest. At the second harvest, a reduction of eugenol content and an increase of alpha trans trans farnesene, beta bisabolene, beta cariophilene, germacrene D and alfa selineno was found.

Keywords:Ocimum gratissimum, organic compost, yield.

O Ocimum gratissimum, também conhecido como alfavaca-cravo ou alfavacão, é um subarbusto aromático, com até um metro de altura, originário do Oriente e subespontâneo em todo o Brasil. Possui folhas ovalado-lanceoladas, de bordos duplamente dentados, membranáceas, com 4 a 8 cm de comprimento. As flores são pequenas, roxo-pálidas, dispostas em racemos paniculados eretos e geralmente em grupos de três (Lorenzi & Matos, 2002).

Existem vários quimiotipos, como ocorre em outras espécies do mesmo gênero, sendo um quimiotipo muito comum o eugenol, que possui essa substância em maior quantidade na composição do óleo essencial. O eugenol é a substância característica do aroma do cravo-da-índia. No nordeste do Brasil, encontra-se um quimiotipo de O. gratissimum que apresenta ação diurética, denominado quiôio (Blank et al., 2003), enquanto o quimiotipo eugenol apresenta ação anti-séptica (Matos et al., 2000). No óleo essencial extraído de O. gratissimum foram encontrados os seguintes compostos: 1,8 cineol, eugenol, metil-eugenol, timol, p-cimeno, cis-ocimeno e cis-cariofileno, sendo que o eugenol foi indicado como responsável por inibir o crescimento de Staphylococcus aureus, Shigella flexneri, Salmonella enteritidis e Escherichia coli, Klebsiella sp. e Proteus mirabilis (Nakamura et al., 1999). Ao analisar a atividade antibacteriana de óleos essenciais de plantas medicinais, frente a 100 cepas de bactérias isoladas de indivíduos da comunidade com diagnóstico de infecção urinária, foi verificado que, embora menos eficiente que Salvia officinalis, o O. gratissimum apresentou atividade antimicrobiana em 16% das cepas estudadas, exceto Klebsiella oxytoca e Pseudomonas aeruginosa (Pereira et al., 2004).

O óleo essencial desta planta apresenta atividade antifúngica comprovada contra os fungos fitopatogênicos Botryosphaeria rhodina e duas espécies de Alternaria sp. O eugenol apresenta atividade contra Alternaria isolada de tomate (A1) e Penicillium chrysogenum (Faria et al., 2006). Também foi atribuído ao eugenol a atividade contra os fungos Penicillium chrysogenum, Rhizoctonia sp., Aspergillus niger e duas espécies de Alternaria sp. isoladas de tomate e cenoura (Rosset et al., 2005).

Além da atividade antifúngica e antibacteriana, também foi observada a ação larvicida do óleo essencial dessa espécie contra Aedes aegypti, o mosquito transmissor da dengue, cuja dose letal média foi de 60 ppm (Cavalcanti et al., 2004) e ação repelente do óleo essencial contra Simulium damnosum, o transmissor de Onchocerca volvulus na Nigéria. A aplicação tópica na concentração de 20% reduziu a taxa de picadas em até 90,2% e protegeu por 3 horas (Usip et al., 2006).

O metabolismo primário e secundário é afetado por diversos fatores externos, sendo a disponibilidade de nutrientes um desses fatores. A influência da adubação, no desenvolvimento e produção de óleos essenciais, tem sido demonstrada em diversas plantas medicinais. O manjericão (Ocimum basilicum L.) cv. Genovese apresentou maior produção de matéria seca da parte aérea e maior rendimento de óleo essencial quando foi adubado com um adubo químico formulado com macro e micronutrientes e esterco de galinha (Blank et al., 2005). Para o capim-limão (Cymbopogon citratus), a adubação mineral com NPK e esterco bovino também resultou em maior rendimento de biomassa seca e teor de óleo essencial, quando as folhas foram colhidas às 07:00 hs (Silva et al., 2003). Entretanto, nem sempre a adubação apresenta resposta positiva, como foi observado para Lippia alba, onde a adubação orgânica não afetou a produção de matéria seca foliar nem o teor de óleo essencial (Santos & Innecco, 2004). Para o chambá (Justicia pectoralis var. stenophylla), as adubações orgânicas e minerais não influenciaram o crescimento da planta e a produção de biomassa e o teor de óleo essencial apresentou uma tendência de decréscimo com o incremento nas doses de esterco bovino em cada uma das formulações de NPK (Bezerra et al., 2006).

