Otimização do processo de extração de própolis através da verificação da atividade antimicrobiana

Dos Santos, C.R.; Arcenio, F.; Carvalho, E.S.; Lúcio, E.M.R.A.; Araújo, G.L.; Teixeira, L.A.; Sharapin, N.; Rocha, L.

doi:10.1590/S0102-695X2003000300027

Resumos

A própolis, também conhecida como "cola de abelhas" possui atividade antimicrobiana, antiinflamatória, anestésica e imunoestimulante. Amostras de diferentes origens geográficas podem apresentar composição química bem diferente, porém continuam sendo responsáveis por atividade antibacteriana, inclusive contra cepas multirresistentes de Staphylococcus aureus. Este trabalho teve por objetivo otimizar o processo de extração visando determinar a melhor alcoolatura para a obtenção de tinturas de própolis com maior atividade antimicrobiana. Amostras de própolis foram extraídas com diferentes misturas hidroalcoólicas, variando o teor de etanol entre 90% a água pura, obtendo assim 11 tinturas diferentes. Todas as tinturas foram aplicadas em discos de papel, secos e colocados sobre a superfície de placas contendo ágar inoculado com cepa multirresistente de S. aureus. As placas foram incubadas e avaliadas no dia seguinte quanto à presença de halos de inibição. Os melhores resultados foram obtidos com extratos contendo 50 a 90% de etanol. O trabalho sugere a utilização da alcoolatura de 70% como a ideal para a obtenção de tinturas de própolis.

Bee glue (propolis) possesses antimicrobial, antiinflammatory, anaesthetic and immunostimulating activities. Propolis composition is extraordinary variable; samples from different geographic origin may posse's entirely different chemical composition. In different propolis samples, various substance combinations are responsible for the antibacterial activity of the bee glue. The aim of the study was to evaluate the best ethanolic extract concentration using Staphylococcus aureus multiresistant. Ethanol extracts from different concentration (10 to 90%) were applied on paper disks, dried, and put on the surface of nutrient agar plates with the overlay containing S. aureus. The plates were then incubated and evaluated the next day for the presence of inhibition zones. The best result was verified among 60 to 90% of ethanolic extract of propolis. This paper suggests the use of the alcool 70% as the ideal for the extration of propolis.

Otimização do processo de extração de própolis através da verificação da atividade antimicrobiana

Dos Santos, C.R.; Arcenio, F., Carvalho, E.S.; Lúcio, E.M.R.A., Araújo, G.L.; Teixeira, L.A.; Sharapin, N.; Rocha, L.^* * Autor para correspondência: Prof . Dr. Leandro Machado Rocha Laboratório de Tecnologia de Produtos Naturais (LTPN) Faculdade de Farmácia - UFF Rua: Dr.Mário Viana, 523- Santa Rosa CEP: 24241-002 - Niterói (RJ). E-mail: farm@cruiser.com.br Telefax: (21)2610-6654

Laboratório de Tecnologia de Produtos Naturais, Faculdade de Farmácia, Universidade Federal Fluminense

RESUMO

A própolis, também conhecida como "cola de abelhas" possui atividade antimicrobiana, antiinflamatória, anestésica e imunoestimulante. Amostras de diferentes origens geográficas podem apresentar composição química bem diferente, porém continuam sendo responsáveis por atividade antibacteriana, inclusive contra cepas multirresistentes de Staphylococcus aureus. Este trabalho teve por objetivo otimizar o processo de extração visando determinar a melhor alcoolatura para a obtenção de tinturas de própolis com maior atividade antimicrobiana. Amostras de própolis foram extraídas com diferentes misturas hidroalcoólicas, variando o teor de etanol entre 90% a água pura, obtendo assim 11 tinturas diferentes. Todas as tinturas foram aplicadas em discos de papel, secos e colocados sobre a superfície de placas contendo ágar inoculado com cepa multirresistente de S. aureus. As placas foram incubadas e avaliadas no dia seguinte quanto à presença de halos de inibição. Os melhores resultados foram obtidos com extratos contendo 50 a 90% de etanol. O trabalho sugere a utilização da alcoolatura de 70% como a ideal para a obtenção de tinturas de própolis.

