Estudo químico e da atividade biológica cardiovascular do óleo essencial de folhas de Alpinia zerumbet (Pers.) B.L.Burtt & R.M.Sm. em ratos

Phytochemistry and cardiovascular biological activity of the essential oil from leaves of Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M.Sm. in rats

Estudo químico e da atividade biológica cardiovascular do óleo essencial de folhas de Alpinia zerumbet (Pers.) B.L.Burtt & R.M.Sm. em ratos

Phytochemistry and cardiovascular biological activity of the essential oil from leaves of Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M.Sm. in rats

Barcelos, F.F; Oliveira, M.L; Giovaninni, N.P.B; Lins, T.P; Filomeno, C.A; Schneider, S.Z; Pinto, V.D; Endringer, D.C; Andrade, T.U

Departamento de Farmácia, Centro Universitário Vila Velha - UVV, CEP: 29102-770, Vila Velha-Brasil

RESUMO

A espécie vegetal Alpinia zerumbet (Pers.) B.L.Burtt & R.M. Sm. é popularmente empregada para o tratamento de diversas enfermidades, entre elas a hipertensão. Avaliar a composição química, a atividade antihipertensiva e ação na hipertrofia cardíaca do óleo essencial das folhas de Alpinia zerumbet (OEAZ) em ratos foram os objetivos deste estudo. O OEAZ, obtido por hidrodestilação em aparelho Clevenger, teve sua composição química analisada em cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM). Foram identificados 14 constituintes, sendo terpinen-4-ol (37,45%) o majoritário, seguido pelos óxido de cariofileno (7,56%), trans-hidrato de sabineno (6,61%) e 1,8-cineol (4,02%). A avaliação cardiovascular foi feita após o tratamento crônico de ratos espontaneamente hipertensos (SHR) e seus respectivos controles, ratos Wistar-Kyoto (WKY). Os dados hemodinâmicos revelaram redução da pressão arterial média (PAM) no grupo tratado (SHRP: 160 ± 7 mm Hg; p<0,01) em relação ao não tratado (SHR: 180 ± 5 mm Hg). A relação entre peso do ventrículo esquerdo e peso corporal (VE/PC) do SHRP (2,50 ± 0,03 mg g^-1; p<0,01) mostrou-se inferior ao SHR (2,61 ± 0,01 mg g^-1), confirmando a redução da hipertrofia cardíaca (HC). Os dados de PAM e VE/PC dos animais SHRP foram estatisticamente diferentes quando comparados com os ratos controle (WKY: 116 ± 2 mm Hg e WKYP: 119 ± 4 mm Hg; p<0,05; WKY: 2,15 ± 0,04 mg g^-1 e WKYP: 2,17 ± 0,04 mg g^-1 ; p<0,01), indicando não ter havido normalização dos mesmos. Conclui-se que o tratamento crônico com OEAZ foi capaz de determinar redução, mas não a normalização, da PAM e da HC de ratos SHR, provavelmente pela presença dos componentes terpinen-4-ol e 1,8-cineol. Estudos com doses maiores ou período de tratamento superior são necessários para avaliar a possibilidade de o OEAZ normalizar os parâmetros analisados (PAM e HC).

Palavras-chave: óleo essencial, terpinen-4-ol, 1,8-cineol, Alpinia zerumbet, hipertensão, SHR

