RESUMO Introdução: Diagnosticar infecções em pacientes da unidade de terapia intensiva (UTI) é vital para implementar terapias apropriadas. A contagem automatizada de granulócitos imaturos (IG) em analisadores hematológicos é rápida e sem custos adicionais. A taxa de IG elevada está associada a infecções. Objetivos: Avaliar IG como indicador de infecção em pacientes adultos da UTI do Complexo Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná (CHC-UFPR) em comparação com culturas de materiais biológicos (padrão-ouro). Material E Métodos: Foram analisadas amostras de 200 pacientes adultos com suspeita de infecção da UTI do CHC-UFPR. As contagens automatizadas de granulócitos imaturos absolutas (IG#) e relativas (IG%) foram realizadas no Sysmex-XN-3000, e as culturas e as hemoculturas, manualmente ou no Bactec-FX. As características de desempenho de teste diagnóstico para IG# e IG% foram avaliadas. Resultados: Os intervalos de referência (IR) obtidos para IG# e IG% foram 0,06 × 103/µl e 0,6%, respectivamente, com sensibilidade para ambos de 74,4% e especificidade de 25,3% para IG# e 26,6% para IG%. A curva receiver operating characteristic (ROC) mostrou valor de corte de 0,33 × 103/µl para IG#, sensibilidade de 28%, especificidade de 82,3% e área sob a curva (AUC) de 0,521. Para IG%, o valor de corte foi de 1,35%, sensibilidade de 44,6%, especificidade de 64,6% e AUC de 0,532. Valores de corte de IG% < 3% aumentaram a especificidade para 88%. Conclusão: IRs de IG% e IG# apresentaram sensibilidade elevada e são úteis na triagem de infecção nos pacientes da UTI. Os VCs demonstrados pelas curvas ROC para IG% e IG# apresentaram elevada especificidade, sendo, portanto, úteis para exclusão de diagnóstico de sepse nos pacientes da UTI. IG mostrou-se útil para triagem e confirmação de infecção em pacientes de UTI.

ABSTRACT Introduction: Diagnosing infections in intensive care unit (ICU) patients is vital to provide appropriate therapies. Hematological analyzers perform automated immature granulocyte counts (IG) quickly and with no additional cost when compared to traditional microbiological cultures. Elevated IG is directly associated with infections and inflammation. Objectives: Evaluate IG as infection marker in adult inpatients at the ICU-Complexo Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná (CHC-UFPR), compared to cultures of biological materials (gold standard). Material And Methods: Samples of 200 adult inpatients at CHC-UFPR ICU with suspected infection were used. Absolute (IG#) and relative (IG%) counts were performed on the Sysmex XN-3000. Cultures and blood cultures were performed either manually or on Bactec FX. Diagnostic accuracy and agreement for IG# and IG% were evaluated. Results: The reference intervals (RI) obtained for IG# and IG% were 0.06 × 103/µl and 0.6%, respectively, with sensitivity for both of 74.4% and specificity of 25.3% for IG#, and 26.6% for IG%. The receiver operating characteristic (ROC) curve showed cut-off value of 0.33 × 103/µl for IG#, sensitivity of 28%, specificity of 82.3%, and area under the curve (AUC) of 0.521. For IG%, cut-off value was 1.35%, sensitivity 44.6%, specificity 64.6%, and AUC 0.532. CV < 3% increased specificity to 88%. Conclusion: RI of IG% and IG# showed high sensitivity and are useful in screening for infection in ICU patients. The CVs demonstrated by the ROC curves showed high specificity and are helpful on the exclusion of sepsis diagnosis in ICU patients. IG was shown to be useful for screening and confirmation of infection in ICU patients.

