Potencial antimicrobiano de diferentes retentores intrarradiculares frente a Enterococcus faecalis: uma avaliação in vitro

Evaluation of antibacterial activity of different intraradicular retainers against Enterococcus faecalis: in vitro evaluation

Resumo

Introdução

O tratamento endodôntico tem como objetivo erradicar microrganismos bacterianos e fúngicos do canal radicular, ou pelo menos possibilitar sua redução para níveis compatíveis com a saúde do tecido perirradicular, uma vez que, após o tratamento endodôntico, colônias de microrganismos residuais podem estar presentes nos túbulos dentinários e no cemento.

Objetivo

Avaliar o potencial antimicrobiano de diferentes tipos de retentores intrarradicularess em dentes bovinos.

Material e método

50 dentes unirradiculares após tratamento endodôntico concluído foram desobturados, bem como tiveram seus condutos preparados para a cimentação dos retentores intrarradiculares. Posteriormente, os dentes foram contaminados por Enterococcus faecalis por meio da montagem de um dispositivo, o qual permitiu a infiltração bacteriana. Os dados resultantes da contagem das Unidades Formadoras de Colônia foram analisados utilizando o teste de ANOVA one-way, seguido pela análise de comparações múltiplas de Tukey.

Resultado

Decorrido o período de 14 dias, o grupo que apresentou a maior infiltração bacteriana foi o grupo-controle, o qual não continha nenhum tipo de retentor intrarradicular, seguido do G1-FV (grupo de continha retentor radicular de fibra de vidro) e G2-FC (grupo de que continha retentores radiculares de fibra de carbono). O menor grau de recuperação bacteriana foi encontrado nos grupos G3-Ni-Cr e G4-Cu-Al, os quais continham retentores intrarradiculares metálicos formados por ligas de níquel-cromo e cobre-alumínio, respectivamente.

Conclusão

Os retentores aqui avaliados apresentam diferentes efeitos antimicrobianos. Assim, a utilização de um pino com melhores resultados antimicrobianos favorece maiores chances de sucesso nos tratamentos reabilitadores.

Descritores:
Endodontia; técnica para retentor intrarradicular; infiltração dentária; obturação do canal radicular

Abstract

Introduction

The ultimate goal of endodontic treatment is the eradication of microorganism from the root canal space, or at least their reduction to levels compatible with periradicular tissue health since after endodontic treatment colonies of residual microorganisms may be present in the dentinal tubules and cementum.

Objective

To evaluate the antibacterial activity of different fiber posts in the root canal system of bovine teeth.

Material and method

Here, 90 uniradicular bovine teeth were randomly assigned after complete endodontic therapy. The samples were unthreaded, as well as had their conduits prepared for the cementation of the intracanal retainers. Subsequently, the teeth were exposed to Enterococcus faecalis by means of the assembly of a device, which allowed bacterial infiltration. The data of the amount by colony forming unit (CFU) per ml assay were analyzed by one-way ANOVA followed by Tukey’s HSD post hoc test (p<0,05).

Result

After the 14-day period, the group that presented the highest bacterial infiltration was the control group, which did not contain any type of intrarradicular retainer, followed by G1-FV (group of contained fiber glass post) and G2- FC (group containing carbon fiber reinforced post). Results of the smallest degree of bacterial recovery was found in the G3-Ni-Cr and G4-Cu-Al groups, which contained metallic intracanal retainers by nickel-chromium and copper-aluminum alloys respectively.

Conclusion

The intracanal retainers evaluated here presented different antimicrobial effects. Thus, the use of intracanal post with better antimicrobial results, favors greater chances of success in rehabilitation treatments.

Descriptors:
Endodontics; post and core technique; dental leakage; root canal obturation

INTRODUÇÃO

A presença de microrganismos no interior do canal radicular está fundamentada na literatura pela existência de mais de 400 espécies diferentes de bactérias, as quais estão relacionadas a diversos tipos de infecções endodônticas, uma vez que estas são classificadas de acordo com sua localização: intrarradicular ou extrarradicular^1,2. Por sua vez, o canal radicular é considerado uma via, a qual se caracteriza por ser suscetível a infecções bacterianas. Esta particularidade está associada à baixa resistência do hospedeiro frente às agressões físicas, químicas e biológicas, assim como à necrose pulpar decorrente de cáries, doença periodontal, trauma e iatrogênias³. Nesse contexto, o Enterococcus faecalis, um diplococo Gram-positivo, é constantemente associado às lesões radiculares, principalmente àquelas consideradas como refratárias, uma vez que esta característica se deve à sua grande resistência às substâncias antimicrobianas, bem como à sua intensa capacidade de formar biofilme^4,5.