ABSTRACT

Alpinia zerumbet (Pers.) B.L. Burtt & R.M.Sm. is traditionally employed to treat several diseases such as hypertension. The aim of this study was to evaluate the chemical composition, the anti-hypertensive activity and the capacity to reduce cardiac hypertrophy of the essential oil of A. zerumbet leaves (EOAZ) in rats. EOAZ was obtained through hydrodistillation in Clevenger apparatus and its chemical composition was analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Several constituents (14) were identified, terpen-4-ol (37.45%) being the major component, followed by caryophyllene oxide (7.56%), trans-sabinene hydrate (6.61%) and 1,8-cineol (4.02%). The cardiovascular effect was investigated after chronic treatment with spontaneously hypertensive rats (SHR) and their respective controls, Wistar-Kyoto rats (WKY). The treated group showed a lower mean arterial pressure (MAP) (SHRP: 160 ± 7 mm Hg; p<0.01) than the untreated group (SHR: 180 ± 5 mm Hg). The ratio of left ventricle-to-body weight (LV/BW) for SHRP was lower (2.504 ± 0.03 mg g^-1; p<0.01) than that for SHR (2.162 ± 0.01 mg g^-1), confirming the cardiac hypertrophy (CH) reduction. There were significant differences in MAP and CH between SHRP animals and control rats (WKY: 116 ± 2 mm Hg and WKYP: 119 ± 4 mm Hg; p<0.05. WKY: 2.152 ± 0.04 mg g^-1 and WKYP: 2.168 ± 0.04 mg g^-1; p<0.01), indicating that these values were not normalized. Those data showed that the chronic treatment with EOAZ reduces MAP and CH in SHR probably due to the presence of the compounds terpinen-4-ol and 1,8-cineol. Studies with higher doses or longer treatment periods are necessary to evaluate whether EOAZ can reduce the analyzed parameters (MAP and CH) to normal values.

Key words: essential oil, terpinen-4-ol, 1,8-cineol, Alpinia zerumbet, hypertension, SHR

INTRODUÇÃO

O uso de plantas como recurso terapêutico pode ser traçado desde a antiguidade até os dias atuais (WHO, 2002; Lee, 2004). Estima-se que cerca de 80% da população dos países em desenvolvimento depende do uso de plantas medicinais para assistência primária à saúde, sendo vários os benefícios terapêuticos atribuídos a essas espécies vegetais (Hostettmann & Marston 2002; Maciel et al., 2002; WHO, 2002). Esses fatos instigaram a pesquisa em diversas áreas, que envolvem as plantas medicinais, como agronomia, botânica, farmacologia e fitoquímica, visando fornecer dados que contribuíssem com o desenvolvimento e aperfeiçoamento da fitoterapia (Maciel et al., 2002), tornando-a recurso terapêutico alternativo viável para o tratamento para diversas enfermidades (WHO, 2002).

No Brasil, estima-se que o uso de espécies vegetais com fins medicinais é prática difundida, enriquecida pela diferenças culturais, provenientes dos índios, negros e europeus (Brandão, 1996). A sabedoria popular sobre plantas medicinais não deve ser subestimada, mas, no entanto, somente deve ser repassada como verdadeira para a população depois de confirmar se as atividades atribuídas às espécies vegetais realmente existem, e que o seu uso como medicamento é seguro (Brasil, 2007). Haja vista ser ainda insuficiente o número de estudos científicos acerca do assunto, torna-se necessário estimular a realização desses estudos, tendo em vista a importância dos seus resultados tanto individuais como sociais (Brasil, 2007).

A espécie Alpinia zerumbet (Pers.) B.L.Burtt & R.M.Sm., nativa de regiões tropicais do sul e sudeste asiático, tendo a introdução no Brasil, no século XIX, ocorrida ou por acaso, por meio da mistura dos rizomas com a areia que servia de lastro às caravelas portuguesas que voltavam das Índias (Albuquerque & Neves, 2004), ou proposital, quando a espécie fora trazida para o Jardim Botânico do Rio de Janeiro, para presentear a princesa Isabel, logo após a mesma ter assinado a Lei Áurea, em 13 de maio de 1888 (Pio Corrêa, 1984). Diversos são os nomes populares atribuídos à A. zerumbet, tais como pacová, colônia, paco-seroca, cuité-açu, gengibre-concha, dentre outros (Albuquerque & Neves, 2004). Esta espécie pertence à família Zingiberaceae, sendo o gênero Alpinia o maior dessa família, com aproximadamente 230 espécies (Kress et al., 2005). A. zerumbet é erva terrestre com 1,5 a 2,5 metros de altura, apresentando folhas alternas, completas e simples, com caules aéreos e curtos agrupados em touceiras (Albuquerque & Neves, 2004).

