Resumo em Português:

A esporulação de Alternaria solani in vitro pode ser escassa e tende a reduzir após sucessivas repicagens. Conduziram-se vários experimentos para avaliar o efeito da umidade, injúria da colônia, qualidade de luz e fotoperíodo, bem como do meio de cultura na produção de conídios. Adaptou-se a técnica bifásica para induzir esporulação, por meio de injúria de micélio e desidratação do meio de cultura. Obtiveram-se melhores resultados quando colônias cresceram em meio V8 a 25ºC, no escuro, sob agitação durante sete dias; a massa de micélio foi triturada e a suspensão depositada em meio BDA (pH 6,5) em placas de Petri, incubando-se a 25 ± 2ºC, sob luz negra com 12 h de fotoperíodo. Validou-se o protocolo para 30 isolados de A. solani distintos quanto ao hospedeiro, local de origem, idade e forma de armazenamento. Quantificaram-se a produção, germinação e infectividade de conídios. Dos 30 isolados, 75% esporularam e a germinação mínima de conídios foi de 68%. Todos os isolados foram patogênicos em seus respectivos hospedeiros. Avaliou-se, também, o efeito de repicagens sucessivas na esporulação. Todos os isolados produziram conídios após seis repicagens sucessivas.

Resumo em Inglês:

Sporulation of Alternaria solani can be scarce and is often reduced when the fungus is cultivated in vitro. A series of experiments were conducted to assess the effects of moisture, mycelial wounding, light quality and photoperiod, and culture media on conidial production. A procedure to induce sporulation based on mycelial wounding and dehydration was adapted and validated. Best results were obtained when fungal colonies were grown in V8 medium at 25ºC in the dark with agitation for seven days; the mycelium mass was ground, poured into potato dextrose agar (pH 6.5) in plates, and incubated at 25 ± 2ºC under near ultraviolet light and 12 h-photoperiod. The procedure was validated with 30 isolates of A. solani from different hosts, sampling locations, ages, and storage conditions. Conidial production, germination, and infectivity were quantified. Seventy-five percent of the isolates sporulated and the lowest germination rate was 68%. Inoculations of conidial suspension of all isolates resulted in lesions on tomato and potato plants. The effect of subculturing on A. solani sporulation was also assessed. After six subcultures, every seven days, there was no reduction in sporulation of colonies that were induced with the protocol.

Resumo em Português:

A combinação do uso do citômetro de fluxo (FCM) e de anticorpo policlonal (imuno-FCM) foi comparada à microscopia de imunofluorescência (IF) e ao plaqueamento em meio de cultura semi-seletivo, para a detecção de Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli (Xap) em sementes de feijão. Concentrações de Xap variando de 10³ a 10(7) CFU/mL foram adicionados aos extratos de sementes. Um método de separação pelo citômetro de fluxo foi desenvolvido para a detecção de Xap em extratos de semente e posterior confirmação por PCR. Para avaliação da viabilidade das células foram usadas sondas fluorescentes, iodeto de propídio (PI)/carboxi diacetato de fluoresceína (cFDA) e PI/SYTO 9 e também, a combinação de imuno-FCM e PI. Em meio semi-seletivo e IF foram detectadas 10³-10(6) UFC/mL e no FCM 10(4)-10(6) UFC/mL, em extratos de sementes artificialmente infestados. Xap somente foi detectada em extratos de sementes por PCR, após o processo de separação pelo FCM. Foi possível pelo FCM a quantificação e identificação de células viáveis (verde fluorescente) e células mortas (vermelho fluorescente) de Xap, pelas sondas cFDA/SYTO 9 e PI, respectivamente. A combinação de immuno-FCM e PI poderá ser uma técnica promissora e segura para a detecção deste patógeno em sementes.

