Resumos
A colibacilose é considerada uma das principais doenças da indústria avícola moderna, devido aos grandes prejuízos econômicos causados. A Escherichia coli contribui não só para a doença em si, levando à perda de peso das aves, bem como para o aumento da taxa condenação de carcaças durante o abate e processamento. A detecção de fatores de virulência de cepas de E. coli do patotipo APEC colabora para a caracterização de sua patogenicidade e as técnicas de PCR têm sido muito úteis na pesquisa de genes que os codificam. Este estudo objetivou diagnosticar E. coli pela detecção o gene Fel A por PCR e relacionar a positividade para este agente com o baixo peso em frangos de corte provenientes de lotes condenados por aerossaculite. Foram estudados 40 lotes de frangos de corte abatidos em um matadouro avícola sob Inspeção Sanitária Federal, localizado no Estado do Rio Grande do Sul. Foram colhidos aleatoriamente 3 frangos e obtidos "pools" de três traqueias em cada um deles para PCR. O DNA foi extraído pelo método de fenol-clorofórmio e amplificado com pares de "primers" específicos para gene Fel A de E. coli. Dos 40 lotes analisados pela PCR, 35% (14/40) foram positivos para o gene Fel A. A PCR foi eficaz para a detecção do gene Fel A em lotes de frangos de corte e houve relação entre a presença do gene Fel A, a queda de peso e aumento na taxa de aerossaculite.
Aves; colibacilose; fatores de virulência; fímbria F11; doença crônica respiratória
Collibacillosis is considered one of the major diseases of the modern poultry industry, due to the significant losses it causes. Escherichia coli contributes not only to the disease itself, by causing weight loss of the birds, but also to the increase in carcasses condemnation during slaughter and processing. Detection of virulence factors in E. coli strains of the APEC pathotype contributes to the characterization and pathogenicity of this agent. PCR techniques have been very helpful in the search for genes that encode those virulence factors. This study aimed to detect the gene Fel A of E. coli by PCR and relate its positivity to low weight in broiler flocks with airsacculitis as diagnosed by the health inspection service. The study involved 40 flocks of broilers slaughtered in a single poultry slaughterhouse, under Federal Sanitary Inspection, located in the state of Rio Grande do Sul, Brazil. Three broilers were randomly selected to obtain one "pool" of three tracheas for each PCR. DNA was extracted using phenol-chloroform and amplified using a pair of primers specific to gene Fel A of E. coli. Of the 40 flocks analyzed by PCR, 35% (14/40) were positive for the gene Fel A. PCR was an effective technique for the detection of gene Fel A in broiler flocks. There was a relationship between the presence of the gene Fel A, weight loss, and increase of the airsacculitis rate.
Avian; collibacillosis; virulence factors; fimbriae F11; chronic respiratory disease
- BRASIL. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abaste-cimento. Portaria n°210, de 10 de nov. de 1998. Regulamento Técnico da Inspeção Tecnológica e Higiênico-sanitária de carne de aves do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA). Diário Oficial República Federativa do Brasil, Brasília/DF, 11 de novembro. 1998. Seção 1.
- BRITO, B.G.; TAGLIARI, K.C.; BERBEL, M.M.; FREIRE, R.L. Produção de enterotoxina termoestável, hemolisinas, colicinas e fatores de colonização em amostras de Escherichia coli isoladas de leitões com diarréia no sudoeste do Paraná. Scientia Agrária, v.4, n.1, p.15-20, 2003.
- CARDOSO, A.L.S.P.; TESSARI, E.N.C.; CASTRO, A.G.M.; PULICI, S.C.P.; ZANATTA, G.F.. Prevalência de resistência em amostras de Escherichia coli de origem aviária. In: CONFERÊNCIA APINCO 2002 DE CIÊNCIA E TECNOLOGIA AVÍCOLAS, 2002, Campinas,SP. Resumos Campinas: FACTA, 2002. p.129.
- DELICATO, E.R.; BRITO, B.G.; GAZIRI, L.C.J.; VIDOTTO, M.C. Virulence associated genes in Escherichia coli isolates from poultry with colibacillosis. Veterinary Microbiology, v.94, p.97-103, 2003.
- DOZOIS, C.M., POURBAKHSH, S.A.; FAIRBROTHER, J.M. Expression of P and type 1 (Fl) fimbriae in pathogenic Escherichia coli from poultry. Veterinary Microbiology, v.145, p.297-309, 1995.
