Resumos
OBJETIVO:
Determinar a frequência de seis mutações (F508del, G542X, G551D, R553X, R1162X e N1303K) em pacientes com fibrose cística (FC) de um centro de referência, diagnosticados pela presença de duas dosagens de sódio e cloro no suor alteradas.
MÉTODOS:
Estudo de corte transversal com 70 pacientes com idade média de 12,38 ± 9,00 anos, sendo que 51,43% eram do sexo feminino, e 94,29% eram caucasoides. A triagem de mutações foi realizada pela técnica de reação em cadeia da polimerase (F508del), seguida por digestão enzimática (demais mutações). A análise clínica foi realizada utilizando as variáveis sexo, idade, etnia, manifestações pulmonares/digestivas e escore de Shwachman-Kulczycki (ESK).
RESULTADOS:
Todos os pacientes apresentaram manifestações pulmonares, e 8 não apresentaram manifestações digestivas. Os resultados do ESK evidenciaram doença leve, moderada e grave, respectivamente, em 22 (42,3%), 17 (32,7%) e 13 (25,0%) pacientes. Não houve associação da mutação F508del com o grau de doença pelo ESK. Dos 140 alelos analisados, a mutação F508del foi identificada em 70 (50%). As demais mutações (G542X, G551D, R553X, R1162X e N1303K) foram identificadas em 12 (7,93%) dos alelos analisados. Em pacientes homozigotos F508del com doença grave, a OR foi de 0,124 (IC95%: 0,005-0,826).
CONCLUSÕES:
O diagnóstico molecular de FC foi confirmado pela identificação de apenas uma mutação (F508del) em 50% dos alelos estudados. Se considerarmos a análise das seis mutações de maior frequência na população brasileira (incluindo F508del), o diagnóstico molecular foi confirmado em 58,57% dos alelos analisados.
Fibrose cística; Regulador de condutância transmembrana em fibrose cística; Mutação
OBJECTIVE:
To determine the frequency of six mutations (F508del, G542X, G551D, R553X, R1162X, and N1303K) in patients with cystic fibrosis (CF) diagnosed, at a referral center, on the basis of abnormal results in two determinations of sweat sodium and chloride concentrations.
METHODS:
This was a cross-sectional study involving 70 patients with CF. The mean age of the patients was 12.38 ± 9.00 years, 51.43% were female, and 94.29% were White. Mutation screening was performed with polymerase chain reaction (for F508del), followed by enzymatic digestion (for other mutations). Clinical analysis was performed on the basis of gender, age, ethnicity, pulmonary/gastrointestinal symptoms, and Shwachman-Kulczycki (SK) score.
RESULTS:
All of the patients showed pulmonary symptoms, and 8 had no gastrointestinal symptoms. On the basis of the SK scores, CF was determined to be mild, moderate, and severe in 22 (42.3%), 17 (32.7%), and 13 (25.0%) of the patients, respectively. There was no association between F508del mutation and disease severity by SK score. Of the 140 alleles analyzed, F508del mutation was identified in 70 (50%). Other mutations (G542X, G551D, R553X, R1162X, and N1303K) were identified in 12 (7.93%) of the alleles studied. In F508del homozygous patients with severe disease, the OR was 0.124 (95% CI: 0.005-0.826).
CONCLUSIONS:
In 50% of the alleles studied, the molecular diagnosis of CF was confirmed by identifying a single mutation (F508del). If we consider the analysis of the six most common mutations in the Brazilian population (including F508del), the molecular diagnosis was confirmed in 58.57% of the alleles studied.
Cystic fibrosis; Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator; Mutation
Introdução
A fibrose cística (FC; #219700) é uma doença autossômica, monogênica e recessiva, causada por mutações no gene cystic fibrosis transmembrane regulator (CFTR; #602421) na região 7q3.1.(1) Desde a identificação do gene CFTR, aproximadamente 2.000 mutações foram identificadas no mesmo.