Em vista disso, o tratamento endodôntico tem como objetivo primordial a remoção de depósitos microbianos formadores de biofilme do sistema de canais^5-7. Não obstante, devido tratamento endodôntico prévio, fratura ou amplas restaurações, o remanescente dentário encontra-se fragilizado, com escassa porção coronária. Perante isso, a confecção de restaurações para recuperação de forma, função e estética, e proteção do remanescente torna-se necessária. Neste cenário, a utilização de retentores intrarradiculares (RIR) fundamenta-se no auxílio da retenção e do suporte da futura restauração, uma vez que tal prescrição está associada a grandes perdas de estrutura dentária e fragilização do canal radicular^8-10.

Entretanto, falhas no tratamento endodôntico ou na confecção dos pinos intracanais transcorrem devido à ruptura nos princípios biológicos, uma vez que microrganismos usualmente penetram no sistema de canais radiculares no período entre as consultas ou até mesmo após a finalização do tratamento endodôntico^1,5,6. Para além disso, após o tratamento de canais radiculares, a quantidade de microrganismos diminui significativamente. Porém, o retorno de características de esterilidade dos tecidos infectados é impossível, devido ao fato de que não há eliminação de 100% dos agentes microbianos^1,11. Neste contexto, vale ressaltar que há a possibilidade de manutenção do crescimento microbiano no interior do sistema de canais radiculares mesmo após o tratamento endodôntico. Embora muitas melhorias tenham sido alcançadas durante a extensão longitudinal temporal no que diz respeito aos protocolos de químico-mecânica endodôntica, a desinfecção usada hoje não pode rigorosamente fornecer a esterilidade do complexo do canal radicular¹². Adicionado a isso, e de extrema relevância, há o fato de que nenhum dos elementos da terapia endodôntica (sistema de defesa do hospedeiro, instrumentação e irrigação, medicamentos intracanal, restauração radicular permanente e restauração coronária) pode garantir a desinfecção completa^13-23.

Por conseguinte, a incorporação de estruturas apresentando características antimicrobianas no canal radicular torna-se um fator primordial na prevenção do recrescimento de bactérias residuais. Neste âmbito, retentores intracanais reforçados com algum tipo de material antimicrobiano têm sido interessantemente alvos de estudos^16-19. No entanto, até o presente momento, nenhum estudo avaliou as propriedades antibacterianas dos pinos reforçados com fibra de vidro, fibra de carbono e metálico fundido, em dentes bovinos.

Dada a importância do E. faecalis nos casos de insucesso endodôntico e a utilização dos RIR, e a falta de estudos a respeito, este estudo avaliou o potencial antimicrobiano de diferentes tipos de retentores intracanais frente a este microrganismo.

MATERIAL E MÉTODO

Características dos Pinos

Para realização do estudo, foram utilizados quatro tipos distintos de retentores intrarradiculares. Tais pinos foram randomizados e seguiram uma distribuição conforme informado na Tabela 1.

Tabela 1
Subdivisão dos grupos do estudo conforme a constituição de cada pino intra-radicular

Grupo	Modelo de Pino	Quantidade de dentes avaliados
G1-FV	Fibra de vidro Reforpost nº3	10
G2-FC	Fibra de carbono Reforpost nº3	10
G3-Ni-Cr	Núcleo metálico em ligas de Ni-Cr	10
G4-Cu-Al	Núcleo metálico em ligas de Cu-Al	10
G5	Dentes tratados endodonticamente sem a presença de pino intra-radicular	10

• FV: Fibra de vidro; FC: Fibra de carbono; Ni-Cr: Níquel-cromo; Cu-Al: Cobre-alumínio.

