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Valores de referência do leucograma de bovinos da raça Jersey criados no Estado de São Paulo

Reference values of the leucogram of the Jersey cattle, raised in São Paulo State

Resumo

Estabeleceram-se os valores de referência do leucograma de bovinos da raça Jersey, criados no Estado de São Paulo, avaliando-se a influência exercida pelos fatores etários em amostras de sangue colhidas de 253 fêmeas clinicamente sadias e não-reagentes ao antígeno do Vírus da Leucose dos Bovinos. Nas amostras de sangue, que continham EDTA como anticoagulante, foi realizada a contagem do número total de leucócitos, em câmara de Neubauer modificada, utilizando-se o líquido de Thoma como diluidor e a contagem diferencial de leucócitos, efetuada em esfregaços sangüíneos, corados pelo método de Rosenfeld. Demonstrou-se que o leucograma desses bovinos sofria influência dos fatores etários. O número total de leucócitos e linfócitos aumentou até 12 meses de idade, estabilizando-se entre 12 e 24 meses, para, a seguir, diminuir, progressivamente, com o desenvolvimento etário, sendo o quadro leucocitário predominantemente linfocitário. Essas variações foram atribuídas, principalmente, ao comportamento do número absoluto de linfócitos. O número absoluto do total de neutrófilos não demonstrou variações significativas que pudessem ser atribuídas à influência dos fatores etários, mas o número absoluto de neutrófilos com núcleo em bastonete foi maior nos bezerros com até 6 meses de idade. O número absoluto de eosinófilos aumentou gradativamente com o desenvolvimento etário, não se observando variações significativas do número absoluto de basófilos e monócitos. Os valores de referência determinados para o leucograma, expressos em números absolutos, foram os seguintes: leucócitos- 11.847 ± 3.374 células/mm³; neutrófilos bastonete- 80 ± 122 células/mm³; neutrófilos segmentado- 2.457 ± 1.311 células/mm³; total de neutrófilos- 2.537 ± 1.354 células/mm³; eosinófilos- 335 ± 415 células /mm³; basófilos- 84 ± 108 células/mm³; linfócitos- 8.716 ± 3.028 células/mm³; monócitos- 174 ± 132 células/mm³.

Hematologia; Valores de referência; Bovinos; Gado Jersey


Valores de referência do leucograma de bovinos da raça Jersey criados no Estado de São Paulo

Reference values of the leucogram of the Jersey cattle, raised in São Paulo State

Eduardo Harry BIRGEL JUNIOR1 1 Departamento de Clínica Médica da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da USP ¾ SP ; José Luiz D´ANGELINO1 1 Departamento de Clínica Médica da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da USP ¾ SP ; Fernando José BENESI1 1 Departamento de Clínica Médica da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da USP ¾ SP ; Eduardo Harry BIRGEL1 1 Departamento de Clínica Médica da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da USP ¾ SP

CORRESPONDÊNCIA PARA:

Eduardo Harry Birgel Junior

Departamento de Clínica Médica da

Faculdade de Medicina Veterinária

e Zootecnia da USP

Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva, 87

Cidade Universitária Armando

de Salles Oliveira

05508-000 ¾ São Paulo ¾ SP

e-mail: ehbirgel@usp.br

RESUMO

Estabeleceram-se os valores de referência do leucograma de bovinos da raça Jersey, criados no Estado de São Paulo, avaliando-se a influência exercida pelos fatores etários em amostras de sangue colhidas de 253 fêmeas clinicamente sadias e não-reagentes ao antígeno do Vírus da Leucose dos Bovinos. Nas amostras de sangue, que continham EDTA como anticoagulante, foi realizada a contagem do número total de leucócitos, em câmara de Neubauer modificada, utilizando-se o líquido de Thoma como diluidor e a contagem diferencial de leucócitos, efetuada em esfregaços sangüíneos, corados pelo método de Rosenfeld. Demonstrou-se que o leucograma desses bovinos sofria influência dos fatores etários. O número total de leucócitos e linfócitos aumentou até 12 meses de idade, estabilizando-se entre 12 e 24 meses, para, a seguir, diminuir, progressivamente, com o desenvolvimento etário, sendo o quadro leucocitário predominantemente linfocitário. Essas variações foram atribuídas, principalmente, ao comportamento do número absoluto de linfócitos. O número absoluto do total de neutrófilos não demonstrou variações significativas que pudessem ser atribuídas à influência dos fatores etários, mas o número absoluto de neutrófilos com núcleo em bastonete foi maior nos bezerros com até 6 meses de idade. O número absoluto de eosinófilos aumentou gradativamente com o desenvolvimento etário, não se observando variações significativas do número absoluto de basófilos e monócitos. Os valores de referência determinados para o leucograma, expressos em números absolutos, foram os seguintes: leucócitos- 11.847 ± 3.374 células/mm3; neutrófilos bastonete- 80 ± 122 células/mm3; neutrófilos segmentado- 2.457 ± 1.311 células/mm3; total de neutrófilos- 2.537 ± 1.354 células/mm3; eosinófilos- 335 ± 415 células /mm3; basófilos- 84 ± 108 células/mm3; linfócitos- 8.716 ± 3.028 células/mm3; monócitos- 174 ± 132 células/mm3.

