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Brazilian Journal of Microbiology, Volume: 32, Número: 1, Publicado: 2001
  • Bioacumulação de cobre, zinco, cádmio e chumbo por Bacillus sp., Bacillus cereus, Bacillus sphaericus e Bacillus subtilis Industrial Microbiology

    Costa, Antonio Carlos Augusto da; Duta, Flavia Pereira

    Resumo em Português:

    Este trabalho apresenta resultados de acumulação dos íons metálicos cádmio, zinco, cobre e chumbo por bactérias do gênero Bacillus. A bioacumulação máxima de cobre foi 5,6 mol/g biomassa para B. sphaericus, 5,9 mol/g biomassa para B. cereus e B. subtilis, e 6,4 mol/g biomassa para Bacillus sp.. A bioacumulação máxima de zinco foi 4,3 mol/g biomassa para B. sphaericus, 4,6 mol/g biomassa para B. cereus, 4,8 mol/g biomassa para Bacillus sp. e 5,0 mol/g biomassa para B. subtilis. A bioacumulação máxima de cádmio foi 8,0 mol/g biomassa para B. cereus, 9,5 mol/g biomassa para B. subtilis, 10,8 mol/g biomassa para Bacillus sp. e 11,8 mol/g biomassa para B. sphaericus. A bioacumulação máxima de chumbo foi 0,7 mol/g biomassa para B. sphaericus, 1,1 mol/g biomassa para B. cereus, 1,4 mol/g biomassa para Bacillus sp. e 1,8 mol/g biomassa para B. subtilis. As distintas linhagens de Bacillus testadas apresentaram variáveis capacidades de carregamento de íons metálicos, sendo os melhores resultados aqueles obtidos com o emprego de B. subtilis e B. cereus.

    Resumo em Inglês:

    This work presents some results on the use of microbes from the genus Bacillus for uptake of cadmium, zinc, copper and lead ions. Maximum copper bioaccumulations were 5.6 mol/g biomass for B. sphaericus, 5.9 mol/g biomass for B. cereus and B. subtilis, and 6.4 mol/g biomass for Bacillus sp. Maximum zinc bioaccumulations were 4.3 mol/g biomass for B. sphaericus, 4.6 mol/g biomass for B. cereus, 4.8 mol/g biomass for Bacillus sp. and 5.0 mol/g biomass for B. subtilis. Maximum cadmium bioaccumulations were 8.0 mol/g biomass for B. cereus, 9.5 mol/g biomass for B. subtilis, 10.8 mol/g biomass for Bacillus sp. and 11.8 mol/g biomass for B. sphaericus. Maximum lead biomaccumulations were 0.7 mol/g biomass for B. sphaericus, 1.1 mol/g biomass for B. cereus, 1.4 mol/g biomass for Bacillus sp. and 1.8 mol/g biomass for B. subtilis. The different Bacillus strains tested presented distinct uptake capacities, and the best results were obtained for B. subtilis and B. cereus.
  • Obtenção de protease usando Bacillus subtilis 3411 e meio com farinha de semente de Amaranthus em diferentes condições de aeração Industrial Microbiology

    Pastor, Maria Delia; Lorda, Graciela Susana; Balatti, Antonio

    Resumo em Português:

    Neste trabalho estudou-se a produção de proteases a partir de Bacillus subtilis 3411 cultivado em um meio no qual adicionou-se farinha de semente de Amaranthus cruentus como fonte de nutrientes e fatores de crescimento. As experiências foram realizadas em Erlenmeyers com agitador em fermentador de laboratório. Além disso, considerou-se a influência da aeração sobre a produção enzimática. A adição de amaranto em uma concentração de 20 g/L produziu um aumento de 400% no nível de proteases. A aeração das culturas teve um efeito favorável até valores de 750 r.p.m. empregando um fluxo de ar de 1 L/L. min.

    Resumo em Inglês:

    The influence of the addition of Amaranthus cruenthus seed meal to the medium, as nutrient and growth factor, on protease production by Bacillus subtilis 3411 was studied. Tests were carried out in a rotary shaker and in mechanically stirred fermenters. The influence of aeration was also evaluated. The addition of amaranth in a concentration of 20 g/L resulted in 400% increase in protease production. Aeration up to 750 r.p.m. and 1 L/L.min had a favorable effect.
  • Susceptibilidade de Saccharomyces cerevisiae e bactérias láticas provenientes de indústrias alcooleiras a vários compostos antimicrobianos Industrial Microbiology

    Oliva-Neto, Pedro de; Yokoya, Fumio

    Resumo em Português:

    O efeito antimicrobiano de vários produtos incluindo formulações comerciais usualmente utilizadas em usinas de açúcar e álcool foi determinado pelo teste da Concentração Mínima Inibitória (CMI) adaptada para Saccharomyces cerevisiae e os contaminantes naturais Lactobacillus fermentum and Leuconostoc mesenteroides. O teste da CMI foi feito pela adaptação do método da Macrodiluição em caldo pela formulação de um meio de cultivo com caldo de cana em condições similares ao mosto da fermentação alcoólica. Penicilina V Ácida (CMI= 0,10-0,20 µg/ml) e clindamicina (CMI = 0,05-0,40 µg/ml) foram os mais efetivos contra o crescimento bacteriano em 24 horas. Entre os produtos químicos, sulfito (CMI = 10-40 µg/ml), nitrito (CMI <117 µg/ml) e sulfato de cobre (CMI = 75-300 µg/ml) foram os mais efetivos. Etileno-bis-ditiocarbamato de zinco e manganês e dimetilditilcarbamato não apresentaram efeito inibitório satisfatório (CMI > 50 µg/ml). Metilditiocarbamato foi eficiente apenas para L. fermentum (CMI= 2,5 µg/ml) e S. cerevisiae (CMI= 5,0 µg/ml). Tiocianato (CMI= 1,2-5,0 µg/ml), bromofenato (CMI= 9-18 µg/ml) e n-alquildimetilbenzil cloreto de amônio (CMI= 1-8 µg/ml) afetaram o crescimento de S. cerevisiae em concentrações inibitórias similares à L. mesenteroides ou L. fermentum. Formaldeido foi mais efetivo contra as bactérias (CMI= 11,5-23 µg/ml) em ambos pHs (4,5 e 6,5) em relação à levedura (CMI= 46-92 µg/ml). Vários biocidas testados afetam seriamente o crescimento de S. cerevisiae, nas dosagens similares àquelas que inibem as bactérias, portanto estes produtos deveriam ser evitados, ou usados somente em condições especiais, para o controle bacteriano do processo de fermentação. Para esta etapa, o controle destes contaminantes por antibióticos é mais apropriado e efetivo.

    Resumo em Inglês:

    The antimicrobial effect of several products including commercial formulations currently used in sugar and alcohol factories was determined by adapted MIC (Minimal Inhibitory Concentration) test on Saccharomyces cerevisiae and on natural contaminants Lactobacillus fermentum and Leuconostoc mesenteroides. The MIC test by macrodilution broth method was adapted by formulating of the culture medium with cane juice closely simulating industrial alcoholic fermentation must. Acid penicillin V (MIC 0.10-0.20 µg/ml) and clindamycin (MIC 0.05-0.40 µg/ml) were most effective against bacterial growth in 24 h. Among the chemicals, sulphite (MIC 10-40 µg/ml), nitrite (MIC <117 µg/ml) and copper sulphate (75-300 µg/ml) were the most effective. Zinc and manganese ethylene-bis-dithiocarbamate and dimethyldithiocarbamate did not show good inhibitory effect on bacteria (MIC > 50 µg/ml). Methyldithiocarbamate was efficient only on L. fermentum (MIC 2.5 µg/ml) and S. cerevisiae (MIC 5.0 µg/ml). Thiocianate (MIC 1.2-5.0 µg/ml), bromophenate (MIC 9-18 µg/ml) and n- alkyldimethylbenzylammonium cloride (MIC 1-8 µg/ml) affected S. cerevisiae at similar inhibitory concentration for L. mesenteroides or L. fermentum. Formaldehyde was more effective on bacteria (MIC 11.5 - 23 µg/ml) in both pH (4.5 and 6.5) than yeast (MIC 46-92 µg/ml). Several tested formulated biocides seriously affect S. cerevisiae growth in the similar dosages of the bacterial inhibition, so these products should be avoided or used only in special conditions for the bacterium control of fermentation process. For this step, the control of these contaminants by antibiotics are more suitable and effective.
  • Uso de alfa-metil-D-glucosídeo, um análogo sintético de maltose, como indutor de produção de amilases por Aspergillus sp em fermentação submersa e fermentação em estado sólido Industrial Microbiology

    Moreira, Fabiana G.; Lenartovicz, Veridiana; Souza, Cristina G.M. de; Ramos, Edivan P.; Peralta, Rosane M.

    Resumo em Português:

    O uso de alfa-metil-D-glucosídeo (alfaMG), um análogo sintético de maltose, como fonte de carbono e indutor das amilases por Aspergillus sp., foi estudado em fermentação submersa e fermentação em estado sólido. De um grupo de dez espécies, A. tamarii, A. fumigatus e A. flavus foram capazes de produzir biomassa e alta atividade amilolítica em culturas submersas contendo alfaMG como única fonte de carbono. Em fermentação em estado sólido, o enriquecimento do meio basal de farelo de trigo ou sabugo de milho com alfaMG aumentou em 3 vezes a produção das amilases. Tanto em fermentação submersa quanto em fermentação em estado sólido, alfaMG induziu mais eficientemente a produção de amilases que maltose e amido.