Popularmente, A. zerumbet é empregada como depurativa, diurética, hipotensora, antihistérica e vermífuga, sendo as folhas, flores e rizomas as partes vegetais mais utilizadas (Albuquerque et al., 2007; Oliveira & Araújo, 2007). Essas potencialidades medicinais, que auxiliam na profilaxia e no tratamento de diversos males, vêm sendo estudadas por alguns grupos (Lahlou et al., 2002a; Lahlou et al., 2003; Leal-Cardoso et al., 2004; Moura et al., 2005; Pinho et al., 2005).

A atividade hipotensora do óleo essencial de A. zerumbet (OEAZ) foi avaliada empregando-se diferentes ensaios para estudo dos mecanismos de ação (Lahlou et al., 2002a; Lahlou et al., 2003). OEAZ (1-20 mg Kg^-1) promoveu redução imediata e significante da pressão arterial de ratos normotensos (Lahlou et al., 2002a) e com hipertensão induzida por sal de deoxicorticosterona (DOCA-sal) (Lahlou et al., 2003). O principal constituinte de OEAZ, o terpinen-4-ol, também foi avaliado no modelo de hipertensão DOCA-sal, apresentando diminuição da pressão arterial, dose-dependente (1-10 mg Kg^-1), indicando ser esse constituinte o responsável pela ação antihipertensiva do OEAZ (Lahlou et al., 2003). Nesse ensaio, os autores observaram que a atividade hipotensora do terpinen-4-ol, ocorreu independente da presença funcional do sistema nervoso simpático, sugerindo ação periférica, com vasodilatação (Lahlou et al., 2003).

Moura et al. (2005) demonstraram efeito antihipertensivo crônico de extrato hidroalcoólico de A. zerumbet, também utilizando o modelo de hipertensão DOCA-sal.

Para melhor compreender a fisiopatologia e a terapêutica da hipertensão arterial, uma linhagem de ratos espontaneamente hipertensos (SHR) fora selecionada, geneticamente, para o desenvolvimento de um modelo experimental (Okamoto & Aoki, 1963). Ao nascer, os ratos SHR são normotensos, mas por volta da quinta semana de vida, a pressão sangüínea arterial eleva-se progressivamente, podendo atingir 220 mm Hg, mantendo-se assim durante toda a vida do animal, tornando-se o modelo experimental de maior utilidade para o estudo fisiopatológico da hipertensão essencial humana (National Research Council, 1976). Embora, estudos avaliando o efeito antihipertensivo crônico em ratos SHR sejam amplamente empregados, não é conhecido nenhum estudo que tenha sido conduzido com o óleo essencial de A. Zerumbet, empregando-se o referido modelo.

Desta forma, este estudo buscou investigar a existência de efeito hipotensor crônico do OEAZ e consequente redução da hipertrofia cardíaca em animais SHR, identificar os constituintes químicos do óleo essencial de folhas da A. zerumbet, bem como descrever a anatomia do material vegetal empregado.

MATERIAL E MÉTODO

Material vegetal

As folhas de A. zerumbet foram coletadas no mês de abril de 2008, no bairro da Prainha, em Vila Velha (ES), em horta parceira da Igreja Católica. A espécie foi identificada pela Profª M.Sc. Solange Z. Schneider, curadora do herbário do Centro Universitário Vila Velha - UVV, onde a exsicata encontra-se depositada, sob número UVVES 1982.

As folhas frescas da planta foram submetidas à análise histológica por microscopia, conforme métodos descritos por Bukatsh (1972) e Johansen (1940).

Inicialmente, realizou-se a triagem do material coletado, quando foram descartadas as folhas contaminadas por insetos ou fungos. O material não foi previamente lavado, sendo diretamente submetido à secagem em estufa ventilada, a 40ºC, por 72 h.

