Prospección química y microbiológica del bosque de galería del Río Uruguay

Prospecção química e microbiológica do bosque de galeria do Rio Uruguai

Chemical and microbiological prospecting woodland along the Uruguay River

Prospección química y microbiológica del bosque de galería del Río Uruguay

Chemical and microbiological prospecting woodland along the Uruguay River

Prospecção química e microbiológica do bosque de galeria do Rio Uruguai

Stephanie Barneche^I; Ana Bertucci^I; Federico Haretche^II; Cristina Olivaro^I; Maria Pia Cerdeiras^III; Alvaro Vázquez^I,*

^ICátedra de Farmacognosia y Productos Naturales, Departamento de Química Orgánica, Facultad de Química, CC 1157, Montevideo 11800, Uruguay

^IIMuseo y Jardín Botánico "Atilio Lombardo" 19 de Abril 1181, Montevideo 11700, Uruguay

^IIICátedra de Microbiologia, Departamento de Biociencias, Facultad de Química, CC 1157, Montevideo 11800, Uruguay

RESUMEN

La bioprospección es la búsqueda de información a partir de especies biológicas para su uso posterior en procesos de producción en diversos sectores. Ejemplos de esa información es la contenida en el material genético de todos los seres vivos, en los compuestos químicos que producen, en sus interacciones o en el conocimiento de las personas que de una manera u otra han estudiado a esos seres vivos. En este trabajo se presentan los resultados de la prospección botánica, química y microbiológica del bosque de galería del río Uruguay en la zona del rio Queguay, ecosistema con gran biodiversidad (comprende unas 200 especies) y de características poco comunes en el país dado su carácter subtropical. Se estudiaron 75 extractos provenientes de 31 especies pertenecientes a quince familias cubriendo de esa forma una gran biodiversidad.

Palabras clave: bioprospección, screening fitoquímico, actividad antimicrobiana.

ABSTRACT

Bioprospecting is the search for information from biological species for later use in production processes in various sectors. Examples of this information is contained in the genetic material of all living beings in the chemicals they produce, in their interactions or the knowledge of people who in one way or another, have studied these living beings. This paper presents the results of botanical, chemical and microbiological study of the gallery forest of the Uruguay River in the area of the Queguay river. This ecosystem presents great biodiversity (comprising about 200 species) and unusual features in the country given its subtropical character. We studied 75 extracts from 31 species belonging to fifteen families covering therefore a large biodiversity

Keywords: Bioprospection, phytochemical screening, antimicrobial activity.

RESUMO

A bioprospecção é a bisca de informações a partir de espécies biológicas para seu uso posterior em processos de produção em diversos setores. Exemplos dessa informação está contida no material genético de todos os seres vivos, nas substâncias químicas que produzem, nas suas interações ou n o conhecimento das pessoas que, de uma maneira ou de outra, estudam os seres vivos. Neste trabalho é apresentado os resultados da prospecção botânica, química e microbiológica do bosque de galeria do Rio Uruguai na zona do Rio Queguay, ecosistema com grande biodiversidade, com cerca de duzentas espécies, e de características pouco comum no país dado seu caráter subtropical. Foram estudados 75 extratos provenientes de 31 espécies pertencentes a quinze famílias, cobrindo, assim, uma grande biodiversidade.

Unitermos: Bioprospecção, abordagem fitoquímica, atividade antimicrobiana.

INTRODUCCIÓN

Aunque el Uruguay es considerado tradicionalmente como un país de praderas, la vegetación leñosa, arbóreo arborescente incluyendo a los palmares, según la carta forestal (Ministerio de Ganadería, Agricultura y Pesca 1980) cubre el 3,7% de la superficie del territorio nacional, totalizando 667315 hectáreas. Esto representa más de la mitad de toda el área forestada del país, incluso luego de años de auge de la forestación para madera y pulpa de celulosa.

Las especies arbóreas que forman parte de las comunidades nativas del Uruguay son alrededor de 170 ascendiendo a unas de 250 si se consideran también las especies arbustivas y caméfitas sobre un total algo mayor a las 2600 especies de plantas vasculares que crecen en el país. Este es un número considerablemente más alto al de la provincia de Buenos Aires, Argentina, a la que tradicionalmente se asocia en la bibliografía a la flora uruguaya, ubicándolas en la misma Provincia fitogeográfica (Escudero, 2004).

Dichas agrupaciones boscosas ocupan diferentes ambientes que determinan situaciones en la mayoría de los casos perfectamente diferenciables entre sí desde un punto de vista ecológico geográfico, lo que no ocurre si sólo se tiene en cuenta la localización geográfica de las especies leñosas. En las costas e islas del río Uruguay (departamentos del norte: Artigas, Salto y Paysandú) y en los afluentes (ríos Arapey, Queguay etc.) la vegetación del bosque de galería adquiere un "aspecto selvático" con especies propias de regiones subtropicales. A este fenómeno se le denomina intrusión de vegetación subtropical. Especies de la Provincia Paranense se desplazan hacia el sur por los ríos Uruguay y Paraná aprovechando el microclima ribereño, llegando hasta Punta Lara (Provincia de Buenos Aires) (Chebataroff, 1942).

En estos tipos de bosques se encuentran setenta especies de árboles y 57 de arbustos (50% de la flora arbórea y arbustiva del Uruguay) y 78 de enredaderas (88% del total) (Grela, 2004).

En este trabajo se presenta los resultados de la prospección química y biológica de especies nativas encontradas en el bosque de galería del río Uruguay en el área comprendida entre los ríos Queguay Grande y Queguay Chico y el río Uruguay que abarca algunas de las zonas con mayor biodiversidad del país.