UNITERMOS: Hematologia; Valores de referência; Bovinos; Gado Jersey.

INTRODUÇÃO

A importância e a necessidade do estabelecimento de valores de referência que se adaptem às condições brasileiras podem ser resumidas no relato de Alencar Filho1 sobre episódio ocorrido no final da década de 60, quando a suspeita de que bovinos teriam sido importados da Dinamarca com leucose enzoótica dos bovinos ocasionou a interdição, pelo Ministério da Agricultura, de uma propriedade de criação de bovinos no Estado de São Paulo, com grande repercussão entre os criadores brasileiros e que resultou na vinda de Bendixen e Gaede, hematologistas dinamarqueses, para estudarem o problema. Os referidos hematologistas, como salienta Alencar Filho1, concluíram que as alterações observadas nos valores do leucograma dos bovinos importados da Dinamarca seriam manifestações conseqüentes das variações mesológicas e da influência de condições patológicas, inexistentes no país de origem, não sendo possível, em função disso, utilizarem-se os valores padrões hemáticos e as chaves leucométricas de diagnóstico de leucose européias. Essa interpretação hematológica asseguraria serem os animais importados da Dinamarca sadios e livres de leucose enzoótica dos bovinos.

De fato existe, na literatura sobre hematologia, a opinião concordante, quase unânime, que animais criados sob diferentes condições ambientais, climáticas e de manejo apresentariam evidentes variações dos elementos constituintes sangüíneos7. Da mesma forma, as variações observadas no hemograma de bovinos acometidos por anaplasmose e babesiose4,14 são consideradas de fundamental importância, particularmente, para a interpretação do leucograma de bovinos criados em regiões tropicais e subtropicais, como o Brasil, pois nestas regiões os bovinos são naturalmente premunidos contra o Anaplasma sp e a Babesia spp, condição que determina uma leucocitose por linfocitose.

Assim sendo, os valores obtidos para os animais criados em uma região não podem ser considerados, sem uma adequada avaliação, como padrão de referência fora dessa região1, devendo ser estabelecidos padrões de referência brasileiros para o hemograma dos bovinos aqui criados.

Os estudos sobre a hematologia dos bovinos demonstram existir influência de fatores raciais sobre os valores do hemograma12,13,18,19,22, sendo o quadro hemático de bovinos da raça Jersey considerado peculiar e diferente das demais raças.

Entre as pesquisas desenvolvidas sobre o quadro leucocitário de bovinos da raça Jersey somente oito apresentaram resultados do leucograma completo2,7,14,19,21,22,23,25, dentre as quais quatro utilizaram mais de 50 animais7,19,23,25, mas apenas três com estratificação da amostragem em várias faixas etárias7,23,25 e somente duas foram desenvolvidas por pesquisadores brasileiros2,7.

Complementando a literatura sobre o leucograma de bovinos da raça Jersey, existem pesquisas que determinaram somente o número total de leucócitos ou parte da fórmula leucocitária10,11,17,18, pois foram desenvolvidas com o intuito de estabelecer-se uma chave leucométrica para o diagnóstico da leucose enzoótica dos bovinos.

