Efeito do alho (Allium sativum Linn.), probiótico e virginiamicina antes, durante e após o estresse induzido pela muda forçada em poedeiras semipesadas

Effect of bulb garlic (Allium sativum Linn.), probiotic and virginiamycin before, during and after induced forced molt stress in semi-heavily laying hens

Resumos

Foram realizados três experimentos com 336 poedeiras no segundo ciclo de produção e 24 meses de idade, alojadas em condições de criação comercial (550 cm²/ave). O objetivo foi avaliar o alho (5 kg/t), probiótico (300 g/t) e a virginiamicina (20 g/t) como aditivos de rações antes, durante e após o estresse induzido pela muda forçada (MF). O delineamento experimental foi o inteiramente ao acaso e os tratamentos usados foram: dieta controle (DC); DC+alho (A); DC+probiótico (P); DC+virginiamicina (V); DC+A+V; DC+A +P; DC+P+V; DC+A+P+V, constituídos por sete repetições de seis aves. O período pré-experimental foi de 15 dias e o fotoperíodo, de 17 horas de luz/dia. O ensaio 1 foi realizado em quatro semanas antes da MF, com as aves recebendo 110 g de ração contendo os aditivos. O ensaio 2 foi realizado durante os doze dias de MF, com as aves recebendo 10 g de milho moído, usado como veículo para diluir a dose dos aditivos consumida em 110 g de ração. O ensaio 3 foi realizado em seis semanas, durante o terceiro ciclo de produção, com as aves recebendo 110 g de ração, sem os aditivos, e as coletas tiveram início após as aves terem atingido 50% de postura. Antes da MF, o alho reduziu a massa de ovos em relação ao probiótico (48,2 vs. 39,8 g) e, durante a MF, a virginiamicina e a mistura P+V reduziram a porcentagem de intestinos em relação ao alho (7,51 e 7,72 vs. 9,43), mas o peso e a porcentagem de baço não foram alterados. Após a MF, as variáveis não foram afetadas pelos tratamentos. Nas condições do experimento, os antimicrobianos usados não melhoram o desempenho de poedeiras antes, durante e após o estresse induzido pela MF em relação à ração sem aditivos.

aditivos; antimicrobianos; estresse; produção de ovos

Three trials were carried out with 336 laying hens, aging 24 weeks and after second forced molt, caged in commercial conditions (550 cm²/bird) to evaluate the use of bulb garlic (5 kg/t), probiotic (300 g/t) and virginiamycin (20 g/t) as additives in laying hens diet before, during and after the induced forced molt stress (FM). A completely randomized design, with seven replicates of six brids each, was used. The treatments consisted of a control diet (CD) supplemented with bulb garlic (G), probiotic (P) and virginiamycin (V,) resulting in treatments: CD+G; CD+P; CD+V; CD+G+V; CD+P+G; CD+P+V; CD+G+P+V. The pre-experimental period lasted 15 days, where the birds were under a photoperiod of 17 h of light: 7 h of dark.The trial 1 was carried out during four weeks before FM, where the birds were fed 110 g of diet with the additives. The trial 2 was conducted during FM (12 days), where the birds were fed diet with 10 g of corn ground, used to reduce the amount fed in 110 g of diet. The trial 3 was carried out in the postmolt period, where the birds were fed 110 g of diet without additive, and the collection period began when birds showed over 50% of egg production. Before FM, bulb garlic decreased the egg mass in comparison to probiotic (48.2 vs. 39.8). During FM, virginiamycin and P+V mixture decreased intestinal percentage in relation to bulb garlic (7.51 and 7.72 vs. 9.43), but weight and percentage of spleen were not affected. After FM, the variables were not affected by the treatments. Bulb garlic, probiotic and virginiamycin showed no effect on semi-heavily laying hens performance, before, during and after induced FM stress in relation to the diet without additives.

additives; antimicrobes; egg production; stress

MONOGÁSTRICOS

Efeito do alho (Allium sativum Linn.), probiótico e virginiamicina antes, durante e após o estresse induzido pela muda forçada em poedeiras semipesadas

Effect of bulb garlic (Allium sativum Linn.), probiotic and virginiamycin before, during and after induced forced molt stress in semi-heavily laying hens

