Resumo em Português:

Objetivo: Investigar a aplicabilidade da técnica de imunoensaio enzimático de multiplicação (enzyme-multiplied immunoassay technique - EMIT) para dosagem de ciclosporina A (CsA) nas amostras de sangue absorvido em papel-filtro (STAP). Material e método: Realizaram-se determinações de CsA utilizando-se técnica de EMIT em 110 amostras; 24 eram de pacientes transplantados cardíacos e 86, dos pacientes transplantados renais. Todos faziam uso da CsA por via oral. Exatamente 12 horas após a tomada da CsA, coletou-se o sangue e prepararam-se as amostras de STAP. As amostras de STAP foram estocadas à temperatura ambiente por períodos de 15 e 30 dias, e as amostras de sangue total foram estocados a ± 4ºC, por um tempo inferior a 48 horas, para o teste. Resultados: O coeficiente de correlação entre a técnica que utiliza como amostra sangue total e a amostra de STAP realizada 15 dias após a preparação foi de 0,963, e de 30 dias foi de 0,972 (p < 0,0001). A correlação entre as amostras de STAP de 15 e 30 dias foi de 0,968 (p < 0,0001). A análise de variância não-paramétrica de Friedman para os três grupos comparados revelou que ela não foi estatisticamente significante (p > 0,005). Conclusões: A técnica de STAP pode ser utilizada rotineiramente por ser estável, reprodutível e prática. Considerando-se a dimensão continental de muitos países, este método pode ser bastante útil para a otimização da terapia.

Resumo em Inglês:

Objective: The purpose of this work is to research the applicability of the Enzyme-multiplied imunoassay technique (EMIT) to measure Ciclosporin A (CsA) in the whole blood sample absorbed in filter paper (STAP). Methods: It was performed dosage of CsA in 110 blood samples: 24 samples in patients with heart transplantation and 86 patients of renal transplantation. All of them were using CsA orally. Just 12 hours after the last CsA intake, the blood was collected and the STAP samples were prepared. The STAP samples were stored at room temperature for a period of 15 and 30 days. The whole blood samples were stored at about 4ºC for a time lower than 48 hours to the test. Results: The coefficient of correlation between the whole blood and the STAP samples of 15 days was 0.963 and 30 days was 0.972 (p < 0.0001). The coefficient correlation between the STAP samples measured after 15 and 30 days was 0.968 (p < 0.0001). The Friedman non-parametrical variance analysis for the three groups compared revealed it was not statistically significant (p > 0.005). Conclusions: The STAP technique can be used in the clinic practice, because it is stable, reproducible and practical. Considering the wide continental dimension of many countries, such method can be quite useful to optimize the therapy.

Resumo em Português:

O meropenem e o imipenem representam os ß-lactâmicos com maior espectro e potência antimicrobiana, e são os únicos carbapenêmicos disponíveis para uso clínico no Brasil, nos Estados Unidos e na Europa. O meropenem apresenta atividade in vitro superior contra gram-negativos, enquanto que o imipenem é discretamente mais ativo contra gram-positivos. Os objetivos deste estudo são comparar as atividades in vitro destes dois carbapenêmicos e avaliar a necessidade de o laboratório clínico testá-los em sua rotina. Os resultados da avaliação dos padrões de sensibilidade de 2.144 bacilos gram-negativos pela técnica de microdiluição em caldo foram analisados. Contra enterobactérias, o meropenem apresentou atividade pelo menos oito vezes maior que o imipenem. Contra Pseudomonas aeruginosa, o meropenem (CIM50 de 1mig/ml) também apresentou atividade superior à do imipenem (CIM50 de 2mig/ml), e contra Acinetobacter baumannii, a ação dos dois é equivalente (CIM50 de 1mig/ml para ambos). Somente 2,7% das amostras avaliadas apresentaram resultados discordantes entre os dois carbapenêmicos em termos de categoria de sensibilidade - isto é, foram sensíveis a um e resistentes ao outro. Quarenta e seis amostras (2,14%) foram sensíveis ao meropenem e resistentes ao imipenem, enquanto que somente 12 amostras (0,55%) apresentaram sensibilidade ao imipenem e resistência ao meropenem. A grande maioria dos resultados discordantes (91,4%) ocorreu entre as amostras de bacilos gram-negativos não-fermentadores da glicose (BGN-NF). Entre as 1.350 enterobactérias testadas houve apenas cinco resultados discordantes (0,37%), enquanto que entre os BGN-NF ocorreram 53 (6,67%). Além disso, em cerca de 80%, as amostras foram sensíveis ao meropenem e resistentes ao imipenem. Os resultados deste estudo indicam que o laboratório de microbiologia pode testar apenas um dos carbapenêmicos contra enterobactérias, considerando para o outro o mesmo resultado. É importante que os resultados dos dois carbapenêmicos sejam colocados no relatório, para que o médico possa escolher aquele que achar mais adequado. Por outro lado, para os BGN-NF, o laboratório deve realizar o teste de sensibilidade com os dois carbapenêmicos separadamente.