MATERIAL E MÉTODO

Com a finalidade de estabelecer os valores de referência dos constituintes do leucograma de bovinos da raça Jersey, criados no Estado de São Paulo, e avaliar a influência de fatores etários sobre a crase sangüínea, foram colhidas 253 amostras de sangue de fêmeas bovinas, clinicamente sadias e não-reagentes ao antígeno do Vírus da Leucose dos Bovinos, oriundas de rebanhos leiteiros, criados em sistema intensivo, de acordo com o manejo tradicional empregado nas propriedades produtoras de leite tipo B e C no Estado de São Paulo.

Para avaliar as variações determinadas pela influência de fatores etários, a amostragem foi distribuída em diferentes grupos experimentais, definidos a seguir: 38 bezerras com até 3 meses de idade; 46 bezerras com idade variando entre 3 e 6 meses; 43 bezerras com idade variando entre 6 e 12 meses; 38 novilhas com idade variando entre 12 e 24 meses; 44 vacas com idade variando entre 24 e 48 meses; 31 vacas com idades variando de 48 e 72 meses; 13 vacas com mais de 72 meses de idade.

As amostras de sangue foram colhidas por meio de punção da veia jugular externa, sem garroteamento excessivo do vaso, em tubos de vidro siliconizados, contendo 0,05 ml de solução aquosa de etilenodiamino-tetracética-di-sódica (EDTA) a 10% e com vácuo suficiente para aspirar 5 ml de sangue.

A contagem do número total de leucócitos foi realizada em Câmara de Neubauer modificada, sendo as amostras de sangue diluídas, em pipeta hematimétrica específica, na proporção de 1:20, utilizando-se como solução diluidora o líquido de Thoma de acordo com as recomendações de Birgel5. Com o sangue in natura foram distendidos dois esfregaços sangüíneos destinados à contagem diferencial de leucócitos. Esses esfregaços, após secarem, foram corados utilizando-se o corante de Rosenfeld, segundo técnica padronizada para os animais por Birgel5. Em cada esfregaço sangüíneo foram diferenciados 100 leucócitos classificados, de acordo com suas características morfológicas e tintoriais, em neutrófilos com núcleo em bastonete, neutrófilos com núcleo segmentado; eosinófilos, basófilos, linfócitos e monócitos.

A seleção dos animais não-reagentes ao antígeno do Vírus da Leucose dos Bovinos foi realizada por meio de avaliação sorológica utilizando-se a prova de imunodifusão dupla de Ouchterlony, em gel de ágar, empregando-se o antígeno glicoprotéico (gp 51) da cápsula do vírus, conforme técnica descrita por Birgel6.

Para calcular os valores da média aritmética e o desvio padrão, assim como avaliar a influência dos fatores etários sobre os elementos constituintes do leucograma, utilizou-se o programa BMDP-P7D, em computador Burroughs 6.900 do Centro de Computação Eletrônica da Universidade de São Paulo, aplicando-se, inicialmente, análise de variância, sendo, a seguir, utilizado, para comparação entre os pares de médias, o teste de Bonferroni, com nível de 5% de significância3.

RESULTADOS

Os valores de referência do leucograma de bovinos da raça Jersey foram estabelecidos em 253 fêmeas bovinas estando os resultados apresentados na Tab. 1.

Os resultados apresentados na Tab. 2 demonstraram a significativa influência dos fatores etários sobre o número total de leucócitos no sangue de fêmeas bovinas da raça Jersey, criadas no Estado de São Paulo. Observou-se nos animais com até três meses de idade valor médio igual a 10.926 ± 3.314 leucócitos/mm3, o qual permaneceu estável no grupo de bezerras com idade variando de 3 a 6 meses (10.453 ± 3.378 leucócitos/mm3). A seguir, estes valores aumentaram, de forma significativa, até atingirem, nos animais com idade variando de 6 a 12 meses e de 12 a 24 meses, os valores máximos (respectivamente, 13.577 ± 2.838 e 13.962 ± 3.259 leucócitos/mm3). A partir deste momento, observou-se uma diminuição do número total de leucócitos, sendo os valores mínimos obtidos nas vacas com mais de 72 meses de idade (10.564 ± 1.647 leucócitos/mm3).