Seleção e Preparo dos Espécimes

Neste experimento, foram utilizados 50 dentes incisivos inferiores bovinos, os quais foram extraídos e armazenados em água destilada. Para seleção de cada dente, utilizou-se o critério da similaridade da morfologia externa e interna de dentes de animais adultos, a qual foi avaliada por meio de radiografias periapicais. Subsequentemente, seguiu-se a metodologia proposta por Haapasalo, Orstavik²⁴ (1987) para limpeza e desinfecção de tais dentes. Assim, os dentes foram limpos com curetas Gracey (Quinelato Qualidade, Rio Claro, Brasil) e profilaxia com pedra pomes, e em seguida foram armazenados em solução de cloramina T 0,5 (Merck Millipore, Massachusetts, EUA).

Para o preparo dos espécimes, foram realizados dois cortes transversais com disco diamantado de dupla face. O primeiro, realizado a 5 mm aquém do ápice radicular, e o segundo, a partir da coroa, a fim de providenciar um segmento radicular com 15 mm de comprimento. Em sequência, a polpa foi removida do canal radicular com limas endodônticas tipo Kerr (AllPrime Dental, Brasília, Brasil) sob constante irrigação com hipoclorito de sódio (NaOCl) (1%) (Asfer Indústria Química, São Caetano do Sul, Brasil), para suspensão da matéria orgânica. Posteriormente, as raízes foram mantidas em ambiente úmido, submersas em soro fisiológico (NaCl 0,9%) estéril (Fresenius Medical Care, Rio de Janeiro, Brasil) a 10°C, para evitar desidratação.

Tratamento Endodôntico

As raízes foram instrumentadas através da técnica escalonada utilizando-se limas tipo K (AllPrime Dental Products, Brasília, Brasil). Estas seguiram a sequência crescente de nº 90 a 140, em movimentos de limagem em todo o comprimento do canal e irrigação contínua com NaOCl (1%). Ao final, foi realizada irrigação abundante utilizando 20 mL de soro fisiológico. Novamente, adotaram-se os mesmos procedimentos de armazenamento citados anteriormente para todos os grupos do estudo.

Em virtude do calibre dos canais, houve a necessidade prévia de confecção do cone principal, elaborado pela união de dois cones de guta-percha nº 80 (AllPrime Dental Products, Brasília, Brasil). Para alcançar adequada adaptação do cone principal no forame apical, nas situações em que este se projetou para fora da região apical, procedeu-se pelo corte do cone nessa região. Após inserção do cone principal com cimento endodôntico Fillcanal (Technew, Rio de Janeiro, Brasil) no interior do canal radicular, os cones acessórios foram introduzidos (Tanari, Manaus, Brasil) com auxílio de um condensador de guta-percha nº 35 (Mani, Rio de Janeiro, Brasil). Posteriormente, a porção excedente dos cones de guta-percha foi cortada e, em seguida, condensada verticalmente com instrumentos calcadores aquecidos tipo Paiva (Golgran, São Caetano do Sul, Brasil). Subsequentemente, com o objetivo de remover quaisquer resíduos de material obturador, tanto o canal radicular quanto a porção externa radicular foram limpos com álcool 70° (Simoquímica, Caxias do Sul, Brasil). Para confirmação da qualidade da obturação e do nível de corte, realizaram-se radiografias periapicais dos dentes obturados.

Inserção de Pinos Intrarradiculares

O espaço para a inclusão dos retentores intracanais foi obtido imediatamente após a conclusão de suas obturações. Utilizando-se o calcador de Paiva aquecido ao rubro, foi removido o material obturador, de forma que restassem de 3 a 4 mm de guta-percha apical. Posteriormente, foi realizada radiografia de confirmação do corte de material obturador. Em seguida, o canal radicular foi limpo e seco com pontas de papel absorvente nº 80 (Tanari, Manaus, Brasil). Os retentores foram limpos com microbrush KG Sorensen (Cotia, São Paulo, Brasil) e embebidos com álcool 70%. Adicionalmente, somente naqueles espécimes pertencentes ao G1-FV, foi realizada a aplicação de silano. Para cimentação, utilizou-se o cimento autoadesivo RelyX U200 (3M, São Paulo Brasil). O mesmo foi introduzido no canal com o auxílio de uma lima, bem como foi pincelado na superfície do pino, o qual foi inserido no interior do canal e, em seguida, fotopolimerizado de acordo com as instruções do fabricante.