O objetivo desse trabalho foi avaliar a resposta do O. gratissimum à adubação orgânica, verificando a viabilidade dessa prática para o aumento no rendimento de biomassa, quantidade e qualidade de seu óleo essencial.

MATERIAL E MÉTODOS

O experimento na Universidade Federal do Paraná, localizada no município de Pinhais no Paraná (25º25' S; 40º42' W; altitude média de 930 m). O solo em análise prévia possuía: pH SMP= 6,6; Al+3= 0,0 cmolc dm-3; H++Al+3= 3,2 cmolc dm-3; Ca+2= 9,6 cmolc dm-3; Mg+2= 5,5 cmolc dm-3; K+= 1,59 cmolc dm-3; P= 159 mg dm-3; C= 36,5 g dm-3; saturação por bases= 84% e teor de argila de 400 g.kg-1.

As mudas produzidas a partir de sementes, em bandejas de poliestireno expandido de 128 células, com 2 a 3 folhas, foram plantadas em 31/10/05. Utilizou-se como adubo orgânico um composto à base de esterco curtido de carneiro e palha seca (produzido em julho/05), com teor aproximado de umidade de 44%. O composto analisado possuia pH SMP= 6,9; Al+3= 0,0 cmolc dm-3; H++Al+3= 2,5 cmolc dm-3; Ca+2= 10,8 cmolc dm-3; Mg+2= 10,4 cmolc dm-3; K+= 3,4 cmolc dm-3; P= 728 mg dm-3; saturação por bases= 91%.

O experimento foi instalado com delineamento em blocos ao acaso, com 4 tratamentos, 5 repetições e 8 plantas em cada parcela. O espaçamento adotado foi de 0,5 m entre plantas e 1,0 m entre parcelas. Os tratamentos aplicados foram testemunha (sem adubação orgânica) e 4; 8 e 12 kg m-2 de composto parcelado em duas aplicações em fevereiro e abril/06.

A primeira colheita foi realizada de 21 a 23/03/06, sendo analisadas as características: massa fresca e seca total, de folhas, flores e caule por planta e teor de óleo essencial nas folhas e flores. Na segunda colheita, realizada em 07/06/06, foram avaliadas as mesmas características, apenas, devido ao menor crescimento das plantas, a massa das folhas e caules foram pesadas juntas. A produtividade de óleo essencial em L ha-1 foi estimada para uma população de 16.000 plantas ha-1. A extração de óleo essencial foi realizada no mesmo dia de cada colheita, sendo feita pelo método de hidrodestilação com 100 g de massa fresca de folhas e flores em 1000 mL de água destilada, com destilador tipo Clevenger, permanecendo por um período de 3 horas. Para estimar o teor de óleo essencial em relação à matéria seca, foi determinada a massa seca de uma amostra de 10 g do material destilado.

O óleo essencial obtido foi analisado em cromatógrafo a gás acoplado a espectrofotômetro de massa (CG-MS) no Laboratório de Análise de Combustíveis Automotivos (LACAUT) da UFPR. Para identificação dos componentes do óleo essencial, utilizou-se o equipamento Varian, modelo CP3800/Saturno 2000, com íon trap e coluna capilar Chrompack de sílica fundida (CP-SIL 8 CB, 0,25 mm de diâmetro interno, 30 m de comprimento e 0,25 mm de filme líquido). Uma quantidade de 0,2 µL de amostra foi injetada a 250°C (split 1:300), com uma vazão constante de hélio a 1 mL min-1.

