DIGOXINA E VERAPAMIL INDUZEM HIPERTROFIA EM CARDIOMIÓCITOS DE RATOS SEDENTÁRIOS E/OU TREINADOS

DIGOXIN AND VERAPAMIL PROMOTE CARDIOMYOCYTE HYPERTROPHY IN SEDENTARY AND/OR TRAINED RATS

DIGOXINA Y VERAPAMILO INDUCEN HIPERTROFIA DE CARDIOMIOCITOS EN RATAS SEDENTARIAS Y/O ENTRENADAS

RESUMO

Introdução:

Cardiotônicos e bloqueadores de canais de cálcio são fármacos que alteram o Ca2+ intracelular e afetam o coração.

Objetivo:

Avaliar os efeitos da administração de verapamil e digoxina sobre a morfologia cardíaca de ratos submetidos ao treinamento intervalado (TAI).

Métodos:

Ratos Wistar machos divididos em seis grupos (N = 8): Controle, Digoxina (30,0 µg.kg-1/dia), Verapamil (5,0 mg.kg-1/dia), Treinado, Treinado+digoxina e Treinado+verapamil. O TAI foi realizado em esteira rolante (60 min/dia/60 dias) concomitantemente com a administração dos fármacos. Fragmentos do ventrículo esquerdo (VE) foram coletados para análise histológica.

Resultados:

A digoxina e o verapamil aumentaram a área total do VE (p < 0,002), capilares/área VE (p < 0,01) e área de cardiomiócitos (p < 2,8e-10), sendo que, nesta última variável, o verapamil promoveu efeito ainda maior que a digoxina. O TAI aumentou VE/PC (p < 4e-05), o diâmetro interno do VE (p < 2,7e-6), a área de cardiomiócitos (p < 1,8e-6) e reduziu o [Lac] (p < 2,6e-5). Houve interação entre TAI e fármacos na área total (p < 9,8e-5), capilares (p < 0,04), células/área (p < 0,004) e área de cardiomiócitos (p < 2e-16).

Conclusão:

A digoxina promoveu hipertrofia de cardiomiócitos e, quando associada ao TAI, potencializou a hipertrofia. O verapamil foi mais eficiente em aumentar a área de cardiomiócitos em comparação com a digoxina, porém somente de forma isolada.

Descritores:
cardiotônicos; bloqueadores dos canais de cálcio; atividade motora; coração

ABSTRACT

Introduction:

Cardiotonics and calcium channel blockers are drugs that alter intracellular Ca2+ and can affect the heart.

Objective:

To evaluate the effects of administration of verapamil and digoxin on heart morphology of rats subjected to interval training (IT).

Methods:

Male Wistar rats were divided into groups (n = 8): Control, Digoxin (30.0µg.kg-1/day), Verapamil (5.0 mg.kg-1/day), Trained, Trained+digoxin and Trained+verapamil. The IT was performed on a treadmill (60 min/day/60 days) concurrently with the drugs administration. Fragments of the left ventricle (LV) were collected for histological analysis.

Results:

Digoxin and verapamil increased the total area of the LV (p<0.002), capillary/LV area (p<0.01) and cardiomyocytes area (p<2.8e-10), and in the latter variable, verapamil promoted even greater effect than digoxin. The IT increased LV/BW (p<4e-05), the inner diameter of the LV (p<2.7e-6), the area of cardiomyocytes (p<1.8e-6), and reduced the [Lac] (p<2.6e-5). There was interaction between IT and drugs in the total area (p<9.8e-5), capillaries (p<0.04), cell/area (p<0.004) and cardiomyocytes area (p <2.0e-16).

Conclusions:

Digoxin promoted cardiomyocyte hypertrophy and when associated with IT, potentiated the hypertrophy. Verapamil was more efficient in increasing the cardiomyocytes area compared with digoxin, but only when isolated.

Keywords:
cardiotonic agents; calcium channel blockers; motor activity; heart

RESUMEN

Introducción:

Cardiotónicos y bloqueadores de los canales de calcio son fármacos que alteran el Ca2+ intracelular y afectan al corazón.