Atualmente, o diagnóstico da FC é baseado em valores alterados de sódio e cloro no
suor; contudo, outras ferramentas de diagnóstico têm sido estudadas, tais como: (a)
mensuração dos valores de cloro e sódio na saliva(
22. Gonçalves AC, Marson FA, Mendonça RM, Ribeiro JD, Ribeiro AF,
Paschoal IA, et al. Saliva as a potential tool for cystic fibrosis diagnosis. Diagn
Pathol. 2013;8:46. http://dx.doi.org/10.1186/1746-1596-8-46 PMid:23510227
PMCid:PMC3621375
http://dx.doi.org/10.1186/1746-1596-8-46...
); (b) indução da secreção de cloro por estímulo β-adrenérgico no
suor(
33. Quinton P, Molyneux L, Ip W, Dupuis A, Avolio J, Tullis E, et al.
β-adrenergic sweat secretion as a diagnostic test for cystic fibrosis. Am J Respir
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PMid:22859523
http://dx.doi.org/10.1164/rccm.201205-09...
); (c) medidas da secreção de cloro pelo CFTR em biópsias
retais(
44. Sousa M, Servidoni MF, Vinagre AM, Ramalho AS, Bonadia LC, Felício V,
et al. Measurements of CFTR-mediated Cl-secretion in human rectal biopsies constitute
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PMCid:PMC3474728
http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0...
); (d) triagem neonatal por tripsina imunorreativa(
55. Wagener JS, Zemanick ET, Sontag MK. Newborn screening for cystic
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http://dx.doi.org/10.1097/MOP.0b013e3283...
); (e) diferença de potencial nasal(
66. Valiulis A, Skurvydienė I, Misevičienė V, Kasnauskienė J, Vaidelienė
L, Utkus A. Relevance of nasal potential difference in diagnosis of cystic fibrosis
among children. Medicina (Kaunas). 2013;49(4):185-90.
); e (f) sequenciamento de nova geração e/ou determinação de duas mutações
no gene CFTR, em seguimento ou não, da triagem neonatal.(7-9)
A gravidade da FC é dependente e modulada por fatores ambientais, genes modificadores
e classes das mutações no gene CFTR.(
88. Knowles MR, Drumm M. The influence of genetics on cystic fibrosis
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13. Marson FA, Bertuzzo CS, Hortencio TD, Ribeiro JD, Bonadia LC,
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16. de Lima Marson FA, Bertuzzo CS, Secolin R, Ribeiro AF, Ribeiro JD.
Genetic interaction of GSH metabolic pathway genes in cystic fibrosis. BMC Med Genet.
2013;14:60. http://dx.doi.org/10.1186/1471-2350-14-60 PMid:23758905 PMCid:PMC3685592
http://dx.doi.org/10.1186/1471-2350-14-6...
-
1717. Furgeri DT, Marson FA, Ribeiro AF, Bertuzzo CS. Association between
the IVS4G>T mutation in the TCF7L2 gene and susceptibility to diabetes in cystic
fibrosis patients. BMC Res Notes. 2012;5:561.
http://dx.doi.org/10.1186/1756-0500-5-561 PMid:23050589 PMCid:PMC3519805
http://dx.doi.org/10.1186/1756-0500-5-56...
) As mutações no gene CFTR são divididas em seis classes
associadas à gravidade da doença.(
88. Knowles MR, Drumm M. The influence of genetics on cystic fibrosis
phenotypes. Cold Spring Harb Perspect Med. 2012;2(12):a009548.
http://dx.doi.org/10.1101/cshperspect.a009548 PMid:23209180
http://dx.doi.org/10.1101/cshperspect.a0...
,
99. Drumm ML, Ziady AG, Davis PB. Genetic variation and clinical
heterogeneity in cystic fibrosis. Annu Rev Pathol. 2012;7:267-82.
http://dx.doi.org/10.1146/annurev-pathol-011811-120900 PMid:22017581
http://dx.doi.org/10.1146/annurev-pathol...