O espectro de massa de cada componente do óleo essencial foi comparado aos espectros do acervo das bibliotecas Saturn (GC-MS versão 5.51) e Nist (98 MS, versão 1.7). Confirmou-se a identificação pelo cálculo do índice de retenção de cada componente (Adams, 1995), utilizando-se uma série homóloga de hidrocarbonetos (C5 - C20) como picos de referência.

Para a quantificação dos constituintes, utilizou-se um cromatógrafo gasoso Varian, modelo CP-3800, com detector FID (CG-FID). Para a separação cromatográfica, utilizou-se uma coluna capilar Chrompack, de silica fundida CP-SIL 8 CB, 0,25 mm de diâmetro interno, 30 m de comprimento e 0,25 µm de filme líquido. As condições de análise para esta coluna foram: a) temperatura do injetor: 250ºC, split 1: 300; b) quantidade de amostra injetada: 1,0 µL; c) gás de arraste: hélio a 1,0 mL min-1; d) temperatura do detector: 300ºC; e) programação de temperatura do forno: temperatura inicial de 60°C, elevação de temperatura a 140ºC na razão de 3°C.min-1; elevação de temperatura a 240°C na razão de 30°C min-1, permanecendo por 5 minutos; f) tempo total de corrida: 35 minutos.

Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e as médias dos tratamentos comparadas pelo teste de Duncan com 5% de significância.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Devido ao grande desenvolvimento observado na primeira colheita, optou-se por separar os caules das folhas, já que os caules encontravam-se muito lignificados e representavam 40% da massa seca total. Observou-se na primeira colheita, que as três doses aplicadas de composto orgânico não diferiram entre si com relação à biomassa fresca e seca produzida. Apenas a dose de 8 kg m-2 foi superior à testemunha quanto à massa fresca de flores e massa seca total e de flores (Tabela 1). A massa fresca e seca de folhas não diferiu entre os tratamentos, da mesma forma como já foi observado por Chaves et al. (2002) para a massa seca de folhas de O. gratissimum, utilizando as mesmas doses de adubação com esterco de galinha. Silva et al. (2003) verificaram que a adubação orgânica com 4 L m-2 de esterco bovino apresentou rendimento de biomassa seca inferior à adubação orgânica mais mineral com nitrogênio, fósforo e potássio para o capim-limão (Cymbopogon citratus). O manjericão (Ocimum basilicum) cv. Genovese também apresentou menor rendimento de biomassa seca quando foi adubado apenas com esterco bovino (1,8 kg m-2) em comparação com adubação mineral com macro e micronutrientes sozinha ou combinada com esterco de galinha ou bovino (Blank et al., 2005).

Na segunda colheita não houve diferença entre os tratamentos, para todas as variáveis de biomassa analisadas (Tabela 2). Entretanto, foi observada uma redução no desenvolvimento das plantas em relação à primeira colheita. Nessa época, que corresponde ao final do outono, é comum uma redução da temperatura média diária, que deve ter causado uma redução na taxa de crescimento das plantas, pois já foi demonstrado para O. gratissimum var. macrophyllum, que médias térmicas semanais abaixo de 80°C dia-1 são limitantes para o seu crescimento (Costa Filho et al., 2006). Nessa colheita, a massa seca total média foi de 26,8 g por planta, enquanto na primeira colheita foi de 143,6 g por planta. O florescimento também foi bastante reduzido na segunda colheita, onde a massa seca média de flores foi de apenas 1,3 g por planta, enquanto na primeira colheita foi de 28,1 g por planta. Num experimento com O. gratissimum em Botucatu (SP), foi observado maior rendimento de folhas na colheita realizada no inverno (agosto), em relação à colheita de outono (maio) (Chaves et al., 2002). Entretanto, as condições climáticas diferem bastante entre esses locais, pois em Pinhais (PR), onde foi realizado o presente experimento, as geadas durante o inverno danificaram toda a parte aérea das plantas, impedindo a continuidade do experimento.

