INTRODUÇÃO

Nos últimos anos, muitos estudos vêm sendo realizados com protocolos hormonais para a indução de estro sincronizado em cabras Toggenburg, uma vez que elas vêm se destacando no mercado leiteiro por sua produção, fácil adaptabilidade e docilidade. Os tratamentos hormonais permitem induzir o estro sincronizado na fêmea em anestro e sincronizar o estro na fêmea cíclica, concentrando partos para períodos específicos, assim como a produção leiteira distribuída ao longo do ano, evitando, desse modo, perdas econômicas e déficit no leite (^{Zambrini, 2006}; ^{Amorim et al., 2008}; ^{Pietroski et al., 2013}).

A influência do fotoperíodo é marcante tanto nos machos quanto nas fêmeas de raças oriundas do hemisfério norte, que iniciam seu ciclo reprodutivo anual em função da diminuição da intensidade de luz diária, marcadamente no outono. Esses animais são considerados animais poliéstricos estacionais de “dias curtos” ou “fotoperíodo negativo” (^{Traldi et al., 2007}).

Para se driblar esse fotoperíodo, diferentes tratamentos à base de substâncias hormonais exógenas, seja para controlar a fase lútea, seja para induzir ou aumentar a resposta ovariana, estão sendo testadas. Esses tratamentos facilitam a utilização de uma alimentação racional e a observação dos partos, diminuindo a mortalidade perinatal. Permitem também a concentração de partos programados, gerando leite em todos os períodos do ano e lotes de cabritos para o abate mais homogêneo no momento da venda (^{Zambrini, 2006}).

Dessa forma, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da duração do tratamento hormonal (seis, nove e 12 dias) com implante intravaginal contendo progesterona, em fêmeas da raça Toggenburg, no período de anestro estacional, sobre a dinâmica ovulatória, bem como o comportamento sexual. Ademais, avaliou-se a influência das categorias animais (nulíparas, pluríparas lactantes e pluríparas secas) e o tipo de acasalamento sobre as respostas aos protocolos de indução do estro.

MATERIAL E MÉTODOS

O projeto foi aprovado junto ao Comitê de Ética em Pesquisa Animal da Universidade Federal Fluminense, sob o protocolo de número 00438-08.

O estudo foi realizado durante a estação de anestro estacional (novembro e dezembro), em uma propriedade comercial produtora de leite caprino, localizada na região da Zona da Mata mineira, Brasil (latitude 21º 35’S, longitude 43º 15’W e altitude de 484m). O clima foi caracterizado como mesotermal Cwa, de acordo com a classificação Koppen, com inverno seco e verão quente.

Os animais foram mantidos em sistema de confinamento em baias coletivas, sob fotoperíodo natural e temperatura ambiente, alimentados no cocho com capim napier picado (Pennisetum purpureum v. Taiwan), concentrado, formulado e misturado na própria granja, água e sal mineral (Salminas Caprinos^® - Nutriplan - Brasil) ad libitum.

Foram selecionadas 62 cabras da raça Toggenburg, sendo estas de distintas categoriais animais: nulíparas (n=20), pluríparas lactantes (n=21) e pluríparas secas (n=21), após a realização dos exames clínicos geral e reprodutivo específico e ultrassonográfico, seguidos da avaliação do escore da condição corporal (1 a 5 - ^{Suiter, 1994}).

Os animais foram divididos uniformemente quanto as categorias em três grupos experimentais de acordo com o tempo de permanência do implante intravaginal impregnado com progesterona: 6 (G_{6dias -} n=22), 9 (G_9dias n=19) ou 12 (G_{12dias -} n=21). Todos os animais receberam no Dia 0 injeção paravulvar de 5mg de dinoprost (Lutalyse^® - Zoetis, Brasil) e 24 horas antes da retirada do dispositivo foi administrado (i.m.) 200UI de eCG (Novormon^® - Zoetis, Brasil).

O estro foi observado duas vezes ao dia, pela manhã e à noite, (sete e 19 horas), com auxílio de rufiões. As fêmeas foram consideradas em estro quando apresentaram edema de vulva, agitação à presença do macho, como bater de cauda, micção frequente, procura pelo macho e aceitação da monta.

O acompanhamento da dinâmica ovulatória iniciou-se no momento da retirada do implante intravaginal por meio de avaliações ultrassonográficas Modo-B, sendo repetidas a cada oito horas até a identificação das ovulações. Utilizou-se aparelho portátil (Aloka SSD 500, Aloka Co. Japão), equipado com transdutor linear de 5MHz, por via transretal. Os ovários foram mapeados, e todos os folículos antrais com diâmetro ≥ 3 mm visibilizados foram mensurados. O diâmetro médio (média do comprimento e largura) de cada folículo foi calculado, sendo repetido a cada oito horas. A ovulação foi considerada como sendo o momento em que o(s) folículo(s) dominante(s) (FD), anteriormente identificado(s), não estava(m) mais presente(s) na imagem ultrassonográfica, ou dependendo da irregularidade da parede do FD.