ABSTRACT

Bee glue (propolis) possesses antimicrobial, antiinflammatory, anaesthetic and immunostimulating activities. Propolis composition is extraordinary variable; samples from different geographic origin may posse's entirely different chemical composition. In different propolis samples, various substance combinations are responsible for the antibacterial activity of the bee glue. The aim of the study was to evaluate the best ethanolic extract concentration using Staphylococcus aureus multiresistant. Ethanol extracts from different concentration (10 to 90%) were applied on paper disks, dried, and put on the surface of nutrient agar plates with the overlay containing S. aureus. The plates were then incubated and evaluated the next day for the presence of inhibition zones. The best result was verified among 60 to 90% of ethanolic extract of propolis. This paper suggests the use of the alcool 70% as the ideal for the extration of propolis.

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1 Volpert, R.; Elstenr, E.F. Biochemical activivies of propolis extracts. II Photodynamic activities. Z. Naturforsch-C, v. 48, n. 11,12, p. 858-862, 1993.
2 Souza, G.H.B.; Zainaghi, I.A.; Carvalho, J.C.T.; Salvador, S.; Bastos, J.K. Desenvolvimento de metodologia analítica em cromatografia em camada delgada e isolamento de marcadores químicos para controle de qualidade da própolis. Revista da Universidade de Franca, ed. Especial, n. 7, p. 36, 1999.
3 Levy Jr., N.C. Atividade antimicrobiana da própolis. Revista da Universidade de Franca, ediçăo especial, ano 7, n 7, p. 18, 1999.
4 Carvalho, J.C.T. Validaçăo toxicológica de produtos apiterápicos. Revista da Universidade de Franca, ediçăo especial, ano 7, n. 7, p. 17, 1999.
5 Dos Santos, C.R.; Araújo, G.L.; Carvalho, E.S.; Sharapin, N.; Rocha, L.M.; Teixeira, L.A. Controle de qualidade físicoquímico e biológico de tinturas de própolis. Revista da Universidade de Franca, ediçăo especial, ano 7, n. 7, p. 35-36, 1999.
6 Dos Santos, C.R.; Araújo, G.L.; Carvalho, E.S.; Sharapin, N.; Teixeira, L.A.; Breyer, G.; Rocha, L.M. Otimizaçăo de processo extrativo de própolis visando a atividade antimicrobiana. Anais do Congreso Internacional de propóleos. Buenos Aires, Argentina. p. 115, 2000.
7 Amoros, M.; Simões, C.M.; Girre, L.; Sauvager, F.; Cormier, M. Synergistic effect of flavones and flavonols against herpes simplex virus type 1 in cell culture. Comparison with the antiviral activity of propolis. Journal of Natural Products. v. 55, n. 12, p. 1732-1740, 1992.
8 Khayyal, M.T.; El-Ghazaly, M.A.; El-Khatib, A.S. Mechanisms involved in the anti-inflammatory effect of propolis extract. Drugs Exp. Clin. Res., v.19, n. 5, p. 197-203, 1993.
9 Sud'ima, G.F.; Mirzoeva, O.K.; Pushkareva, M.A.; Korshumova, G.A.; Sumbatyan, N.V.; Varfolomeev, S.D. Caffeic acid, phenethyl ester as a lipoxygenase inhibitor with antioxidant properties. FEBS Lett. 23, v. 329, n. 1, 2, p. 21-24, 1993.
10 Tabera, A.; Bedascarrasbure, E.; Maldonado, L.; Alvarez, A.; Van Der Host, A. Actividad antibacteriana de propóleos argentinos enfrentados a Staphylococcus aureus Anais do Congreso Internacional de propóleos, Buenos Aires, Argentina, p. 97, 2000.
11 Kartal, M.; Yildiz, S.; Kaya, S.; Kurucu, S.; Topcu, G. Antimicrobial activity of propolis samples from two different regions of Anatolia. Jounal Ethnopharmacology, v. 86, n. 1, p. 69-73, 2003.
12 Focht, J.; Hansen, S.H.; Nielsen, J.V.; Van-Den-Berg , S.A.; Riezler, R. Bactericidal effect of própolis in vitro against agents causing upper respiratory tract infections. Arzmeimittelforshung, v. 43, n. 8, p. 921-3, 1993.
13 Hegazi, A.G. Propolis: an overview. Anais do Congreso Internacional de propóleos, Buenos Aires, Argentina, p. 35-53, 2000.
14 Boyanova, L.; Derejian, S.; Koumanova, R.; Katsarov, N.; Gergova, G.; Mitov, I.; Nikolov, R.; Krastev, Z. Inhibition of Helicobacter pylori growth in vitro by Bulgarian propolis: preliminary report. J. Med. Microbioogy, v. 52, n. 5, p. 417-419, 2003.
15 Fierro, W.M. Evidencia científica del propóleos desde el punto de vista médico. Anais do Congreso Internacional de propóleos, Buenos Aires, Argentina, p. 21-31, 2000.
16 Barizon, E.; Oliveira, P.; Figueiredo, E.; Figueiredo, C.; Bastos, J.K.; Salvador, S.L. Determinaçăo da atividade antimicrobiana da própolis em soluçăo alcoólica, mel e mel com própolis. Revista da Universidade de Franca; ed. especial 7, p. 51, 1999.
17 Soares, M.J.S.; Teixeira, L.A.; Nunes, M.R.C.M.; Carvalho, M.C.S.; Ferreira-Carvalho, B.T.; Figueiredo, A.M.S. Analysis of different molecular methods for typing methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolates belonging to the Brazilian epidemic clone. J. Med. Microbiology, n. 50, p. 1-11, 2001.
18 Larson, E.L. Alcohols. In: (Lea & Febiger) Disinfection, Sterilization and Preservation. Philadelphia: S.S. Block, p. 191-203, 1991.
19 Pelczar, M.; Reid, R.; Chan, E.C.S. Controle por agentes químicos. In: Microbiologia. Săo Paulo: Mc Graw-Hill Ltda, p. 497, 1980.
20 Rocha, Leandro. Estudo químico e farmacológico de Hypericum brasiliense Choisy. Rio de Janeiro, Dissertaçăo de Mestrado, Núcleo de Pesquisa de Produtos Naturais - NPPN - UFRJ, 1991.
²¹
NCCLS - National Committee for Clinical Laboratory Standards, Methods for diluition antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically. Approved standard. M 7-A 3, 1993.