Resumo em Inglês:

Flow cytometric analysis of immuno-stained cells (immuno-FCM) was compared to immunofluorescence microscopy (IF) and dilution plating on a semi-selective medium, for quantitative detection of Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli (Xap) in bean seed extracts. Cell concentrations of Xap between 10³-10(7) CFU/mL were added to healthy bean seed extracts. A flow cytometry sorting procedure was developed to separate immuno-stained Xap cells from crude seed extracts and confirming by PCR. FCM was evaluated for direct viable counting (DVC) of Xap using combinations of propidium iodide (PI) and carboxy fluorescein diacetate (cFDA) or PI and SYTO 9 and also the combination of immuno-FCM and PI. Dilution plating and IF allowed detection of Xap in bean seed extracts in a range of 10³-10(6) CFU/mL and immuno-FCM from 10(4)-10(6) CFU/mL. Sorted cells could be detected in crude seed extracts by PCR without further extraction. FCM also allowed quantification of viable cells of Xap after DVC procedures; the red fluorescent dye propidium iodide was used to identify dead cells in combination with the green fluorescent dyes cFDA or SYTO 9, these identifying live cells. The combination of immuno-FCM and PI could be more promising and reliable to detect this pathogen in seeds.

Resumo em Português:

Este trabalho foi realizado com os objetivos de avaliar a influência de diferentes doses de nitrogênio (N) e de potássio (K), fornecidos via solução nutritiva, na intensidade da mancha de Phoma e determinar a quantidade de matéria seca e a concentração de macro e micronutrientes em folhas e ramos de mudas do cafeeiro. Os tratamentos consistiram em 5 doses de K (4, 5, 6, 7 e 8 mmol/L) combinadas com 5 doses de N (3, 7, 11, 15 e 19 mmol/L) em esquema fatorial, constituindo 25 tratamentos, com 3 repetições. Esse experimento foi repetido três vezes a 20ºC. Com o aumento das doses de N, houve aumento linear em 34,8%, para AACPI (Área abaixo da curva de progresso da incidência) e 34,3%, para AACPS (Área abaixo da curva de progresso da severidade). Aumentando as doses de K, verificou-se redução de forma quadrática, tanto para AACPI quanto para AACPS até a dose de 7 mmol/L, a partir da qual ocorreu aumento da doença. A matéria seca das mudas de café aumentou linearmente com o aumento das doses de N. Com o aumento das doses de N, observou-se aumento de N na parte aérea. As doses de potássio influenciaram significativamente os teores de N, K, Ca, S e B nas folhas e ramos. Assim, a nutrição balanceada, além de minimizar alterações nutricionais, pode ser manipulada para reduzir o número de pulverizações com fungicidas neste patossistema.

Resumo em Inglês:

This work was carried out to evaluate different dosages of N and K amended through roots via nutrient solution on the intensity of Phoma spot in coffee seedlings, and to determine the dry matter and the concentration of macro and micronutrients in the aerial part of coffee seedlings inoculated with Phoma tarda. Treatments encompassed 5 dosages of K (4, 5, 6, 7 and 8 mmol/L) combined to 5 dosages of N (3, 7, 11, 15 and 19 mmol/L), in 25 treatments and three replicates. This assay was repeated three times at 20ºC. By increasing the amended N, there was a linear increase of 34.8% for AUIPC (Area under incidence progress curve) and 34.3% for AUSPC (Area under severity progress curve). By increasing the K, there was a square-shaped reduction for both AUIPC and AUSPC. The dry matter of coffee seedlings increased linearly with the increase in the amended N. By increasing the amended N, a corresponding increase in shoot N content was observed. Dosages of potassium significantly influenced the N, K, Ca, S and B contents in the shoot of coffee seedlings. Thus, balanced fertilization, besides minimizing nutritional problems, can be manipulated to reduce the number of fungicide applications in this pathosystem.

Resumo em Português:

O objetivo deste trabalho foi avaliar métodos, doses de manutenção e intervalos de aplicação do acibenzolar-S-metil (ASM) no controle da murcha bacteriana do tomateiro, bem como o seu efeito na densidade populacional do patógeno. Em ensaios conduzidos em casa-de-vegetação e câmara climatizada, o ASM foi aplicado via pulverização foliar e irrigado no solo. A inoculação de Ralstonia solanacearum ocorreu três dias após a segunda aplicação do produto. Para determinar a melhor dose de manutenção e época de aplicação, o ASM foi aplicado em três doses diferentes, com intervalos de aplicação de dez dias. Verificou-se redução significativa na severidade da doença em relação à testemunha não tratada independente do modo de aplicação do produto. As doses de manutenção proporcionaram reduções intermediárias na severidade da doença, diferindo entre si e dos demais tratamentos. Quanto às épocas de aplicação, não houve diferença significativa para o produto aplicado uma ou duas vezes após a inoculação da bactéria desafiante. No ensaio em câmara climatizada, observou-se aumento na altura das plantas tratadas com ASM e correlação negativa entre severidade da doença e crescimento das plantas. A aplicação de ASM reduziu a densidade populacional de R. solanacearum embora não tenha havido diferença significativa, comparada à testemunha.