José Humberto Vilar da Silva^I; José Jordão Filho^II; Edson Lindolfo da Silva^II

^IProfessor do Departamento de Agropecuária/CFT/UFPB - Campus IV.E.mail: [e-mail]

^IIAluno do Curso de Graduação em Licenciatura em Técnicas Agropecuárias – Bolsista do PIBIC - CNPq/UFPB

RESUMO

Foram realizados três experimentos com 336 poedeiras no segundo ciclo de produção e 24 meses de idade, alojadas em condições de criação comercial (550 cm²/ave). O objetivo foi avaliar o alho (5 kg/t), probiótico (300 g/t) e a virginiamicina (20 g/t) como aditivos de rações antes, durante e após o estresse induzido pela muda forçada (MF). O delineamento experimental foi o inteiramente ao acaso e os tratamentos usados foram: dieta controle (DC); DC+alho (A); DC+probiótico (P); DC+virginiamicina (V); DC+A+V; DC+A +P; DC+P+V; DC+A+P+V, constituídos por sete repetições de seis aves. O período pré-experimental foi de 15 dias e o fotoperíodo, de 17 horas de luz/dia. O ensaio 1 foi realizado em quatro semanas antes da MF, com as aves recebendo 110 g de ração contendo os aditivos. O ensaio 2 foi realizado durante os doze dias de MF, com as aves recebendo 10 g de milho moído, usado como veículo para diluir a dose dos aditivos consumida em 110 g de ração. O ensaio 3 foi realizado em seis semanas, durante o terceiro ciclo de produção, com as aves recebendo 110 g de ração, sem os aditivos, e as coletas tiveram início após as aves terem atingido 50% de postura. Antes da MF, o alho reduziu a massa de ovos em relação ao probiótico (48,2 vs. 39,8 g) e, durante a MF, a virginiamicina e a mistura P+V reduziram a porcentagem de intestinos em relação ao alho (7,51 e 7,72 vs. 9,43), mas o peso e a porcentagem de baço não foram alterados. Após a MF, as variáveis não foram afetadas pelos tratamentos. Nas condições do experimento, os antimicrobianos usados não melhoram o desempenho de poedeiras antes, durante e após o estresse induzido pela MF em relação à ração sem aditivos.

Palavras-chave: aditivos, antimicrobianos, estresse, produção de ovos

ABSTRACT

Three trials were carried out with 336 laying hens, aging 24 weeks and after second forced molt, caged in commercial conditions (550 cm²/bird) to evaluate the use of bulb garlic (5 kg/t), probiotic (300 g/t) and virginiamycin (20 g/t) as additives in laying hens diet before, during and after the induced forced molt stress (FM). A completely randomized design, with seven replicates of six brids each, was used. The treatments consisted of a control diet (CD) supplemented with bulb garlic (G), probiotic (P) and virginiamycin (V,) resulting in treatments: CD+G; CD+P; CD+V; CD+G+V; CD+P+G; CD+P+V; CD+G+P+V. The pre-experimental period lasted 15 days, where the birds were under a photoperiod of 17 h of light: 7 h of dark.The trial 1 was carried out during four weeks before FM, where the birds were fed 110 g of diet with the additives. The trial 2 was conducted during FM (12 days), where the birds were fed diet with 10 g of corn ground, used to reduce the amount fed in 110 g of diet. The trial 3 was carried out in the postmolt period, where the birds were fed 110 g of diet without additive, and the collection period began when birds showed over 50% of egg production. Before FM, bulb garlic decreased the egg mass in comparison to probiotic (48.2 vs. 39.8). During FM, virginiamycin and P+V mixture decreased intestinal percentage in relation to bulb garlic (7.51 and 7.72 vs. 9.43), but weight and percentage of spleen were not affected. After FM, the variables were not affected by the treatments. Bulb garlic, probiotic and virginiamycin showed no effect on semi-heavily laying hens performance, before, during and after induced FM stress in relation to the diet without additives.

Key Words: additives, antimicrobes, egg production, stress

Introdução

Vários questionamentos têm sido feitos sobre o uso de antibióticos em rações para promover o desempenho de aves, em virtude da possível presença de resíduos em carne e ovos que possam alterar o balanço microbiano intestinal, contribuindo para o surgimento de resistência em patógenos humanos. O aumento da demanda por alimentos de origem animal com selo orgânico, tem realçado a importância dos extratos herbais como aditivos antimicrobianos em rações animais. Portanto, os aditivos de rações devem atender as exigências de segurança alimentar dos consumidores, e o alho, por fazer parte da culinária humana, assim como os probióticos, que são constituídos por microorganismos da flora benéfica, têm se mostrado como opções interessantes aos antibióticos convencionais.