RESUMEN Introducción: Diagnosticar infecciones en pacientes de la unidad de cuidados intensivos (UCI) es de suma importancia para proporcionar el tratamiento adecuado. El contaje automatizado de granulocitos inmaduros (GI) en analizadores hematológicos es rápido y sin costes adicionales. La elevada tasa de GI está asociada a infecciones. Objetivos: Evaluar GI como indicador de infección en pacientes adultos de la UCI del Complexo Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná (CHC-UFPR) en comparación a culturas de materiales biológicos (estándar de oro). Material Y Métodos: Se analizaron muestras de 200 pacientes adultos con sospecha de infección de la UCI del CHC-UFPR. Los conteos automatizados de granulocitos inmaduros absolutos (GI#) e relativos (GI%) se realizaron en el Sysmex-XN-3000, y los cultivos y hemocultivos, manualmente o en el Baetec-FX. Se han evaluado precisión diagnóstica y concordancia para GI# y GI%. Resultados: Los rangos de referencia obtenidos para GI# y GI% fueron 0,06 × 103/µl y 0,6%, respectivamente, con sensibilidad para ambos de 74,4% y especificidad de 25,3% para IG# y 26,6% para IG%. La curva receiver operating characteristic (ROC) ha mostrado valor de corte de 0,33 × 103/µl para IG#, sensibilidad de 28%, especificidad de 82,3% y área bajo la curva (AUC) de 0,521. Para GI%, el valor de corte ha sido 135%, sensibilidad de 44,6%, especificidad de 64,6% y AUC de 0,532. Valores de corte de GI% < 3% aumentaron la especificidad para 88%. Conclusión: Rangos de referencia de GI% y GI# presentaron sensibilidad elevada y son útiles en el triaje de infecciones en pacientes de UCI. Los valores de corte enseñados por las curvas ROC presentaron alta especificidad, permitiendo la identificación adecuada de los pacientes sanos. GI se ha mostrado útil para triaje y confirmación de infección en pacientes de UCI.

Abstract Background: There is great interest in reducing the number of automated complete blood counts requiring manual blood smear reviews without sacrificing the quality of patient care. This study was aimed at evaluating and establishing appropriate screening criteria for manual blood smear reviews to improve the performance in a hematology laboratory. Method: A total of 1977 consecutive samples from the daily workload were used to evaluate four sets of screening criteria for manual blood smear reviews to identify samples with positive smear findings. Three sets of screening criteria were arbitrarily proposed in this study: Group 1 (narrow ranges), Group 2 (intermediate ranges), and Group 3 (wide limits) and one set (Group 4) was adapted from the International Society for Laboratory Hematology. All samples were run on Sysmex hematology analyzers and were investigated using manual blood smear reviews. Diagnostic accuracy and agreement were performed for each set of screening criteria, including an investigation of microscopic review rate and efficiency. Results: The microscopic review rates for Groups 1, 2, 3 and 4 were 73.85%, 54.52%, 46.33% and 46.38%, respectively; the false-negative rates were 0.50%, 1.97%, 2.73% and 3.95%, respectively. The efficiency and negative predictive values of Group 3 were 73.04% and 4.91%, respectively. Conclusions: Group 3 had the best relationship between safety (false-negative rate: ≤3%) and efficiency to estimate the limits of automation in performing complete blood counts. This study strengthens the importance of establishing screening criteria for manual blood smear reviews, which account for the different contexts in which hematological determinations are performed. Each laboratory should optimize the screening criteria for manual blood smear reviews in order to maximize their efficiency and safety.

RESUMO Introdução: A análise de líquidos corporais é fundamental para o diagnóstico e o acompanhamento de várias condições patológicas. Devido às limitações da contagem manual de células, tem ocorrido maior interesse no desenvolvimento da análise automatizada de líquidos corporais. Objetivo: Verificar o desempenho analítico do analisador hematológico Sysmex XE-5000 na análise de fluidos pleurais e ascíticos na rotina laboratorial de um hospital universitário de grande porte. Métodos: Um total de 56 amostras (35 de líquidos ascíticos e 21 de líquidos pleurais) foi analisado por microscopia ótica manual (MOM) e pelo XE-5000. O estudo de verificação incluiu linearidade, carryover, limite de quantificação e comparação de amostras de pacientes. Resultados: O estudo de verificação mostrou linearidade de até 25.825 WBC-BF/ml (r2 = 0,999); WBC-BF, carryover de 0,18%; e o menor limite de quantificação foi fixado em 22 WBC-BF/ml. Boas correlações entre o método manual e o automatizado foram observadas apenas para as contagens de total de células nucleadas (TC-BF) e glóbulos brancos (WBC-BF) em líquidos pleurais e ascíticos. A contagem de células de alta fluorescência (HF-BF) mostrou correlação fraca, porém valor preditivo positivo (VPP) elevado para ambos os líquidos corporais (94,74% pleural; 96,97% ascítico). Conclusão: O XE-5000 fornece contagem confiável para TC-BF, WBC-BF e células polimorfonucleares (PMN-BF) em fluidos pleurais e ascíticos em níveis de decisão médica, contudo a diferenciação morfológica deve continuar a ser realizada por MOM. O histograma e o diagrama de dispersão exibidos no XE-5000 devem ser sempre avaliados quanto à existência de qualquer interferência ou alerta suspeito. A contagem de HF-BF constitui uma potencial ferramenta para triagem.