Objetivo:

Evaluar los efectos de la administración de verapamilo y digoxina sobre la morfología del corazón de ratas sometidas a entrenamiento a intervalos (EI).

Métodos:

Ratas Wistar macho, divididas en seis grupos (N = 8): Control, Digoxina (30,0 µg.kg-1/día), Verapamilo (5,0 mg.kg-1/día), Entrenado, Entrenado+digoxina y Entrenado+verapamilo. El entrenamiento a intervalos se realizó en una cinta de correr (60 min/día/60 días), con la administración concomitante de fármacos. Se recogieron fragmentos del ventrículo izquierdo (VI) para el análisis histológico.

Resultados:

La digoxina y el verapamilo aumentaron el área total del VI (p < 0,002), capilares/área VI (p < 0,01) y el área de los cardiomiocitos (p < 2,8e-10) y, en esta última variable, el verapamilo promovió un efecto aún mayor que la digoxina. EI entrenamiento a intervalos aumentó VI/PC (p < 4e-05), el diámetro interior del VI (p < 2,7e-6), el área de los cardiomiocitos (p < 1,8e-6) y redujo el [Lac] (p < 2,6e-5). Hubo una interacción entre fármacos y el EI en el área total (p < 9,8e-5), capilares (p<0,04), células/área (p < 0,004) y el área de los cardiomiocitos (p < 2e-16).

Conclusión:

La digoxina promovió la hipertrofia de los cardiomiocitos y, cuando al asociarse con el EI, potenció la hipertrofia. El verapamilo fue más eficiente en el aumento de la zona de los cardiomiocitos en comparación con la digoxina, pero sólo de forma aislada.

Descriptores:
cardiotónicos; bloqueadores de los canales de calcio; actividad motora; corazón

INTRODUÇÃO

Os cardiotônicos e os bloqueadores de canais de cálcio (BCCs) são fármacos comumente utilizados em pacientes com cardiopatias. Os primeiros aumentam a força de contração cardíaca por elevarem os níveis citosólicos de cálcio (Ca^2+)1,2. O mecanismo de ação proposto mais aceito é que o cardiotônico se liga à bomba de sódio/potássio (Na⁺/K⁺⁾ da membrana do cardiomiócito elevando os níveis de Na⁺ intracelular e, consequentemente, o trocador Na⁺/Ca²⁺ promove a troca de Ca²⁺ para dentro da célula e o Na⁺ para fora. Os BCCs promovem efeitos inversos dos cardiotônicos. Ao se ligarem aos canais de Ca²⁺ voltagem dependente, eles bloqueiam o influxo de Ca²⁺ promovendo assim, redução tanto da contratilidade como da condutibilidade cardíaca. Desta forma, esses fármacos alteram a biodisponibilidade intracelular de Ca²⁺ no cardiomiócito determinando o grau de força de contração muscular. Entretanto, o Ca⁺² participa de outros processos fisiológicos, incluindo a transcrição gênica e a proliferação celular^3,4.

Não estão bem elucidados na literatura os efeitos desses fármacos sobre a morfologia cardíaca de corações normais ou hipertrofiados pelo treinamento físico (TF). Uma vez que o TF promove efeitos benéficos ao coração, como melhora do débito cardíaco no exercício, melhora no controle do sistema nervoso autônomo, hiperplasia e aumento no número de mitocôndrias, nossa hipótese é que a administração crônica de cardiotônico ou BCCs, associada ao treinamento físico intervalado de alta intensidade (TAI), promova alterações na estrutura das células cardíacas. O objetivo desse trabalho foi avaliar os efeitos da administração crônica de verapamil ou digoxina sobre a morfologia cardíaca de ratos submetidos ao TAI.

METODOLOGIA

Animais e grupos experimentais

Foram utilizados 48 ratos Wistar, machos, com 60 dias de idade. Os animais foram mantidos em gaiolas coletivas (4 animais/gaiola) em ambiente com temperatura controlada (24 ± 2ºC) sob um ciclo claro- escuro de 12h, alimentados com ração comercial Labina (Purina, Paulínia, SP, Brasil) e água ad libitum⁵. Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa Animal da Universidade Federal de Mato Grosso (CEPA - UFMT) (protocolo nº: 23108.019254/11-0) e foi conduzido de acordo com as normas estabelecidas no "Guide for the Care and Use of Laboratory Animals" e Princípios Éticos na Experimentação Animal do Colégio Brasileiro de Experimentação Animal.