) Mutações de classe I, II e III acarretam maior gravidade do que as de
IV, V e VI.
O estudo de todas as mutações no gene CFTR não é possível na realidade brasileira e em muitos países. Nesse contexto, o presente estudo buscou a identificação das mutações de maior frequência no gene CFTR em um centro de referência. Todos os pacientes foram investigados para as mutações de maior frequência da FC - F508del (c.1521_1523delCTT; p.Phe508del; classe II); G542X (c.1624G>T; p.Gly542X; classe I); G551D (c.1652G>A; p.Gly551Asp; classe III); R553X (c.1657C>T; p.Arg553X; classe I); R1162X (c.3484C>T; p.Arg1162X; classe I); e N1303K (c.3909C>T; p.Asn1303Lys; classe II) - e os resultados foram comparados com variáveis clínico-demográficas dos pacientes.
Métodos
Estudo de corte transversal. Foram incluídos 70 pacientes com FC diagnosticada por dois valores de cloro iguais ou superiores a 60 mEq/L no teste do suor.
O estudo foi aprovado pelo comitê de ética em pesquisa da instituição (Protocolo #297/2003). Todos os pacientes assinaram o termo de consentimento livre e esclarecido antes do início do estudo, e no caso de o paciente ser menor de idade, o termo foi assinado pelos pais ou responsáveis legais.
A extração de DNA foi realizada pela técnica do cloreto de lítio. A concentração de DNA utilizada para a análise foi de 50 ng/mL, avaliada em um espectrofotômetro (GE NanoVueTM; GE Healthcare Biosciences, Pittsburgh, PA, EUA).
Para a identificação das mutações no gene CFTR, o procedimento utilizado está descrito nas Tabelas 1 e 2, incluindo os iniciadores, tamanhos dos fragmentos, enzimas de restrição (segundo recomendações do fabricante) e o fragmento que representa a presença da mutação.
Sequências de iniciadores e enzimas de digestão utilizadas na reação de cadeia da polimerase e na digestão enzimática para a identificação das mutações no gene cystic fibrosis transmembrane regulator em pacientes com fibrose cística.
A técnica utilizada para a identificação das mutações analisadas (G542X, G551D, R553X, R1162X e N1303K) foi a digestão enzimática, exceto para a F508del, que é a deleção de três pares de base no éxon 10. No éxon 11 (G542X, G551D e R553X), quando detectada a presença de mutações, uma segunda digestão enzimática foi realizada para diferenciar as mutações G551D e R553X.
A caracterização clínica dos pacientes foi realizada por dois pesquisadores do estudo, devidamente capacitados para a análise. As variáveis utilizadas no estudo foram: sexo (masculino/feminino), idade (< 10, 11-20 e > 21 anos), etnia (caucasoides e não caucasoides), manifestações clínicas de comprometimento pulmonar (determinada por cultura de secreções do trato respiratório, espirometria e mensuração da saturação de oxigênio transcutânea), manifestações digestivas (balanço de gordura nas fezes e avaliação da elastase fecal) e escore de Shwachman-Kulczycki (ESK).
O ESK avalia a nutrição, atividade geral, exame físico e alterações radiográficas. Cada item avaliado foi pontuado para atingir o máximo de 25 pontos. Quanto menor a pontuação, pior o quadro clínico. O escore é graduado em excelente (86-100), bom (71-85), médio (56-70), moderado (41-55) e grave (40 ou menos), conforme o número total de pontos.(18) Definiu-se como doença de grau leve o escore do ESK excelente e bom; de grau moderado, o escore médio; e de grau grave, os escores moderado e grave. A categorização dos escores foi realizada para se obter um número menor de grupos para permitir a análise estatística dos dados.
A análise estatística foi realizada pelo programa IBM SPSS Statistics, versão 21.0 para Windows (IBM Corp., Armonk, NY, EUA).
Para as mutações e descrição das variáveis clínico-demográficas categóricas (sexo, etnia e presença de manifestação pulmonar/digestiva) foi utilizado o valor absoluto e percentual. Para a idade, foi utilizado à média e o desvio-padrão.