O rendimento de óleo essencial não diferiu entre os tratamentos nas duas épocas de colheita (Tabelas 2 e 3), observando-se para as folhas em média 17,2 µL g-1 de massa seca (1,72%) na primeira colheita e 10,0 µL g-1 massa seca (1%) na segunda colheita. Redução no rendimento de óleo essencial semelhante também ocorreu no trabalho de Chaves et al. (2002), de 1,29% para 1,08%, sendo atribuída a menor temperatura ocorrida no período da segunda colheita. As inflorescências também apresentaram óleo essencial, porém com praticamente metade do rendimento das folhas, em média 8,4 µL g-1 massa seca (0,84%). Em escala comercial onde a planta inteira é destilada, as inflorescências contribuirão para aumentar o rendimento de óleo essencial, que na primeira colheita foi estimado em 15,4 L ha-1 para as folhas e 3,8 L ha-1 para as flores.

Ao analisar a composição química do óleo essencial, foi confirmado que o quimiotipo estudado de O. gratissimum foi o eugenol, pois essa substância foi encontrada em quantidades muito superiores às demais (Tabela 4). Não foram encontradas diferenças marcantes na composição do óleo essencial devido aos níveis de adubação estudados, mas ocorreram mudanças na composição com relação à época de colheita e origem do material destilado, de folhas ou de flores. Na primeira colheita foi encontrado em média 90,4% de eugenol nas folhas, enquanto na segunda colheita o teor caiu para 65,4%, o que resultou no aumento da quantidade dos demais compostos, principalmente alfa trans trans farneseno, beta bisaboleno, beta cariofileno, germacrene D e alfa selineno. As flores também apresentaram variação na proporção dos compostos, sendo menor o teor de eugenol, em média 80,8% e maiores os teores de alfa trans trans farneseno, beta bisaboleno, beta cariofileno, germacrene D e alfa selineno (Tabela 4). Os teores de eugenol obtidos no presente trabalho foram superiores aos obtidos por Chaves et al. (2002), que encontraram no máximo 47,29% de eugenol na colheita de outono, valor que foi superior ao obtido no inverno (33,23%). Também foram superiores aos encontrados por Jirovetz et al. (2003) para O. gratissimum cultivado no sul da Índia, com 63,36% de eugenol. Esses autores também encontraram 9,11% de (Z)-ß-ocimene, 8,84% de germacrene D e 3,89% de ß-cariofileno. Silva et al. (1999) ao analisarem a variação do teor de eugenol no óleo essencial de folhas de O. gratissimum ao longo do dia, observaram ao meio dia o maior rendimento, que atingiu 98%.

Conclui-se que a alfavaca-cravo responde pouco à adubação orgânica e o pequeno aumento de biomassa não corresponde a um aumento no rendimento de óleo essencial. O teor de óleo essencial e o teor de eugenol são maiores nas folhas do que nas flores.

AGRADECIMENTOS

Os autores agradecem à Secretaria de Estado de Ciência e Tecnologia (SETI)/Governo do Estado do Paraná pelo apoio financeiro e concessão de bolsa para as alunas de graduação e ao CNPq pela bolsa de Produtividade em Pesquisa do primeiro autor.

(Recebido para publicação em 17 de outubro de 2007; aceito em 19 de fevereiro de 2009)

(Received on October 17, 2007; accapted on February 19, 2009)

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Datas de Publicação

  • Publicação nesta coleção
    23 Jun 2009
  • Data do Fascículo
    Mar 2009

Histórico

  • Aceito
    19 Fev 2009
  • Recebido
    17 Out 2007
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