    Resumo em Inglês:

    The use of a methyl-D-glucoside (alphaMG), a synthetic analogue of maltose, as carbon source and inducer of amylase synthesis to several species of Aspergillus was studied in submerged and solid-state fermentations. Among a group of ten species, A. tamarii, A. fumigatus and A. flavus were able to produce biomass and high specific amylolytic activity in submerged cultures containing alphaMG as the only carbon source. In solid state fermentation, the enrichment of basal wheat bran or corn cob medium with alphaMG increased up to 3 times the production of amylases. In both submerged and solid state fermentations, alphaMG was more effective inducer of amylases than maltose and starch.
  • Rápida produção de quitosana por linhagens de Mucorales em cultura submersa Industrial Microbiology

    Amorim, Rosa Valéria da Silva; Souza, Wanderley de; Fukushima, Kazutaka; Campos-Takaki, Galba Maria de

    Resumo em Português:

    A produção microbiológica da quitosana foi realizada usando-se duas linhagens de Mucorales, Mucor racemosus and Cunninghamella elegans. Quitosana foi extraída a partir dos micélios de M. racemosus e C. elegans em diferentes fases de crescimento em meio YPD. Para ambos os fungos, quitosana foi rapidamente produzida, com rendimentos de quitosana mais elevados após 24h de cultivo em cultura submersa. O rendimento de quitosana isolada a partir de micélio seco de M. racemosus foi cerca de 40% maior do que de C. elegans. O grau de N-acetilação da quitosana foi 49% em M. racemosus e 20% em C. elegans, e os conteúdos de D-glicosamina foram cerca de 48 and 90%, respectivamente.

    Resumo em Inglês:

    Production of chitosan was conducted using two Mucoralean strains, Mucor racemosus and Cunninghamella elegans. Chitosan was extracted from mycelia of M. racemosus and C. elegans at different growth phases on YPD medium. In both fungi, chitosan was rapidly produced, while highest yield of extractable chitosan was found in 24h of cultivation in submerged culture. The yield of chitosan isolated from dry mycelia of M. racemosus was about 40% higher than from C. elegans. The degree of N-acetylation of chitosan was 49% in M. racemosus and 20% in C. elegans, and the D-glucosamine contents were about 48% and 90%, respectively.
  • Seleção de linhagens de Aspergillus niger produtoras de tanase Industrial Microbiology

    Pinto, Gustavo A.S.; Leite, Selma G.F.; Terzi, Selma C.; Couri, Sonia

    Resumo em Português:

    O objetivo deste trabalho foi selecionar linhagens de Aspergillus niger para síntese de tanase. O crescimento das colônias em meio contendo ácido tânico indicou capacidade de produção de tanase. A atividade enzimática foi determinada em fermentação semi-sólida. A. niger 11T25A5 foi o melhor produtor (67.5 U.g-1/72 horas de fermentação).

    Resumo em Inglês:

    The aim of this work was to select strains of Aspergillus niger for tannase production. Growth of colonies in plates with tannic acid-containing medium indicated their ability to synthesize tannase. Tannase activity was also measured in solid-state fermentation. A. niger 11T25A5 was the best tannase producer (67.5 U.g-1/72 hours of fermentation).
  • Detecção de diferentes cepas de Staphylococcus aureus de mastite bovina subclínica através da técnica de PCR e técnicas tradicionais Food Microbiology

    Vieira-da-Motta, Olney; Folly, Márcio Manhães; Sakyiama, Cássia Camargo Hagen

    Resumo em Português:

    Quinhentas e cinqüenta e cinco amostras de leite, provenientes de 362 vacas com mastite subclínica em diferentes propriedades rurais do Estado do Rio de Janeiro, Brasil, de 1995 a 1997, foram submetidas ao teste "Califórnia Mastitis Test" (CMT). 39,7% das amostras foram positivas, das quais foram isoladas 128 cepas de Staphylococcus aureus. Todas as cepas isoladas foram positivas para o gene da coagulase utilizando a técnica de PCR, todavia, resultados de coagulase através das técnicas em tubo e "coagulase slide test" foram variáveis. Após a amplificação do gen de coagulase através da técnica de PCR utilizando iniciadores específicos para o referido gen, fragmentos com diferentes pesos moleculares foram vistos através de análise em gel de agarose, sugerindo a ocorrência de polimorfismo genético. O estudo também sugere a ocorrência de diferentes cepas da bactéria atuando nos rebanhos leiteiros causando mastite bovina.