A comparação da presença das mutações com as variáveis clínico-demográficas dos pacientes foi realizada pelos testes do qui-quadrado e exato de Fisher, com o cálculo de OR, com o intuito de comparar a gravidade clínica em relação à identificação das mutações no gene CFTR incluídas no estudo.
Resultados
Os pacientes incluídos tiveram uma média de idade de 12,38 ± 9.00 anos (variação, 2-49 anos). A distribuição dos pacientes segundo as faixas etárias em estudo foram de 57,14%, 27,14% e 15,72%, respectivamente, nas faixas < 10 anos, 11-20 anos e > 21 anos.
Foram incluídos 36 pacientes do sexo feminino (51,43%). Houve distribuição uniforme em relação ao sexo.
A origem caucasoide foi observada em 94,29% dos pacientes. Todos os pacientes apresentaram manifestação respiratória, e apenas 8 (11,43%), sendo 2 deles heterozigotos compostos para a F508del e os demais sem a mutação (OR = 0,111; IC95%: 0,014-0,581), não apresentaram manifestação digestiva (Tabela 3).
A descrição dos genótipos e da frequência alélica para as mutações identificadas está apresentada na Tabela 4. Nos 52 pacientes com genótipos que continham ao menos uma das mutações estudadas, 22 (42,3%), 17 (32,7%) e 13 (25,0%), respectivamente, foram classificados como tendo doença leve, moderada e grave segundo os resultados do ESK. Não houve associação da mutação F508del com a gravidade segundo o ESK; apenas pacientes homozigotos F508del apresentaram OR de 0,124 (IC95%: 0,005-0,826) para a forma grave (Tabela 5).
Dos 140 alelos analisados, a mutação F508del foi identificada em 70 (50%). Para a frequência genotípica, a mutação F508del em homozigose ocorreu em 30% dos pacientes.
Discussão
Os valores de distribuição das idades dos pacientes em nosso estudo foram semelhantes
aos de Maróstica et al.,(
1919. Maróstica PJ, Raskin S, Abreu-e-Silva FA. Analysis of the delta F508
mutation in a Brazilian cystic fibrosis population: comparison of pulmonary status of
homozygotes with other patients. Braz J Med Biol Res. 1998;31(4):529-32.
http://dx.doi.org/10.1590/S0100-879X1998000400009 PMid:9698805
http://dx.doi.org/10.1590/S0100-879X1998...
) sendo que, em 61 pacientes, a idade variou de quatro meses a 17 anos, e
73,77% dos pacientes eram menores de 10 anos. Essa distribuição deve refletir a
presença de mutações das classes I-III, mais frequentemente identificadas nos centros
pediátricos de FC em detrimento de maior prevalência de mutações das classes IV-VI
nos centros de FC de adultos.
Como a FC é uma doença genética autossômica recessiva, é de se esperar um equilíbrio
na prevalência entre os sexos, como foi por nós observado. Alguns autores têm
descrito um discreto predomínio do sexo masculino, fato relatado por Streit et
al.(20) e Maróstica et al.,(
1919. Maróstica PJ, Raskin S, Abreu-e-Silva FA. Analysis of the delta F508
mutation in a Brazilian cystic fibrosis population: comparison of pulmonary status of
homozygotes with other patients. Braz J Med Biol Res. 1998;31(4):529-32.
http://dx.doi.org/10.1590/S0100-879X1998000400009 PMid:9698805
http://dx.doi.org/10.1590/S0100-879X1998...
) respectivamente, com valores de 61% e 62,3% para o sexo masculino. Uma
hipótese é a maior deterioração da função pulmonar observada nas meninas durante a
puberdade.