O alho contém a alicina, sintetizada pela enzima alinase a partir da alina (Ceci et al., 1991) com o rompimento das células do bulbo (Prasad et al., 1996; Yu & Wu, 1989a,b). A alicina é reconhecida como bactericida, fungicida e antioxidante há pelo menos 5000 anos por babilônicos, egípcios, fenícios, viquingues, chineses, gregos, romanos e hindus (Block, 1985; Song & Milner, 2001; Matsuura, 2001), exibindo ação antibiótica de largo espectro contra as bactérias gram positiva e gram negativa, sem contribuir para aumentar a resistência bacteriana e, em combinação com antibióticos, resulta em sinergismo de ação parcial ou total contra bactérias (Sivam, 2001).

Segundo Coates (1963) e Roura et al. (1992), a eficácia de um promotor de crescimento depende da contaminação ambiental e da intensidade do desafio que o organismo da ave está exposto. Trabalhando com pintos alojados em baterias, Freitas et al. (2001) não observaram efeito do alho (0, 0,2, 0,4 e 0,6%), da bacitracina de zinco (0,0025%) e da lincomicina (0,001%) sobre o desempenho das aves. Ao contrário, quando os frangos foram alojados em cama de palha de café, Takaki et al. (1998) constataram efeito benéfico do alho.

A muda forçada é aplicada com a finalidade de prolongar a produção econômica das galinhas poedeiras (Silva & Santos, 1999), causando além da suspensão da postura, perdas de peso e de penas, alterações fisiológicas importantes como aumento da concentração dos hormônios adrenocortical e corticosterona (Davis et al., 2000), afetando a função imune no oviduto (Yoshimura et al., 1997). Portanto, a muda forçada deve ser um estágio crítico, do ponto de vista imunológico, para testar a eficácia dos antimicrobianos. Holt & Porter (1992) atribuíram o agravamento das infecções causadas por Salmonellas enteritidis, durante MF de 14 dias de duração, à imunocompetência celular. Recentemente, Holt & Gast (2002) observaram aumento significativo nos níveis séricos da a1 Glicoproteína ácida, uma proteína de fase aguda, em poedeiras submetidas a muda forçada, pela restrição alimentar durante 10 dias, em comparação com às não submetidas. Segundo Davis et al. (2000), o aumento da relação heterofil: linfócitos e dos níveis de corticosterona durante a MF também pode ser usado como indicadores do estresse fisiológico nas aves. Em contraste, Alodan & Mashaly (1996) não constataram efeito de três métodos de muda forçada sobre a imunocompetência e mortalidade das aves.

Em virtude da falta de informações e contradição entre os autores, mais estudos devem contribuir para elucidar o papel da muda forçada na imunodepressão e desempenho posterior das aves. Nenhum tratamento preventivo contra a colonização do trato digestivo por patógenos tem sido testado durante o estresse induzido pela muda forçada. Portanto, será que o fornecimento de substâncias antimicrobianas antes e durante a fase de restrição alimentar melhora o balanço microbiano intestinal, promovendo a saúde do epitélio e o desempenho das aves durante o ciclo de postura seguinte?

O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito do alho em comparação com o probiótico e virginiamicina como aditivos antimicrobianos em poedeiras antes, durante e após o estresse fisiológico induzido pela muda forçada.

Material e Métodos

Local e tratamentos experimentais

O experimento foi realizado no Aviário do Centro de Formação de Tecnólogos, Campus de Bananeiras da UFPB.

Foram utilizados 336 poedeiras Lohmann Brown entre o segundo e o terceiro ciclos de postura, com 24 meses de idade e peso vivo de 1,70 kg, alojadas em condições de criação comercial numa densidade de 550 cm². As aves foram submetidas a um programa de luz de 17 horas de duração. Uma dieta controle (DC), sem aditivo, foi formulada conforme as recomendações de Rostagno et al. (2000) para atender as exigências das aves em todos os nutrientes (Tabela 1). Posteriormente, esta DC foi suplementada com alho (A), probiótico (P), virginiamicina (V) e as misturas A+V, P+A, P+V e P+A+V.

