Rhodococcus equi: sorologia e avaliação da transferência passiva de anticorpos para potros

Rhodococcus equi: serology and evaluation of passive antibody transference to foals

RHODOCOCCUS EQUI: SOROLOGIA E AVALIAÇÃO DA TRANSFERÊNCIA PASSIVA DE ANTICORPOS PARA POTROS

RHODOCOCCUS EQUI: SEROLOGY AND EVALUATION OF PASSIVE ANTIBODY TRANSFERENCE TO FOALS

Andrea Lazzari¹ Agueda Castagna de Vargas² Lúcia Niederauer Weiss³ Carlos Horácio Borges⁴

RESUMO

Objetivando esclarecer alguns aspectos relacionados à sorologia e a transferência passiva de anticorpos contra o Rhodococcus equi em potros, foram testadas pela técnica de imunodifusão em gel de ágar (IDGA) amostras de soro e colostro de duas populações distintas de eqüinos. A primeira população era constituída por 59 potros e suas mães, de um haras onde não se efetuava a vacinação contra esta bactéria. Do total de potros. 32,2% (19/59) mostraram anticorpos contra este agente. No colostro foram detectados anticorpos em 30,5% (18/59) das amostras, entretanto, não se observou transferência passiva de anticorpos. A segunda população, constituída por 12 éguas prenhas, foi submetida à vacinação contra o Rhodococcus equi, sendo testados soro e colostro das éguas e soro de seus respectivos potros. Antes da vacinação todas as fêmeas mostraram-se soronegativas. Após, 91,6% (11/12) foram positivas ao teste de IDGA. Nas amostras de colostro e soro dos potros, os percentuais de positividade foram de 75% (9/12) e 66,7% (8/12), respectivamente. Observou-se a transferência passiva de anticorpos para os potros, tendo esta, relação com a ingestão de colostro positivo.

Palavras-chave: Rhodococcus equi, imunidade, anticorpos, vacina, colostro, eqüino.

SUMMARY

Two equine populations were evaluated in relation to serology and passive antibodies against Rhodococcus equi. The first population had 59 foals with no history of mare vaccination against Rhodococcus equi. The foals sera samples and the mare colostrum were examined with the agar gel immunodiffusion test. Antibodies were detected in 32.2% of the foals and also 30.5% (18/59) of colostrum samples examined. However, no passive antibody transfer was observed. The second population, 12 pregnant mares were vaccinated against Rhodococcus equi. Before the vaccination, all mares were seronegative. After vaccination, 91.6% (11/12) of the vaccinated mares were positive on the serologic test. In mare colostrum and foals sera, positive results were 75% (9/12) and 66.7% (8/12) respectively. Passive antibody transmission was observed in the foals and there was a relationship with ingestion of positive colostrum.

Key words: Rhodococcus equi, immunity, antibody, vaccine, colostrum, equine.

INTRODUÇÃO

O Rhodococcus equi foi identificado pela primeira vez em 1923 por Magnusson, de casos de pneumonia em potros na Suécia (BARTON & HUGHES, 1980). Esta bactéria possui uma distribuição mundial, tendo sido isolada de solos contaminados por fezes de eqüinos e de outros herbívoros (KNOTTENBELT, 1993). Sua presença no trato gastrointestinal de eqüinos saudáveis sugere associação à flora intestinal normal desta espécie (TAKAI & TSUBAKI, 1985). Segundo GASKIN et al. (1990), este agente bacteriano tomou-se mundialmente importante como causa de broncopneumonia com abscedação pulmonar em potros, entre o 2° e 6° mês de idade, o que coincide com o período de transição entre a imunidade passiva e a ativa (PRESCOTT & HOFFMAN, 1993). LANGONI et al (1994) em um levantamento de amostras laboratoriais, encontrou o Rhodococcus equi como o 2° microrganismo mais prevalente em isolamentos de pulmão e lavados tráqueo-bronquiais de equinos da região de Botucatu, Brasil.

Atribui-se a esta bactéria em torno de 3% das mortes em potros, sendo que nos casos de surto esta mortalidade pode chegar à 20% (TAKAI et al., 1993). Na Argentina, BECU (1994) encontrou um percentual de mortalidade de 2-8% em haras de criação da raça Puro Sangue de Corrida. FERNANDEZ & ESTEIN (1994), também na Argentina, registraram uma taxa de mortalidade de 17-22% em haras endêmicos. Estes percentuais são alcançados pela dificuldade do estabelecimento de um diagnóstico precoce (KNOTTENBELT, 1993). No entanto, os testes sorológicos podem ser utilizados como indicadores precoces desta infecção, permitindo a intervenção terapêutica antes do avanço das lesões e evidências clínicas da doença (GASKIN et al., 1990).