    Resumo em Inglês:

    Contamination of fresh milk with Staphylococcus aureus was assessed comparatively through routine phenotypic (coagulase tube test and coagulase slide test) and genotypic (PCR) screening of 128 S. aureus strains isolated from 555 milk samples. These samples were collected from 362 cows with subclinical mastitis, hosted in different dairy herds at various locations of the Northern and Northeastern rural areas of the State of Rio de Janeiro, 39.7% of which were CMT-positive. All S. aureus isolates tested positive for the presence of the coagulase gene by PCR and the isolates could be grouped into four distinct classes according to the size of the PCR product. The strains also yielded variable results when assayed with coagulase test. Taken together, these data indicate the existence of extensive polymorphism at the coagulase gene locus in the genus Staphylococcus and exemplifies the extent of molecular and phenotypic heterogeneity associated with the strains circulating in rural herds.
  • Atividade antilisterial de bactérias láticas isoladas de carnes e produtos cárneos brasileiros embalados à vácuo Food Microbiology

    Martinis, Elaine C.P. De; Públio, Márcia R.P.; Santarosa, Priscila R.; Freitas, Flávia Z.

    Resumo em Português:

    Vinte amostras de carnes e produtos cárneos brasileiros foram analisadas com a finalidade de se isolar bactérias láticas produtoras de bacteriocina, através do método de antagonismo em ágar, utilizando Lactobacillus sake ATCC 15521 como microrganismo indicador. Baseado na coloração de Gram, reação com KOH, teste de catalase e teste de fermentação de 49 carboidratos (API 50 CH), três das sete cepas com características antagonísticas foram classificadas como Lactobacillus curvatus, uma como Leuconostoc mesenteroides e uma como Leuconostoc sp. Duas cepas não puderam ser identificadas usando apenas estes testes. Os inibidores produzidos por essas cepas mostraram-se sensíveis a proteases. A inibição devido a bacteriófagos líticos foi descartada e assim as culturas foram classificadas como bactérias láticas produtoras de bacteriocina. Quatro cepas apresentaram atividade antilisterial, e conseqüentemente um potencial de utilização como bioconservadores em produtos cárneos.

    Resumo em Inglês:

    Twenty samples of Brazilian meat and meat products were screened by the agar overlay method for bacteriocin-producing lactic acid bacteria, using Lactobacillus sake ATCC 15521 as indicator strain. Based on Gram staining, KOH reaction, catalase test and fermentation of 49 carbohydrates (API 50 CH), three out of seven isolates with confirmed antagonist properties were identified as Lactobacillus curvatus, one as Leuconostoc mesenteroides and one as Leuconostoc sp. Two isolates could not be properly identified using these tests. The inhibitors produced by these strains were sensitive to proteases. Inhibition due to lytic bacteriophages was ruled out, so the isolates were classified as bacteriocin-producing lactic acid bacteria. Four of them presented antilisterial activity and a potential application as biopreservatives in meat systems.
  • Ação do ácido peracético na destruição de Staphylococcus aureus e Escherichia coli em suspensão ou sedimentados sobre uma superfície de aço inoxidável Food Microbiology

    Kunigk, Leo; Almeida, Maria C.B.

    Resumo em Português:

    A eficiência de um sanificante comercial à base de ácido peracético na destruição de Staphylococcus aureus e Escherichia coli foi avaliada apregando-se dois métodos distintos. O primeiro corresponde ao método da suspensão da AOAC e o segundo ao método desenvolvido por um dos autores, no qual a eficiência de sanificantes é avaliada em culturas microbianas aplicadas à uma superfície de aço inoxidável com o mesmo grau de acabamento das superfícies encontradas nas indústrias de alimentos. Os resultados indicaram que S. aureus foi mais resistente ao sanificante que E. coli, quando em suspensão. Quando S. aureus encontrava-se sedimentando sobre uma superfície de aço inoxidável, o tempo de contato entre sanificante e microrganismos para reduzir a população 6,5 ciclos logaritmos foi 3 vezes maior do que quando esses microrganismos estavam em suspensão.

    Resumo em Inglês:

    The efficiency of a commercial peracetic acid sanitizer on destruction of Staphylococcus aureus and Escherichia coli was evaluated using two distinct methods. The first method is the AOAC suspension test and the second is a method proposed by one of the authors in which the microbial cells are settled on a stainless steel surface and then treated with the sanitizer. The results showed that when in suspension S. aureus was more resistant to the sanitizer than E. coli. When S. aureus was settled on the stainless steel surface, the contact time between the sanitizer and the microorganisms to attain a 6.5 log reduction in the number of viable cells was three times greater than when the cells were in suspension.
  • Influência de bacteriocinas produzidas por Lactobacillus plantarum BN na vida útil de carne bovina refrigerada Food Microbiology

    Fiorentini, Ângela M.; Sant'Anna, Ernani S.; Porto, Anna C.S.; Mazo, Jaciara Z.; Franco, Bernadette D.G.M.