Resumo em Inglês:

The objective of this work was to evaluate application methods, maintenance doses, and application intervals of acibenzolar-S-methyl (ASM) on the control of tomato bacterial wilt, as well as its effect on pathogen population densities. In experiments carried out in a greenhouse and under controlled temperature, ASM was applied by two methods: foliar spray and soil drench. Ralstonia solanacearum was inoculated three days after the second application of ASM. To determine the best maintenance dose and application interval, ASM was applied using three different doses at ten-day intervals. There was a significant reduction in disease severity, regardless of the application method used. The maintenance doses of ASM provided intermediate severity reductions, differing from each other and from the other treatments. In relation to the number of applications, there was no significant difference when the product was applied one or two times after the inoculation of the challenging pathogen. The experiment conducted under controlled temperature showed an increase in the height of the tomato plants treated with ASM. Additionally, there was a negative correlation between disease severity and plant growth promotion. The application of ASM reduced the population densities of R. solanacearum, although there was no significant difference when compared to the control plants.

Resumo em Português:

Sagitaria montevidensis (sagitária ou aguapé-flecha) é uma das plantas invasoras mais nocivas na cultura do arroz irrigado. O controle desta invasora tem se tornado difícil devido ao surgimento de populações desta espécie resistentes a herbicidas. O uso de micoherbicidas pode vir a ser uma alternativa para contornar este problema. Na Austrália o fungo Plectosporium alismatis já foi detalhadamente investigado como potencial micoherbicida para Damansonium minus e outras espécies da família Alismataceae, entretanto os isolados australianos deste patógeno não eram infectivos a S. montevidensis. Isolados deste fungo obtidos no Brasil foram promissores no controle de S. montevidensis. O presente estudo investigou o efeito de diferentes densidades de inóculo de P. alismatis para o controle de S. montevidensis. Densidades de 2 x 10(6) e 2 x 10(7) conídios.mL-1 causaram em media 86 e 93 % de queima foliar seguido de paralisação do crescimento e morte das plantas. Concluiu-se que uma densidade de inóculo de 2 x 10(6) conídios.mL-1 seria suficiente para o controle de S. montevidensis e que esta densidade deveria ser adotada como padrão em futuros experimentos.

Resumo em Inglês:

Sagitaria montevidensis (arrowhead) is one of the worst weeds of irrigated rice. Control of this weed by means of chemical herbicides has become increasingly difficult on account of herbicide resistance in populations of S. montevidensis. Mycoherbicides are recognized as potential alternative tools against S. montevidensis. In Australia, the fungus Plectosporium alismatis was reported as a possible mycoherbicide for Damansonium minus and other alismataceous weeds, but Australian isolates of the pathogen did not infect S. montevidensis. In contrast, Brazilian isolates of P. alismatis obtained from S. montevidensis have shown promise in controlling the weed. The present study investigated effects of different inoculum densities of a selected strain of P. alismatis on S. montevidensis. Respective densities of 2 x 10(6) and 2 x 10(7) conidia.mL-1 caused an average of 86 and 93 % leaf blight followed by growth cessation and death of the plants. It was concluded that a density of 2 x 10(6) conidia.mL-1 was sufficient to control S. montevidensis and that this density should be adopted as standard in future experiments.

Resumo em Português:

A murcha de Fusarium causada por Fusarium oxysporum f.sp. vasinfectum (FOV) provoca perdas no rendimento de algodão principalmente nos estados do Paraná e São Paulo. O controle dessa doença pode ser obtido por meio de resistência varietal, e para este fim, o conhecimento da diversidade genética dentro da população do patógeno é um pré-requisito. Estudou-se a diversidade de 15 isolados de FOV coletados de diversos estados brasileiros, juntamente com um isolado de F. solani da soja para fins de comparação, com técnicas moleculares. Os resultados de ERIC e REP-PCR, RAPD e PCR-RFLP de rDNA foram comparáveis e demonstraram existência de variabilidade genética entre isolados de FOV inclusive aqueles provenientes de regiões geograficamente diferentes. Os resultados indicam a necessidade de utilização de isolados que representem a diversidade genética da população nos trabalhos de melhoramento genético visando desenvolver cultivares resistentes a fusariose.

