Imunoexpressão do Ki-67 no carcinoma do pênis

Immunoexpression of Ki-67 antigen in carcinoma of the penis

IMUNOEXPRESSÃO DO Ki-67 NO CARCINOMA DO PÊNIS

IMMUNOEXPRESSION OF Ki-67 ANTIGEN IN CARCINOMA OF THE PENIS

Sandro M. Faria¹, Antonio Carlos Pereira Martins², Maria Angeles S. Llorach-Velludo³, Haylton Jorge

Suaid⁴, Silvio Tucci Jr⁴, Adauto José Cologna⁴, Nelson Okano⁴

Unitermos: Ki-67, MIB-1, carcinoma epidermóide, carcinoma de pênis

Key Words: Ki-67, MIB-1, squamous cell carcinoma, carcinoma of the penis

FACULDADE DE MEDICINA DE RIBEIRÃO PRETO - USP

Departamento de Cirurgia - Disciplina de Urologia

Departamento de Patologia

Projeto financiado pela FAPESP e pela FAEPA- Fundação de Apoio ao Ensino, Pesquisa e Assistência ao HCFMRP-USP.

RESUMO

Objetivo - Estudar se a expressão imunohistoquímica do Ki-67 em carcinomas epidermóides de pênis tem relação com a agressividade biológica do tumor.

Material e Métodos– Em 26 pacientes portadores da neoplasia fez-se amputação parcial ou total de pênis, em 10 dos quais associou-se linfadenectomia regional por suspeita de metástases. A idade média dos pacientes foi de 61 anos e o tempo de seguimento pós-operatório de 5± 3,2 anos. As peças operatórias conservadas em formol ou parafina foram processadas para marcação imunohistoquímica para o Ki-67 pelo método da avidina-biotina-peroxidase.

Resultados – Em 19/26 (73%) dos casos a marcação foi positiva, sendo 13/20 tumores bem diferenciados e 6/6 moderadamente diferenciados. Em 10/16 pacientes com doença localizada o marcador foi positivo, enquanto que essa proporção para os casos de metástases foi 9/10. A sobrevida de 5 anos foi 15/26 (65,4%). A análise estatística não mostrou correlação entre a positividade imunohistoquímica com o grau e estádio da neoplasia, nem com a sobrevida dos pacientes.

Conclusão – Não se encontrou relação entre a marcação imunohistoquímica do Ki-67 com a agressividade biológica do tumor.

Introdução: O prognóstico do carcinoma epidermóide de pênis depende do estadio e do grau de diferenciação celular e o grau maior se relaciona a uma incidência maior de metástases^17,20. A sobrevida de cinco anos de pacientes sem metástases ganglionares é de 80% e com metástases é de 50%. O estadiamento da lesão primária é relativamente simples clinicamente, sendo confirmado pela histologia. Já a detecção de metástases ganglionares também depende da inspeção e palpação, não sendo diagnosticada precocemente na ausência de enfartamento ganglionar^4,17,22. A literatura tem mostrado que 2/3 (dois terços) dos pacientes com linfadenopatia ao exame inicial apresentam neoplasia ganglionar. Por outro lado, 20% dos pacientes sem adenopatia apresentam disseminação linfonodal⁹. Esses dados associados à morbidade (30% a 50%) do esvaziamento ganglionar⁵ levam à dificuldade e controvérsia no manejo do câncer de pênis no que se refere à linfadenectomia inguinal. As opções terapêuticas consistem no tratamento clínico com antibiótico dos casos com adenopatia procurando-se excluir infecção e linfadenectomia tardia nos pacientes com suspeita de metástases; ou então o esvaziamento ganglionar profilático^1,15. Sugere-se que a primeira conduta está associada a uma mortalidade específica maior e a segunda a um índice de 20% de esvaziamento inguinal desnecessário, e portanto com morbidade maior, mas associada a uma taxa maior de sobrevida¹⁵.