- DOZOIS, C.M.; HAREL, J.; FAIRBROTHER, J.M. P-fimbriae-producing septicaemic Escherichia coli from poultry possess febrelated gene clusters whereas pap hybridizing P-firnbriae negative strains have partial or divergent P fimbrial gene clusters. Microbiology, v.142, p.2759-2766, 1996.
- DOZOIS, C.M.; DAIGLE, F.; CURTISS III, R. Identification of pathogen-specific and conserved genes expressed in vivo by an avian pathogenic Escherichia coli strain. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, v.100, n.1, p.247-252, 2003.
- EISENSTEIN, B.I. Fimbriae. In: NEIDHARDT, F.C. (Ed.). Escherichia coli and Salmonella Typhimurium: celular and molecular biology. Washington: American Society for Microbiology, 1987. v.1, p.84-90.
- FERREIRA, A.J.P.; KNOBL, T. Colibacilose. In: BERCHIERI JUNIOR, A.; SILVA, E.N.; DI FÁBIO, J.; SESTI, L.; ZUANAZE, M.A.F. (Ed.). Doenças das aves 2.ed. Campinas. Fundação APINCO de Ciência e tecnologia Avícolas, 2009. cap. 4.2, p.457-471.
- GIBBS, P.S.; MAURER, J.J.; NOLAN, L.K.; WOOLEY, E. Prediction of chicken embryo lethal.ity with the avian Escherichia coli traits complement resistance, colicin V production, and presence of increased serum survival. gene cluster (iss). Avian Diseases, v.47, n.2, p.370-379, 2003.
- GYIMAH, J.E.; PANIGRAHY, B. Adhesin-receptor Interactions Mediating the Attachment of Pathogenic Escherichia coli to Chicken Tracheal Epithelium. Avian Diseases, v.32, n.1, p.74-78, 1988.
- KUHNERT, P.; BOERLIN, P.; FREY, J. Target genes for virulence assessment of Escherichia coli isolates from water, food and the environment. FEMS Microbiology Reviews, v.24, n.1, p.107-117, 2000.
- LA RAGIONE, R.M.; WOODWARD, M.J. Virulence factors of Escherichia coli serotypes associated with avian colisepticaemia. Research in Veterinary Science, v.73, n.1, p.27-35, 2002.
- POURBAKHSH, S.A.; DHO-MOULIN, M.; BREE, A.; DESAUTELS, C.; MARTINEAU-DOIZE, B.; FAIRBROTHER, J.M. Localization of the in vivo expression of P and F1 fimbriae in chickens experimentally inoculated with pathogenic E. coli Microbial Pathogenesis, v.22, p.331-341, 1997.
- ROCHA, A.C.G.P.; ROCHA, S.L.S.; LIMA-ROSA, C.A.V.; SOUZA, G.F.; MORAES, H.L.S.; SALLE, F.O.; MORAES, L.B.; SALLE, C.T.P. Genes associated with pathogenicity of avian Escherichia coli (APEC) isolated from respiratory cases of poultry. Pesquisa Veterinária Brasileira, v.28, n.3, p.183-186, 2008.
- RUSSEL, S.M. The effect of airsacculitis on bird weights, uniformity, fecal contamination, processing errors, and populations of Campylobacter spp. and Escherichia coli. Poultry Science, v.82, n.8, p.1326-1331, 2003.
- SAMBROOK, J.; RUSSELL, D.W. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. In: _______. Preparation and analysis of eukaryotic genomic DNA. 3.ed. New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001a. v.1, Cap.6, p. 6.4-6.11.
- SAMBROOK, J.; RUSSELL, D.W. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. In: _______. Gel electrophoresis of DNA and Pulsed-fiels Agarose Gel Eletrophoresis. 3.ed. New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001b. v.1, Cap.5, p. 5.1-5.17.
- SKYBERG, J.A.; HORNE, S.M.; GIDDINGS, C.W.; WOOLEY, R.E.; GIBBS, P.S.; NOLAN, L. Characterizing avian Escherichia coli isolates with multiplex polymerase chain reaction. Avian Diseases, v.47, n.4, p.1441-1447, 2003.
- THRUSFIELD, M. Epidemiologia veterinária 2.ed. São Paulo: Roca, 2003. 556p.
- VIDOTTO, M.C.; NAVARRO, H.R.; GAZIRI, L.C.J. Adherence pili of pathogenic strains of avian Escherichia coli. Veterinary Microbiology, v.59, n.1, p.79-87, 1997.
Datas de Publicação
-
Publicação nesta coleção
18 Jul 2013 -
Data do Fascículo
Jun 2013
Histórico
-
Recebido
12 Dez 2011 -
Aceito
16 Abr 2013