Obtenção do óleo essencial

Empregou-se o método de hidrodestilação, em aparelho Clevenger (Logen, mod. LS 2015), ajustado por Skrubis (1982) e Ming et al. (1996), com aquecimento mantido na temperatura mínima necessária à ebulição. O aparelho de Clevenger foi adaptado a balão de fundo redondo com capacidade de 2,0 L, onde 1,5 L de água deionizada e a amostra vegetal (20 g) foram adicionadas. O tempo de extração foi de duas horas, contadas a partir da ebulição da água. O hidrolato obtido foi particionado com pentano (3 x 50 mL), a fração orgânica foi filtrada sobre sulfato de magnésio anidro. Esse filtrado foi submetido à evaporação do solvente em evaporador rotativo (Fisatom, mod. 802), a 30ºC e pressão reduzida (40 mm Hg). Todo o sistema foi protegido da luz por meio de papel alumínio e o óleo essencial foi armazenado em frascos âmbar sob resfriamento. O rendimento de extração foi determinado pela relação proporcional entre a massa das folhas e a massa do óleo obtido, sendo esse processo realizado em sextuplicata.

Identificação e quantificação dos componentes químicos

A identificação dos constituintes do óleo essencial (Adams,1995) foi realizada empregando-se cromatografia gasosa, acoplada à espectrometria de massas (CG-EM. aparelho Shimadzu, modelo GCMS-QP 5050). Na identificação da constituição química foi empregada coluna DB-5HT (J & W Scientific®), com 30 m de comprimento, diâmetro interno de 0,32 mm, espessura do filme de 0,10 µm, e nitrogênio como gás de arraste. As condições programadas no aparelho foram: pressão interna da coluna de 56,7 kPa, razão de split de 1:20, fluxo de gás na coluna de 1,0 mL min^-1 (210ºC), temperatura no injetor de 220ºC, temperatura no detector ou na interface (CG/EM) de 240ºC. A temperatura da [LC3] inicial da coluna foi 60ºC por 1 min, seguido de um incremento de 3ºC min^-1 até atingir 240ºC, sendo mantida constante por 30 min. O espectrômetro de massas foi programado para realizar leituras em uma faixa de 29 a 400 Da, em intervalos de 0,5 s, com energia de ionização de 70 eV. Foram injetados 1 µL de cada amostra, na concentração de 10.000 ppm, dissolvida em hexano. A identificação dos componentes foi feita pela comparação de seus espectros de massas com os disponíveis no banco de dados da espectroteca Willey 330.000 (7ª ed.), e também pelos índices de Kovats. Para cálculo dos índices de Kovats, foi injetada no cromatógrafo a mistura de alcanos lineares (C9 a C26).

A quantificação dos componentes foi realizada utilizando-se cromatógrafo a gás com detector de ionização de chamas (GCFID) da marca Shimadzu, modelo GC-17A. As análises foram realizadas nas mesmas condições descritas para a identificação dos constituintes. Essas análises foram realizadas em triplicata.

Grupos experimentais

Foram utilizados ratos espontaneamente hipertensos (spontaneously hypertensive rats - SHR) e respectivos controles, os ratos Wistar-Kyoto (WKY), machos com três meses e com peso corporal variando entre 200-260 g. Os animais foram mantidos em ambiente com iluminação artificial (ciclo claro-escuro de 12h) e temperatura de 20-25ºC de acordo com o recomendado pelos biotérios de pesquisa (FINEP). As gaiolas individuais permitiram o acesso dos animais à ingestão de água e ração (ração Probiotério, Moinho Primor, S.A) ad libitum. Como o volume de óleo essencial a ser aplicado era muito reduzido, optou-se pela utilização da via intraperitoneal.