O probiótico utilizado foi o Carlsporin B-300, em nível de 300 g/t de ração e o alho foi adquirido no mercado local, depois processado e misturado à ração na base de 0,5% (Takaki et al., 1997). Para prevenir eventuais perdas de atividade durante um longo período de armazenamento, o probiótico e o alho foram adicionados semanalmente à ração. A virginiamicina (Stafac - 50%) foi usada na proporção de 20 g/t de ração (Teeter & Belay, 1996).

A temperatura e umidade relativa do ar foram registradas duas vezes ao dia (8 e 17 h), utilizando-se um aparelho digital localizado no centro do galpão. A temperatura média do período foi de 27,9ºC, com médias mínima e máxima, respectivamente, de 22,2 e 32,0.ºC, enquanto a umidade relativa média foi de 70,2%, com mínima e máxima, respectivamente, de 52,9 e 90,6%.

Experimento 1

Antes da muda forçada (MF), as aves foram pesadas e submetidas a um período pré-experimental de 15 dias. Decorrido este período, as aves passaram a receber 110 g de ração/dia durante as quatro semanas de coleta.

As variáveis estudadas nesta fase foram consumo de ração, produção e peso dos ovos, massa e conversão por massa de ovos.

Experimento 2

A muda forçada foi realizada, pela retirada da ração dos comedouros durante 12 dias, mantendo a oferta de água à vontade. Durante a muda forçada, o programa de luz foi suspenso e, o consumo dos aditivos foi mantido em nível similar ao ensaio anterior, pela diluição da dose consumida em 110 g de ração em 10 g de milho moído, utilizado como veículo.

Foram avaliados a produção, peso e gravidade específica dos ovos, pesos e porcentagens de intestino e baço e a perda de peso vivo. Também foram estudados os pesos e as porcentagens de gema, clara e casca. Para avaliação da porcentagem do intestino, do duodeno até a cloaca, e do baço em relação ao peso vivo, foram selecionadas e abatidas 56 aves, uma de cada parcela experimental, por deslocamento cervical.

A qualidade da casca foi medida pela quebra e secagem das cascas em estufa a 105ºC durante quatro horas e a gravidade específica foi estimada pela relação entre o peso do ovo no ar e o peso de deslocamento da água pelo peso do ovo, quando completamente imerso em 1 L de água destilada com temperatura mantida a 23ºC, utilizando-se uma balança com precisão de 0,01 g e a seguinte expressão (Hempe et al., 1988):

em que FC = fator de correção da temperatura da água a 23ºC = 0,99754, é o valor da densidade dependente da temperatura da água no beacker.

Experimento 3

Após a MF, as aves foram paulatinamente adaptadas a ingestão de alimentos, durante 15 dias, com o fornecimento de cotas crescente de milho moído. Completada esta fase, as rações sem aditivos passaram a ser fornecidas na quantidade de 110 g/ave/dia e as coletas foram reiniciadas quando as aves atingiram cerca de 50% de produção de ovos.

Foram avaliados os efeitos residuais dos aditivos antimicrobianos sobre o consumo de ração, produção, peso, massa, conversão por massa e gravidade específica dos ovos.

Análises estatísticas

O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente ao acaso, com oito tratamentos, cada um com sete repetições de seis aves. As médias dos tratamentos foram analisadas pelo teste F (P<0,05) e, quando houve efeito significativo, as médias dos diferentes tratamentos foram comparadas entre si pelo teste Student Newman Keuls (P<0,05), utilizando o programa SAEG (UFV, 1982).

Resultados e Discussão

Experimento 1. Resultados antes da muda forçada

Antes da muda forçada, as rações contendo alho ou a mistura A+P+V afetaram negativamente o consumo em comparação com os tratamentos contendo V e a mistura A+P (P < 0,05).

Observa-se que o efeito do alho sobre o consumo foi inconsistente, em virtude do tratamento contendo A+P melhorou o consumo, enquanto os tratamentos contendo alho ou a mistura A+P+V pioraram (Tabela 2). Resultado semelhante foi obtido por Freitas et al. (2001) com frangos de corte.