Para realização das análises estatísticas, utilizou-se o programa SAEG 8.1 (Sistema para Análises Estatísticas e Genéticas), desenvolvido pela Universidade Federal de Viçosa, e o programa InStat 3.

Para as variáveis paramétricas (intervalo entre a retirada do dispositivo à IA; duração do estro; intervalo da retirada do dispositivo ao início do estro; intervalo da retirada do dispositivo à ocorrência da ovulação; intervalo do início do estro à ocorrência da ovulação; diâmetro do maior e do segundo maior folículo; número de folículos ovulados/animal) entre as categorias estudadas, aplicou-se a análise de variância, e para a comparação de mais de duas médias, utilizou-se o teste de Student-Newman-Keuls (SNK).

As variáveis não paramétricas: percentual de cabras em estro e taxa de animais ovulando foram submetidas ao teste de qui-quadrado.

RESULTADOS

Todos os animais manifestaram estro (100% - 62/62), independentemente da categoria; 80,6% (50/62) das cabras demonstraram estro pela manhã e nenhuma antes de 24h, após a retirada do implante.

A duração do estro apresentou diferença (P<0,05) entre a categoria das fêmeas: as nulíparas (27,4 ± 8,2h) demonstraram estro mais precocemente do que as pluríparas lactantes (32,7 ± 8,0h) e pluríparas secas (33,4 ± 7,5h).

A Tab. 1 apresenta os resultados referentes aos parâmetros do comportamento sexual estudados.

Os parâmetros ultrassonográficos estão apresentados na Tab. 2. Obteve-se diferença (P>0,05) apenas quanto ao intervalo do início do estro à ocorrência da ovulação, em que o tipo de acasalamento, monta natural (51,7 ± 7,6 horas), demonstrou maior intervalo do que a IA (48,0 ± 9,8).

DISCUSSÃO

Todos os animais entraram em estro, demonstrando que os tratamentos foram eficientes na indução. Segundo ^{Knight (2001}), o período mínimo de exposição a P₄ necessário para induzir o comportamento de estro varia de três a cinco dias. Assim, o período de utilização mínimo de P₄, no estudo, foi eficiente para induzir o comportamento estral.

^{Fonseca et al. (2005}), após tratarem animais não lactantes com esponjas impregnadas com 60mg de MAP por seis e nove dias, descreveram 89,5% e 84,2%, respectivamente. Outros autores obtiveram taxas entre 91,3% e 98% após a utilização de 60mg de MAP (^{Baril et al., 1996}; ^{Menchaca e Rubianes, 2002}).

Os resultados demonstraram 80,6% (50/62) dos animais com comportamento estral pela manhã. Relatos semelhantes em animais de mesma raça podem ser observados na literatura (^{Fonseca et al., 2005}; ^{Souza et al., 2011}; ^{Pietroski et al., 2013}). Esse evento pode estar relacionado à secreção concentrada em ritmo noturno da melatonina, devido às horas de escuridão, resultando em um número maior de animais demonstrando estro pela manhã (^{Nagy et al., 2000}; Fonseca e Simplício, 2008).

O período compreendido entre a retirada do dispositivo e o início do estro demonstrou intervalo mais curto no tratamento seis dias (29,5 ± 9,7h) (P<0,05) do que os tratamentos nove dias (34,0 ± 6,0h) e 12 dias (32,4 ± 7,7h) (Tab. 1). Isso porque o tratamento seis dias se caracteriza por uma alta concentração de progesterona no final do tratamento, o que leva a uma brusca queda das concentrações desse esteroide após a retirada do dispositivo. Dessa forma, permite descarga mais intensa de FSH e LH, induzindo a maturação folicular, o aumento nos índices de 17_β-estradiol e a ocorrência precoce do estro (^{Rubianes et al., 1998}). ^{Souza et al. (2011}) relataram período semelhante (33,1 ± 1,9h), reutilizando CIDR^® durante seis e 12 dias em animais da mesma raça. Por outro lado, resultados inferiores (25,7h) foram descritos em animais da raça Saanen, durante o anestro estacional, utilizando MAP durante seis, nove e 12 dias (^{Pietroski et al., 2013}), demonstrando que pode haver efeito de raça sobre o período da retirada do dispositivo e início do estro. O intervalo da retirada do implante ao início do estro está relacionado com o momento da administração do eCG. Muitos são os fatores que podem interferir neste intervalo da retirada do implante ao início do estro, como temperatura do ambiente, fase do ciclo estral no momento da indução do estro, tipo de acasalamento, nutrição, diferentes fontes de progestágenos, uso de gonadotrofinas e presença de reprodutores após a remoção do dispositivo intravaginal e dominância social (^{Baril et al., 1996}; ^{Orihuela, 2000}; ^{Dogan et al., 2008}).