Confecção do Dispositivo para Teste de Infiltração Bacteriana

Para confirmar a passagem do E. faecalis por meio da obturação, foi elaborado um dispositivo: os espécimes foram inseridos na porção inferior de microtubos tipo Eppendorf (CRAL, Cotia, Brasil) com capacidade para 1,5 mL. Com o auxílio de um disco de carburundum (Dentorium, Nova Iorque, EUA), foi realizado um corte transversal, a fim de remover o fundo dos microtubos e, assim, possibilitar a adaptação dos espécimes, uma vez que este procedimento permitiu que 2 mm da extremidade apical da raiz se projetasse para fora do mesmo. Com o objetivo de fixar o espécime e de impedir a passagem do meio de cultivo nessa região, a junção entre o microtubo e a raiz foi selada com cola araldite de presa rápida (Huntsman Advanced Materials, Taboão da Serra, Brasil). Subsequentemente, após excluir 1 mm circundante ao extremo apical, a porção do segmento externo do microtubo foi recoberta com duas camadas de esmalte para unhas (Colorama Esmaltes, São Paulo, Brasil). Esse procedimento foi realizado com o objetivo de impermeabilizar as raízes lateralmente.

Após a montagem deste dispositivo, todo o conjunto foi submetido ao processo de esterilização em autoclave a 127°C por 15 minutos.

Microrganismo

Uma cepa de E. faecalis (ATCC 29212) foi reisolada em caldo infusão cérebro-coração (BHI) (Kasvi, Padova, Itália), o qual foi suplementado com 5% de soro sanguíneo de cavalo desfibrinado (LaborClin, Pinhais, Brasil).

Para a exposição ao microrganismo do estudo, os dentes bovinos, em conjunto com os microtubos, foram adaptados em um frasco tipo penicilina. Tal conjunto foi submerso em 3,0 mL de caldo BHI, de modo que aproximadamente 1 mm do ápice radicular pudesse ficar submerso nesse meio de cultivo. A união entre o frasco de penicilina, o dispositivo envolvendo o segmento radicular e o microtubo foi selada com araldite. Após, procedeu-se à inoculação na parte superior do microtubo com 500 µL do inóculo bacteriano padronizado a 5 × 10⁵ UFC/mL. O dispositivo (frasco penicilina, microtubo e segmento radicular) foi incubado a 37°C em aerobiose (Figura 1). A infiltração bacteriana foi checada por um período de 14 dias. A cada 7 dias, o caldo BHI foi aspirado do interior do microtubo e uma nova alíquota de caldo BHI foi inserida para dentro do dispositivo.

Figura 1
Dispositivo de contaminação microbiológica.

Posteriormente ao período de 14 dias, o conjunto foi desmontado e, subsequentemente, os dentes de todos os grupos foram seccionados no sentido sagital, com o auxílio de um disco diamantado estéril, sendo utilizado um disco estéril para cada dente. Logo após, uma das porções foi imersa em 1,5 mL de Tampão Fosfato-Salino (PBS) (Dinâmica, Diadema, São Paulo) e incubada em aerobiose a 37°C durante 24 horas. Posteriormente, a suspensão resultante foi semeada na superfície de placas de Petri com ágar sangue suplementado com 5% de soro sanguíneo de cavalo desfibrinado. Após, tais placas foram incubadas em aerobiose a 37°C por 48 horas, sendo contabilizadas as Unidades Formadoras de Colônia por mililitro (UFC/mL) de forma manual.

Análise Estatística

Os dados foram analisados através do software de análise estatística Graph Pad Prism 6.0 (Graph Pad Prism Inc., La Jola, CA, EUA). As diferenças entre os grupos foram analisadas por teste de ANOVA one-way. Para análise da comparação múltipla, realizou-se o teste de Tukey. Os resultados foram considerados estatisticamente significativos quando P ≤ 0,05. Para este estudo, foi adotado intervalo de confiança de 95%.