A prevalência de caucasoides está de acordo com os dados da literatura, que
demonstram uma baixa incidência de FC entre não caucasoides. No Brasil, estudos
realizados no estado do Rio Grande do Sul (predominantemente caucasoide)(
1919. Maróstica PJ, Raskin S, Abreu-e-Silva FA. Analysis of the delta F508
mutation in a Brazilian cystic fibrosis population: comparison of pulmonary status of
homozygotes with other patients. Braz J Med Biol Res. 1998;31(4):529-32.
http://dx.doi.org/10.1590/S0100-879X1998000400009 PMid:9698805
http://dx.doi.org/10.1590/S0100-879X1998...
) e no estado da Bahia (predominantemente negroide)(
2121. Santana MA, Matos E, do Socorro Fontoura M, Franco R, Barreto D,
Lemos AC. Prevalence of pathogens in cystic fibrosis patients in Bahia, Brazil. Braz
J Infect Dis. 2003;7(1):69-72. http://dx.doi.org/10.1590/S1413-86702003000100008
PMid:12807693
http://dx.doi.org/10.1590/S1413-86702003...
) evidenciaram, respectivamente, 100% e 28,7% de caucasóides com FC,
demonstrando que a prevalência de FC pode estar associada com características
étnicas.
Embora o diagnóstico molecular da FC seja complexo devido à heterogeneidade molecular
do gene CFTR, a análise pontual de algumas mutações é necessária. Um
estudo envolvendo a mutação F508del como primeiro passo para a identificação
molecular de mutações no gene CFTR foi realizado por nosso
grupo.(7) Dos 140 alelos analisados, a mutação F508del foi identificada
em 70 (50%). A elevada prevalência da F508del pode ser observada também em estudos
realizados no Rio Grande do Sul,(20) São Paulo,(
2222. Raskin S, Phillips JA 3rd, Krishnamani MR, Vnencak-Jones C, Parker
RA, Rozov T, et al. DNA analysis of cystic fibrosis in Brazil by direct PCR
amplification from Guthrie cards. Am J Med Genet. 1993;46(6):665-9.
http://dx.doi.org/10.1002/ajmg.1320460612 PMid:8362909
http://dx.doi.org/10.1002/ajmg.132046061...
,
2323. Cabello GM, Cabello EH Jr JL, Fernande O, Harris A. The 3120 ->A
splicing mutation in CFTR is common in Brazilian cystic fibrosis patients. Hum Biol.
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http://dx.doi.org/10.1353/hub.2001.0031...
) Rio de Janeiro,(24) e Pará,(
2525. Araújo FG, Novaes FC, Santos NP, Martins VC, Souza SM, Santos SE, et
al. Prevalence of deltaF508, G551D, G542X, and R553X mutations among cystic fibrosis
patients in the North of Brazil. Braz J Med Biol Res. 2005;38(1):11-5.
http://dx.doi.org/10.1590/S0100-879X2005000100003 PMid:15665983
http://dx.doi.org/10.1590/S0100-879X2005...
) nos quais, respectivamente, a análise de 154, 116, 148, 108 e 66 alelos,
mostrou a frequência de 48,7% (χ2 = 0,05; p = 0,82), 47% (χ2 =
0,17; p = 0,68), 44,45% (χ2 = 0,75; p = 0,38), 25,68% (χ2 =
18,16; p < 0,01) e 22,7% (χ2 = 13,77; p = 0,01). Vale ressaltar que
todos esses estudos são brasileiros.
As maiores prevalências de homozigoze e heterozigoze para a mutação F508del,
comparadas aos resultados em outros estados do Brasil, reforça, em nosso meio, a
importância da triagem da mutação F508del.(
77. Marson FA, Bertuzzo CS, Ribeiro MÂ, Ribeiro AF, Ribeiro JD. Screening
for F508del as a first step in the molecular diagnosis of cystic fibrosis. J Bras
Pneumol. 2013;39(3):306-16. PMid:23857699
) Enquanto, em nosso estudo, a frequência genotípica para a mutação
F508del em homozigoze ocorreu em 30% dos pacientes, no Rio Grande do Sul,(
2020. Streit C, Burlamaque-Neto AC, de Abreu e Silva F, Giugliani R,
Saraiva Pereira ML. CFTR gene: molecular analysis in patients from South Brazil. Mol
Genet Metab. 2003;78(4):259-64. http://dx.doi.org/10.1016/S1096-7192(03)00033-7
http://dx.doi.org/10.1016/S1096-7192(03)...