Estudos relativos à imunidade humoral demonstraram que a opsonização por anticorpos específicos é de grande importância no aumento da adesão e morte do microrganismo por macrófagos e neutrófilos (SANADA et al., 1992). MARTENS et al. (1989) demonstram este fato pela capacidade da imunoprofilaxia passiva, através do plasma hiperimune, alterar a progressão clínica da pneumonia causada pelo Rhodococcus equi. TAKAI et al. (1991) sugerem que a vacinação parenteral de éguas e a administração de plasma hiperimune à potros podem ser opções viáveis para o controle desta enfermidade. Entretanto, MADIGAN (1994) citou que os anticorpos derivados do colostro de éguas vacinadas contra o Rhodococcus equi não protegeriam os potros contra a pneumonia causada por este agente.

Apesar da importância desta enfermidade, existem poucas informações e registros sorológicos no Brasil. Os objetivos do presente estudo foram pesquisar anticorpos contra o R. equi no soro de éguas, potros e colostro de equinos vacinados e não vacinados contra esta bactéria, e avaliar a transferência passiva de anticorpos para potros.

MATERIAIS E MÉTODOS

Eqüinos não vacinados:

Foram analisadas amostras de soro sanguíneo de 59 potros provenientes de um haras do Estado do Paraná. A coleta foi realizada às 3, 6, 12, 18 e 24 horas e ao 7°, 14°, 21°, 28°, 35°, 42°, 49°, 56°, 71°, 86°, 101°, 116°, 161° e 176° dias após o parto. As amostras de colostro foram coletadas logo após o parto, antes da primeira mamada.

Eqüinos vacinados:

O soro sanguíneo de 12 éguas prenhas, vacinadas contra o R. equi, foi obtido de um haras do Estado do Rio Grande do Sul. As coletas foram realizadas antes da 1ª, 2ª e 3ª dose da vacina e 15 dias após a última aplicação da vacina. Para a determinação da transferência passiva de anticorpos contra este agente, o soro sanguíneo dos 12 potros, filhos das éguas vacinadas, foi coletado 24 horas após o nascimento (após ingestão do colostro). A pesquisa de anticorpos no colostro foi realizada em amostras coletadas logo após o parto, antes da primeira mamada dos potros. Nas 12 éguas prenhas foi utilizada uma vacina importada, produzida a partir da cepa Joaquim 89-Curitiba, Paraná. O esquema de vacinação foi de 1 ml subcutâneo aos 50-40 e 30 dias pré-parto.

Técnica de imunodifusão em gel de ágar (IDGA):

As amostras coletadas foram submetidas à técnica sorológica de IDGA. Para a realização da técnica foram produzidos o antígeno e o soro controle, segundo descrição feita por NAKAZAWA (1980) e SKALKA & SVASTOVÁ (1984) respectivamente. O antígeno foi preparado a partir da cepa SB 17/91, isolada no laboratório de bacteriologia da UFSM. Esta cepa foi obtida do pulmão de um potro com pneumonia piogranulomatosa proveniente de um haras do Estado do Paraná. Os resultados obtidos foram analisados pelo teste do qui-quadrado. As diferenças foram consideradas significativas quando P<0,05%.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Eqüinos não vacinados contra o Rhodococcus equi:

Através da análise de amostras coletadas de um haras onde nunca se efetuou a vacinação de fêmeas prenhas contra o R. equi, alguns aspectos relacionados com o número de animais positivos e a transferência passiva de anticorpos contra este agente para os potros foram elucidados.

Dos 59 potros que tiveram o soro coletado, 32,2% (19/59) apresentaram anticorpos contra o R. equi, e 67,8% (40/59) foram negativos. Nas diferentes datas de coleta do soro dos potros, revelou-se uma persistência média de anticorpos contra o R. equi de 38 dias, sendo que o mínimo e o máximo desta persistência foi de 7 e 126 dias. Este achado demonstra que nesta população não vacinada, os potros apresentaram uma variação bastante ampla na persistência de anticorpos contra esta bactéria. A data de coleta onde primeiro se detectou anticorpos específicos foi a do 28° dia em 2,6% das amostras de potros positivos. O maior percentual de positividade foi observado no 56° dia (18,2%). Os dados referentes à vida média dos anticorpos contra o Rhodococcus equi e as datas de coleta dos potros estão representados na Figura 1.

As amostras de colostro em estudo apresentaram 30,5% (18/59) de positividade para anticorpos contra esta bactéria, sendo os demais negativos. A análise estatística mostrou que não houve relação entre a presença de anticorpos. contra o Rhodococcus equi no colostro e o início do aparecimento dos mesmos no soro sanguíneo dos potros.

São poucos os registros sobre estudos sorológicos, o que dificulta a discussão. O percentual de potros soropositivos neste trabalho (32,2%) é superior ao encontrado por SANADA et al. (1992) no Japão, que foi de 11% e por GASKIN et al. (1990) em Kentucky (EUA), que foi de 12%. Isto talvez se deva a maior contaminação ambiental e ou manejo predisponente a infecção por este agente na propriedade em estudo. No período da realização deste estudo ocorreram surtos desta enfermidade. Autores como SKALKA (1987) descrevem que a soropositividade de potros pode estar associada com a presença ou mesmo com a ausência de história de doença por este agente.