Resumo em Inglês:

Meropenem and imipenem are the most active and potent ß-lactams against gram-negative bacteria and the only carbapenems commercially available in Brazil, USA, and Europe. Meropenem has higher in vitro activity against gram-negative bacteria, while imipenem has slightly higher in vitro activity against gram-positive. The objectives of this study are to compare the in vitro activities of these carbapenems and to evaluate the necessity of susceptibility testing both compounds at the routine of the microbiology laboratory. The broth microdilution results of 2,144 gram-negative bacilli were analyzed. Against Enterobacteriaceae meropenem was at least eight-fold more potent than imipenem. Against Pseudomonas aeruginosa meropenem (MIC50, 1mug/ml) was also more potent than imipenem (MIC50, 2mug/ml), and against Acinetobacter baumannii both carbapenems presented similar in vitro activities (MIC50, 1mug/ml for both). Only 2.7% of the isolates presented discrepant category results between the carbapenems; i.e. susceptible to one and resistant to the other. Forty-six isolates (2.14%) were susceptible to meropenem and resistant to imipenem; while only 12 isolates (0.55%) were susceptible to imipenem and resistant to meropenem. The vast majority of discordant results (91.4%) occur among non-fermentative bacilli (NF-BGN). Five discordant results were detected among 1,350 Enterobacteriaceae evaluated (0.37%); while 53 discrepant results were detected among 794 NF-BGN (6.64%). Isolates showing susceptibility to meropenem and resistance to imipenem account for 80% of the discrepant results. The results of this study indicate that the microbiology laboratory may susceptibility test only one of the carbapenems for Enterobacteriaceae and use the same category result for the other one. It is important that the results for both carbapenems are sent to the physicians in order for them to be able to choose the most appropriated for the case. On the other hand, for NF-BGN the laboratory should susceptibility test both carbapenems.

Resumo em Português:

O teste de carga viral foi concebido para acompanhar a evolução e o tratamento do paciente com diagnóstico confirmado de HIV-1. Contudo, sua especificidade diagnóstica não foi ainda avaliada em pessoas que apresentam um teste sorológico negativo. Mesmo assim, ele tem sido erroneamente utilizado para o diagnóstico da infecção primária pelo HIV-1. Este trabalho relata quatro pacientes em que a carga viral plasmática NucliSens (Organon Teknika) foi repetidamente positiva na ausência de anticorpos para HIV e chama atenção para o fato de que a carga viral abaixo de 10 mil cópias/ml é de difícil interpretação, como tem sido assinalado em numerosos artigos, em que foram utilizadas outras metodologias.