) São Paulo(
2323. Cabello GM, Cabello EH Jr JL, Fernande O, Harris A. The 3120 ->A
splicing mutation in CFTR is common in Brazilian cystic fibrosis patients. Hum Biol.
2001;73(3):403-9. http://dx.doi.org/10.1353/hub.2001.0031 PMid:11459421
http://dx.doi.org/10.1353/hub.2001.0031...
) e Rio de Janeiro(
2424. Okay TS, Oliveira WP, Raiz-Júnior R, Rodrigues JC, Del Negro GM.
Frequency of the deltaF508 mutation in 108 cystic fibrosis patients in Sao Paulo:
comparison with reported Brazilian data. Clinics (Sao Paulo). 2005;60(2):131-4.
http://dx.doi.org/10.1590/S1807-59322005000200009
http://dx.doi.org/10.1590/S1807-59322005...
) e essa ocorreu, respectivamente, em 31,2%, 21,3% e 10,81% dos pacientes.
Por outro lado, em nosso estudo, a heterozigose ocorreu em 40,01%, que é um valor
mais próximo do que os encontrados nos mesmos estudos acima citados (28,6%, 46,3% e
22,97%, respectivamente).(
2020. Streit C, Burlamaque-Neto AC, de Abreu e Silva F, Giugliani R,
Saraiva Pereira ML. CFTR gene: molecular analysis in patients from South Brazil. Mol
Genet Metab. 2003;78(4):259-64. http://dx.doi.org/10.1016/S1096-7192(03)00033-7
http://dx.doi.org/10.1016/S1096-7192(03)...
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splicing mutation in CFTR is common in Brazilian cystic fibrosis patients. Hum Biol.
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http://dx.doi.org/10.1353/hub.2001.0031...
,
2424. Okay TS, Oliveira WP, Raiz-Júnior R, Rodrigues JC, Del Negro GM.
Frequency of the deltaF508 mutation in 108 cystic fibrosis patients in Sao Paulo:
comparison with reported Brazilian data. Clinics (Sao Paulo). 2005;60(2):131-4.
http://dx.doi.org/10.1590/S1807-59322005000200009
http://dx.doi.org/10.1590/S1807-59322005...
)
A prevalência da mutação G542X foi de 4,29% em nosso estudo, valor semelhante aos
encontrados em outros estudos no Brasil, de 3,2% (χ2= 6,22; p =
0,63),(
2020. Streit C, Burlamaque-Neto AC, de Abreu e Silva F, Giugliani R,
Saraiva Pereira ML. CFTR gene: molecular analysis in patients from South Brazil. Mol
Genet Metab. 2003;78(4):259-64. http://dx.doi.org/10.1016/S1096-7192(03)00033-7
http://dx.doi.org/10.1016/S1096-7192(03)...
) 2,7% (χ2= 0,54; p = 0,46)(24) e 5,5 (χ2
= 11,91; p < 0,01).(
2626. Raskin S, Phillips JA, Kaplan G, McClure M, Vnencak-Jones C, Rozov
T, et al. Geographic heterogeneity of 4 common worldwide cystic fibrosis non-DF508
mutations in Brazil. Hum Biol. 1999;71(1):111-21. PMid:9972102
) A mutação R553X foi identificada em 0,71% dos alelos analisados. Nos
estudos de Streit et al.(
2020. Streit C, Burlamaque-Neto AC, de Abreu e Silva F, Giugliani R,
Saraiva Pereira ML. CFTR gene: molecular analysis in patients from South Brazil. Mol
Genet Metab. 2003;78(4):259-64. http://dx.doi.org/10.1016/S1096-7192(03)00033-7
http://dx.doi.org/10.1016/S1096-7192(03)...
