Resumo em Português:

OBJETIVO: Estabelecer a prevalência do Helicobacter spp nos doentes com colecistopatia crônica calculosa e correlacioná-la com as alterações histológicas da vesícula biliar. MÉTODOS: Foram operados 100 doentes portadores de colecistite crônica calculosa. No anátomo-patológico foram avaliadas a presença de, metaplasias, displasias, folículos linfóides, anaplasias e tumores que pudessem se relacionar à presença do helicobacter e a presença de bacilos Giemsa ? à microscopia. A partir do DNA extraído da bile foi realizada PCR utilizando-se primers específicos para identificação de Helicobacter spp com amplificação de segmento de 400bp do gene16S rRNA, com controle positivo de DNA de Helicobacter Pylori. Os casos negativos para isolamento de material genético na bile foram excluídos. Os casos de PCR e Giemsa negativos foram utilizados como grupo controle. Os achados histológicos foram comparados ao Giemsa e à PCR utilizando-se Teste do Qui-Quadrado e Exato de Fisher (IC=95,0%; p<0,05). RESULTADOS: De 68 doentes, 42(61,8%) apresentaram PCR para Helicobacter spp e 19(27,9%) Giemsa ?. Não houve correlação entre os dois achados. Não houve correlação entre alterações histológicas e a PCR (p=0,378). A presença de folículos linfóides e metaplasia estiveram relacionadas ao Giemsa ?(p=0,025 e 0,039). CONCLUSÃO: Há prevalência elevada de Helicobacter spp nos doentes com colecistite crônica calculosa sem haver correlação com os achados histológicos estudados.

Resumo em Inglês:

PURPOSE: Establish the prevalence of Helicobacter spp in chronic cholecystitis and its correlation with the gallbladder's histological findings. METHODS: 100 patients were operated for chronic cholecystitis with cholecystolithiasis. In pathological examination of the gallbladder, were evaluated the presence of metaplasia, dysplasia, lymphoid follicles, anaplasia and tumors that might be related to the presence of Helicobacter plus the presence of the bacilli Giemsa? by optical microscopy. From the DNA extracted from the gallbladder's bile, PCR was performed by using specific primers for the identification of Helicobacter spp with amplification of the 400bp segment of rRNA gene16S, with positive control DNA from Helicobacter pylori. All the cases negative for isolation of genetic material were excluded. The cases of PCRΘ and GiemsaΘ were used as negative control group. The histological findings were compared to the presence of bacilli and PCR data using a chi-square and Fisher's Exact test (CI = 95.0%, p <0.05). RESULTS: Of 68 patients, 42 (61.8%) were PCR? for Helicobacter spp and 19 (27.9%) had Giemsa?. There was no correlation between the two findings. The PCR? for Helicobacter spp was not correlated to the histological findings. The presence of lymphoid follicles and metaplasia was related to the Giemsa? (p = 0.025 and p= 0.039). CONCLUSION: There is high prevalence of Helicobacter spp in patients with chronic cholecystitis and cholecystolithiasis without be correlated with the histological patterns studied.

Resumo em Português:

OBJETIVO: Avaliar os resultados de resultados da aplicação de um protocolo terapêutico de natureza prospectiva, com seguimento em longo prazo nos termos de taxas de sobrevivência em uma coorte de pacientes operados com carcinoma vesícula biliar (CVB) intermédio e avançado. MÉTODOS: A coorte prospectiva de pacientes com estágios intermediários e avançados de CVB tratados entre 1996 e 2006. Todos os casos foram tratados com uma segmentectomia hepática parcial em segmentos IVb e V e uma dissecção linfonodal regional e seis ciclos de quimioterapia de ambulatório (5-FU e leukovorin). Com um tempo de seguimento médio de 31,5 meses, a morbidade, mortalidade operatória, hepático e infiltração linfática e atuarial de sobrevida foram medidas. Estatísticas descritivas foram aplicadas, bem como análise bivariada aplicando o teste exato de Fisher, testes não-paramétricos, curvas de sobrevida Kaplan Meier e técnica de regressão logística e risco proporcional de Cox. RESULTADOS: Foram incluídos 40 pacientes neste protocolo, com uma média de idade de 59,5 anos (40-85 anos), dos quais 28 eram mulheres (70%). Profundidade de infiltração parede: muscular 8 pacientes (20%), subserosal 12 pacientes (30%), serosas 12 pacientes (30%) e perivesicular no tecido adiposo, 8 pacientes (20%). A série morbidade foi de 27,5%. Não houve mortalidade operatória. A quimioterapia foi bem tolerada. A sobrevida global atuarial da série foi de 50% em 60 meses. CONCLUSÃO: Nosso protocolo tem tratamento morbidade, mortalidade e taxas de sobrevivência semelhantes às relatadas anteriormente série.