*

Autor para correspondência:

Prof . Dr. Leandro Machado Rocha

Laboratório de Tecnologia de Produtos Naturais (LTPN) Faculdade de Farmácia - UFF

Rua: Dr.Mário Viana, 523- Santa Rosa

CEP: 24241-002 - Niterói (RJ).

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Telefax: (21)2610-6654

Datas de Publicação

Publicação nesta coleção
15 Set 2009
Data do Fascículo
2003

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[1] 1 Volpert, R.; Elstenr, E.F. Biochemical activivies of propolis extracts. II Photodynamic activities. Z. Naturforsch-C, v. 48, n. 11,12, p. 858-862, 1993.

[2] 2 Souza, G.H.B.; Zainaghi, I.A.; Carvalho, J.C.T.; Salvador, S.; Bastos, J.K. Desenvolvimento de metodologia analítica em cromatografia em camada delgada e isolamento de marcadores químicos para controle de qualidade da própolis. Revista da Universidade de Franca, ed. Especial, n. 7, p. 36, 1999.

[3] 3 Levy Jr., N.C. Atividade antimicrobiana da própolis. Revista da Universidade de Franca, ediçăo especial, ano 7, n 7, p. 18, 1999.

[4] 4 Carvalho, J.C.T. Validaçăo toxicológica de produtos apiterápicos. Revista da Universidade de Franca, ediçăo especial, ano 7, n. 7, p. 17, 1999.

[5] 5 Dos Santos, C.R.; Araújo, G.L.; Carvalho, E.S.; Sharapin, N.; Rocha, L.M.; Teixeira, L.A. Controle de qualidade físicoquímico e biológico de tinturas de própolis. Revista da Universidade de Franca, ediçăo especial, ano 7, n. 7, p. 35-36, 1999.

[6] 6 Dos Santos, C.R.; Araújo, G.L.; Carvalho, E.S.; Sharapin, N.; Teixeira, L.A.; Breyer, G.; Rocha, L.M. Otimizaçăo de processo extrativo de própolis visando a atividade antimicrobiana. Anais do Congreso Internacional de propóleos. Buenos Aires, Argentina. p. 115, 2000.