) e Raskin et al.,(
2626. Raskin S, Phillips JA, Kaplan G, McClure M, Vnencak-Jones C, Rozov
T, et al. Geographic heterogeneity of 4 common worldwide cystic fibrosis non-DF508
mutations in Brazil. Hum Biol. 1999;71(1):111-21. PMid:9972102
) houve frequência de 0,7% (χ2 = 0,01; p = 0,93) e 0,8%
(χ2 = 4,31; p = 0,037), respectivamente. A mutação R1162X foi detectada
em 2,4% dos alelos. Embora as mutações de classe I (G542X, R553X e R1162X) tenham
baixa prevalência no Brasil (menos que 6% dos alelos pesquisados), vale ressaltar que
estudos em modelos animais e humanos têm sido promissores para novas drogas
corretoras da função da CFTR para essas mutações, entre elas,
PTC124.(
2727. Du M, Liu X, Welch EM, Hirawat S, Peltz SW, Bedwell DM. PTC124 is an
orally bioavailable compound that promotes suppression of the human CFTR-G542X
nonsense allele in a CF mouse model. Proc Natl Acad Sci U S A. 2008;105(6):2064-9.
http://dx.doi.org/10.1073/pnas.0711795105 PMid:18272502 PMCid:PMC2538881
http://dx.doi.org/10.1073/pnas.071179510...
)
Ao contrário da mutação F508del, também de classe II, com alta prevalência, a N1303K
apresentou baixa prevalência (1,43% dos alelos analisados). Outros estudos
brasileiros não analisaram essa mutação.(
2020. Streit C, Burlamaque-Neto AC, de Abreu e Silva F, Giugliani R,
Saraiva Pereira ML. CFTR gene: molecular analysis in patients from South Brazil. Mol
Genet Metab. 2003;78(4):259-64. http://dx.doi.org/10.1016/S1096-7192(03)00033-7
http://dx.doi.org/10.1016/S1096-7192(03)...
,
2626. Raskin S, Phillips JA, Kaplan G, McClure M, Vnencak-Jones C, Rozov
T, et al. Geographic heterogeneity of 4 common worldwide cystic fibrosis non-DF508
mutations in Brazil. Hum Biol. 1999;71(1):111-21. PMid:9972102
) Para essa classe de mutação, drogas corretoras e potenciadoras da função
da CFTR têm sido pesquisadas, tais como VX-770 e VX-809.(
2828. Leonard A, Leal T, Lebecque P. Mucoviscidosis: CFTR
mutation-specific therapy: a ray of sunshine in a cloudy sky [Article in French].
Arch Pediatr. 2013;20(1):63-73. http://dx.doi.org/10.1016/j.arcped.2012.10.018
PMid:23199563
http://dx.doi.org/10.1016/j.arcped.2012....
,
2929. Flume PA, Liou TG, Borowitz DS, Li H, Yen K, Ordo-ez CL, et al.
Ivacaftor in subjects with cystic fibrosis who are homozygous for the F508del-CFTR
mutation. Chest. 2012;142(3):718-24. http://dx.doi.org/10.1378/chest.11-2672
PMid:22383668 PMCid:PMC3435140
http://dx.doi.org/10.1378/chest.11-2672...
)
A mutação G551D não foi detectada na amostra avaliada, sendo apenas identificada por
Raskin et al.(
2626. Raskin S, Phillips JA, Kaplan G, McClure M, Vnencak-Jones C, Rozov
T, et al. Geographic heterogeneity of 4 common worldwide cystic fibrosis non-DF508
mutations in Brazil. Hum Biol. 1999;71(1):111-21. PMid:9972102
) em um alelo analisado (1,8%; χ2 = 2,51; p = 0,11). Para essa
mutação, está disponível no mercado a droga VX-770, conhecida como kalydeco
(Vertex(r)).(
2828. Leonard A, Leal T, Lebecque P. Mucoviscidosis: CFTR
mutation-specific therapy: a ray of sunshine in a cloudy sky [Article in French].