Resumo em Inglês:

Fusarium wilt of cotton caused by Fusarium oxysporum f.sp. vasinfectum (FOV) causes yield losses, especially in the States of São Paulo and Paraná. The disease can mainly be controlled by the use of resistant cultivars, and knowledge regarding the genetic diversity among isolates of the pathogen has become essential. Diversity among 15 isolates collected from different Brazilian cotton-producing States was studied along with one isolate of F. solani, using molecular techniques. The results of RAPD, PCR-RFLP of rDNA, ERIC and REP-PCR were comparable with each other and indicated the existence of genetic variability among some of the FOV isolates of different geographic origins. This indicates the necessity of using different FOV isolates that represent the genetic diversity of the population, while screening cultivars for genetic resistance against this disease, so that only cultivars that are resistant to isolates from different geographic origins may be used in breeding programs.

Resumo em Português:

Um fungo estromático causador de mancha-de-piche, associado a Cardiospermum grandiflorum no Parque Nacional do Vale do Catimbau (Buíque PE), foi coletado e identificado como Phyllachora serjaniicola. Este é o primeiro relato deste fungo em C. grandiflorum.

Resumo em Inglês:

A stromatic tar-spot fungus, found associated with Cardiospermum grandiflorum from the Parque Nacional do Vale do Catimbau (Buíque PE), was collected and identified as Phyllachora serjaniicola. This represents the first report of this fungus on C. grandiflorum.

Resumo em Português:

Clonostachys rosea foi avaliado como promotor de crescimento e no controle da podridão de raiz (Pythium aphanidermatum) em sistemas de fluxo laminar de nutrientes (NFT) e "floating". Na promoção de crescimento, Clonostachys (0, 10³, 10(4), 10(5), 10(6) e 10(7) conídios/mL) foi introduzido na solução nutritiva (SN) e avaliada a massa das plantas. O biocontrole, em sistema NFT, foi avaliado introduzindo Clonostachys na SN (10(6) conídios/mL) i. um dia após o transplantio na ausência do patógeno; ii. três dias antes e no momento da infestação com Pythium e, iii. três dias antes, no momento e três dias após infestação com Pythium. Em sistema "floating", Clonostachys foi introduzido na SN (10(6) conídios/mL) i. quatro dias antes e no momento da infestação com Pythium, e ii. quatro dias antes, no momento e quatro dias após a infestação com Pythium. Nesses experimentos foram determinadas as massas das plantas, e a recuperação do patógeno e antagonista. O antagonista não promoveu o crescimento das plantas, entretanto protegeu-as do subdesenvolvimento causado pelo patógeno no sistema NFT. Não foi observada proteção em sistema "floating". Clonostachys reduziu a incidência do patógeno nas raízes no sistema NFT em 28,6% e 42,8%, quando aplicado duas e três vezes, respectivamente.

Resumo em Inglês:

Clonostachys rosea was evaluated for growth promotion and control of root rot (Pythium aphanidermatum) in hydroponic lettuce in NFT and floating systems. For growth promotion, Clonostachys (0, 10³, 10(4), 10(5), 10(6) and 10(7) conidia/mL) was added in nutrient solution (NS) and the mass of the plants was measured. To evaluate the control of the disease in NFT, Clonostachys was applied to the NS (10(6) conidia/mL) i. one day after transplanting in the absence of Pythium; ii. three days before and simultaneously with Pythium infestation; and, iii. three days before, simultaneously and three days after Pythium infestation. To evaluate the control of root rot in floating system, Clonostachys was added in NS (10(6) conidia/mL) i. four days before, and at the moment of pathogen infestation, and, ii. four days before, simultaneously, and four days after pathogen infestation. Plant mass and the recovery of pathogen and antagonist from the roots were evaluated. Clonostachys did not improve plant growth in the absence of Pythium. In the NFT system Clonostachys protected the plants from yield losses caused by Pythium, but not in the floating system. Pythium recovery from the roots was reduced by 28,6% and 42,8% when Clonostachys was applied two or three times, respectively.