Os ratos foram aleatoriamente divididos em (N=8): controle (C), treinado (T), digoxina (DIGO), verapamil (VERA), treinado mais digoxina (TDIGO) e treinado mais verapamil (TVERA). A dose de digoxina (Pharlab Indústria Farmacêutica, Lagoa da Prata-MG) foi de 30,0 µg.kg^-1 e a dose de verapamil foi de 5,0 mg.kg^-1, sendo que ambas foram administradas por gavagem, uma vez ao dia por 75 dias. A concentração de digoxina utilizada nesse trabalho baseou-se em Wang et al.¹ e Manunta et al.⁶. Os grupos C e T foram submetidos ao mesmo procedimento da gavagem, porém, receberam apenas solução fisiológica para garantir as mesmas condições a todos os grupos.

Treinamento físico intervalado de alta intensidade (TAI)

Os grupos T, TDIGO e TVERA foram submetidos a um protocolo de adaptação à esteira, com duração de uma semana (velocidade de 10m/mim, 15 min por dia). Posteriormente, os grupos T, TVERA e TDIGO foram submetidos a um teste de esforço máximo (TEM) realizado em esteira rolante, o qual foi repetido após 30 e 60 dias do início do treinamento. O TEM iniciou com velocidade de 10m/min e aumentos progressivos de 2,0 m/min cada dois minutos até a exaustão. O critério de exaustão adotado na avaliação no ergômetro foi a não manutenção da corrida na velocidade proposta por cinco segundos.

O protocolo de treinamento físico por nós utilizado foi adaptado de Kemi et al.⁷, uma vez que tem sido proposto como uma estratégia adequada para promover respostas benéficas sobre a função e hipertrofia cardíaca⁸. Após o pré-teste, os grupos T, TVERA e TDIGO foram submetidos TAI em esteira rolante (8 min em velocidade correspondente à 80% da Vmáx e dois min em velocidade correspondente à 20% da V_máx) durante 60 min. O tempo total de treinamento foi de oito semanas ininterruptas.

Determinação da concentração de lactato sanguíneo

Para avaliar a eficácia do protocolo de TAI, foi determinada a concentração de lactato sanguíneo imediatamente após o teste de esforço máximo utilizando lactímetro portátil (Roche, Alemanha). Para cada teste foi coletada uma gota de sangue da extremidade da cauda do animal.

Dados anatômicos e perfil nutricional

Ao término do período experimental, os animais foram eutanasiados, o coração foi imediatamente retirado e os ventrículos direito (VD) e esquerdo (VE) foram separados dos átrios; os tecidos adiposos foram excisados e totalmente retirados. Todas as amostras supracitadas foram pesadas em balança analítica (Marca Shimadzu, Alemanha).

Fragmentos do VE foram colocados em solução de cloreto de potássio (KCl) para que o ciclo cardíaco fosse interrompido em diástole; além disso, foram medidas a espessura da parede do VE (EPVE) e o diâmetro interno do VE (DIVE) com o auxílio de um paquímetro de aço inox (Jomarca-China) e, em seguida, o VE foi colocado em solução de fixador para posterior análise histológica.

Análise histológica

Após ser fixado em paraformaldeído 10% tamponado, o VE foi submetido ao processamento para a análise histológica, com cortes de três µm e coloração PAS (ácido periódico+reativo de Schiff) com a solução de metanilyellow). Todas as análises foram realizadas por um único avaliador cego para o grupo de imagens.

Para a análise, foi utilizado um sistema computadorizado acoplado ao microscópio ótico com aumento de 20x. Foram selecionados quatro campos da região endocárdica-miocárdica (aproximadamente 200 células) para cada animal. Foi medido em µm² a área total do campo, o diâmetro da área celular de cada cardiomiócito e foram contados os números de cardiomiócitos e de capilares.