Arch Pediatr. 2013;20(1):63-73. http://dx.doi.org/10.1016/j.arcped.2012.10.018
PMid:23199563
http://dx.doi.org/10.1016/j.arcped.2012....
)
Em nossa casuística de 70 pacientes com FC, 8 pacientes não apresentaram alteração digestiva. Desses, nenhum era homozigoto F508del e, em 5, não foi detectada nenhuma das mutações estudadas.
Embora a relação da mutação F508del e a gravidade da doença seja conhecida na
associação entre essa mutação e resultados do ESK, 1,92% dos indivíduos homozigotos
para a mutação F508del apresentava doença grave, enquanto, naqueles com duas mutações
não diagnosticadas, 23,08% dos indivíduos apresentava doença grave segundo o ESK.
Algumas hipóteses podem ser formuladas para a menor frequência de doença grave pelo
ESK em pacientes homozigotos F508del, tais como a modulação gênica,(
88. Knowles MR, Drumm M. The influence of genetics on cystic fibrosis
phenotypes. Cold Spring Harb Perspect Med. 2012;2(12):a009548.
http://dx.doi.org/10.1101/cshperspect.a009548 PMid:23209180
http://dx.doi.org/10.1101/cshperspect.a0...
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http://dx.doi.org/10.1146/annurev-pathol...
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http://dx.doi.org/10.1590/S1806-37132009000400007 PMid:19466271
http://dx.doi.org/10.1590/S1806-37132009...
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Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator gene mutations and glutathione
S-transferase null genotypes in cystic fibrosis patients in Brazil. J Bras Pneumol.
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http://dx.doi.org/10.1590/S1806-37132012...
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ADRB2 gene can modulate the response to bronchodilators and the severity of cystic
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PMid:22950544 PMCid:PMC3558405
http://dx.doi.org/10.1186/1471-2466-12-5...
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Ribeiro AF. The ACE gene D/I polymorphism as a modulator of severity of cystic
fibrosis. BMC Pulm Med. 2012;12:41. http://dx.doi.org/10.1186/1471-2466-12-41
PMid:22874010 PMCid:PMC3460779
http://dx.doi.org/10.1186/1471-2466-12-4...
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http://dx.doi.org/10.1186/1471-2350-14-6...
-
1717. Furgeri DT, Marson FA, Ribeiro AF, Bertuzzo CS. Association between
the IVS4G>T mutation in the TCF7L2 gene and susceptibility to diabetes in cystic
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http://dx.doi.org/10.1186/1756-0500-5-561 PMid:23050589 PMCid:PMC3519805
http://dx.doi.org/10.1186/1756-0500-5-56...
) a maior mortalidade precoce desses pacientes e a baixa adesão ao manejo
ou ao tratamento da doença.
Concluímos que a análise das seis mutações do gene CFTR permitiu a identificação de 58,57% dos 140 alelos. Contudo, do total analisado, 50% dos alelos eram da mutação F508del, que deve ser o padrão inicial para a identificação de mutações no gene CFTR, tendo como base a recente implantação do teste de triagem neonatal em nosso estado. A presença de resultados ESK indicando doença leve para a maioria dos pacientes, mesmo naqueles com mutações de classe II em forma homozigota, pode traduzir a baixa idade dos pacientes que ainda não apresentam gravidade clínica associada à progressão da doença, bem como a baixa adesão dos pacientes de maior gravidade ao tratamento da doença.
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-
*
Trabalho realizado no Departamento de Genética Médica e Departamento de Pediatria, Faculdade de Ciências Médicas, Universidade Estadual de Campinas, Campinas (SP) Brasil.
-
Apoio financeiro: Nenhum.
Datas de Publicação
-
Publicação nesta coleção
Sep-Oct 2013
Histórico
-
Recebido
15 Maio 2013 -
Aceito
17 Set 2013