RESULTADO

Ao final dos 14 dias, todos os frascos de penicilina contendo os respectivos dentes bovinos apresentaram turvação do meio de cultivo, indicando que houve a passagem dos microrganismos por meio das obturações. Quanto às quantificações, no G1-FV, a média de recuperação bacteriana foi de 1 × 10¹⁰ UFC/mL (0,9 × 10¹⁰ - 1,1 × 10¹⁰; ±0,06; IC 95%). No G2-FC, a sobrevivência bacteriana foi igual a 9,0 × 10⁷ UFC/mL (8,0 × 10⁷ - 9,9 × 10⁷; ± 5,25; IC 95%). Já no G3-Ni-Cr, obteve-se uma recuperação bacteriana igual a 5,2 × 10⁶ UFC/mL (3,2 × 10⁶ - 7,0 × 10⁶; ± 1,43; IC 95%). No G4-Cu-Al, foi encontrada uma média de 5,7 × 10⁶ UFC/mL (4,1 × 10⁶ - 7,8 × 10⁶; ± 1,30; IC 95%). No G5-CN, foi relatada uma sobrevivência bacteriana de 1 × 10¹⁵ UFC/mL (0,89 x 10¹⁵- 1,2 × 10¹⁵; 0,11; IC 95%) (Tabela 2).

Tabela 2
Resultados da recuperação bacteriana nos grupos do estudo

Grupos	Média (mín. – máx.; dp)
G1-FV	1 x 1010 UFC/mL (0.9 x 1010 - 1.1 x 1010; ± 0.06 )A
G2-FC	9.0 x 107 UFC/mL (8.0 x 107 - 9.9 x 107; ± 5.25)B
G3-Ni-Cr	5.2 x 106 UFC/mL (3.2 x 106 - 7.0 x 106; ± 1.43)C
G4-Cu-Al	5.7 x 106 UFC/mL (4.1 x 106 - 7.8 x 106; ± 1.30)C
G5-CN	1 x 1015 UFC/mL (0.8 x 1015 - 1.2 x1015 ± 0.11)D

• Letras diferenças indicam diferença estatisticamente significante (P ≤ 0,05).

Quando comparamos os grupos G1-FV, G2-FC, G3-Ni-Cr e G4-Cu-Al, em relação ao G5-CN, foi observada uma diferença estatisticamente significativa (P ≤ 0,0001), uma vez que esta diferença está relacionada a uma diminuição expressiva da recuperação bacteriana encontrada nos grupos-testes. Por sua vez, quando avaliados todos os dentes submetidos aos mesmos procedimentos, porém apresentando retentores intrarradiculares distintos, também se observou uma diferença significativa entre eles, principalmente quando foi comparado o G1-FV aos demais grupos-testes (P ≤ 0,0001). Adicionalmente, também foi encontrada diferença significativa no grau de recuperação bacteriana, quando o grupo G2-FC foi comparado aos G3-Ni-Cr e G4-Cu-Al, os quais foram compostos por retentores metálicos fundidos (P≤ 0,0001). Quando foram comparados entre si os dois grupos compostos por retentores à base a ligas metálicas (G3-Ni-Cr × G4-Cu-Al), não foi observada diferença significativa entre eles (q=1,52; − 0,00001598 a 0,000007177; IC 95%), ou seja, não foi observada diferença no potencial antibacteriano entre G3-Ni-Cr e G4-Cu-Al (Figura 2).

Figura 2
Representação das diferenças dos grupos do estudo.

DISCUSSÃO

Na atualidade, estão sendo desenvolvidos diversos protocolos para completa desinfecção do canal radicular, especialmente no que diz respeito ao preparo químico-mecânico. Entretanto, nenhum dos elementos da terapia endodôntica pode garantir 100% da esterilidade do sistema de canais^11,12,23. Desta forma, a incorporação de estruturas apresentando características antimicrobianas no canal radicular torna-se um fator primordial na prevenção do recrescimento de bactérias residuais^17-19,21-23. Sob esta perspectiva, o presente estudo avaliou o potencial antibacteriano de diferentes retentores intrarradiculares frente ao E. faecalis, em dentes bovinos.

No estudo ora apresentado, quando se analisou o pino de fibra de vidro, o nível de recuperação bacteriana foi alto, fato que revela que tal retentor não apresenta um bom potencial antibacteriano frente ao E. faecalis. Nossos resultados concordam com os estudos previamente publicados por Poggio et al.²⁵, que também relataram a falta de atividade antimicrobiana quando pinos de fibra de vidro e fibra de quartzo foram avaliados em experimentos in vitro realizados sobre placas de Petri contaminadas, no qual houve medida de halo de inibição bacteriana. Desta forma, observa-se que há uma relação entre dados obtidos por meio de experimentos microbiológicos laboratoriais de modo in vitro e dados obtidos pelo nosso estudo, no qual se testou a capacidade antimicrobiana dos pinos intrarradiculares por meio de experimentos utilizando dentes bovinos. Logo, nossos resultados indicam que este RIR, apesar de ser muito utilizado devido às suas propriedades estéticas e mecânicas, não apresenta uma boa capacidade de inibir o crescimento bacteriano.