Os animais foram divididos em quatro grupos experimentais:

- Grupo controle (WKY, n = 6): os animais receberam diariamente apenas o veículo (óleo de girassol) utilizado para administração do óleo essencial, por via intraperitoneal, durante 30 dias;

- Grupo hipertenso (SHR, n = 6): os animais receberam diariamente apenas o veículo (óleo de girassol) utilizado para administração do óleo essencial, por via intraperitoneal, durante 30 dias;

- Grupo normotenso tratado com óleo essencial (WKYP, n = 6): os animais (WKY) receberam diariamente o óleo essencial (10 mg Kg^-1) por via intraperitoneal, durante 30 dias de tratamento;

- Grupo hipertenso tratado com óleo essencial (SHRP, n = 6): os animais (SHR) receberam diariamente o óleo essencial (10 mg Kg^-1) por via intraperitoneal, durante 30 dias de tratamento;

Procedimentos cirúrgicos e registros hemodinâmicos

Utilizou-se cateter de polietileno (PE 50 - Clay Adans^®, USA), o qual se destinou à artéria femoral. Sob anestesia pelo pentobarbital sódico (50 mg Kg^-1, via intra-peritoneal, Hypnol^®, Cristália, Brasil), uma incisão na região inguinal, com posterior isolamento do plexo vásculo-nervoso, possibilitou a cateterização da aorta via artéria femoral. A terminação livre do cateter foi mantida preenchida com solução salina (0,9%) e ocluída com pinos de aço inoxidável.

O cateter arterial femoral foi conectado a transdutores de pressão (Spectramed - Statham^®, P23XL, USA) através de cateter flexível, e os valores de registro da pressão arterial média (PAM), pulsátil (PAP) e Freqüência Cardíaca (FC) foram obtidos através de sistema computadorizado (Pentium MMX 233 MHz) e programa para aquisição de dados biológicos (BIOPAC^® - BIOPAC Systems, Inc., Santa Barbara, Califórnia, USA, mod. MP 100A/série 94111065).

Análise de hipertrofia do coração

Ao final do protocolo experimental os animais foram sacrificados por injeção in bolus de anestésico. O coração foi isolado, lavado com solução fisiológica e o excesso de líquido foi removido com papel de filtro e em seguida pesado. O ventrículo direito (VD) foi separado do ventrículo esquerdo (VE) e o septo interventricular foi considerado parte do VE (Andrade et al., 2007). A razão do peso ventricular pelo peso corporal (VE/PC ou VD/PC) foi usada como índice para a estimativa da hipertrofia cardíaca (Andrade et al., 2007).

Protocolo experimental

Os animais foram pesados e colocados em gaiolas individuais com livre acesso à água e ração. A dose de óleo essencial ministrada foi de 10 mg Kg^-1 (Lahlou et al., 2003) e o veículo utilizado foi óleo de girassol (Dersani^® ; Advanced products, Brasil).

Todos os animais foram pesados semanalmente. Ao final do tratamento, os animais foram anestesiados com pentobarbital sódico, para possibilitar o cateterismo da artéria femoral e os registros hemodinâmicos de Pressão Arterial Média (PAM) e Freqüência Cardíaca (FC). Ao final do experimento, os ratos foram sacrificados por meio de injeção in bolus de doses elevadas de anestésico. Em seguida, o coração foi retirado para obtenção do peso úmido e estimativa da hipertrofia cardíaca.

Análise estatística

Os valores das avaliações biológicas realizadas foram expressos como média ± erro padrão da média (EPM). Para análise estatística dos valores basais de PAM e FC, peso corporal, peso das câmaras cardíacas, dos valores de VD/PC e VE/PC; os mesmos foram submetidos à análise de variância (ANOVA, uma via). A significância da diferença entre as médias foi determinada por teste post hoc pelo método de Fisher, ajustado para múltiplas comparações, com significância aceita acima de 5% (p<0,05). Para análise estatística e apresentação gráfica dos resultados foram empregados os softwares GB-Stat (S.N.96003126) e Slide Write Plus (S.N.WSWP - C018529), respectivamente.