Em virtude da falta de um padrão de comportamento alimentar das aves frente à inclusão dos aditivos, não foi possível especular sobre os possíveis fatores e mecanismos fisiológicos envolvidos, embora informações anteriores mostraram que a inclusão de alho diretamente no estômago causou irritação na mucosa intestinal de cães, aparecimento de vermelhidão na mucosa e perda das células epiteliais do topo das criptas do íleo (Hoshiro et al., 2001).

A produção de ovos, o peso dos ovos e a conversão alimentar por massa de ovos não foram afetados pelos tratamentos (P>0,05). O probiótico melhorou a massa de ovos em comparação com o tratamento contendo alho (P<0,05), sem diferir dos demais tratamentos. O tratamento contendo alho e virginiamicina pioraram, respectivamente, 10 e 5% a conversão alimentar por massa de ovos, enquanto o probiótico melhorou 6%, em comparação com o resultado obtido com a dieta controle (Tabela 2). O tratamento A+V piorou a conversão alimentar por massa de ovos em 1,2%, enquanto o P+V melhorou em 10% em relação ao tratamento controle.

Um fato secundariamente observado, mas com possível valor biosanitário importante, foi a redução na freqüência de pardais nos comedouros contendo alho na ração.

Experimento 2. Resultados durante a muda forçada

Durante a muda forçada, a produção, o peso e a gravidade específica dos ovos produzidos nos três primeiros dias da suspensão do fornecimento de ração e os pesos do baço e do intestino no final da muda forçada, assim como a porcentagem de baço, não foram afetados pelos tratamentos (P>0,05). Entretanto, a virginiamicina e a mistura probiótico com virginimiacina reduziram (P<0,05) a porcentagem do trato digestivo em relação ao tratamento contendo alho (Tabela 3).

O efeito da virginiamicina na redução da massa do trato gastrointestinal tem sido observado (Teeter & Belay, 1996), podendo estar relacionado à diminuição da inflamação da parede intestinal (Walton, 1990) e à melhor absorção de nutrientes e ao menor gasto de mantença, com a renovação do epitélio intestinal (Teeter & Belay, 1996).

Ao contrário, a tendência de os tratamentos contendo alho na ração causarem aumento da porcentagem de trato gastrointestinal pode estar relacionada com o efeito irritante do alho sobre a mucosa intestinal, conforme observado por Hoshiro et al. (2001) em cães, provocando, possivelmente, o engrossamento da mucosa intestinal.

Apesar de alguns estudos indicarem que a MF afeta os diferentes componentes do sistema imune das aves (Bem Nathan et al., 1977; Holt & Porter, 1992) como o peso do timo e do baço (Brake et al., 1981), este último não sofreu alteração no presente estudo, embora as aves tenham sido alojadas sob densidade de 550 cm²/ave, semelhante aquela das granjas comerciais, e em condições de alta temperatura ambiente (máxima de 32^oC).

No final da MF, os tratamentos não influenciaram a perda de peso e a porcentagem de perda de peso das aves (P>0,05), conforme a Tabela 4. Observa-se que a porcentagem de perda de peso das aves, em média, de 28 a 29% foi maior que aquela obtida por Silva et al. (1999) e atende a recomendação de Baker et al. (1983) de uma perda de peso próxima a 28% para que as aves apresentem ótimo desempenho produtivo no ciclo seguinte de postura.

A mortalidade durante a muda forçada foi de 1%, considerada baixa em relação a muda convencional, e somente ocorreu no tratamento contendo virginiamicina. Este resultado sugere o uso de uma cota diária de 10 g de fubá de milho durante a muda forçada como atenuante do estresse fisiológico induzido pela restrição total da ração durante 12 a 14 dias, melhorando o bem-estar das aves em processo de muda forçada.

A GE caiu linearmente (P<0,001) numa taxa de 0,0086/dia de muda forçada, conforme a equação: Y = 1,08580-0,00864006 X, R² = 0,92, em que Y representou a variável dependente gravidade específica e X, a variável independente número de dias de muda forçada. O não atendimento das necessidades nutricionais em cálcio, fósforo e vitamina D₃ foi, talvez, o principal fator responsável pelo declínio da qualidade da casca dos ovos nos primeiros três dias da muda forçada. O início da muda forçada deve ser, do ponto de vista fisiológico, uma ótima oportunidade para avaliação da influência de produtos e nutrientes sobre a qualidade da casca dos ovos. Silva & Santos (2000) mostraram claramente que a oferta de uma fonte de cálcio durante a muda forçada afeta a qualidade da casca e, conseqüentemente, o número de ovos com casca intacta durante e após a muda forçada, sendo o carbonato de cálcio superior ao fosfato bicálcico.