O quadro leucocitário dos bovinos estudados foi linfocitário, sendo as variações observadas com o desenvolvimento etário atribuíveis ao comportamento do número absoluto de linfócitos. Conforme apresentado na Tab. 2, o número total de linfócitos aumentou, de forma significativa e gradativa, do nascimento até 12 meses de idade, sendo o menor valor médio obtido nas bezerras com até três meses de idade (7.444 ± 2.675 linfócitos/mm3) e o valor máximo nos animais cuja idade variava entre 6 e 12 meses (10.950 ± 2.801 linfócitos/mm3), valor que se repete, praticamente, nas novilhas com idade variando entre 12 e 24 meses (10.507 ± 2.912 linfócitos/mm3). A partir da puberdade, quando se obtiveram os maiores valores do número total de linfócitos, verificou-se gradativa e significativa diminuição destas células, atingindo-se as cifras mínimas nos animais com mais de 72 meses de idade (6.857 ± 1.326 linfócitos/mm3).

As variações do número absoluto total de neutrófilos, apresentados nas Tab. 2 e 3, demonstraram, inicialmente, uma diminuição de 3.109 ± 2.067 neutrófilos/mm3, nos animais com até 3 meses de idade, para 1.995 ± 1.211 neutrófilos/mm3 nas bezerras com idade variando entre 3 e 6 meses de idade, sendo esse último valor significativamente menor do que o obtido em vacas com idades entre 24 e 48 meses (2.873 ± 1.381 neutrófilos/mm3). A análise estatística dos resultados apresentados na Tab. 3 demonstrou que o número absoluto de neutrófilos com núcleo em bastonete obtido no sangue das bezerras com até três meses de idade (171 ± 206 neutrófilos bastonete/mm3) e no grupo de animais com idade variando de 3 a 6 meses (101 ± 97 neutrófilos bastonete/mm3) diferiam, de forma significativa, daqueles observados nos animais adultos, com idades variando entre 24 e 48 meses e entre 48 e 72 meses de idade, respectivamente, 40 ± 80 neutrófilos bastonete/mm3 e 51 ± 88 neutrófilos bastonete/mm3. Em relação ao número absoluto de neutrófilos com núcleo segmentado, observou-se valor máximo e mínimo, respectivamente, nas bezerras com até três meses de idade (2.938 ± 1.957 neutrófilos segmentado/mm3) e com idade variando entre 3 e 6 meses (1.894 ± 1.179 neutrófilos segmentado/mm3). As diferenças entre o valor médio de neutrófilos segmentados obtidos nessas bezerras e naqueles animais com idades variando entre 12 e 24 meses e entre 24 e 48 meses, respectivamente, 2.645 ± 976 células/mm3 e 2.833 ± 1.351 células/mm3, foram estatisticamente significativas, demonstrando a influência dos fatores etários.

A avaliação dos resultados apresentados na Tab. 2 demonstrou que o número absoluto de eosinófilos, no sangue de bovinos da raça Jersey, aumenta de forma gradativa e significante, com o desenvolvimento etário. O valor médio mínimo foi obtido no grupo composto por animais com até três meses de idade (60 ± 102 eosinófilos/mm3), atingindo valor significativamente maior no grupo de bovinos com idades variando entre 12 e 24 meses (441 ± 376 eosinófilos/mm3). A seguir, as diferenças entre os resultados não foram estatisticamente significativas; todavia, os resultados dos animais mais velhos sempre foram maiores do que os dos animais mais jovens.

A apreciação dos resultados apresentados na Tab. 2 demonstrou que o número de basófílos não sofreu influência dos fatores etários. Os valores médios variaram de 65 ± 82 basófilos/mm3, no grupo de animais com idade oscilando de 24 a 48 meses, e 102 ± 95 basófílos/mm3, detectado no grupo formado por bezerras com idade entre 3 e 6 meses de idade.

Com relação aos resultados apresentados na Tab. 2, referentes ao número absoluto de monócitos, observou-se que os valores médios obtidos no grupo de vacas com mais de 72 meses de idade (113 ± 58 monócitos/mm3) foram menores do que os observados no grupo de bezerras com até 3 meses de idade (224 ± 145 monócitos/mm3) e nas novilhas com idade variando entre 12 e 24 meses (214 ± 141 monócitos/mm3).