Análise estatística

As variáveis foram expressas por meio de medidas descritivas de posição e variabilidade. A comparação dos grupos experimentais foi realizada pela técnica de Kruskal Wallis para o esquema de dois fatores independentes (droga e treinamento), utilizando-se o software R. O índice de significância considerado para todas as variáveis foi de 5%.

RESULTADOS

A Tabela 1 apresenta as características gerais dos animais dos grupos experimentais. Não houve diferença significante entre os grupos para as variáveis, peso corporal e consumo de ração, indicando que a administração crônica de digoxina ou de verapamil associadas ou não ao TAI, não afetaram o crescimento somático dos animais.

Tabela 1
Características gerais dos animais.

	C N = 7	DIGO N = 6	VERA N = 7	T N = 8	TDIGO N = 7	TVERA N = 8
PCI (g)	245 ± 22	229 ± 28	217 ± 39	242 ± 18	215 ± 39	206 ± 32
PCF (g)	369 ± 23	374 ± 23	370 ± 33	373 ± 22	351 ± 42	320 ± 35
Consumo ração (g)	23,3 ± 0,2	23,8 ± 1,6	24,1 ± 0,7	25,8 ± 0,2	24,5 ± 1,5	23,2 ± 1,1

• Valores expressos em média ± desvio padrão; C: controle; T: treinado; DIGO: digoxina; TDIGO: treinado+digoxina; VERA: verapamil; TVERA: treinado+ verapamil; PCI: peso corporal inicial; PCF: peso corporal final; Kruskal Wallis, p<0,05.

De acordo com os dados da Tabela 2, as drogas utilizadas afetaram a relação VE/PCF (p<0,04). O TAI apresentou aumento no VE/PCF (p<4,0e^-5) e DIVE (p<2,7e^-6) e diminuição na GOR/PCR (p<2,9e^-5). Houve interação entre as drogas e TAI no VE/PCF (p<0,0002), GOR/PCF (p<0,0004) e DIVE (p<9,3e^-5)

Tabela 2
Relações entre gordura corporal, músculo cardíaco com o peso corporal final, espessura da parede e diâmetro interno do ventrículo esquerdo.

	C N = 7	DIGO N = 6	VERA N = 7	T N = 8	TDIGO N = 7	TVERA N = 8
Gor/PCF	39,4 ± 3,9	42,4 ± 6,5	41,0 ± 5,8	35,4 ± 6,4	31,0 ± 3,6#‡	29,2 ± 3,6+‡
VE/PCF	1,92 ± 0,05	2,10 ± 0,21*	2,01 ± 0,11	2,12 ± 0,06*	2,29 ± 0,19#	2,37 ± 0,19+‡
VD/PCF	0,565 ± 0,067	0,602 ± 0,073	0,603 ± 0,06	0,634 ± 0,06	0,660 ± 0,08	0,684 ± 0,099*
EPVE	0,291 ± 0,033	0,308 ± 0,016	0,282 ± 0,050	0,341 ± 0,052	0,297 ± 0,071	0,323 ± 0,040
DIVE	0,244 ± 0,065	0,301 ± 0,046	0,294 ± 0,037	0,377 ± 0,080*	0,461 ± 0,121#‡	0,383 ± 0,075+

• Valores expressos em média ± desvio padrão; GOR: gordura corporal; PCF: peso corporal final; VE: ventrículo esquerdo; VD: ventrículo Direito; EPVE: espessura da parede do ventrículo esquerdo; DIVE: diâmetro interno do ventrículo esquerdo. * vs C; # vs DIGO; + vs VERA; ‡ vs T; Kruskal Wallis, p<0,05.

O teste de esforço máximo foi utilizado para comprovar a eficácia do TAI. A Figura 1A e 1B demonstra que todos os grupos treinados aumentaram o tempo total e a distância total percorrida do momento pré para o pós 60 dias de TAI. No entanto, este aumento foi similar entre os grupos em todos os momentos, sugerindo que as drogas utilizadas não afetaram o desempenho físico.

Figura 1
Teste de esforço em ratos treinados (T); Treinado+digoxina (TDIGO) e Treinado+verapamil (TVERA), antes do treinamento intervalado (T0) após 30 dias (T30) e após 60 dias (T60). A: tempo total de teste (min). B: distância total percorrida (m). Dados expressos em média ± erro padrão da média.