Resumo em Inglês:

PURPOSE: To evaluate the results of a prospective therapeutic protocol with long-term follow up in terms of survival rates in a cohort of patients treated with Intermediate and Advanced GBC (GBC). METHODS: Prospective cohort of patients with intermediate and advanced stages of GBC treated between 1996 and 2006. All cases were treated with a partial hepatic segmentectomy on segments IVb and V and a regional lymph node dissection and six cycles of out-patient chemotherapy (5-FU and leukovorin). With an average follow-up of 31.5 months, the morbidity, operative mortality, hepatic and lymphatic infiltration and actuarial survival were measured. Descriptive statistics were applied as well as bivariate analysis applying Fisher's exact test and non-parametrical tests and Kaplan Meier survival curves. Also logistic regression and proportional risk of Cox were applied. RESULTS: 40 patients were included in this protocol, with an average age of 59.5 years (40-85 years), of which 28 were women (70%). Depth of wall infiltration: muscular 8 patients (20%), subserosal 12 patients (30%), serosal 12 patients (30%) and perivesicular adipose tissue 8 patients (20%). The series morbidity was 27.5%. There was no operative mortality. The chemotherapy was well tolerated. The overall actuarial survival in the series was 50% at 60 months. CONCLUSION: Our protocol treatment has morbidity, mortality and survival rates similar to previously reported series.

Resumo em Português:

OBJETIVO: Quantificar, por meio de processamento de imagem assistida por computador, a intensidade de expressão de sulfomucinas e sialomucinas na mucosa cólica comparando segmentos com e sem trânsito e relacionando-a ao tempo de exclusão de trânsito fecal. MÉTODOS: Quarenta e cinco ratos Wistar machos foram submetidos à derivação do trânsito no cólon esquerdo pela confecção de colostomia proximal e fístula mucosa distal. Foram divididos de forma randomizada em três grupos experimentais de 15 animais, nos quais 10 foram submetidos à derivação do trânsito cólico (subgrupo experimental) e cinco somente a laparotomia exploradora sem desvio do trânsito fecal (subgrupo controle). Os três grupos experimentais foram formados segundo o sacrifício ter sido realizado em seis (grupo A), 12 (Grupo B) e 18 semanas (Grupo C). A avaliação da expressão de sulfomucinas e sialomucinas na mucosa cólica foi realizada pela técnica histoquímica da diamina de ferro alto alcian-blue (HID-AB). A quantificação da expressão tecidual foi determinada, para cada animal, nos segmentos com e sem trânsito, em local onde existiam quatro criptas contíguas e íntegras em dois campos aleatórios com auxílio de programa de análise de imagem assistida por computador. Adotou-se como valor final a média das leituras dos dois campos selecionados, nos segmentos providos e desprovidos de trânsito fecal. Na comparação entre a expressão dos dois subtipos de mucinas nos segmentos com e sem trânsito fecal utilizou-se o teste t de Student pareado. Para análise de variância segundo o tempo de exclusão utilizou-se o teste de ANOVA com o pós-teste de Newmann-Keuls, estabelecendo-se nível de significância de 5% (p<0,05). RESULTADOS: Houve redução significante no conteúdo tecidual de sulfomucinas e sialomucinas no cólon desprovido de trânsito fecal, independente do tempo de exclusão considerado. Houve aumento no conteúdo tecidual de sulfomucinas e diminuição de sialomucinas nos segmentos exclusos de trânsito fecal com o progredir do tempo de exclusão. CONCLUSÕES: A derivação do trânsito fecal diminui o conteúdo tecidual de sulfomucinas e sialomucinas nos segmentos desprovidos de trânsito fecal. Não obstante a redução do conteúdo de ambos os subtipos de mucinas ácidas nos segmentos desprovidos de trânsito fecal existe aumento no conteúdo tecidual de sulfomucinas e redução no conteúdo de sialomucinas com o progredir do tempo de derivação intestinal.

Resumo em Inglês:

PURPOSE: To quantify the intensity of sulfomucin and sialomucin expression in the colon mucosa, by means of computer-assisted image processing, comparing segments with and without fecal stream and correlating with the duration of fecal transit exclusion. METHODS: Forty-five Wistar rats were subjected to diversion of the fecal stream in the left colon by means of constructing a proximal colostomy and distal mucosal fistula. They were distributed randomly into three experimental groups of 15 animals, of which 10 were subjected to colon diversion (experimental subgroup) and five were only subjected to laparotomy, without colon diversion (control subgroup). The three experimental groups were formed according to the sacrifice date, which was to be performed six weeks after the surgical procedure (Group A), 12 weeks (Group B) and 18 weeks (Group C). The sulfomucin and sialomucin expression in the colon mucosa was evaluated using the histochemical technique of high iron diamine-alcian blue (HID-AB). The tissue expression was quantified for each animal, in the segments with and without fecal stream, at a location where there were four complete contiguous crypts in two random fields, with the aid of the computer-assisted image analysis software. The final value was taken to be the mean reading from the two fields selected, in the segments with and without fecal stream. To compare the expressions of the two mucin subtypes in the segments with and without fecal stream, the paired Student t test was used. To analyze variance according to duration of exclusion, ANOVA with the Newman-Keuls post-test was used, setting the significance level at 5% (p<0.05). RESULTS: There were significant reductions in tissue sulfomucin and sialomucin content in the colon without fecal stream, independent of the duration of exclusion considered. There was increased tissue sulfomucin content and decreased tissue sialomucin in the segments without fecal stream, with increasing duration of exclusion. CONCLUSIONS: Diversion of the fecal transit decreased the tissue sulfomucin and sialomucin content in the segments without fecal stream. Notwithstanding the reduction in the levels of both subtypes of acid mucin in the segments without fecal stream, there was increased tissue sulfomucin content and decreased tissue sialomucin with increasing duration of intestinal diversion.

Resumo em Português:

OBJETIVOS: Estudar histologicamente a vascularização entre um retalho cecal e o testículo de ratos Wistar. MÉTODOS: Cinquenta e três ratos foram estudados. G1, submetidos a (a) celiotomia, (b) mobilização do testículo direito (TD) para o abdome, (c) sutura do retalho cecal ao TD, (d) fechamento da cavidade. G2, procedimentos (a, b e d), com o TD fixado no abdome. G3, procedimentos (a, b e d), com exposição do TD ao ar e retorno ao escroto. G4 não operados. Após 20 dias, eutanásia e histologia. Realizou-se histometria e classificação segundo escore de lesão. Avaliou-se a vascularização testicular, comparando-se os grupos 1 e 3. Considerou-se significativo um p < 0,05. RESULTADOS: Diâmetros dos TD no G1, iguais ao G2 e diferentes de G3 e G4. O escore de lesão nos TD foi de 5,83 pontos para o G1, de 3,3 pontos para o G2, não havendo diferença significativa, porém diferentes de G3 e G4 (sem lesão). A vascularização no G1 teve média de 16,9 vasos por campo de grande aumento no TD. No G3 a média foi de 0,96 no TD e 0,92 no TE, com diferença significativa. O peso médio do G1 foi igual ao G2 e diferente de G3 e G4. CONCLUSÃO: Houve aumento significativo da vascularização entre o retalho e o testículo do rato.

Resumo em Inglês:

PURPOSE: Histological study of vascularization between a cecal pedicle flap and the testicle of Wistar rats. METHODS: Fifty-three rats were studied. G1: submitted to celiotomy (a), mobilization of the right testicle (RT) to the abdomen (b), cecal flap suture to the RT (d) and cavity closure. G1: procedures a, b and d and fixation of RT into abdomen. G3: procedures a, b and d, exposition of RT to air and reposition into scrotum. G4: not operated. Euthanasia and histology was done after 20 days. Histometry and lesions score classification was done. Testicular vascularization was studied with comparison between G1 and G3. A p < .05 was considered significant. RESULTS: The G1 RT diameters were not different to G2 RT and all have decreased size in comparison with RT of G3 and G4. The lesions score in the RT was 5.83 in G1 and 3.3 in G2 without statistical difference. The vascularization's average in G1 was 16.9 vessels in 400X field in the RT. In the G3 this average was 0.96 to the RT and 0.92 to left testicles. The weight's average in G1 was similar with G2 but different of G3 and G4. CONCLUSION: A significant increase of vascularization was observed between the intestinal flap and the rat testicle.

Resumo em Português:

OBJETIVO: Medir a acurácia e reprodutibilidade da colangiopancreatografia por ressonância magnética (CPRM) na avaliação da visibilização de complicações biliares em pacientes submetidos a transplantes hepáticos ortotópicos. MÉTODOS: Realizado estudo retrospectivo de 28 exames de CPRM de 24 pacientes submetidos a transplantes hepáticos. Os exames foram interpretados por dois observadores independentes, em dois momentos distintos, quanto ao grau de visibilização das estruturas estudadas e quanto à presença ou ausência de alterações nas vias biliares. Os resultados da CPRM foram comparados, nos casos de CPRM negativa, à evolução clínico-laboratorial por pelo menos 3 meses e, nos casos de CPRM alterada, aos achados de colangiopancreatografia retrógrada endoscópica (CPRE) e cirurgia, quando indicados. RESULTADOS: A visibilização das vias biliares intra-hepáticas foi considerada boa ou excelente em 78,6% e 82,1% dos exames pelos dois observadores. A visibilização da via biliar extra-hepática do doador e do receptor, bem como da anastomose biliar, foi considerada boa ou excelente em 100% dos casos por ambos os observadores. Foram detectadas seis complicações biliares (21,4% dos casos), todas elas estenoses anastomóticas. A concordância intra e intra-observador foi substancial ou quase perfeita (índices de kappa- k de 0,611 a 0,804) para a visualização das estruturas estudadas e quase perfeita (k de 0,900 a 1,000) para a detecção das complicações biliares. A CPRM apresentou sensibilidade de 100%, especificidade de 95,45%, valor preditivo positivo de 85,7% e valor preditivo negativo de 100% para a detecção de complicações biliares. CONCLUSÕES: A colangiopancreatografia por ressonância magnética (CPRM) é um exame acurado para a detecção de complicações biliares em pacientes submetidos a transplantes hepáticos ortotópicos por CPRM. Este exame configura-se como um método eficiente e altamente reprodutível para detecção de complicações biliares pós-transplantes hepáticos ortotópicos.

Resumo em Inglês:

PURPOSE: To evaluate the accuracy and reproducibility of magnetic resonance cholangiopancreatography (MRCP) in the detection of biliary complications in liver transplanted patients. METHODS: A study was conducted, with blinded review of 28 MRCP exams of 24 patients submitted to liver transplantation. The images were reviewed by two independent observers, at two different moments, regarding the degree of biliary tree visualization and the presence or absence of biliary complications. The MRCP results were compared, when negative, to at least 3 months of clinical and biochemical follow-up, and when positive, to the findings at surgery or endoscopic retrograde cholangiopancreatography (ERCP). RESULTS: The degree of intrahepatic biliary tree visualization was considered good or excellent in 78.6% and 82.1% of the exams by the two observers and visualization of the donor duct, recipient duct and biliary anastomosis was considered good or excellent in 100% of the exams, by both observers. Six biliary complications were detected (21.4%), all of them anastomotic strictures. Intra and interobserver agreement were substantial or almost perfect (kappa k values of 0.611 to 0.804) for the visualization of the biliary tree and almost perfect (k values of 0.900 to 1.000) for the detection of biliary complications. MRCP achieved 100% sensitivity, 95.45% specificity, 85.7% positive predictive value and 100% negative predictive value for the detection of biliary complications. CONCLUSIONS: MRCP is an accurate examination for the detection of biliary complications after orthotopic liver transplantation and it is a highly reproducible method in the evaluation of the biliary tree of liver transplanted patients.

Resumo em Português:

OBJETIVO: Avaliar histometricamente a influência do PRP na reparação óssea de defeitos circulares criados em tíbia irradiada de ratos Wistar. MÉTODOS: Sessenta ratos machos tiveram a tíbia direita irradiada com 30Gy. Após 30 dias, defeitos ósseos monocorticais foram criados e PRP foi adicionado em 30 ratos. No grupo controle os defeitos foram criados, mas não preenchidos. Os animais foram sacrificados em 4, 7, 14, 21, 56 e 84 dias e a tíbia removida para processamento histológico. RESULTADOS: Houve uma tendência do grupo PRP mostrar uma neoformação óssea significativamente maior nos períodos de 14 a 84 dias; no grupo controle o aumento da reparação óssea não se manteve após 21 dias. CONCLUSÃO: A adição de PRP mostrou-se benéfica no período inicial de reparação celular e em períodos seqüentes foi estímulo à quantidade neoformação óssea, quando comparado ao controle.

Resumo em Inglês:

PURPOSE: To evaluate the influence of PRP addition on bone repair of circular defects created in irradiated tibiae of rats by histometric analysis. METHODS: Sixty male Wistar rats had the right tibiae irradiated with 30 Gy. After 30 days monocortical defects were created and platelet-rich plasma was applied in 30 rats. In the control group defects were created but not filled. The animals were desanguinated after 4, 7, 14, 21, 56 and 84 days and the tibiae removed for histological processing. RESULTS: There was a tendency in the PRP group to increased bone neoformation from 14-days to 84-days; in the control group increased bone neoformation was not seen after 21 days or later. CONCLUSION: The addition of platelet-rich plasma had a beneficial effect in the initial cellular regeneration period and enhanced bone formation in later periods when compared to control.