DISCUSSÃO

A comparação do número total de leucócitos e absoluto de linfócitos encontrados em animais da raça Jersey, criados no Estado de São Paulo, estão em concordância com os resultados apresentados na literatura11,14,19. Em contrapartida, discordou-se de vários autores que observaram menores valores tanto para o número de leucócitos como de linfócitos10,17,18,21,23,25.

Ao analisarem-se as razões da semelhança ou não dos resultados obtidos nesta pesquisa e os das citações da literatura, destaca-se a condição de o bovino ser ou não premunido contra as plasmoses bovinas (Anaplasma marginale e Babesia spp), que são responsáveis por um quadro de leucocitose por linfocitose4,14. De fato, os autores que se referiram a um menor número total de leucócitos e de linfócitos realizaram as pesquisas no Hemisfério Norte, região de clima temperado ou frio, onde a ocorrência desses hemoparasitas é esporádica. Ao contrário, os autores que encontraram valores semelhantes aos da presente pesquisa trabalharam em regiões de clima subtropical, onde os bovinos são infestados por carrapatos (Boophilus microplus) e a tristeza bovina é enzoótica. Aceita-se integralmente a afirmação de Alencar Filho1, ao transmitir a opinião, pessoal, de Bendixen sobre a variação do quadro leucocitário de bovinos importados da Dinamarca e em fase de adaptação às condições do Estado de São Paulo: "as alterações do leucograma seriam manifestações conseqüentes às variações mesológicas e da influência de condições patológicas inexistentes na Dinamarca". Assim sendo, considerou-se justo afirmar-se, baseado nas variações dos leucócitos e dos linfócitos, que os valores de referência do leucograma, estabelecidos no Hemisfério Norte, jamais deveriam ser utilizados com a finalidade de subsidiar o diagnóstico clínico no Estado de São Paulo.

A comparação dos resultados obtidos nesta pesquisa com aqueles obtidos por Alencar Filho et al.2 demonstrou diferenças expressivas, sendo a relação entre linfócitos/neutrófilos obtidos nesta pesquisa igual a 3,00, enquanto na realizada por Alencar Filho et al.2 ela foi de 5,07. A razão desta diferença poderia estar relacionada à presença de animais infectados pelo Vírus da Leucose dos Bovinos na pesquisa de Alencar Filho et al.2, já que somente a partir de 1975 as pesquisas que estabeleceram valores de referência do leucograma puderam, por meio da prova de imunodifusão dupla de Ouchterlony, identificar, com perfeição, os bovinos não infectados pelo Vírus da Leucose dos Bovinos7.

Ao compararem-se os valores obtidos para os leucócitos polimorfonucleares (neutrófilos, eosinófilos e basófilos) nos bovinos da raça Jersey com os apresentados na literatura, verificou-se que havia concordância com os resultados referidos por Russof; Piercy21, Grazien11, Ryan22 e Meneses et al.19. Entretanto, discordou-se dos resultados apresentados por inúmeros autores que obtiveram menores valores para o número absoluto de neutrófilos14,23,25 como também dos que referiram maiores valores absolutos de eosinófilos23.

Ao comparar-se o número absoluto de monócitos obtidos nesta pesquisa com os valores citados na literatura, verificou-se que havia equivalência com os apresentados por Hibbard; Neal14 e Meneses et al.19. Por serem maiores que os referidos no gado Jersey de São Paulo, discordou-se dos resultados apresentados por Russof; Piercy21, Schalm et al.23 e Theilen et al.25. As diferenças encontradas podem estar relacionadas à dificuldade de diferenciação ou dos critérios de classificação dos monócitos, como foi salientado por Greatorex13, em face da semelhança existente entre monócitos e linfócitos do tipo monocitóide (célula de Rieder), como salientou, anteriormente, Stöber; Heubner24.