[7] 7 Amoros, M.; Simões, C.M.; Girre, L.; Sauvager, F.; Cormier, M. Synergistic effect of flavones and flavonols against herpes simplex virus type 1 in cell culture. Comparison with the antiviral activity of propolis. Journal of Natural Products. v. 55, n. 12, p. 1732-1740, 1992.

[8] 8 Khayyal, M.T.; El-Ghazaly, M.A.; El-Khatib, A.S. Mechanisms involved in the anti-inflammatory effect of propolis extract. Drugs Exp. Clin. Res., v.19, n. 5, p. 197-203, 1993.

[9] 9 Sud'ima, G.F.; Mirzoeva, O.K.; Pushkareva, M.A.; Korshumova, G.A.; Sumbatyan, N.V.; Varfolomeev, S.D. Caffeic acid, phenethyl ester as a lipoxygenase inhibitor with antioxidant properties. FEBS Lett. 23, v. 329, n. 1, 2, p. 21-24, 1993.

[10] 10 Tabera, A.; Bedascarrasbure, E.; Maldonado, L.; Alvarez, A.; Van Der Host, A. Actividad antibacteriana de propóleos argentinos enfrentados a Staphylococcus aureus Anais do Congreso Internacional de propóleos, Buenos Aires, Argentina, p. 97, 2000.

[11] 11 Kartal, M.; Yildiz, S.; Kaya, S.; Kurucu, S.; Topcu, G. Antimicrobial activity of propolis samples from two different regions of Anatolia. Jounal Ethnopharmacology, v. 86, n. 1, p. 69-73, 2003.

[12] 12 Focht, J.; Hansen, S.H.; Nielsen, J.V.; Van-Den-Berg , S.A.; Riezler, R. Bactericidal effect of própolis in vitro against agents causing upper respiratory tract infections. Arzmeimittelforshung, v. 43, n. 8, p. 921-3, 1993.

[13] 13 Hegazi, A.G. Propolis: an overview. Anais do Congreso Internacional de propóleos, Buenos Aires, Argentina, p. 35-53, 2000.

[14] 14 Boyanova, L.; Derejian, S.; Koumanova, R.; Katsarov, N.; Gergova, G.; Mitov, I.; Nikolov, R.; Krastev, Z. Inhibition of Helicobacter pylori growth in vitro by Bulgarian propolis: preliminary report. J. Med. Microbioogy, v. 52, n. 5, p. 417-419, 2003.

[15] 15 Fierro, W.M. Evidencia científica del propóleos desde el punto de vista médico. Anais do Congreso Internacional de propóleos, Buenos Aires, Argentina, p. 21-31, 2000.

[16] 16 Barizon, E.; Oliveira, P.; Figueiredo, E.; Figueiredo, C.; Bastos, J.K.; Salvador, S.L. Determinaçăo da atividade antimicrobiana da própolis em soluçăo alcoólica, mel e mel com própolis. Revista da Universidade de Franca; ed. especial 7, p. 51, 1999.

[17] 17 Soares, M.J.S.; Teixeira, L.A.; Nunes, M.R.C.M.; Carvalho, M.C.S.; Ferreira-Carvalho, B.T.; Figueiredo, A.M.S. Analysis of different molecular methods for typing methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolates belonging to the Brazilian epidemic clone. J. Med. Microbiology, n. 50, p. 1-11, 2001.

[18] 18 Larson, E.L. Alcohols. In: (Lea & Febiger) Disinfection, Sterilization and Preservation. Philadelphia: S.S. Block, p. 191-203, 1991.

[19] 19 Pelczar, M.; Reid, R.; Chan, E.C.S. Controle por agentes químicos. In: Microbiologia. Săo Paulo: Mc Graw-Hill Ltda, p. 497, 1980.

[20] 20 Rocha, Leandro. Estudo químico e farmacológico de Hypericum brasiliense Choisy. Rio de Janeiro, Dissertaçăo de Mestrado, Núcleo de Pesquisa de Produtos Naturais - NPPN - UFRJ, 1991.

[21] ²¹
NCCLS - National Committee for Clinical Laboratory Standards, Methods for diluition antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically. Approved standard. M 7-A 3, 1993.

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