RESULTADO

Análise da anatomia vegetal

Empregando-se corte histológico no plano paradérmico da lâmina foliar, foram observadas epidermes adaxial e abaxial glabras com células poligonais de paredes retas, dispostas em fileiras, e estômatos paracíticos e tetracíticos em ambas as faces, concordando com Albuquerque & Neves (2004). Já os cortes transversais do limbo foliar mostraram folha dorsiventral, revestida por epidermes unisseriadas, protegidas por cutícula mais espessa na face adaxial da lâmina foliar. Abaixo das epidermes ocorrem de um a três estratos de células hipodérmicas mucilaginosas e portadoras de gotas lipídicas, conforme previamente descrito por Albuquerque & Neves (2004).

O clorênquima está organizado por uma camada de células de parênquima paliçádico e por quatro a cinco camadas de parênquima lacunoso. Entre as células do clorênquima ocorrem células mucilaginosas, muitas células isodiamétricas, oleíferas e idioblastos cristalíferos portadores de cristais prismáticos de oxalato de cálcio (Albuquerque & Neves, 2004).

O sistema vascular é formado por feixes colaterais revestidos pela bainha de feixe de natureza parenquimática. As células do floema e da bainha de feixe apresentam gotas lipídicas e teste positivo para substâncias tânicas (Albuquerque & Neves, 2004). Partindo da bainha até a epiderme, observam-se células fibrosas que constituem a extensão esclerenquimática da bainha.

Característica física do óleo essencial e rendimento da extração

O óleo essencial de folhas secas de A. zerumbet apresentou coloração amarelada e forte odor amadeirado refrescante. O rendimento da extração do óleo essencial de folhas dessa espécie foi de 0,25 ± 0,03% (m/m). O coeficiente de variação (CV) de extração foi de 12,40%, indicando ter ocorrido pequena diferença entre as repetições de obtenção do óleo essencial. O CV representa o desvio padrão expresso como porcentagem da média, sendo comumente utilizada para estimar a precisão dos experimentos (Brasil, 2003).

Análise Cromatográfica

Pela análise da constituição química do óleo essencial de folhas de A. zerumbet, realizada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM), foi possível identificar vários constituintes, sendo 14 as principais substâncias, todos de natureza terpênica, sete monoterpenos e sete sesquiterpenos (Tabela 1). O constituinte majoritário foi o monoterpeno terpinen-4-ol (37,45%), seguido pelo sesquiterpeno óxido de cariofileno (7,56%) e pelos monoterpenos trans-hidrato de sabineno (6,61%) e 1,8-cineol (4,02%) (Figura 1).

Análise do peso corporal, do coração e da hipertrofia cardíaca

Ao final do período de tratamento os animais dos grupos SHR e SHRP apresentaram relação VD/PC (0,55 ± 0,02 mg g^-1; 0,54 ± 0,04 mg g^-1; respectivamente; p<0,01) e VE/PC (2,61 ± 0,01 mg g^-1; 2,504 ± 0,03 mg g^-1; respectivamente; p<0,01) estatisticamente superiores quando comparados aos grupos controle com (WKYP: VD/PC=0,54 ± 0,03 mg g^-1; VE/PC=2,17 ± 0,04 mg g^-1) ou sem tratamento (WKY: VD/PC=0,54 ± 0,04 mg g^-1; VE/PC=2,15 ± 0,04 mg g^-1). Além disso, o tratamento com OEAZ foi capaz de reduzir a relação VE/PC dos animais SHRP em comparação aos SHR (p<0,01) (Figura 2). O mesmo não foi observado para a relação VD/PC. O resultado da análise do peso dos ventrículos direito e esquerdo, segue o mesmo padrão encontrado para a hipertrofia destas câmaras (Tabela 2). Também não foi observada diferença estatística entre os grupos experimentais no peso corporal inicial (PCI) e no peso corporal final (PCF).