A Figura 2 representa a concentração plasmática de lactato imediatamente após o TEM após 60 dias de TAI. Observou-se efeito do treinamento (p<2,6e^-5) sendo que o grupo T foi menor que o grupo C, o grupo TDIGO foi menor que o grupo DIGO e o grupo TVERA foi menor que o grupo VERA.

Figura 2
Concentração plasmática de lactato após o teste de esforço máximo no momento pós-treinamento. (N = 8 por grupo).

A Tabela 3 apresenta os dados histológicos do ventrículo esquerdo dos grupos experimentais. Observou-se efeito das drogas na área total (p<0,002), no número de capilares/área (p<0,016) e na área de cardiomiócito (p<2,83e^-10) sendo que nesta última variável, o verapamil teve efeito maior que a digoxina. O TAI aumentou a área de cardiomiócito (p<1,85e^-6). Houve interação entre as drogas e o TAI na área total do VE (0,79e^-5), no número de capilares (p<0,04), no número de capilares/área (p<0,006), no número de células/área (p<0,004) e na área de cardiomiócito (p<0,00).

Tabela 3
Dados histológicos ventrículo esquerdo.

	C	DIGO	VERA	T	TDIGO	TVERA
Área total (µ2)	32645±7797	37527±9121*	45079± 6937*#	41684±7013*	38967±6190	41738±6164
Nº de capilares	35,1 ± 12,0	35,9 ± 12,1	39,1 ± 14,0	40,9 ± 13,7	28,7 ± 12,6#‡	37,2 ± 10,9
Nº de células	51,9 ± 10,7	51,4 ± 14,6	58,0 ± 13,9	55,1 ± 12,6	53,8 ± 10,5	56,6 ± 12,4
Área cardiomiócito (µ2)	563 ± 205	615 ± 243*	692 ± 248*#	666 ± 254*	682 ± 278#+	648 ± 261#+†
Células/área (10-4)	16,1 ± 2,3	13,8 ± 2,8*	12,8 ± 2,0*	13,2 ± 2,2*	14,1 ± 3,3*	13,7 ± 2,9*
Capilares/área (10-4)	10,7 ± 2,5	9,6 ± 2,5	8,3 ± 3,3*	9,9 ± 3,0	7,4 ± 3,2*#‡	9,0 ± 2,8†

• Valores expressos em média ± desvio padrão. C: controle; T: treinado; DIGO: digoxina; TDIGO: treinado+digoxina; VERA: verapamil; TVERA: treinado+verapamil, * vs C; # vs DIGO; + vs VERA; ‡ vs T; † vs TDIGO, Kruskal Wallis, p<0,05.

As imagens histológicas de tecido do ventrículo esquerdo (Figura 3) demostram que os cardiomiócitos estão preservados, com ausência de lesão, dano celular, fibrose, núcleos centralizados, células endoteliais e capilares aparentemente normais.

Figura 3
Corte transversal da região endocárdica-miocárdica do ventrículo esquerdo. A) Controle; B) Treinado; C) Digoxina; D) Treinado+digoxina; E)Verapamil; F)Treinado+verapamil. Observam-se os cardiomiócitos (asterisco), capilares (setas) e núcleo (círculo). Coloração PAS+ metanilyellow. Aum. 40x.

DISCUSSÃO

O objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos da administração crônica de cardiotônico ou BCCs sobre a morfologia de cardiomiócitos de ratos submetidos ao TAI. O TAI melhorou a aptidão física dos animais pertencentes a todos os grupos treinados, sendo isto confirmado pelos resultados obtidos no TEM; sugerimos que tal melhora possa estar relacionada à otimização tanto da capacidade oxidativa muscular como das capacidades cardiocirculatória e neuroendócrina advindas do treinamento físico. Além disso, os menores níveis de lactato sanguíneo apresentados pelo grupo T imediatamente após o TEM sugerem, ao menos em parte, ocorrência de adaptação metabólica ao treinamento físico (i.e., menor produção e/ou aumento na taxa de remoção do lactato produzido), corroborando, desta forma, o estudo de Menezes et al.⁹, os quais também verificaram essa redução. Os mecanismos responsáveis por esse fenômeno estão relacionados à maior oxidação de ácidos graxos bem como à redução na magnitude de funcionamento da glicólise anaeróbia e, ainda, de forma importante, à conversão do lactato em glicogênio (neoglicogênese), principalmente no tecido hepático¹⁰.