Resumo em Inglês:

The plasma viral load test for HIV-1,a exquisitely high sensitive assay, were neither developed nor evaluated for the diagnosis of primary HIV infection; therefore, their diagnostic specificity is not well delineated when applied to persons who are negative for HIV antibody. This article reported four cases of false positive results obtained by using NucliSens viral load assay (Organon Teknika) and emphasize the importance that low positive plasma viral load (< 10 000 copies/ml) may be difficult to interpret how has been assinalated in numerous articles in the medical literature, using other methodologies.

Resumo em Português:

O mieloma múltiplo consiste na proliferação de células plasmáticas. Raramente apresenta, ao diagnóstico, morfologia de células imaturas com citoplasma amplo basofílico, sugerindo quadro leucêmico inicial. O objetivo deste artigo é mostrar a importância da imunofenotipagem na elucidação destes achados morfológicos pela expressão simultânea de antígenos plasmocíticos, mielomonocíticos e de linhagem linfóide T, confirmando a hipótese diagnóstica de mieloma mielomonocítico. Apresentamos dois casos de mieloma mielomonocítico através de análise morfológica (coloração pancromática de Romanovsky), citoquímica (PAS, peroxidase, sudan black, alfanaftil acetato esterase e oil red), citogenética e imunofenotipagem por citometria de fluxo em sangue periférico e medula óssea, de acordo com as técnicas recomendadas. Foram utilizados os anticorpos monoclonais: CD2, CD3, CD4, CD5, CD7, CD10, CD13, CD15, CD19, CD20, CD25, CD33, CD34, CD38, CD45, CD56, CD71, HLA-DR, TCR alfa/beta, TCR gama/delta, kappa, lambda, IgM e IgD de superfície e intracitoplasmática, assim como MPO, CD79a e CD3 intracitoplasmático. Utilizamos as técnicas de banda G e FISH nas análises citogenéticas. Foram observadas alterações clonais em ambos os casos, sendo uma com trissomia do cromossomo 8 e outro caso com deleção do braço longo do cromossomo 7 e do braço curto do cromossomo 6. Os percentuais de positividade encontrados nos anticorpos monoclonais CD4, CD7, CD10, CD13, CD14, CD15, CD33, CD38 e CD56 de forte expressão, HLA-DR, TCR gama/delta, MPO e IgM intracitoplasmático no histograma de volume x complexidade e no histograma de CD45 x complexidade permitiram concluir este diagnóstico em ambos os casos, demonstrando a importância do método.

Resumo em Inglês:

Multiple myeloma is a malignant disease caused by unregulated proliferation of mature plasma cells. Very few cases present as blast cells in the bone marrow with intense basophylic cytoplasm and monocytoid morphology, suggesting acute leukemia. This paper presents immonophenotypying in 2 cases with the diagnostic hypoteses of myelomonocytic myeloma, showing the simultaneous expression of plasmocytic, myelomonocytic and T cell antigens. Immonophenotypying was done in peripheral blood and bone marrow with classical techniques, using the following monoclonal antibodies: CD2, CD3, CD4, CD5, CD7, CD10, CD19, CD20, CD25, CD33, CD34, CD38, CD41, CD45, CD56, CD71, HLA-DR, TCR alpha/beta, DCR gama/delta, kappa, lambda, surface IGM and IGG, intracitoplasmic kappa, lambda, IGM and IGD, MPO, CD79a and intracitoplasmic CD3. Morphology was evaluated with pan-chromatic Romanovsky stain and cytochemical stains - PAS, peroxidase, Sudan Black B, alpha-naphtil acetate esterase and Oil Red O. Cytogenetic analysis was done with banding techniques and FISH. Clonal cytogenetic alterations were present in both cases, one with chromosomo 8 trysomy and the other with long arm delection of chromosome 7 and short arm delection of chromosome 6. The percentage positivity of specific markers were clean cut making the diagnosis clear.