A detecção de 2,6% de potros soropositivos somente a partir da coleta do 28° dia e a presença de 30,5% de amostras de colostro positivo, demonstra que não houve transferência passiva de anticorpos (Figura 1). Pela característica coprofágica dos potros, as fezes das mães e o solo são fontes essenciais para a colonização inicial pelo Rhodococcus equi (DEBEY & BAILIE, 1987). Isto leva à crer que a soroconversão a partir do 28° dia de vida, pode estar relacionada ao contato dos potros nas 3 primeiras semanas após o nascimento com o agente presente no meio ambiente. Tal constatação encontra respaldo em GASKIN et al. (1990), citando que a inoculação do antígeno de R. equi a partir da primeira semana de vida resulta em resposta imune mensurável pela IDGA sete dias após sua aplicação.

Eqüinos vacinados contra o Rhodococcus equi:

As 12 éguas prenhas utilizadas foram negativas à técnica de IDGA antes da vacinação. Quinze dias após a aplicação da 3ª dose da vacina, 91,6% (11/12) das éguas apresentaram anticorpos contra o Rhodococcus equi. O colostro destas éguas mostrou uma positividade de 75% (9/12).

Analisando os dados referentes às fêmeas com colostro positivo e potros com sorologia positiva ao R. equi, se observou que 89% (8/9) dos potros que receberam colostro com anticorpos contra esta bactéria foram positivos à técnica de IDGA (Figura 2). Um percentual de 11% (1/9), mesmo recebendo colostro positivo, não apresentou anticorpos detectáveis neste teste. Todos os potros que receberam colostro negativo para anticorpos contra o R. equi permaneceram soronegativos nas 24 horas após ingestão do colostro. A presença de anticorpos no soro dos potros está relacionada com a positividade para o R. equi no colostro de suas mães (P<0,01%).

As pesquisas sobre vacinas ocorreram a partir da demonstração feita por HIETALA & ARDANS (1987) de que macrófagos alveolares de potros sensibilizados por este agente possuíam uma capacidade mais elevada para destruir esta bactéria. Neste estudo, se observou que a vacina foi capaz de estimular a produção de anticorpos específicos contra o R. equi, corroborando achados de MARTENS et al. (1991). O percentual de positividade encontrado nos potros (66,7%) foi inferior ao encontrado por BECU (1994) na Argentina que foi de 85%, isto pode ser atribuído às diferenças das populações estudadas bem como à vacina empregada. A transferência passiva de anticorpos contra o R. equi para os potros está significativamente relacionada com a presença de imunoglobulinas específicas no soro sanguíneo e colostro de suas respectivas mães. A transmissão passiva foi também observada por TAKAI et al. (1985) e MADIGAN et al (1991), tendo este último descrito que éguas prenhas imunizadas tiveram altos títulos de anticorpos no colostro e poucos potros apresentaram falha na tranferência passiva.

Embora o relato da diminuição de casos clínicos provocados pelo Rhodococcus equi (de 26,1% para 6,4%) e da mortalidade (de 69,6% para 20%) na população vacinada, permanece a dúvida do efeito protetor dos anticorpos transferidos passivamente pelo colostro e da importância da vacinação de éguas prenhas. Várias medidas de manejo adotadas provavelmente contribuíram para esta melhora. Existe portanto, a necessidade de maiores estudos para a elucidação destas questões, bem como o conhecimento da situação epidemiológica da região estudada.

CONCLUSÕES

Mediante os resultados obtidos neste trabalho e as condições em que foi realizado, pode-se concluir que:

- éguas não vacinadas que apresentam anticorpos em seus colostros não são capazes de transmitir imunidade passiva para seus potros. Não há relação entre a presença de anticorpos contra o Rhodococcus equi no colostro e o início do aparecimento dos mesmos no soro sanguíneo dos potros;

- em éguas vacinadas para R. equi ocorre a transferência passiva de anticorpos existindo uma relação entre a presença destes no colostro e no soro de seus respectivos potros.

² Médico Veterinário, MsC, Professor Assistente, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, UFSM, RS, Brasil. Fax [phone]. Email: AGUEDA at super.ufsm.br. Autor para correspondência.

³ Acadêmico do Curso de Medicina Veterinária da UFSM.

⁴ Médico Veterinário autônomo.

Recebido para publicação em 22.11.95. Aprovado em 27.03.96.

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¹

Médico Veterinário, aluno do Curso de Pós-graduação (área de Medicina Veterinária Preventiva), Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), 97119-900 - Santa Maria, RS.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  02 Out 2008
• Data do Fascículo
  Ago 1996

Histórico

• Aceito
  27 Mar 1996
• Recebido
  22 Nov 1995