Embora informações anteriores atribuem um possível papel do probiótico na melhoria da qualidade da casca dos ovos (Mohan et al., 1995, Pedroso et al., 1998), este efeito não foi confirmado no presente trabalho, o que concorda com Jadhav et al. (1992) citado por Ferreira & Oliveira (1996). Segundo Dale (1992), o valor do probiótico como aditivo de rações ainda não está completamente comprovado.

O peso e a porcentagem de gema, peso e a porcentagem de albúmen e peso e porcentagem de casca não foram afetados pelos aditivos durante a MF (Tabela 5).

Experimento 3. Resultados após a muda forçada

Durante o terceiro ciclo de produção, não se observou efeito residual dos aditivos e suas misturas em relação ao tratamento testemunha sobre consumo de ração, produção e peso dos ovos, massa e conversão alimentar por massa de ovos e gravidade específica em comparação com os resultados mostrados pelas aves alimentadas com a dieta controle (Tabela 6).

Este resultado concorda com aquele observado por Freitas et al. (2001) com frangos de corte em que a inclusão de 0,2, 0,4 e 0,6% de alho na ração e 0,0025% de bacitracina de zinco e 0,001% de lincomicina não causou efeito positivo sobre o desempenho em relação as aves recebendo a ração sem antimicrobianos.

Novamente, as condições higiênicas das instalações com alojamento das aves em sistema de gaiola com piso suspenso, provavelmente, contribuíram para reduzir o estresse imunológico e a eficácia dos aditivos na promoção do desempenho das aves. Coates et al. (1963) indicaram que, quanto menor o nível de contaminação ambiental, menor a necessidade de uso de antimicrobianos na ração como promotores do desempenho das aves. Segundo Roura et al. (1992), a habilidade dos antimicrobianos na promoção do desempenho das aves depende da extensão do desafio microbiano presente no ambiente, quando a intensidade de desafio decresce, o efeito positivo dos antimicrobianos sobre o desempenho também diminui.

O tratamento contendo somente alho como aditivo diminuiu a produção de ovos em 20%, massa de ovos em 23% e piorou a conversão alimentar em 16% em comparação com a dieta controle, estando, provavelmente, relacionadas ao aumento da espessura da parede intestinal. Segundo Hoshiro et al. (2001), a introdução de alho diretamente no estômago provoca irritação da mucosa intestinal, aparecimento de vermelhidão e perda das células do topo das criptas em cães. Segundo Visek (1978), citado por Lancini (1994), o aumento da espessura da parede intestinal causa redução da absorção dos nutrientes e aumenta a taxa de passagem do material em digestão.

Resultados anteriores mostraram que a exposição do plantel a uma situação potencial de estresse, como a muda forçada, deve exacerbar as infecções em poedeiras (Holt & Gast, 2002). Portanto, nas condições do presente estudo, o método de muda forçada utilizado, com o fornecimento de 10 g de milho moído em substituição a 110 g de ração, falhou na indução do estresse imune, provavelmente, em virtude das condições aparentemente sadias das aves, evitando o agravamento de infecções já existentes no plantel. Este fato explica porque o uso dos antimicrobianos na ração não modificou substancialmente o desempenho, peso e porcentagem do baço, como parte do sistema imune, e mortalidade das aves. Este resultado também sugere que a oferta de 10 g de milho moído durante o período de muda forçada deve controlar o estresse, favorecendo o bem-estar e a manutenção da saúde das aves.

Conclusões

O uso de alho, virginiamicina e probiótico em rações de poedeiras antes e durante o estresse induzido pela muda forçada é desaconselhável, em virtude de não promoverem melhoria no desempenho das aves durante o ciclo de postura seguinte e onerarem o custo final da ração em relação à ração sem aditivos.

Agradecimento

À FATEC, pelo fornecimento do probiótico.

Literatura Citada

Recebido em: 04/10/02

Aceito em: 03/02/03

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  26 Nov 2008
• Data do Fascículo
  Dez 2003

Histórico

• Aceito
  03 Fev 2003
• Recebido
  04 Out 2002