Resumo em Português:

A capacidade de fertilização dos espermatozóides é dependente, entre outros fatores, da sua motilidade e da integridade de sua membrana. As substâncias oxidativas, quando produzidas em excesso no organismo, em particular no líquido seminal, comprometem a motilidade do espermatozóide e a sua viabilidade em promover a fertilização. Um dos agentes oxidantes capazes de promover estes efeitos é o óxido nítrico (ON), responsável pela mediação em vários processos fisiológicos. O uso de terapias antioxidantes no tratamento de alguns tipos de infertilidade deve ser feito com cautela, pois uma inibição muito severa poderá comprometer as taxas de ON e, conseqüentemente, irá influenciar outros mecanismos fisiológicos dependentes de sua concentração.

Resumo em Inglês:

The capacity of fertilization of the sperm is dependent, among other factors, of the mobility and integrity of its membrane. The oxidative substances when produced in excess in the organism, in matter in the seminal liquid, they commit the mobility and viability of the sperm in their capacity of fertilization. One of the oxidative substance capable to promote these effects is the nitric oxide (NO), responsible for the mediation in several physiologic processes. The use of antioxidant therapies in the treatment of some infertility types should be made with caution because it can commit the nitric oxide's levels and consequently, it will influence other physiologic mechanisms dependents of its concentration.

Resumo em Português:

A análise quantitativa das AgNORs e a imunomarcação para o PCNA têm sido empregadas de forma independente na avaliação da proliferação celular de vários tumores, e, em muitos casos, têm mostrado correlação positiva. Entretanto poucos trabalhos têm avaliado, em um mesmo corte histológico, a relação entre PCNA e AgNOR. O objetivo deste trabalho foi otimizar a técnica de dupla marcação com a finalidade de se estudar simultaneamente a correlação entre PCNA e AgNOR no carcinoma adenóide cístico (CAC) de glândulas salivares menores. Foram selecionados 16 casos de CAC classificados de acordo com o subtipo histológico. A análise quantitativa das AgNORs foi feita por meio de análise de imagens. As AgNORs foram contadas em cem núcleos PCNA positivos e em cem núcleos PCNA negativos. O número médio de AgNOR nos núcleos PCNA positivos foi 2,14 ± 0,77, e, nos núcleos PCNA negativos, 1,97 ± 0,79, entretanto esta diferença não se mostrou estatisticamente significante (p = 0,2537). Nosso trabalho não mostrou correlação entre o número de AgNOR e a imunomarcação para o PCNA em CAC quando estes marcadores foram demonstrados simultaneamente através da dupla marcação. Quanto à técnica, o uso do microondas melhorou a coloração da AgNOR, permitindo uma redução no tempo de incubação com a solução de prata e uma melhor individualização das AgNORs, o que facilitou os procedimentos de contagem.

Resumo em Inglês:

No previous studies have simultaneously assessed the relationship between AgNORs and PCNA expression in salivary gland tumors. We describe a method to demonstrate both PCNA and AgNORs in the same slice of routinely processed tissue. We also evaluated the effect of microwaving on the AgNORs reaction. Sixteen cases of adenoid cystic carcinoma (ACC) were selected and the double staining technique was performed in order to quantify the number of AgNORs in PCNA-positive and negative cells. The best results were obtained when AgNOR was performed after the immunostaining. The microwave oven heating improved the AgNORs staining. Our results did not show a statistical difference between the mean number of AgNORs in PCNA-negative and positive cells. There is no association between PCNA and AGNOR in ACC when they are assessed by double-staining.

Resumo em Português:

O termo "atipia de células escamosas de significado indeterminado" (Ascus) foi introduzido, em 1988, pelo Sistema Bethesda. A conduta clínica nesses casos é controversa. Outra dificuldade é a falta de uniformização de critérios citológicos dessa anormalidade, resultando em taxas de ocorrência discrepantes. Neste trabalho, estudamos 111 casos, incluídos nesta categoria citológica, concorrendo para uma taxa de 2,4% detectada num universo de 4.634 exames citológicos no período de um ano. Todas as pacientes foram avaliadas colposcopicamente, concomitantemente à colheita do material citológico cervicovaginal. Destas, 80 (72%) apresentavam anormalidades ao exame colposcópico, sendo realizadas 38 biópsias dirigidas (34%). A histopatologia mostrou cervicite crônica e/ou hiperplasia simples do epitélio malpighiano em 39% dos exames, com os 61% restantes apresentando lesões intra-epiteliais escamosas, variando de baixo grau em 20 casos (52%) a alto grau em três (9%). Predominaram os casos de infecção pelo HPV (39%). Estas taxas comprovam a estreita relação de Ascus com lesões pré-neoplásicas, inclusive aquelas de alto grau. Diante do significado clínico de Ascus estabelecido neste estudo, consideramos ser indicada biópsia dirigida em todos os casos de anormalidade colposcópica concomitante, sendo a histopatologia o meio mais fidedigno na avaliação destes casos.

Resumo em Inglês:

The category atypical squamous cells of undetermined significance (Ascus), it was introduced in 1988 by the Bethesda System. The clinical conduct in such cases is controversial. Another difficulty is the lack of uniformity as to cytological criteria of this abnormality and as a result we have different rates of the ocurrence. The total number of Ascus in the present series was of 2.4% in respect to 111 cases, detected in an universe of 4,634 cytologic exams in the period of one year. All patients have been submitted to a colposcopic evaluation at the same time as the cytologic samples has been collected. Among those patients whose smears have been presented Ascus, 80 (72%) showed abnormalities to the colposcopic study and 38 biopsies (34%) were performed. The histopatologic evaluation detected chronic cervicitis and/or simple hyperplasia of the malpighian epithelium in 39% of the cases, being 61% of the remaining specimens presented proliferative lesions which varied from a low grade in 20 cases (52%) to a high grade in 3 cases (9%). Those cases of infection by HPV have been predominant (39%). The frequency of Ascus in our study is in agreement with the rates reported in literature. Take into account the percentages described above is evident the cytological meaning of Ascus wich showed its close relationship with squamous intraepithelial lesions at the hystopathologic exam including high grade lesions as well. Thus, the biopsy colposcopic in patients having Ascus would be recommended and it is in fact the most trustworthy means of evaluating those cases.

Resumo em Português:

A hiperplasia embrionária epitelial da cápsula de Bowman (HEECB) é uma rara alteração pós-diálise de rins em fase final de evolução, com poucas descrições na literatura mundial. Destaca-se a sua importância por simular histologicamente a nefroblastomatose universal, uma entidade pré-neoplásica precursora do tumor de Wilms. Neste artigo, relatamos o caso incomum de um paciente de 12 anos de idade, cujos rins, após 32 meses de terapia dialítica, apresentaram alterações compatíveis com HEECB.

Resumo em Inglês:

Embryonal hiperplasia of Bowman's capsule epithelium is a rare after dialysis alteration of kidneys in final phase of evolution, which has few descriptions in the medical literature. It stands out its importance for simulating histologically the universal nephroblastomatosis, a precursor entity of the Wilms' tumor. In this article, we report a 12 year-old patient's unusual case undergoing dialysis during thirty-two months, whose kidneys presented features consisted with embryonal hiperplasia of Bowman's capsule epithelium.

Resumo em Português:

Existem poucos trabalhos na literatura a respeito dos mecanismos moleculares envolvidos na patogênese do carcinoma vulvar. Estudos que servem como base para a compreensão destes mecanismos são discutidos de forma compreensiva neste artigo de revisão. As alterações genéticas, a associação com o papilomavírus humano (HPV) e outros possíveis fatores envolvidos na carcinogênese dos tumores vulvares são abordados.

Resumo em Inglês:

There are few publications in the literature about the molecular mechanisms involved in the pathogenesis of vulvar cancer. Previous and recent studies that pointed out the basic mechanisms of carcinogenesis at this site are discussed in a comprehensive way by this review article. Genetic disturbs, association with human papillomavirus (HPV) and other possible factors involved in vulvar carcinogenesis are discussed.