O estudo da biologia molecular dos tumores tem despertado o interesse de grande número de autores devido ao potencial na definição do prognóstico e consequentemente da conduta. Mas os resultados encontrados não são uniformes, nem igualmente importantes para os diversos tipos de tumores^3,10,21,24. Recentemente foi demonstrado no carcinoma epidermóide de pênis relação do PCNA com o estádio e maior agressividade biológica mas não com o grau¹⁴.

O Ki-67 (MIB-1) é um antígeno nuclear associado com a proliferação celular, encontrado em todo o ciclo celular (fases G1, S, G2, M) e ausente em G0⁷. Através da análise imunohistoquímica, tem-se buscado correlacionar sua expressão com o comportamento tumoral. É descrita uma correlação positiva no tumor de mama^12,16, tumores de células basais², lesões vulvares²³ e tumor de laringe⁸. Já no carcinoma epidermóide da cavidade oral¹⁹, no tumor de adrenal⁶, no câncer gástrico¹⁸ e de cólon¹³ essa correlação não foi encontrada.

Nosso objetivo é estudar a imunoexpressão do Ki – 67 no carcinoma epirdemóide do pênis buscando verificar se há correlação com o grau, estádio e evolução da doença.

Material e Métodos: Foram estudados 26 pacientes com diagnóstico de carcinoma epirdemóide do pênis tratados no HCFMRP-USP entre 1989 e 1998 com penectomia parcial ou total. A idade variou entre 32 e 87 anos com média de 61. O tempo de seguimento médio foi de 5± 3,2 anos (mediana de 4 anos). O estadiamento tumoral foi feito com exame clínico, Rx de tórax e nos casos com suspeita clínica de metástase ganglionar buscou-se a confirmação por tomografia de abdômen e pelve. Somente os pacientes com suspeita de metástase ganglionar inguinal foram submetidos à linfadenectomia inguinal bilateral, cadeias superficiais e profundas. Os 10 casos submetidos à linfadenectomia apresentavam metástases ganglionares, 7 dos quais já no momento da consulta inicial.

As peças cirúrgicas foram fixadas em formol à 10% e incluídas em parafina. Esses blocos foram recuperados no Serviço de Patologia do FMRP – USP para identificação das áreas mais representativos da neoplasia. Empregou-se a técnica descrita anteriormente¹⁴. Cortes de 4 micra foram colocados em lâminas, desparafinados com xilol e submetidos à recuperação antigênica; em seguida fez-se a reação imunohistoquímica utilizando o método da avidina-biotina-peroxidase, com anticorpo monoclonal anti Ki-67¹¹ (Imunotechâ), na diluição de 1:100. Realizamos a leitura contando número de células marcadas para cada 500 células, utilizando campos aleatórios, com uma videocâmera acoplada ao microscópio de luz (KS-400, Zeiss), utilizando um "software" para morfometria. O padrão de marcação foi considerado positivo quando a proporção células marcadas/não marcadas era superior a 5%.

Os resultados foram analisados pelo teste exato de Fisher considerando-se a significância a nível de 5%.

Resultados: A Tabela 1 mostra as características da amostra quanto ao grau e estádio tumoral. Nessa amostra, nenhum tumor era indiferenciado, 6 (23%) eram moderadamente diferenciados e 20 (77%) indiferenciados. Foram identificados 10 casos de metástases (N₊/Mo/₊), 9 dos quais evoluíram com óbito pela doença, apesar de serem bem diferenciados e da linfadenectomia regional.

A Tabela 2 mostra a distribuição da marcação do Ki-67 com o grau do tumor, onde não foi estabelecida uma relação com o grau de expressão (p=0,14).

A relação da expressão do Ki-67 com o estádio linfonodal e conseqüente evolução clínica está na Tabela 3. A marcação imunohistoquímica apresentou uma sensibilidade de 90% e especificidade de 37,5% no diagnóstico de doença linfonodal maligna. O valor preditivo positivo para a disseminação linfonodal foi de 47,3 % e o preditivo negativo de 85 %.