MATERIALES Y MÉTODOS

Selección del área de estudio

El relevamiento se realizó eligiendo parcelas representativas dentro de la zona en estudio sobre el cauce medio de los ríos Queguay Grande y Chico y en la desembocadura del mismo con el rio Uruguay.

El relevamiento se desarrolló a través de transectas perpendiculares al cause principal de los ríos que abarcaron toda la profundidad del monte ribereño hasta la zona de transición y herbácea posterior. Se tomaron puntos sobre esas transectas y fueron relevados todos los ejemplares comprendidos en un radio de 4 m del punto de selección. Los ejemplares fueron identificados, medidos (altura y circunferencia a 120 cm de la base) y se tomaron muestras de herbario. Las plantas colectadas fueron seleccionadas de acuerdo a sus usos etnofarmacológicos reportados luego de una exhaustiva revisión bibliográfica (Alonso & Desmarchelier, 2005; Alonso Paz et al., 1992; Arrillaga, 1969, 1997; Cabrera & Zardini, 1978; Chifa & Ricciardi, 2001; Copetti, 1918; Goyeneche, 1906 apud Gupta, 1995; Jozami et al., 1983; Lombardo, 1928, 1937; Lahitte, 1998, Piastri et al., 1998; Ratera & Ratera, 1980; Toursarkissian, 1980) y tratando de abarcar la mayor diversidad posible. Se eligieron preferentemente aquellas cuyo uso popular sugieren una posible actividad antiinfecciosa.

El material vegetal fue identificado por el Lic. F. Haretche y especímenes de herbario fueron depositados en el Jardin Botanico "Atilio Lombardo", Montevideo (MVJB).

Preparación de extractos y screening fitoquímico

Se realizaron extractos en CHCl₃, acetona y EtOH/H₂O 70:30 de forma de abarcar el mayor rango de polaridades. El screening fitoquímico se realizó por cromatografía en capa fina (TLC), utilizando solventes de corrida y reveladores específicos para cada grupo de compuestos incluyendo reacciones de precipitación para taninos (Marini-Bettolo, 1981). Se utilizó CHCl₃/MeOH/NH₄OH en proporciones 90:10:1 y revelador de Dragendorff para alcaloides, AcOEt/COOH/AcOHglac/H₂O 100:11:11:27 y Fast Blue B para flavonoides, CH₂Cl₂/MeOH 95:5 y vainillina/acido sulfúrico para terpenos, CH₂Cl₂/MeOH 95:5 y H₂SO₄/CuSO₄/▲. para triterpenos y esteroides, AcOEt/MeOH/H₂O81:11:8 y reactivo de Kedde para butenolidos, CH₂Cl₂/MeOH 95:5 y FeCl₃ 5% para fenoles y CH₃Cl/MeOH/acetona/NH₄OH 3% 75:15:13:2 y revelador de anilina/difenilamina/H₃PO₄ para azucares (Wagner, 1996).

Ensayos de actividad antimicrobiana

La actividad antimicrobiana de los extractos fue determinada por una variación del método de difusión (Barry & Thornsberry, 1985) utilizando Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), Staphylococcus aureus (ATCC 6538p), Listeria inocua (CCM-FQ 56), Candida albicans (ATCC 10231), Bacillus subtilis (ATCC 25369), Escherichia coli (ATCC 26) y Aspergillus niger (ATCC 2601) como cepas de ensayo.

RESULTADOS Y CONCLUSIONES

En este trabajo se estudiaron 71 extractos provenientes de 31 especies representando diecinueve familias. De esta manera se abarco una amplia biodiversidad dentro de las especies presentes en el bosque de galería del rìo Uruguay. La información etnobotánica recopilada se presenta en la Tabla 1. De las especies estudiadas dieciocho tienen uso tradicional reportado incluyendo quince con uso medicinal.

De los resultados del screening fitoquìmico se puede apreciar que la mayor parte de los extractos dieron un resultado positivo para esteroides y/o triterpenos, y terpenos menores. Un número muy importante fue positivo para, flavonoides, y otros glicósidos fenólicos. Los taninos y saponinas, aunque ampliamente distribuidos son particularmente abundantes en Bignoneacea, Fabaceae y Sapindaceae. Los alcaloides se presentaron en catorce extractos. Tres extractos, pertenecientes todos ellos a especies del genero Myrsine, fueron positivos con el reactivo de Kedde para el grupo butenólido, siendo esta la primera que se encuentra estos derivados en tanto en el gènero Myrsine como en la familia Myrsinceae.

Los resultados de los ensayos de actividad antimicrobiana se presentan en la Tabla 2. El 70% de los extractos (50) fueron activos frente a por lo menos una de las cepas microbianas testeadas. Este resultado es coherente con el método de colecta utilizado basado en información etnobotánica tradicional (Cox, 1990) y quimiosistemática y con resultados previos de nuestro grupo (Olano et al., 1996, Bertucci et al., 2009).

Numerosos extractos fueron activos frente a todas las cepas del panel representativo utilizado, es particularmente interesante que veinte extractos fueron positivos contra S. aureus, diecinueve contra C. albicans y nueve contra A. niger.

AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecen el apoyo del Instituto Nacional de Investigaciones Agropecuarias a través del proyecto FPTA 247 "Valorización del monte nativo: la bioprospección como una herramienta de conservación".

Received 30 September 2009; Accepted 21 November 2009

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Fechas de Publicación

• Publicación en esta colección
  19 Nov 2010
• Fecha del número
  Dic 2010

Histórico

• Recibido
  30 Set 2009
• Acepto
  21 Nov 2009