    Resumo em Português:

    Melaço de cana de açúcar é um sub-produto barato da indústria açucareira. Esse produto foi empregado para o crescimento e produção de bacteriocina de Lactobacillus plantarum BN e avaliado quando a sua aplicação potencial no aumento da vida útil de carne crua. Cubos de carne bovina foram imersos por 5 minutos no sobrenadante filtrado e neutralizado dessa cultura (Tratamento A) e mantidos a 5ºC. Contagens de microrganismos psicrotróficos e mesófilos, determinação de pH e de acidez total foram realizadas nas amostras após 0, 3, 6, 9, 12 e 15 dias. Essas determinações foram também feitas em amostras mergulhadas por 5 minutos em solução de ácido lático a 6% (tratamento B) e em água destilada (tratamento C). Após 3 dias em refrigeração, as contagens de microrganismos psicrotróficos nas amostras submetidas ao tratamento A aumentaram 0,38 ciclos log, enquanto aquelas submetidas aos tratamentos B e C aumentaram muito mais (1,42 and 2,04 ciclos log, respectivamente). O mesmo aconteceu com os microrganismos mesófilos (0,31, 0,33 and 1,04 ciclos log, respectivamente). No sexto dia, as contagens de psicrotróficos nas amostras submetidas aos tratamentos A e B foram 2,07 e 0,64 ciclos log, respectivamente, mais baixas que nas amostras controle (tratamento C). As contagens de mesófilos nessas amostras foram 1,58 e 1,12 ciclos log, respectivamente, mais baixas que nos controles. No sexto dia, somente as amostras submetidas ao tratamento A apresentaram contagens inferiores a aquelas consideradas pelo ICMSF como padrão de qualidade (<10(7) UFC/g). Após 9 dias, somente as amostras tratadas com a bacteriocina apresentaram qualidade aceitável. A partir do 12º dia, todas as amostras de carne estavam fora dos padrões de qualidade. Esses resultados indicam que a imersão da carne bovina em caldo de melaço de cana de açúcar pode ser um interessante recurso tecnológico para aumentar a vida útil desse produto em refrigeração.

    Resumo em Inglês:

    Sugar cane molasses is a cheap by-product of the sugar cane industry. This product was used for growth and production of bacteriocins by Lactobacillus plantarum BN and evaluated for its potential application in the extension of the shelf-life of raw meat. Bovine meat cubes were dipped in the filtered and neutralized supernatant of the fermented broth (Treatment A) and stored at 5ºC. Counts of psychrotrophic and mesophilic aerobic microorganisms, pH determination and total acidity were performed on meat cubes after 0, 3, 6, 9, 12 and 15 days. These determinations were also done in cubes dipped in a 6% lactic acid solution (treatment B) and distilled water (treatment C). After 3 days, the counts of psychrotrophic microorganisms in cubes submitted to treatment A, B and C increased 0.38, 1.42 and 2.04 log cycles, respectively. The same happened with mesophilic microorganisms (0.31, 0.33 and 1.04 log cycles increases, respectively). On the sixth day, the psychrotrophic population in samples submitted to treatments A and B were 2.07 and 0.64 log cycles, respectively, lower than in the control samples (treatment C). Mesophilic microorganisms in these samples were 1.58 and 1.12 log cycles, respectively, lower than the controls. On the sixth day, only samples submitted to treatment A presented lower counts than those recommended by ICMSF as quality standards for raw meat (<10(7) CFU/g). After nine days of storage under refrigeration, samples submitted to treatment A still maintained acceptable quality. From the twelfth day on, all samples exceeded the microbial quality limits. These results indicate that dipping of raw meat in filtered sugar cane molasses containing bacteriocins produced by L. plantarum BN may be an interesting technological option to extend the shelf life of refrigerated bovine meat.
  • Isolamento de fungos herpotriquieláceos do ambiente Environmental And Soil Microbiology

    Vicente, Vânia Aparecida; Angelis, Derlene Attili de; Queiróz-Telles Filho, Flávio; Pizzirani-Kleiner, Aline Aparecida

    Resumo em Português:

    Fungos da família Herpotrichiellaceae, agentes comuns de cromoblastomicose e feohifomicose, foram isolados de amostras de solo e de material vegetal em decomposição, durante duas coletas realizadas na propriedade do Centro Nacional de Pesquisa de Florestas/EMBRAPA, localizada em Colombo, PR, Brasil. Após o isolamento, os fungos foram submetidos às análises óticas macro e microscópicas e eletrônica de varredura, além do estudo de seus padrões nutricionais. Das 17 colônias de fungos isoladas, 3 (17,6%) foram identificadas como espécies de importância clínica, tais como: Cladophialophora bantiana (Sacc.) de Hoog et al, Fonsecaea pedrosoi (Brumpt) Negroni e Phialophora verrucosa Medlar. As identificações basearam-se nos resultados dos testes fisiológicos e na comparação da morfologia dos isolados com linhagens referência do CBS (Centraal Bureau voor Schimmelcultures). Esta investigação revelou a existência sapróbia de espécies de fungos conhecidas como agentes de cromoblastomicose e feohifomicose. Tais doenças são tidas como autóctones na região estudada.