O teste exato de Fisher, bicaudal, não mostrou diferença estatística significante do padrão de marcação do Ki-67 com o grau e estádio tumoral, assim como com o êxito letal (p=0,19).

Discussão: A amostra estudada mostra algumas características interessantes. Em 10/26 tumores (38,4%) havia metástases. Em 9/10 tumores metastáticos os portadores faleceram, todos com graduação bem diferenciada. A linfadenectomia inguinal bilateral executada diante da suspeita de metástases mostrou-se pouco eficiente na preservação da vida dos pacientes (apenas 10%). Em 3/11 (27,2%) dos tumores pT1 ocorreram metástases, 2 dos quais faleceram. Nenhuma dessas mortes teria sido evitada caso se adotasse a linfadenectomia profilática segundo os critérios modernos de indicação para o procedimento, ou seja, quando os tumores forem >pT1 e/ou grau >1 (BD)^15,22. Além da eficácia ainda não comprovada desses critérios de indicação de linfadenectomia precoce, acrescente-se que em 8/15

(53,4%) dos pacientes com tumores >pT1 o esvaziamento ganglionar precoce seria desnecessário. Resta saber se essa conduta preventiva iria realmente reduzir a taxa de óbito dos pacientes com metástases comprovadas quando comparada com a outra adotada neste trabalho de se indicar essa cirurgia somente diante da suspeita clínica da existência de metástases. Essa conduta mais conservadora garantiu a sobrevida de 15/26 (65,4%) dos pacientes após 5 anos de seguimento, o que parece não diferir de maneira significativa da conduta mais agressiva¹⁵, além do que na amostra desses autores foram excluídos os casos com suspeita clínica inicial de metástases. Se adotássemos esse critério de exclusão em nossa amostra a sobrevida seria 14/19 (73%).

O uso de marcadores tumorais como o Ki-67 tem o objetivo de verificar se o padrão de marcação guarda alguma relação com a agressividade biológica do tumor, o que poderia ter alguma utilidade para a conduta. Neste trabalho, não conseguimos demonstrar relação entre esse antígeno de proliferação celular com o grau e estádio tumoral ou com a sobrevida dos pacientes. Não há na literatura dados sobre este marcador neste tipo de neoplasia para efeito de comparação. Em outro estudo em carcinomas epidermóides de pênis com o antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA)¹⁴ constatou-se correlação entre o padrão de marcação e o estádio tumoral, mas não com o grau da neoplasia. Essa discrepância é curiosa, pois embora os antígenos estudados sejam diferentes, ambos são marcadores que indicam o estado de proliferação celular. Não é possível afirmar por estes 2 estudos qual a razão da contradição ou qual dos antígenos é melhor, embora na literatura haja a tendência de se considerar o Ki-67 mais fidedigno. Talvez, isto dependa do tipo de neoplasia investigada, o que não é a situação ora em discussão. Também não se pode excluir a possibilidade de que a divergência dos resultados seja decorrente da amostragem dos pacientes. A controvérsia levantada para os marcadores imunohistoquímicos de proliferação indicam a necessidade de outros estudos.

Conclusão: O método imunohistoquímico utilizado mostrou que 73 % dos carcinomas epidermóides de pênis apresentam marcação positiva para o Ki-67. Nos 26 pacientes estudados não se estabeleceu relação estatisticamente significante entre o padrão de marcação com o grau e o estádio da neoplasia, nem com a sobrevida dos pacientes.

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1

Médico Residente do Departamento de Cirurgia e Anatomia da FMRP-USP

² Professor Titular do Departamento de Cirurgia e Anatomia da FMRP-USP

³ Professora Doutora do Departamento de Patologia da FMRP-USP - in memoria

⁴Professor Doutor do Departamento de Cirurgia da FMRP-USP

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  26 Mar 2001
• Data do Fascículo
  2000