A duração do estro diferiu (P˂0,05) de acordo com o tratamento (36,0 ± 12,6h; 31,2 ± 14,3h; 33,4 ± 8,6h - seis, nove e 12 dias, respectivamente), assim como em relação à categoria. Cabras nulíparas (27,4 ± 8,2h) demonstraram duração do estro mais curta (P>0,05) do que as plulíparas lactantes (32,7 ± 8,0h) e secas (33,4 ± 7,5h). Isso pode ter ocorrido devido à presença de anticorpos anti-eCG produzidos pelas pluríparas, uma vez que estas já haviam sido submetidas a outro protocolo de indução e sincronização de estro. ^{Maffili et al. (2006}) obtiveram resultados semelhantes na estação de acasalamento natural com cabras Toggenburg tratadas durante cinco dias com dois dispositivos intravaginais diferentes, CIDR^® (37,0 ± 4,51h) e esponjas impregnadas com 60mg de MAP (35,0 ± 5,89h). Já em cabras Saanen tratadas com esponjas impregnadas com 60mg de MAP, durante seis (33,7 ± 13,6 horas) e nove dias (29,3 ± 10,6 horas) (^{Fonseca et al., 2005}) ou seis, nove e 12 dias (24,9h) (^{Pietroski et al., 2013}), nas estações de acasalamento e anestro estacional, observou-se diferença. Esse fato também pode estar relacionado a diversas razões, como a raça, fatores ambientais e nutrição.

No presente estudo, 80,6% (50/62) dos animais ovularam. O mesmo valor foi relatado em cabras da raça Alpina (80%, ^{Fonseca et al., 2010}) e Saanen (^{Pietroski et al., 2013}) durante anestro estacional, demonstrando que independentemente do período de permanência do dispositivo intravaginal impregnado com progesterona, estes são eficientes para a indução da ovulação durante o anestro estacional.

O número de ovulações por animal foi de 1,7 ± 0,7, não demonstrando diferença entre o período de exposição ao progestágeno e a categoria dos animais (P>0,05). Os resultados assemelham-se a outros estudos do grupo com cabras Toggenburg reutilizando CIDR^® (1,7 ± 0,1 ovulações, ^{Souza et al., 2011}), ou com a utilização de 60mg MAP em cabras Saanen utilizando MAP (1,6 ± 0,2 ovulações, ^{Pietroski et al., 2013}), cabras da raça Alpina (1,7 ± 0,1 ovulações, ^{Fonseca et al., 2010}).

Os diâmetros do maior folículo ovulado (6,7 ± 0,1mm), assim como o do segundo maior (6,6 ± 0,2mm), não diferiram (P>0,05) entre os tratamentos e a categoria, o que está de acordo com prévios trabalhos, que relataram um ou dois folículos em cada onda folicular maiores que 5mm de diâmetro em cabras (^{Ginther e Kot, 1994}).

A literatura demonstra diferença entre os trabalhos referentes ao diâmetro dos folículos pré-ovulatórios: 7,0mm (De Castro et al., 1999); 7,8mm em cabras Murciano-Granadina (Gonzalez-Bulnez et al., 2004); 5,5mm em cabras Anglo Nubiana (Tenório Filho et al., 2007); 7,4mm em cabras Toggenburg (^{Souza et al., 2013}) e 5,7mm em cabras Saanen (^{Pietroski et al., 2013}). Porém, ^{Nascimento (2009}) relata que, durante a estação de acasalamento natural, os animais da mesma raça submetidos às mesmas variáveis (tratamentos e categoria) demonstraram diâmetro inferior (6,1 ± 0,6 e 5,9 ± 0,5; maior e segundo maior folículo) ao descrito no presente estudo. Logo, pode-se inferir que a raça e a estação estão diretamente relacionadas com o diâmetro em que o folículo ovula.

CONCLUSÃO

Tratamentos hormonais utilizando dispositivos impregnados com progestágeno, nos períodos de seis, nove e 12 dias, são eficientes para a indução e a sincronização de estro, assim como na ovulação durante o anestro estacional de cabras leiteiras. Dessa forma, colaboram para melhorar a eficiência reprodutiva de caprinos leiteiros, independentemente da categoria animal.