Resumo em Português:

OBJETIVO: Desenvolver um modelo experimental em ratos para o estudo de deformidades craniofaciais. MÉTODOS: Foram realizados defeitos ósseos de espessura total com diâmetro de 5 x 8 mm e 10 x 10mm na calota craniana em 40 ratos, machos, NIS Wistar, com peso de 320 a 420 g divididos igualmente em dois grupos. O periósteo foi retirado e a dura-máter mantida intacta. Os animais foram sacrificados na 8ª e 16ª semana de pós-operatório e amostras de tecido ósseo foram extraídas para realização da análise histológica. RESULTADOS: Os defeitos cranianos permaneceram abertos mesmo após 16 semanas após a cirurgia. CONCLUSÃO: O modelo experimental com defeitos de 5x8mm na região parietal, com remoção do periósteo e manutenção da integridade da dura-máter são considerados críticos, e poderá ser utilizado para o estudo dos defeitos ósseos cranianos nas anomalias craniofaciais.

Resumo em Inglês:

PURPOSE: To develop an experimental surgical model in rats for the study of craniofacial abnormalities. METHODS: Full thickness calvarial defects with 10x10-mm and 5x8-mm dimensions were created in 40 male NIS Wistar rats, body weight ranging from 320 to 420 g. The animals were equally divided into two groups. The periosteum was removed and dura mater was left intact. Animals were killed at 8 and 16 weeks postoperatively and cranial tissue samples were taken from the defects for histological analysis. RESULTS: Cranial defects remained open even after 16 weeks postoperatively. CONCLUSION: The experimental model with 5x8-mm defects in the parietal region with the removal of the periosteum and maintenance of the integrity of the dura mater are critical and might be used for the study of cranial bone defects in craniofacial abnormalities.

Resumo em Português:

OBJETIVO: Desenvolver um modelo cirúrgico de IHA e hiperamonemia em ratos, que evita o shunt porto-sistêmico e a ligadura do ducto biliar, que seja aplicável à pesquisa de encefalopatia hepática. MÉTODOS: Após anestesia geral e laparotomia mediana, os pedículos dos lobos laterais direito e caudado foram isolados e clampeados. Após 1 hora, o animal foi reaberto, os clampes retirados e foi realizada hepatectomia anterior subtotal (ressecção dos lobos médio e lateral esquerdo), compreendendo a remoção de 75% do parênquima. Quatro horas após a hepatectomia, amostras de sangue e tecido hepático foram coletadas nos grupos IHA e controle. RESULTADOS: Diferenças entre os grupos IHA e controle foram significativas para ALT, AST, bilirrubina total e direta, sódio, potássio, fosfatase alcalina, gama glutamiltransferase e principalmente amônia. Histologicamente, diferenças significativas foram observadas entre os grupos. CONCLUSÃO: O modelo é útil para o estudo de aspectos específicos da IHA e o desenvolvimento de novas abordagens terapêuticas.

Resumo em Inglês:

PURPOSE: To develop a reliable surgical model of acute hepatic failure and hyperammonemia in rats that avoids porto-systemic shunt and bile duct ligation, applicable to hepatic encephalopathy research. METHODS: The pedicles of right lateral and caudate lobes were exposed and clamped. One hour later, the animal was reopened, clamps were released and anterior subtotal hepatectomy (resection of median and left lateral lobes) was performed, comprising 75% of liver removal. Four hours after hepatectomy, blood samples and liver tissues were collected from ALF and control groups. RESULTS: Differences between ALF and control groups were significant for ALT, AST, total and direct bilirubin, sodium, potassium, alkaline phosphatasis, gamma-glutamyltransferase and most important, ammonia. Histologically, significant differences were noticed between groups. CONCLUSION: The model is useful for the study of specific aspects of ALF and the development of new therapeutic approaches.

Resumo em Português:

OBJETIVO: Avaliar o efeito dos óleos de linhaça, oliva e peixe no perfil lipídico, preservação das vilosidades e migração de linfócitos na mucosa intestinal de ratos Wistar. MÉTODOS: Trinta ratos Wistar foram divididos em quarto grupos e receberam dieta AIN-93M, modificando para cada grupo apenas a fonte lipídica: óleo de linhaça, oliva, peixe e soja ( grupo controle). O soro foi separado para análise dos parâmetros bioquímicos. A análise histológica foi realizada na porção ileal. RESULTADOS: O grupo que recebeu óleo de peixe apresentou menores valores de colesterol total, lipoproteína de alta densidade e triacilglicerol (p<0.05). Os animais tratados com óleo de peixe e oliva apresentaram melhor preservação das vilosidades intestinais. Menor deposição de linfócitos foi observado no grupo tratado com óleo de linhaça (p<0.001). CONCLUSÃO: Este estudo demonstrou que os óleos de linhaça, oliva e peixe apresentam diferentes respostas em relação ao óleo de soja na preservação da mucosa intestinal e proliferação de linfócitos em ratos Wistar.