    Resumo em Inglês:

    Herpotrichiellaceous fungi, common agents of chromoblastomycosis and phaeohyphomycosis, were searched in samples of rotten wood, leaf littler, bark and soil of the rhizosphere, collected in the Centro Nacional de Pesquisas de Florestas/EMBRAPA, Colombo, PR, Brazil. Morphological analyses of macro, optic and scanning electron microscopy, as well as the determination of the nutritional pattern of the isolated strains were carried out for a taxonomical study. In a total of 17 colonies, 3 isolates (17.6%) were identified as species of medical relevance: Cladophialophora bantiana (Sacc.) de Hoog et al., Fonsecaea pedrosoi (Brumpt) Negroni and Phialophora verrucosa Medlar. The identifications were based on the results of the analyses and on the comparison with CBS (Centraal Bureau voor Schimmelcultures) reference strains. This investigation revealed the saprophytic existence of species known as agents of chromoblastomycosis and phaeohyphomycosis. These diseases are considered autochthonous in the studied area.
  • Linhagens de Lentinula edodes inibem fungos fitopatogênicos e o vírus da estomatite vesicular, sorotipo Alagoas Environmental And Soil Microbiology

    Sasaki, Selma H.; Linhares, Rosa E.C.; Nozawa, Carlos M.; Montalván, Ricardo; Paccola-Meirelles, Luzia D.

    Resumo em Português:

    Quatro linhagens de Lentinula edodes (Le10, 46, K2, ASSAI) foram avaliadas quanto ao seu efeito inibitório sobre quatro espécies de fungos filamentosos de importância agrícola (Helminthosporium euphorbiae, Helminthosporium sp., Fusarium solani, Phomopsis sojae) e sobre o sorotipo Alagoas vírus da estomatite vesicular (VSA). Foi observado que as linhagens de L. edodes estudadas apresentaram variabilidade quanto ao seu efeito, tanto sobre os fungos filamentosos quanto sobre o vírus VSA. As linhagens K2 e Le10 apresentaram-se antagônicas sobre os fungos e as linhagens 46 e K2 foram eficientes na inibição do vírus VSA. Os resultados obtidos permitem ampliar a lista de efeitos benéficos de algumas linhagens de L. edodes no controle e prevenção de vírus patogênicos animais e de fungos filamentosos.

    Resumo em Inglês:

    Four Lentinula edodes strains (Le10, 46, K2, Assai) were assessed for their antagonistic effect on four filamentous fungus species of agricultural importance (Helminthosporium euphorbiae, Helminthosporium sp, Fusarium solani and Phomopsis sojae) and on Alagoas serotype of Vesicular Stomatitis Virus (VSA). The L. edodes strains studied had variable effects on the filamentous fungi and on VSA. The K2 and Le10 strains were antagonistic on the fungi assessed and the 46 and K2 strains were efficient on the Vesicular Stomatitis Virus. The results widened the list of beneficial effects of L. edodes on the control and prevention of animal pathogenic virus and filamentous fungi.
  • Distribuição de vírus RNA de fita dupla em cepas de Aspergillus flavus toxigênica e não toxigênica Virology

    Silva, Valéria N.; Durigon, Edison Luiz; Pires, Maria de Fátima Costa; Lourenço, Alexandre; Faria, Maria Jacinta de; Corrêa, Benedito

    Resumo em Português:

    Neste trabalho, foram estudadas duas cepas de Aspergillus flavus não toxigênica (NRRL 6550) e toxigênica (NRRL 5940). As cepas foram cultivadas durante 44 dias objetivando a pesquisa de partículas semelhantes a vírus (VLPs), por meio de microscopia eletrônica e pesquisa de ácidos nucléicos, através de eletroforese. Somente as cepas toxigênicas continham "VLPs", as quais apresentaram 3 segmentos de RNA de fita dupla. Um aumento no número de "VLPs" foi observado com 12 dias de cultivo, período correspondente a fase exponencial de crescimento de A. flavus.

    Resumo em Inglês:

    Two strains of Aspergillus flavus, non-toxigenic NRRL 6550 and toxigenic NRRL 5940, were studied over a period of 44 days, in order to detect the presence of virus-like particles (VLPs) by means of electron microscopy (EM) and nucleic acids electrophoresis. Only the toxigenic strain contained VLPs, presenting three-segmented dsRNA. An increase in VLPs number was observed during the exponential phase of fungal growth, up to day 12 of culture; after this, higher levels of aflatoxin production in toxigenic NRRL 5940 mycelia occurred in parallel with decreased VLPs replication.
  • Fungos anemófilos da região de Cubatão, São Paulo, Brasil Micology

    Schoenlein-Crusius, Iracema H.; Trufem, Sandra F.B.; Grandi, Rosely A.P.; Milanez, Adauto I.; Pires-Zottarelli, Carmen L.A.