Efeito antihipertensivo

O tratamento crônico de 30 dias com injeções in bolus intraperitoneais de OEAZ induziu a redução de PAM nos ratos SHRP (160 ± 7 mm Hg; p<0,01) em relação aos animais SHR (180 ± 5 mm Hg); porém os níveis pressóricos dos animais SHRP mantiveram-se diferentes dos animais controle (WKY= 106 ± 2 mm Hg e WKYP= 109 ± 4 mm Hg; p<0,05). Da mesma forma, e como esperado, os níveis de PAM dos animais SHR foram estatisticamente superiores aos dos ratos controle (p<0,01) (Figura 3). Não houve diferença significativa nos valores de FC basal entre os grupos experimentais (WKY= 320 ± 15; WKYP=310 ± 12; SHR= 326 ± 10; SHRP= 334 ± 14 b.p.m.).

DISCUSSÃO

Todas as características observadas durante a análise da anatomia vegetal, do material empregado neste trabalho, estão em concordância com descrito previamente para a A. zerumbet (Zingiberaceae) (Albuquerque & Neves, 2004).

O perfil químico de OEAZ obtido nesse estudo difere do previamente descrito para as folhas de A. zerumbet (Zoghbi et al., 1999; Ali et al., 2002). Entretanto, está em concordância com a descrição do monoterpeno terpinen-4-ol como o componente majoritário (Zoghbi et al., 1999; Ali et al., 2002). Zoghbi et al. (1999) detectaram 1,8-cineol apenas nas flores da espécie, enquanto o limoneno, descrito como segundo componente majoritário por esses autores, não foi detectado no presente trabalho. Por outro lado, Ali et al. (2002) detectaram terpinen-4-ol, 1,8-cineol e b-pineno como os componentes majoritários do óleo essencial de folhas de A. zerumbet. A maturação foliar, a sazonalidade, o local e horário de coleta, o processo de secagem e o armazenamento, são fatores que influenciam na qualidade e composição de óleos essenciais (Oliveira et al., 2006; Stefanini et al., 2006), os quais poderiam explicar a diferença na composição química observada nesse trabalho com os dados previamente descritos.

O efeito crônico antihipertensivo de OEAZ foi evidenciado nesse estudo, empregando-se modelo experimental dos ratos SHR. O efeito hipotensor agudo do óleo essencial de A. zerumbet foi descrito por Lahlou et al. (2003), e o efeito antihipertensivo crônico foi descrito para extrato hidroalcoólico de folhas dessa espécie (Moura et al., 2005), ambos utilizando o modelo de hipertensão DOCA-sal.

Lahlou et al. (2003) demonstraram que o terpinen-4-ol foi capaz de determinar, de maneira semelhante à observada no estudo com o OEAZ, redução da pressão arterial e efeito vasodilatador agudamente em animais DOCA-sal. No presente trabalho, o terpinen-4-ol apresentou-se como constituinte majoritário, podendo-se atribuir à presença deste componente o efeito anti-hipertensivo observado. Somado ao efeito hipotensor do constiuinte majoritário, outros componentes de OEAZ poderiam contribuir de forma sinérgica para a ação hipotensora de OEAZ. Por exemplo, foi descrita atividade hipotensora para o 1,8-cineol, atribuída ao efeito vasodilatador, em animais normotensos, no modelo de hipertensão DOCA-sal, dose de 10 mg Kg^-1, i.v. (Lahlou et al., 2002b). Empregando-se ratos Wistar anestesiados, 1,8-cineol apresentou efeito hipotensor na dose de 1-3 mg Kg^-1, i.v., sendo esse atribuído à capacidade de modular o sistema nervoso autônomo (Lahlou et al., 2002b).

Embora o OEAZ tenha exercido a ação antihipertensiva, não foi possível verificar normalização da pressão arterial quando comparadas às pressões arteriais médias dos animais normotensos. De acordo com estudos agudos conduzidos por Lahlou et al. (2003), foi possível observar redução da PAM, não sendo, todavia, relatada a normalização da mesma. Além disso, a administração crônica de A. zerumbet (extrato hidroalcoólico) em animais DOCA-sal ocasionou significativa redução das pressões sistólica, diastólica e média sem também observar a normalização (Moura et al., 2005).