Resumo em Inglês:

PURPOSE: Evaluate the effect of flaxseed, olive and fish oil on the lipid profile, preservation of villosities and lymphocyte migration in the intestinal mucosa of Wistar rats. METHODS: Thirty Wistar male rats were divided into four groups, which received the AIN-93M diet, with changes only to their lipid source: flaxseed, olive, fish, and soy oil (control group). The serum was separated for the biochemical parameter analysis. A histological evaluation was performed in the ileal portion. RESULTS: The group which was fed fish oil presented lower values when compared to the other treatments for Total Cholesterol, High-density Lipoprotein Cholesterol and Triacylglycerol (p<0.05). The animals treated with fish and olive oils presented better intestinal villosities preservation. Less deposition of lymphocytes was observed in the flaxseed group (p<0.001). CONCLUSIONS: This study demonstrated that flaxseed, olive and fish oils present different responses than soy oil for the intestinal mucosa preservation and lymphocyte proliferation in Wistar rats.

Resumo em Português:

OBJETIVO: A esclerose lateral amiotrófica (ELA) é uma doença neurodegenerativa fatal com evolução rápida. Os tratamentos atualmente disponíveis falham em reverter os sintomas porque os mecanismos envolvidos na morte do neurônio motor ainda não são conhecidos. Publicações recentes colocam as células não neuronais, particularmente o astrócito e a microglia, no cenário da fisiopatologia da doença. Modelos animais para a ELA, particularmente os camundongos transgênicos que expressam o gene da SOD1 humana (hSOD1) mutante estão disponíveis e mostram o fenótipo da doença ao nível celular e clínico. Entretanto, informações detalhadas são escassas sobre os métodos de estudo da doença in vitro para a melhor compreensão da participação das células não neuronais no início e na progressão da patologia. MÉTODOS: Colônias de camundongos Swiss e camundongos transgênicos que expressam a hSOD1 mutante assim como os controles não transgênicos (selvagem) foram amplificadas após avaliação genotípica. A progressão da doença foi acompanhada pelo comportamento e a mortalidade foi registrada. Culturas primárias altamente purificadas de astrócitos e microglia da medula espinal dos camundongos foram obtidas. As células foram identificadas pela immunocitoquímica da GFAP e CD11B. A pureza das culturas de astrócitos e microglia foi acompanhada pelas análises do Western blot e RT-PCR empregando-se marcadores específicos. RESULTADOS: Os primeiros sinais da doença ocorreram por volta dos 105 dias de vida e a maioria dos camundongos transgênicos já estava com a doença manifestada aos 125 dias de idade e alcançaram o estágio terminal aproximadamente 20 dias depois. Fraqueza substancial da força muscular foi registrada nos animais transgênicos comparados com os animais selvagens. Análises imuncitoquímica, bioquímica e pelo RT-PCR demonstraram culturas primárias altamente purificadas de astrócito e microglia da medula espinal dos camundongos. CONCLUSÃO: É possível obter culturas purificadas de astrócitos e microglia da medula espinal do camundongo a ser empregadas em análises celulares e moleculares da influência destas células não neuronais na fisiopatologia da ELA.

Resumo em Inglês:

PURPOSE: Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal neurodegenerative disease that displays a rapid evolution. Current treatments have failed to revert clinical symptoms because the mechanisms involved in the death of motoneuron are still unknown. Recent publications have put non-neuronal cells, particularly, astrocyte and microglia, in the scenario of pathophisiology of the disease. Animal models for ALS, particularly transgenic mice expressing the human SOD1 gene with a G93A mutation (hSOD1), are available and display the phenotype of the disease at cellular and clinical levels. However, it is a lack of detailed information regarding the methods to study the disease in vitro to better understand the contribution of non-neuronal cells in the onset and progression of the pathology. METHODS: Colonies of Swiss mice and transgenic mice expressing hSOD1 mutation as well as non-transgenic controls (wild-type) were amplified after a genotyping evaluation. Disease progression was followed behaviorally and mortality was registered. Highly purified primary cultures of astrocytes and microglia from mouse spinal cord were obtained. Cells were identified by means of GFAP and CD11B immunocytochemistry. The purity of astroglial and microglial cell cultures was also accompanied by means of Western blot and RT-PCR analyses employing a number of markers. RESULTS: The disease onset was about 105 days and the majority of transgenic mice displayed the disease symptoms by 125 days of age and reached the endpoint 20 days later. A substantial motor weakens was registered in the transgenic mice compared to wild-type at the end point. Immunocytochemical, biochemical and RT-PCR analyses demonstrated a highly purified primary cultures of spinal cord astrocytes and microglia. CONCLUSION: It is possible to achieve highly purified primary cultures of spinal cord astrocytes and microglia to be employed in cellular and molecular analyses of the influence of such non-neuronal cells in the pathophysiology of ALS.