A análise dos resultados obtidos na presente pesquisa para o leucograma dos bovinos da raça Jersey, criados em São Paulo demonstrou que o número total de leucócitos aumentou gradativamente, até os 12 meses de idade, mantendo, a seguir, valores estáveis até os 24 meses e, a seguir, diminuíram com o desenvolvimento etário, atingindo valores mínimos nos animais com mais de 72 meses de idade, confirmando as observações feitas para bovinos da raça Jersey, bem como para outras raças de bovinos10,11,12,13,17,19,25,27. Entretanto, discordou-se parcialmente dos autores que, mesmo afirmando a existência da mencionada diminuição dos valores do número de leucócitos, não destacaram o pico de elevação observado entre 6 e 24 meses de vida15,17,20. As conclusões obtidas nesta pesquisa discordaram radicalmente dos resultados das pesquisas de vários autores que afirmaram não existir influência dos fatores etários sobre o número total de leucócitos8,9,16,26. A variação dos resultados encontrados nesta pesquisa para o número total de leucócitos em função da idade foi atribuída principalmente às variações do número absoluto de linfócitos, corroborando com as afirmações de inúmeros pesquisadores11,15,20.

O número absoluto de linfócitos aumentou gradativa e significativamente até 12 meses de idade, estabilizando-se entre 12 e 24 meses, para a seguir diminuir progressivamente, atingindo valores mínimos nos bovinos com mais de 72 meses de idade, estando essa variação concorde com as manifestações apresentadas por Cornner et al.9, Wittwer; Böhmwald27 e Lorenz et al.17; entretanto, apenas algumas pesquisas revelaram, no gado Jersey, a mencionada elevação do número de linfócitos nos animais com até 12 meses de idade10,11,25.

O número absoluto de neutrófilos não demonstrou variações significativas que pudessem ser atribuídas à influência dos fatores etários. Tal afirmação concorda com as observações encontradas em inúmeras pesquisas16,17,20,25,27. Entretanto, deve ser ressaltado que, nos animais com idade variando entre 3 e 6 meses de idade, os valores obtidos para o número de neutrófilos foram menores, sendo tal fato semelhante ao descrito por Schalm et al.23, porém considerados insuficientes para qualquer conclusão, sendo necessários estudos mais detalhados sobre o leucograma de bezerros. Em contraposição, discorda-se das citações que consideram existir uma gradativa diminuição do número de neutrófilos com o envelhecimento11 ou que afirmaram, ao contrário, um aumento desta célula9. O número de neutrófilos do tipo bastonete, nesta pesquisa, foi maior nos bezerros com até seis meses de idade. Esta observação é difícil de ser analisada comparativamente frente ao pequeno número de trabalhos que discutiram, detalhadamente, as variações desta célula20,23.

Os resultados obtidos nesta pesquisa demonstraram, categoricamente, que o número absoluto de eosinófilos, dos bovinos da raça Jersey criados em São Paulo, sofreu influência de fatores etários, pois os valores obtidos aumentaram gradativa e expressivamente com o desenvolvimento etário. Essa observação concordou com inúmeras outras, referidas na literatura especializada11,17,25,27. Em contraposição, discordou-se das afirmações que aparecem em alguns trabalhos, que não observaram variações do número de eosinófilos em função da idade dos bovinos16,20.

Poucas referências estudando a influência dos fatores etários sobre o número de monócitos foram encontradas, sendo elas divergentes, pois afirmou-se que esse número diminuiria11,25, aumentaria27 e outras negaram a existência da influência do fator etário16. Apesar dos valores absolutos de monócitos referidos, nesta pesquisa, para os animais com mais de 72 meses serem menores do que aqueles obtidos em animais jovens, em face da pequena magnitude das diferenças (cerca de 100 monócitos/mm3), não se comprovou de forma categórica uma influência significativa dos fatores etários sobre as variações do número dessa célula que merecesse ser considerada durante a interpretação do leucograma de bovinos da raça Jersey.

O número absoluto de basófilos apresentou inexpressivas variações durante o desenvolvimento etário do gado Jersey, criado no Estado de São Paulo. Por não terem sido detectadas diferenças significativas entre os valores obtidos nos animais dos vários grupos etários estudados, concluiu-se que a flutuação dos valores foi aleatória, não se demonstrando possíveis influências dos fatores etários. Estes resultados confirmaram a opinião unânime dos pesquisadores que estudaram o assunto11,16,17,20,25,27.

Recebido para publicação: 13/12/2000

Aprovado para publicação: 02/07/2001

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    Departamento de Clínica Médica da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da USP ¾ SP
  • Datas de Publicação

    • Publicação nesta coleção
      19 Jun 2002
    • Data do Fascículo
      2001

    Histórico

    • Aceito
      02 Jul 2001
    • Recebido
      13 Dez 2000
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