ABSTRACT Introduction: Body fluid (BF) analysis is critical to the diagnosis and monitoring of several pathological conditions. The limitations of manual cell counts have led to greater interest in the development of automated BF analysis. Objective: To evaluate the analytical performance of the Sysmex XE-5000 hematology analyzer in the analysis of pleural and ascitic fluids in the laboratory routine of a large university hospital. Methods: A total of 56 samples (35 ascitic and 21 pleural fluids) were analyzed by manual optical microscopy (OM) and XE-5000. Analytical performance includes linearity, carryover, functional sensitivity and comparison of patient samples. Results: Performance studies showed linearity up to 25,825 WBC-BF/µl (r2 = 0.999), WBC-BF showed carryover of 0.18%, and the lower limit of quantitation was set at 22 WBC-BF/µl. Good correlations between the methods were observed just for total cell (TC-BF) and white blood cell (WBC-BF) counts in pleural and ascitic fluids. The high-fluorescence cell count (HF-BF) showed poor correlation but high positive predictive value (PPV) for both fluids (94.74% for pleural and 96.97% for ascitic fluid). Conclusion: XE-5000 provides accurate and precise count for TC-BF, WBC-BF and polymorphonuclear cells (PMN-BF) in pleural and ascitic fluids in medical decision levels, but the morphological differentiation should continue to be held by OM. Histogram and scattergram displayed on XE-5000 must always be analyzed to assess if there is any interference or flag. The HF-BF parameter is a potential tool for screening.

Introdução: O Sysmex® XE-2100D é um analisador hematológico multiparamétrico destinado à realização de testes hematológicos em sangue anticoagulado com ácido etilenodiamino tetra-acético (EDTA). Objetivos: Considerando a sua importância na prática clínica e laboratorial, o objetivo deste estudo foi avaliar seu desempenho analítico, comparando os resultados obtidos com especificações de qualidade descritas na literatura. Material e método: Na avaliação de desempenho analítico, conforme recomendações do documento H26-A2 do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), foram incluídos ensaios de verificação da imprecisão intraensaio ou repetitividade, imprecisão entre ensaios ou reprodutibilidade, linearidade, carryover (arraste), avaliação do mecanismo homogeneizador de amostras, sensibilidade clínica do alerta morfológico (flag) de linfócitos atípicos (n = 400 amostras) e a comparação entre a contagem diferencial de leucócitos automatizada e a manual (n = 400 amostras), baseada em uma adaptação do documento H20-A2 do CLSI. Resultados: Os ensaios de verificação da repetitividade, reprodutibilidade, linearidade, carryover (arraste) foram satisfatórios conforme especificações do fabricante. O ensaio de sensibilidade clínica do alerta morfológico (flag) de linfócitos atípicos mostrou eficiência, sensibilidade e especificidade de 92,5%; 65,2% e 94,1% respectivamente. Os coeficientes de correlação entre as contagens diferenciais automatizadas e manuais de neutrófilos, linfócitos, monócitos, eosinófilos e basófilos foram de 0,991; 0,99; 0,872; 0,974 e 0,557 respectivamente. Conclusões: Os resultados obtidos mostraram-se de acordo com as especificações da qualidade analítica descritas na literatura, indicando confiabilidade no Sysmex® XE-2100D. Esse fato confere segurança tanto aos profissionais do laboratório quanto à equipe médica. Conclui-se que o Sysmex® XE-2100D apresentou excelente desempenho analítico, sendo de grande utilidade para fornecer resultados hematológicos confiáveis.

Introduction: The Sysmex® XE-2100D is a multiparameter hematology analyzer designed for hematology testing in samples with ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA). Objectives: Considering the importance of this hematology analyzer for clinical and laboratory practice, the objective of this study was to evaluate its analytical performance, comparing the obtained results with quality specifications described in literature. Material and method: In the evaluation of analytical performance, according to recommendations of the document H26-A2 of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), intra-run imprecision, inter-run imprecision, linearity, carryover, autosampler evaluation, clinical sensitivity of the atypical lymphocytes flag (n = 400 samples) were included, as well as the comparison between automated and manual leukocyte differential count (n = 400 samples), based on an adaptation of the document H20-A2 of CLSI. Results: Repeatability, reproducibility, linearity and carryover were satisfactory according to the manufacturer's specifications. The clinical sensitivity of the atypical lymphocytes flag showed efficiency, sensitivity and specificity of 92.5%, 65.2% and 94.1% respectively. The correlation coefficients between the automated and manual differential counts of neutrophils, lymphocytes, monocytes, eosinophils and basophils were 0.991, 0.99, 0.872, 0.974 and 0.557, respectively. Conclusions: The results were in accordance with quality specifications described in literature, indicating reliability in Sysmex® XE-2100D. This fact ensures certainty to both laboratory professionals and medical staff. We conclude that the Sysmex® XE-2100D showed excellent analytical performance, and is useful to provide reliable hematology data.