Resumo em Português:

OBJETIVO: Descrever e avaliar a articulação temporomandibular de ratos sob o aspecto anatômico e histológico e realizar uma comparação entre esta articulação e a de humanos. MÉTODOS: Foram utilizados doze ratos adultos Wistar (12 articulações do mesmo lado). As seguintes estruturas anatômicas foram avaliadas de forma qualitativa: côndilo, disco, osso temporal, tecido retrodiscal e sinóvia. O estudo macroscópico e o microscópico da ATM humana foram baseados na literatura atual. RESULTADOS: A ATM é envolvida por uma fina cápsula, formada por tecido fibroso e cobertura sinovial. O ângulo mandibular é proeminente. A fossa glenoide é rasa, sem eminência articular. De acordo com os achados histológicos, a ATM é composta por diferentes tecidos, são eles a cabeça da mandíbula, a fossa mandibular e o disco fibrocartilaginoso. Uma camada de cartilagem hialina recobre a superfície articular do côndilo e do osso temporal. CONCLUSÃO: De acordo com os achados morfométricos e histológicos, a estrutura articular em ratos é, no geral, similar a articulação humana. Exceto que nesses animais não há eminência articular.

Resumo em Inglês:

PURPOSE: To describe and evaluate normal rat temporomandibular joints from anatomic and histopathologic point of view and make a comparison between this joint in rats and humans. METHODS: Twelve male adult Wistar rats (12 same side joints) were used in this procedure. The following anatomical structures were histologically evaluated in a qualitative fashion: condyle, disc, temporal bone, retrodiscal tissue and synovia. The macroscopical and microscopic study of the human TMJ was based on the current literature. RESULTS: The TMJ is surrounded by a thin capsule, consisting of fibrous tissue, and a synovial lining. The mandibular angle has a prominent shape. The glenoid fossa is flat, with no eminences. Histologically, the TMJ is composed of different tissues that comprise the mandibular head, mandibular fossa and fibrocartilaginous disc. A layer of hyaline cartilage covers the articulating cortical condyle and temporal bone. CONCLUSION:Morphologically and histologically, the articular structure of rats is, on the whole, similar to that of humans. In these animals there is no articular eminence.

Resumo em Português:

OBJETIVO: Avaliar o manejo anestésico em cirurgia intra-uterina para induzir mielomeningocelo em primatas não humanos, Macaca mulatta. MÉTODOS: Operaram-se um total de nove fetos in útero que foram submetidos à laminectomia em L5 e L6. As variáveis a estudar foram mortes maternas ou fetais, freqüência cardíaca e respiratória, pressão arterial, temperatura e saturação de oxigênio. RESULTADOS: Não se apresentaram mortes maternas ou fetais, a temperatura se manteve abaixo dos 36°C, não tendo repercussões no bem-estar dos macacos. CONCLUSÃO: Não ocorreu nenhum óbito materno ou fetal, sendo que a única variável abaixo do normal foi a temperatura.

Resumo em Inglês:

PURPOSE: Evaluate the anesthetic management in intrauterine surgery to induce myelomeningocele in non human primates Macaca mulatta. METHODS: A total of nine fetuses had intrauterine surgery; laminectomy was performed on them in L5 and L6. The studied variables were: maternal death, fetus death, cardiac frequency, respiratory frequency, arterial pressure, temperature, and oxygen saturation. RESULTS: No maternal or fetal deaths occurred; the only variable that was reported below the normal ranges was temperature. CONCLUSION: No maternal or fetal deaths occurred; the only variable that was reported below the normal ranges was temperature.

Resumo em Português:

OBJETIVO: Avaliar os efeitos da bupivacaína 0,5 e 0,25 % na anestesia regional endovenosa (IVRA) e no bloqueio do plexo braquial (BPB) respectivamente, na anestesia, bloqueio motor e parâmetros cardiovasculares em cães. MÉTODOS: Foram utilizados 14 cães sadios adultos pesando em média 10 kilos. Animais foram aleatoriamente designados a um de dois tratamentos IVRA (n = 7) ou BPB (n = 7). Todos os animais foram sedados com acepromazina (0,1 mg/kg intramuscular). Para realizar o BPB foi usado um estimulador elétrico nervoso. Anestesia, bloqueio motor, sedação, efeitos cardiovascular e respiratório foram mensurados como efeitos dos respectivos bloqueios. RESULTADOS: O bloqueio BPB demonstrou eficiência superior e maior duração da anestesia (BPB - 456 ± 94 minutos vs IVRA - 138 ± 44 minutos) bem como maior envolvimento motor. Somente a pressão arterial sistólica foi alterada no grupo BPB e a freqüência respiratória em ambos os tratamentos. CONCLUSÃO: Em cães, a bupivacaína 0,25% hiperbárica no grupo BPB produziu uma anestesia do membro anterior três vezes mais longa que a 0,5% no grupo IVRA, com ptose do membro bloqueado e pequena interferência no sistema cardiovascular e com diminuição da freqüência respiratória.