Diversos estudos têm demonstrado que o OEAZ possui ação vasodilatadora (Lahlou et al., 2002a; Lahlou et al 2003; Moura et al., 2005). Em leitos mesentéricos, essa ação é independente de canais de potássio cálcio-dependente, voltagem-dependente e ATP-dependente, mas que pode ocorrer via formação de óxido nítrico (NO) e formação de GMP-cíclico, no músculo liso, como segundo mensageiro e, ainda, que deve possuir a participação de receptores de Bradicinina (via bradicinina/NO/GMPc) (Moura et al., 2005).

Dessa forma, a ativação dos receptores de bradicinina induz a produção de óxido nítrico pelo endotélio que, por sua vez, ativa a guanililciclase a produzir GMPc através de GTP (Garcia & Incerpi, 2008). Como conseqüência do aumento intracelular deste segundo mensageiro, desencadeia-se uma sequência de fosforilações protéicas culminando na redução intracelular de cálcio e consequentemente no relaxamento da musculatura lisa vascular (Garcia & Incerpi, 2008). Adicionalmente, Lahlou et al. (2002a, 2003) demonstraram que esta vasodilatação provavelmente não se deve a retirada simpática, corroborando a idéia de ação vasodilatadora direta para o OEAZ.

Outro resultado observado neste estudo foi a redução da hipertrofia cardíaca encontrada nos animais SHRP devido ao tratamento com OEAZ. Tem sido demonstrado que o tratamento antihipertensivo de ratos SHR determina a redução da hipertrofia cardíaca (Uggere et al., 2000; Andrade et al., 2008). Portanto, a redução do estresse de pressão sobre o coração devido à queda da pressão arterial nos ratos SHRP, poderia justificar, pelo menos em parte, a redução da hipertrofia cardíaca. Outra justificativa para a redução da hipertrofia cardíaca estaria relacionada à ativação da via bradicinina/NO/GMPc. Garcia & Incerpi (2008), em estudo sobre atividade antihipertrófica do óxido nítrico, demonstraram que a redução intracelular de cálcio nas células musculares lisas endoteliais em função da ativação da via bradicinina/NO/GMPc, inativa enzimas mitogênicas e, dessa forma, melhora o perfil hipertrófico cardíaco.

Concluindo, o presente trabalho demonstra pela primeira vez, que o tratamento crônico com óleo essencial de A. zerumbet foi capaz de determinar redução da PAM e da hipertrofia cardíaca, no modelo de hipertensão experimental SHR, provavelmente pela presença dos componentes terpinen-4-ol e 1,8-cineol, o que poderia determinar melhoria da hemodinâmica cardiovascular dos animais SHRP, apesar da não normalização da pressão. Mais estudos são necessários para avaliar se doses maiores ou períodos de tratamento superiores aos realizados neste trabalho seriam suficientes para trazer os parâmetros hemodinâmicos para níveis de normalidade.

AGRADECIMENTO

Ao Centro Universitário Vila Velha - UVV e à Fundação Nacional de Desenvolvimento do Ensino Superior Particular (FUNADESP) pelo financiamento do trabalho. Ao prof. Dr. Luiz Cláudio de Almeida Barbosa, do Laboratório de Análise e Síntese de Agroquímicos (LASA - UFV), da Universidade Federal de Viçosa, pelas análises cromatográficas. Agradecemos à Pastoral da Saúde pela doação do material vegetal coletado.

Recebido para publicação em 02/12/2008

Aceito para publicação em 11/07/2009

* [e-mail]

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  11 Nov 2010
• Data do Fascículo
  Mar 2010

Histórico

• Aceito
  11 Jul 2009
• Recebido
  02 Dez 2008