Clinicamente, a dosagem de digoxina usualmente empregada é de 0,25 mg para pacientes com função renal normal. Isso equivale à concentração de 3,57 µg.kg^-1 em um paciente de 70 kg, correspondendo a 10 vezes menos a dosagem que empregada por nós (30 µg.kg^-1). A dosagem de verapamil utilizada nesse estudo foi de 5,0 mg.kg^-1, sendo esta a mesma empregada clinicamente para pacientes hipertensos e corrobora com outros estudos experimentais^11,12. Para verificar a possível toxicidade das drogas utilizadas, nós avaliamos os parâmetros séricos de creatinina, TGO, TGP e proteínas totais (dados não apresentados). Uma vez que não houve alteração nesses parâmetros, consideramos que as drogas, isoladamente ou associada ao TAI, não causaram prejuízo à função renal ou hepática dos animais.

Nossos achados relacionados à hipertrofia cardíaca mostraram que o treinamento empregado promoveu aumento no diâmetro do VE e da área do cardiomiócito, corroborando com outros importantes estudos¹³. Sabe-se que o tipo, a frequência, a intensidade e a duração do TF promovem diferentes adaptações na função cardíaca e dimensões ventriculares¹⁴. As adaptações morfológicas cardíacas correspondem à natureza dos estímulos hemodinâmicos (sobrecarga de pressão ou sobrecarga de volume) impostos ao miocárdio durante sessões repetidas de exercício e a modificação da relação entre a espessura da parede e o diâmetro do ventrículo hipertrófico deve obedecer a lei de Laplace¹⁵. O protocolo de exercício utilizado em nosso estudo foi o modelo intervalado de alta e baixa intensidade e longa duração, este caracterizado por sobrecarga de volume induzindo hipertrofia do tipo excêntrica (DIVE aumentado)¹³.

Nossos achados de área de cardiomiócito indicam que administração crônica de digoxina induziu hipertrofia cardíaca e, quando associada ao treinamento físico, os resultados foram ainda mais proeminentes. A digoxina é utilizada na insuficiência cardíaca por aumentar a disponibilidade intracelular de Ca²⁺ no cardiomiócito aumentando o grau de força de contração muscular. Além do efeito inotrópico positivo, os cardiotônicos possuem efeitos neuro-endócrinos, neuro-hormonais e eletrofiológicos, os quais podem causar interferencia no processo hipertrófico¹⁶. Os cardiotônicos não alteram o débito cardíaco em sujeitos normais, porém, em pacientes com reduzida função sistólica, estes fármacos melhoram a fração de ejeção do ventrículo esquerdo e aumentam o débito cardíaco em repouso e durante o exercício¹⁷. Nossos achados divergem com os obtidos no trabalho de Aldinger¹⁸, o qual não verificou hipertrofia cardíaca em pacientes tratados com digoxina e submetidos ao treinamento físico intermitente.

Os mecanismos moleculares envolvidos na hipertrofia de cardiomiócito induzida pela digoxina podem estar relacionados ao aumento da disponibilidade de cálcio intracelular. Recentes evidências sugerem que a resposta hipertrófica ao cálcio está associada à ativação da proteína quinase C (PKC), cálcio-calmodulina quinase II (CAMKII) e calcineurina fosfatase (CaN) ativada pelo complexo cálcio-calmodulina^2,4. A ativação da PKC e CAMKII fosforila fatores transcricionais nucleares e a CaN causa defosforilação e ativação das células T ativadas por fatores nucleares (NFAT), as quais estão localizadas no citoplasma quando é fosforilada em condições basais. Após a defosforilzação, NFAT transloca-se para a região promotora nuclear promovendo ativação de genes musculo-específicos e promovendo, consequentemente, hipertrofia cardíaca^2,19. Tem sido bem documentado que o treinamento físico induz hipertrofia ventricular e aumento do transiente de Ca²⁺²⁰. Dessa forma, nossos achados de hipertrofia de cardiomiócito induzidos pela digoxina podem estar relacionados às alterações de disponibilidade de cálcio intracelular. Novos estudos necessitam ser realizados para avaliar o transiente de cálcio e a ativação dessas vias de sinalização intracelular.