    Resumo em Português:

    De março/1993 a março/1995, foram isolados fungos anemófilos no Vale do Rio Moji (afetada pela poluição aérea causada por indústrias de fertilizantes, metalúrgicas, fábricas de cimento e indústrias de produtos químicos, entre outras) e no Vale do Rio Pilões (área menos afetada pela poluição aérea), no município de Cubatão, Estado de São Paulo, Brasil, expondo placas-de-Petri, contendo meio de batata-dextrose-ágar, durante cinco minutos a aproximadamente um metro de altura do solo. Após cinco dias de incubação à 20ºC as colônias de fungos filamentosos foram purificadas e identificadas, resultando na obtenção de 39 táxons, três isolamentos não identificados de Fusarium e algumas culturas não esporulantes. O total de 28 táxons, um isolado não identificado de Fusarium e fungos não esporulantes (71 registros) foram isolados do Vale do Rio Moji e 29 táxons, dois isolados não identificados de Fusarium e fungos não esporulantes (72 registros) foram obtidos no Vale do Rio Pilões. De acordo com a freqüência de ocorrências dos fungos, na área poluída foram encontradas 17 espécies comuns, 12 raras e uma constante, ao passo que na outra área ocorreram 19 espécies comuns, 10 raras e duas constantes. Entre os fungos obtidos, pelo menos 12 táxons são reportados como fungos oportunistas, 26 associados a doenças de plantas e oito gêneros à problemas alérgicos. O índice de similaridade de Sörensen entre as micotas, correspondendo a 58%, pode ser considerado baixo, e possivelmente é justificado pela poluição aérea, que distingue principalmente as duas áreas estudadas.

    Resumo em Inglês:

    From March/1993 to March/1995, airborne fungi were isolated from the "Vale do Rio Moji" (highly affected by the air pollution caused by fertilizer industries, steel works, cement factories and chemical products industries, among others) and from the "Vale do Rio Pilões" (less affected by the air pollution), both in the municipality of Cubatão, São Paulo State, Brazil, by exposing Petri dishes with potato dextrose agar medium, placed one meter from the ground, during 5 min. After 5 days of incubation at 20ºC, the colonies of the fungi were purified and identified, resulting in the identification of 39 taxa, three unidentified strains of Fusarium and non-sporulating cultures. A total of 28 taxa, one unidentified strain of Fusarium and non-sporulating fungi (71 records) were isolated in the "Vale do Rio Moji" and 29 taxa, two unidentified strains of Fusarium and non-sporulating fungi (72 records) in the "Vale do Rio Pilões. The airborne mycota of the higher polluted site presented 17 common, 12 rare and only one constant fungal species. In the other site, the airborne mycota was composed by 19 common, 10 rare and two constant fungal species. Among the obtained fungi, at least 12 taxa were reported as opportunistic fungi, 26 have been mentioned related to plant diseases and eight have been associated to allergy problems. The similarity Index of Sörensen between the mycotas, corresponding to 58%, may be considered low, and is probably justified by the air pollution, that mainly distinguish the two studied areas.
  • Proteção por Lactobacillus acidophilus UFV-H2B20 contra o desafio oral experimental com Salmonella enterica subsp. enterica Ser. Typhimurium em camundongos gnotobióticos e convencionais Veterinarian Microbiology

    Moura, Lilian Nobre; Neumann, Elizabeth; Vieira, Leda Quercia; Nicoli, Jacques R.

    Resumo em Português:

    A capacidade de Lactobacillus acidophilus UFV-H2B20 de antagonizar Salmonella enterica subsp. enterica ser. Typhimurium, e de reduzir as conseqüências patológicas para o hospedeiro foram determinadas em animais convencionais e gnotobióticos. Camundongos NIH convencionais receberam diariamente, por via oral, 0,1 ml de uma suspensão contendo em torno de 10(8) ufc de L. acidophilus UFV-H2B20 e os animais sem germes receberam uma única dose de 0,1 ml. Os grupos gnotobióticos e convencionais foram desafiados oralmente com, respectivamente, 10² e 10(5) ufc de S. Typhimurium 7 dias após o início do tratamento. Os grupos controles foram tratados com salina estéril em vez do Lactobacillus. Dados de sobrevida mostraram um efeito protetor contra a bactéria patogênica em ambos os grupos convencional e gnotobiótico tratados com o Lactobacillus. L. acidophilus UFV-H2B20 colonizou o trato digestivo dos camundongos gnotobióticos e o número de células víaveis flutuou entre 10(9) e 10(10) ufc/g de fezes. Em ambos os grupos experimental e controle, S. Typhimurium se estabeleceu rapidamente numa faixa de 10(8) a 10(10) ufc/g de fezes e se manteve em níveis elevados até os animais morreram ou serem sacrificados. Em conclusão, o tratamento prévio de camundongos com L. acidophilus UFV-H2B20 protege os animais contra a infecção experimental com S. Typhimurium mas essa proteção não se deve à uma redução das populações patogênicas nos intestinos.