Resumo em Português:

A inoculação de fungos fitopatogênicos em sementes pela técnica da restrição hídrica é relativamente recente. Este trabalho objetivou avaliar o efeito de potenciais osmóticos (-0.4, -0,6 e -0.8) do substrato BDA, modificado por adição de sacarose, em interação com o tempo de exposição (46, 72 e 96 h), na infeção de sementes de trigo por Bipolaris sorokiniana. Foram analisadas a eficiência da infecção e a inibição da germinação durante e após a aplicação dos tratamentos. De acordo com os resultados, períodos de tempo superiores a 48 horas de exposição à colônia fúngica não foram inibitórios a germinação completa das sementes, a qual incrementou linearmente com o aumento do tempo de contato com o inóculo fúngico. A eficiência de infecção não diferiu para os potenciais osmóticos e tempo de exposição, variando de 0,53 a 0,92. No entanto, a capacidade germinativa das sementes após os tratamentos foi significativamente reduzida após o período de 48 horas de exposição das sementes ao substrato modificado contendo a cultura fúngica.

Resumo em Inglês:

Seed inoculation with pathogenic fungi using the water restriction technique is relatively recent. This study aimed to verify the effect of osmotic potentials (-0.4, -0.6 and -0.8 MPa) of PDA substrate modified by the amendment of sucrose in interaction with the period of exposure (48, 72 and 96 h) of wheat seeds to colonies of Bipolaris sorokiniana. Infection efficiency and inhibition of seed germination during and after treatment were the variables analyzed. The results of this study show that an exposure period longer than 48 hours to the fungal colonies did not inhibit full germination of the seeds. The germination rate increased linearly as the exposure period to the fungal colony was increased. Infection efficiency was not affected by osmotic potential and exposure time, varying from 0.53 to 0.92. However, seed germination was significantly reduced after 48 hours of exposure to the fungal colonies.

Resumo em Português:

Os objetivos deste trabalho foram elaborar e validar uma escala diagramática para quantificar a severidade da mancha alvo, causada por Corynespora cassiicola, em folhas de acerola. Foram coletadas folhas apresentando diferentes níveis de severidade da doença no campo. Baseado na lei de estímulo visual de Weber-Fechner, foi elaborada uma escala com os níveis 2, 4, 8, 16, 32 e 48% de área foliar lesionada. A validação da escala diagramática foi realizada por 10 avaliadores, sem experiência na avaliação de doenças. Estes estimaram a severidade da doença em 50 folhas contendo diferentes níveis de sintomas, mensuradas previamente pelo programa Image Tool. A acurácia e a precisão de cada avaliador foram determinadas por meio de regressão linear simples, entre a severidade real e a estimada. A escala proporcionou bons níveis de acurácia e precisão e os erros absolutos concentraram-se na faixa de 10%. Além disso, o coeficiente de determinação (precisão das estimativas) com o auxílio da escala apresentou média de 90% e 78% sem o auxílio da escala, mesmo sendo inexperientes os avaliadores. A escala proposta foi adequada para as avaliações da severidade da mancha alvo nas folhas de acerola.

Resumo em Inglês:

The objective of this work was to design and validate a diagrammatic scale to assess target spot severity, caused by Corynespora cassiicola, in leaves of Barbados cherry. Leaves with different levels of severity were collected in the field. Following the Weber-Fechner visual stimulus Law, a scale was designed with 2, 4, 8, 16, 32 and 48% of diseased leaf areas. Validation was carried out by 10 evaluators, without previous practice in assessing diseases, who estimated the severity on 50 leaves with different levels of symptoms measured by the software Image Tool. The accuracy and precision of each rater was determined by simple linear regression between actual and estimated severity. The scale provided good levels of accuracy and precision and the absolute errors were around 10%. In addition, the coefficient of determination (precision of estimates) presented an average of 90% with the aid of the scale, and 78% without the aid of scale. The proposed scale proved to be adequate for severity assessments of target spot of Barbados cherry.