Interessantemente, a administração crônica de verapamil promoveu aumento da área do cardiomiócito. Entretanto, quando associado ao treinamento físico, esse efeito não foi observado. Os BCCs promovem efeito inotrópico negativo, uma vez que diminuem a força de contração cardíaca por reduzir a disponibilidade de cálcio intracelular. Seu efeito mais importante como anti-hipertensivo reside na sua ação vasodilatadora, resultando em diminuição da pressão arterial sistêmica. Contrariamente aos nossos achados, dados da literatura sugerem que os BCCs podem atenuar o desenvolvimento da hipertrofia cardíaca em ratos espontaneamente hipertensos^11,12. Essa divergência de resultados pode ser atribuída às condições clínicas dos ratos, uma vez que utilizamos animais saudáveis e, de acordo com alguns autores, os níveis de verapamil nos tecidos do coração diferem drasticamente entre ratos normotensos e hipertensos^21,22. Não encontramos dados na literatura que suportam a ideia de aumento de área de cardiomiócito induzida por BCCs em condições de normotensão. Estudos in vitro e in vivo demonstraram que os BCCs induzem hiperglicemia por inibir a liberação de insulina nas células beta pancreática^23,24. Em doses tóxicas, o verapamil pode promover efeito diabetogênico²⁵. Além disso, tem sido demonstrada relação entre miocárdio hipertrófico e resistência à insulina, independentemente da presença de diabetes mellitus²⁶.

As vias de sinalizacao referentes à resistencia insulínica no miocárdio são complexas e multifatoriais, pois estão envolvidas em anormalidades na homeostasia do calcio intracelular (canal L, fosfolamban, SERCA2A, trocador Na⁺/Ca⁺²⁾ e sinalização da insulina (IRS-PI3K-Akt). Por outro lado, tem sido demonstrado que o treinamento físico reduz a resistencia insulínica²⁷. Não apresentamos os dados de glicemia, entretanto verificamos aumento significativo (p<0,0007) dos níveis séricos de glicose em ratos que receberam verapamil (95 ± 8) em relação aos ratos tratados com verapamil e submetidos ao treinamento físico (76±10). A hiperglicemia e a resistência insulínica poderiam explicar os resultados da maior hipertrofia de cardiomiótico no grupo VERA em relação ao grupo TVERA. Novos estudos são necessários para a comprovação dessa hipótese por meio da dosagem de insulina sérica, da via de sinalização intracelular da insulina envovida na hipertrofia cardíaca em condições de hiperglicemia induzida pela administração crônica de verapamil.

Em relação à vascularização, nossos achados não verificaram alterações sobre a morfologia de vasos sanguíneos induzidos pelo treinamento ou administração de digoxina ou verapamil. Trabalhos têm mostrado que diversas situações como idade, condições clínicas e o próprio treinamento físico induzem angiogênese²⁸. Roque et al.²⁹ verificaram aumento do número de capilares de músculos papilares do coração de ratos submetidos ao treinamento de natação por 10 semanas. Leosco et al.³⁰ verificaram que o treinamento em esteira por 10 semanas induziu angiogênese coronária em ratos com insuficiência cardíaca. Essa divergência de resultados pode estar relacionada à condição clínica do animal, ao modelo de treinamento empregado, à intensidade do exercício e a região cardíaca a qual foi submetida à análise.

CONCLUSÃO

Nossos achados sugerem que a administração crônica de digoxina ou de verapamil promoveu hipertrofia de cardiomiócitos de ratos sedentários e/ou treinados. Novos estudos devem ser realizados para a elucidação de possíveis mecanismos relacionados a esses importantes e significativos efeitos.

REFERÊNCIAS

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  Sep-Oct 2016

Histórico

• Recebido
  15 Jul 2015
• Aceito
  11 Jul 2016