    Resumo em Inglês:

    The ability of Lactobacillus acidophilus UFV-H2B20 to antagonize Salmonella enterica subsp. enterica ser. Typhimurium and to reduce the pathological consequences for the host was determining using conventional and gnotobiotic animals. Conventional NIH mice received daily by gavage a 0.1 ml suspension containing about 10(8) cfu L. acidophilus UFV-H2B20 and germfree animals received a single 0.1 ml dose. The gnotobiotic and conventional groups were infected orally with 10² and 10(5) cfu of S. Typhimurium, respectively, 7 days after the beginning of treatment. Control groups were treated with sterile saline instead of Lactobacillus. Survival data showed a protective effect against the pathogenic bacteria in both conventional and gnotobiotic Lactobacillus-treated mice. L. acidophilus UFV-H2B20 colonized the digestive tract of gnotobiotic mice and the number of viable cells ranged from 10(9) to 10(10) cfu/g of faeces. In both experimental and control gnotobiotic animals, S. Typhimurium became rapidly established at a level ranging from 10(8) to 10(10) cfu/g of faeces and remained at high levels until the animals died or were sacrificed. In conclusion, the previous treatment of mice with L. acidophilus UFV-H2B20 protects the animals against the experimental infection with S. Typhimurium but this protection was not due to the reduction of the pathogenic populations in the intestines.
  • Sorodiagnóstico de sarampo: produção e avaliação da técnica de ELISA IgM IAL Medical Microbiology

    Hoshino-Shimizu, Sumie; Vaz-de-Lima, Lourdes Rehder de Andrade; Oliveira, Maria Isabel de; Pereira, Carlos Augusto; Moura, Anísio de; Mendonça, Ronaldo Zucatelli

    Resumo em Português:

    Recentes epidemias de sarampo em diferentes países induziram aumento de sorodiagnóstico do sarampo, inclusive em laboratórios de saúde pública brasileiros. Desta forma, desenvolvemos uma técnica de ELISA IgM IAL, utilizando antígenos de vírus do sarampo obtidos de células cultivadas em microcarregadores, com o objetivo de fornecer "kits" de reagentes para diferentes laboratórios. Foi produzida uma partida de reagente para esta técnica imunoenzimática, e os parâmetros diagnósticos foram avaliados em comparação com dados clínicos e de ensaio de referência (ELISA de captura IgM). O reagente foi estudado em um painel positivo tendo 70 soros de pacientes com sarampo e painel negativo com 132 soros de pacientes com doenças não relacionadas e sem história de sarampo recente ou vacinação. A técnica de ELISA IgM IAL demonstrou sensibilidade de 97,1% e 98,6%, especificidades de 97%, e índices kapa de concordância de 0,94 e 0,95 (p < 0,05). O perfil de anticorpo IgM de sarampo da fase aguda foi também semelhante ao do ensaio de referência. Foi proposto ainda um sistema prático de análise para o controle de qualidade de reagentes com bases nos achados de validadação do reagente. Nossos achados sugerem que partidas de reagentes do vírus do sarampo podem ser produzidas sucessivamente e utilizadas em laboratórios de saúde pública para sorodiagnóstico de rotina ou inquérito soroepidemiológico de população.

    Resumo em Inglês:

    Recent measles outbreaks in different countries led to an increase of laboratory measles diagnosis. Thus, we developed the IgM-Measles ELISA IAL, using measles virus antigens obtained from cell cultured in microcarriers in order to supply reagent kits to Brazilian public health laboratories. A batch of antigenic reagent was produced and evaluated in the enzyme immunoassay in comparison with clinical diagnosis and with as reference assay (IgM Capture ELISA CDC) data. This study was performed in a positive panel with 70 serum samples from patients with measles, and a negative panel with 132 samples from patients with unrelated diseases and without recent measles or vaccination history. In relation to other diagnostic methods, the IgM ELISA IAL presented sensitivity higher than 97.1%, specificity and precision of 97%, and agreement kappa (k) index higher than 0.94 (P < 0.05). Moreover, the IgM antibody profile from measles acute phase revealed by the assay was similar to the reference assay. A practical analysis system for checking the quality of new reagent batches was proposed based on the diagnostic features and agreement kappa index. Our findings suggest that measles antigenic reagents can be produced with reliable quality control system, and supplied to public health laboratories for routine serodiagnosis or population surveys.
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