INTRODUÇÃO E OBJETIVO: Avaliar o desempenho do red cell distribution width expresso em coeficiente de variação (RDW-CV) e desvio padrão (RDW-SD) e da dedução matemática de 1 desvio padrão (DP) ao redor do volume corpuscular médio (MATH-1SD) ao identificar anisocitose nos hemogramas automatizados, quando comparados com o método manual de quantificação da anisocitose eritrocitária em lâmina. MATERIAL E MÉTODOS: Foram analisadas 806 amostras obtidas da rotina laboratorial da Seção de Hematologia do Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná (HC-UFPR). As avaliações de desempenho foram realizadas dividindo-se as amostras em volume corpuscular médio (VCM) microcítico, VCM normocítico e VCM macrocítico. Para cada faixa de VCM, sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo (VPP), valor preditivo negativo (VPN) e eficiência foram determinados. Além disso, o índice de Youden foi calculado e uma análise comparativa de curvas de características de operação do receptor (curvas ROC [receiver operating characteristic]) foi realizada para verificar o desempenho de RDW-CV, RDW-SD e MATH-1SD em diferentes faixas de VCM. RESULTADOS E DISCUSSÃO: O RDW-CV obteve a melhor sensibilidade (86,8%) e eficiência (86,8%) ao detectar anisocitose em faixas de VCM microcítico. O RDW-SD e o MATH 1SD foram mais sensíveis e eficientes em VCM normocítico (82,9% e 83,3%; 92,1% e 92,3%, respectivamente) e macrocítico (90,2% e 90,2%; 95,1% e 95,1%, respectivamente). A comparação de curvas ROC demonstrou que o RDW-CV foi mais eficiente ao detectar anisocitose em VCM microcítico (p < 0,05 vs. RDW-SD e MATH-1SD). Em VCM normocítico e macrocítico, o RDW-SD e o MATH-1SD mostraram eficiência semelhante ao detectar anisocitose (p < 0,05 vs. RDW-CV). CONCLUSÃO: RDW-CV, RDW-SD e MATH-1SD possuem desempenhos diferentes ao detectar anisocitose em lâmina conforme a faixa de VCM. São parâmetros que se complementam e que devem ser utilizados em conjunto na identificação de heterogeneidade dos tamanhos eritrocitários.

INTRODUCTION AND OBJECTIVE: To evaluate the performance of red cell distribution width reported statistically as coefficient of variation (RDW-CV), standard deviation (RDW-SD), and mathematical deduction of 1 standard deviation (SD) around mean corpuscular volume (MATH-1SD) in identifying anisocytosis in automated blood counts when compared with the manual quantification of erythrocyte anisocytosis in peripheral blood smears. MATERIAL AND METHODS: 806 routine samples obtained from the hematology laboratory of Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná (HC-UFPR) were analyzed. Performance evaluations were carried out by dividing samples into microcytic, normocytic and macrocytic mean corpuscular volume (MCV). For each MCV range, sensitivity, specificity, positive predictive value (PPV), negative predictive value (NPV), and efficiency were calculated. In addition, the Youden index (Y) was obtained and a comparative analysis with receiver operating characteristic (ROC) curves was done to evaluate the performance of RDW-SD, RDW-CV, and MATH-1SD on different MCV ranges. RESULTS AND DISCUSSION: RDW-CV had the best sensitivity (86.8%) and efficiency (86.8%) in detecting anisocytosis in microcytic MCV ranges. RDW-SD and MATH-1SD were more sensitive and efficient in normocytic (82.9% and 83.3%; 92.1% and 92.3%, respectively) and macrocytic (90.2% and 90.2%; 95.1% and 95.1%, respectively) MCV ranges. A ROC curve analysis indicated that RDW-CV was more efficient in detecting anisocytosis in microcytic MCV ranges (p < 0.05 vs. RDW-SD and MATH-1SD). In normocytic and macrocytic MCV ranges, RDW-SD and MATH-1SD showed similar efficiency in detecting anisocytosis (p < 0.05 vs. RDW-CV). CONCLUSION: RDW-SD, RDW-CV, and MATH-1SD deliver different performances in detecting blood smear anisocytosis according to MCV values. They are parameters that complement each other and should be used together to identify erythrocyte size heterogeneity.