Adicionalmente, no estudo aqui apresentado, também se avaliou a capacidade antimicrobiana frente ao E. faecalis dos pinos de fibra de carbono (G2-FC). Surpreendentemente, nossos resultados destacam um potencial antimicrobiano considerável de tal retentor, uma vez que foi aqui observada uma redução de carga bacteriana na ordem oito unidades logarítmicas, em média, quando o G2-FC foi comparado ao G5-CN, o qual não apresentava nenhum RIR. Interessantemente, nossos resultados também assinalaram um potencial antimicrobiano ainda maior, quando os grupos G3-Ni-Cr e G4-Cu-Al, os quais continham pinos metálicos, foram analisados. Tal fato é comprovado pela diminuição expressiva da recuperação bacteriana na ordem de nove unidades logarítmicas, em média, quando comparados G3-Ni-Cr e G4-Cu-Al ao G5-CN, bem como uma diminuição de quatro unidades logarítmicas, quando comparados G3-Ni-Cr e G4-Cu-Al ao G1-FV. Portanto, comprova-se aqui um grande potencial antimicrobiano dos retentores pertencentes aos grupos G3-Ni-Cr e G4-Cu-Al, uma vez que estes apresentaram uma expressiva capacidade de inibição do crescimento bacteriano em nosso estudo. Entretanto, não podem ser feitas aqui demais comparações devido à falta de estudos que avaliem o potencial antimicrobiano dos retentores intrarradiculares testados em nosso estudo.

Ainda assim, três fatores, apesar de não terem sido abordados no presente estudo, têm efeito significativo no resultado do tratamento endodôntico²⁶. Além da qualidade do pino intracanal, estudos publicados por Estrela et al.²⁷, Durighetto et al.²⁸, Hommez et al.²⁹ e Tronstad et al.³⁰ verificaram que a ausência da periodontite apical, a qualidade da obturação, bem como a restauração coronária, são considerados fatores clínicos e estes têm demonstrado impacto no sucesso endodôntico. No entanto, estudos que relatam as condutas frente às falhas são escassos na literatura³¹.

Neste contexto, Oliveira et al.³¹ relataram que quando o pino se encontra sob condições satisfatórias, a sua remoção somente é indicada quando há tratamento endodôntico insatisfatório e presença de lesão periapical. Em contrapartida, no contexto de condições insatisfatórias do pino, a sua remoção independe da qualidade do tratamento endodôntico. Desta forma, sob esta condição, o retratamento endodôntico é preconizado independentemente da presença ou não da lesão periapical, uma vez que tais condutas determinarão uma melhor estabilidade para a prótese, além de contribuir para a não fratura da raiz e evita possíveis infiltrações microbianas. No entanto, antes da remoção do pino nos cenários, nos quais não há presença de lesão periapical, deve-se ressaltar que tal possível remoção gera um excessivo enfraquecimento da estrutura dentinária radicular e, nestes casos, a proservação radiográfica poderá ser a primeira escolha de tratamento. Já naqueles cenários, quando há presença de lesão periapical, tal ocorrência torna-se fator determinante para a indicação da cirurgia paraendodôntica.

CONCLUSÃO

Frente ao estudo desenvolvido, os retentores intrarradiculares constituintes dos grupos G3-Ni-Cr e G4-Cu-Al foram os que apresentaram maior efeito antimicrobiano frente ao microrganismo testado. Desta forma, confirma-se a possibilidade de empregá-los nas etapas protéticas de confecção da futura restauração, resultando, assim, em maiores índices de sucesso.

• Como citar: Finger NH, Paulus M, Gazzoni AF. Potencial antimicrobiano de diferentes retentores intrarradiculares frente a Enterococcus faecalis: uma avaliação in vitro. Rev Odontol UNESP. 2019;48:e20190051. https://doi.org/10.1590/1807-2577.05119.

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  23 Set 2019
• Data do Fascículo
  2019

Histórico

• Recebido
  16 Maio 2019
• Aceito
  07 Ago 2019