Resumo em Inglês:

PURPOSE: To evaluate the effects of bupivacaine 0.5 and 0.25% in intravenous regional anesthesia (IVRA) and brachial plexus block (BPB), respectively, on anesthesia, motor block and cardiovascular parameters in dogs. METHODS: Fourteen healthy adult dogs averaging 10 kilograms (kg) of body weight. Animals were randomly assigned to receive one of the two treatments IVRA (n=7) or BPB (n=7). All the animals were sedated with acepromazine (0.1 mg/kg intramuscular). To execute the BPB was used an electrical nerve stimulation. Anesthesia, motor block, sedation, cardiovascular and respiratory effects were measured as effect of the treatment. RESULTS: BPA showed superior efficiency and duration of anesthesia (BPB - 456 ± 94 minutes vs IVRA - 138 ± 44) as well as motor block. There only physiologic parameter which change were the systolic pressure in BPB and respiratory rate for both treatments. CONCLUSION: In dogs the 0.25 % hyperbaric bupivacaine in BPB produces a front limb anesthesia about three times more than the 0.5 % in IVRA, with ptosis of the limb blocked and little interference in the cardiovascular system but with decrease in respiratory rate.

Resumo em Português:

OBJETIVO: Estudar a expressão da HO-1 (enzima induzida pelo estresse) em diferentes peças esofágicas obtidas de um estudo experimental em ratos que avaliou o papel do refluxo gastroesofágico e duodeno esofágico na carcinogênese experimental. MÉTODOS: Blocos de parafina contendo peças de esôfago provenientes de um estudo experimental com ratos foram utilizados para verificar a expressão imunohistoquímica da HO-1. Os ratos haviam sido divididos nos seguintes grupos: (1) Cardioplastia com o objetivo de promover refluxo ácido, (2) Anastomose esofagoduodenal para indução de refluxo misto (ácido e biliar), (3) sem tratamento (controles), (4) cardioplastia + dietil-nitrosamina (DEN), (5) Anastomose esofagoduodenal + DEN, (6) DEN. Amostras contendo três peças de cada grupo com as lesões histopatológicas mais graves encontradas em cada braço do estudo foram escolhidas para avaliação da expressão imunoistoquímica da HO-1. RESULTADOS: A expressão da HO-1 foi observada somente nas peças de esôfago de ratos submetidos à anastomose esofagoduodenal (Grupos 2 e 5) e analise da intensidade média da fluorescência demonstrou uma diferença significativa na expressão da HO-1 nesses grupos quando comparada com o grupo controle (4,8 e 4,6 vezes respectivamente) (p<0,05). As células inflamatórias localizadas dentro dos tumores e nas regiões adjacentes ao epitélio foram as que mais intensamente expressaram a HO-1. Ratos expostos ao refluxo ácido (gástrico) apresentaram pouca ou nenhuma atividade da HO-1. CONCLUSÃO: Esofagite de refluxo induzida pelo refluxo com conteúdo duodenal provocou considerável estresse oxidativo, que parece exercer um papel importante na carcinogênese esofágica. O refluxo puramente ácido não foi capaz de induzir estresse oxidativo nesse modelo experimental

Resumo em Inglês:

PURPOSE: To study the expression of heme-oxygenase-1 (HO-1), an enzyme induced by oxidative stress, in specimens obtained from an experimental model in rats that evaluated the role of gastric and duodenal reflux in esophageal carcinogenesis. METHODS: Esophageal specimens embedded in paraffin obtained from different experimental groups of rats were used for immunohistochemistry analysis of HO-1 expression. The rats had been divided into the following groups and were killed after 22 weeks: (1) cardioplasty to induce acid reflux; (2) esophagoduodenal anastomosis to induce duodenal reflux; (3) no treatment; (4) cardioplasty + diethylnitrosamine (DEN); (5) esophagoduodenal anastomosis + DEN; and (6) DEN. The study sample comprised 3 specimens from each group with the most severe histopathological lesions found on each study branch. RESULTS: The expression of HO-1 was seen only in rat specimens submitted to esophagoduodenal anastomosis (Groups 2 and 5), and the analysis of mean fluorescence intensity revealed a significant increase of HO-1 expression (4.8 and 4.6 fold, respectively) when compared with the control group (Group 3) (p<0.05). The main target for HO-1 induction was the inflammatory cells inside the tumor or in subepithelial areas. Rats exposed to gastric reflux had no HO-1 expression. CONCLUSION: Reflux esophagitis induced by reflux of duodenal contents, which provoked considerable oxidative stress, may play an important role in esophageal carcinogenesis. Acid reflux did not induce oxidative stress in this experimental model.