Importância do método de gota espessa de sangue no diagnóstico de filárias simpátricas no Amazonas, Brasil

The importance of thick blood film method for sympatric filarial diagnosis in Amazon basin

NOTAS E COMUNICAÇÕES

Importância do método de gota espessa de sangue no diagnóstico de filárias simpátricas no Amazonas, Brasil

The importance of thick blood film method for sympatric filarial diagnosis in Amazon basin

Jansen F. Medeiros^I; Felipe Arley Costa Pessoa^II; Marilaine Martins^III

^IInstituto Nacional de Pesquisas da Amazônia/Universidade do Estado do Amazonas, CP. 478, 69011-970, Manaus, AM; E-mail: [e-mail] ^IICentro de Pesquisa Leônidas e Maria Deane, Fiocruz-Amazônia; E-mail: [e-mail] ^IIIInstituto Nacional de Pesquisas da Amazônia / UNIVERSIDADE DO ESTADO DO AMAZONAS, CP. 478, 69011-970, Manaus, AM; E-mail: [e-mail]

RESUMO

Esse trabalho relata os métodos de diagnósticos para filárias humanas no sangue, referindo-se a importância do método de gota espessa em relação aos métodos de filtração em membrana de policarbonato e Knott na diferenciação das espécies de microfilárias, principalmente em áreas de ocorrência de mais de uma espécie, como em regiões do Amazonas. Lâminas com microfilárias de Mansonella ozzardi foram montadas e fotografadas pelos diferentes métodos de diagnósticos. O método da gota espessa de sangue é o mais confiável, pois permite visualizar com nitidez o espaço cefálico e caudal, disposição dos núcleos caudais e formato da cauda, que são características morfológicas que diferenciam as espécies de microfilárias sanguíneas que ocorrem no Amazonas.

PALAVRAS-CHAVE: Filariose, Métodos de diagnósticos, Mansonella ozzardi, Mansonella perstans.

ABSTRACT

In this work, the visual diagnostic methods for human filarias in the blood are evaluated. The thick blood film method is more faithful to identify the microfilariae species if compared to policarbonate membrane filtration and Knott methods, especially in areas where more than one species occur, as in Amazon basin. Slides with Mansonella ozzardi microfilariae were mounted and photographed by different diagnosis methods. The thick blood film method is much easier to see the diagnostic morphological characters as cephalic and caudal space, pattern of nucleation of the tail and tail shape that can separate the blood Amazonian microfilariae species.

KEYWORDS: Filariasis, Diagnostic methods, Mansonella ozzardi, Mansonella perstans.

A mansonelose é uma filariose causada por Mansonella ozzardi (Manson, 1897) (Nematoda, Onchocercidae) e por M. perstans (Manson, 1891) (Nematoda, Onchocercidae). No Brasil possui uma ampla distribuição entre as populações ribeirinhas e indígenas no Amazonas, e registro em Roraima e Mato Grosso. A M. ozzardi foi registrada a partir da década de 1940 (Deane 1949), já a M. perstans foi encontrada recentemente entre populações indígenas do Alto Rio Negro (Medeiros & Py-Daniel 2009). Uma das questões preocupantes é a ocorrência concomitante dessas duas filárias em algumas regiões do Amazonas, tornando-se imprescindível um diagnóstico correto devido às diferenças de tratamento. Os métodos mais utilizados no diagnóstico se baseiam na visualização das microfilárias no sangue periférico destacando-se a gota espessa, gota fresca e ainda os métodos de concentração, denominadas assim porque utilizam um maior volume de sangue: concentração de Knott (Knott 1939) e filtração em membrana de policarbonato (Bell 1967). Para a realização desta nota científica, nos propomos testar a viabilidade de visualização de estruturas diagnósticas de microfilárias. Lâminas com microfilárias de M. ozzardi foram montadas e fotografadas pelos diferentes métodos diagnósticos. Observamos que os métodos de concentração sem a preparação da gota espessa em área de infecção mista podem induzir a dúvida no diagnóstico específico, devido à dificuldade de visualizar as principais estruturas que identificam as espécies: disposição dos núcleos, tamanho e largura do espaço cefálico e caudal e formato da cauda (Figuras 1a - b). A técnica de Knott consiste em diluir 1 mL de sangue venoso em 9 mL de formalina a 2 %, que posteriormente é centrifugado e o sedimento é removido para preparação da gota espessa. O fato das microfilárias ficarem misturadas ao sedimento viscoso (Figuras 1c - d) dificulta a identificação em microscópio (Rocha & Fontes 2000). A filtração em membrana consiste em filtrar o sangue diluído em solução tamponada através de membrana de policarbonato (poros 3 ou 5 µm de diâmetro) que permite a passagem de hemácias, mas retém as microfilárias, como também outros elementos que por sua vez dificultam a identificação das microfilárias (Figuras 1e - f). Embora os métodos de concentração sejam mais sensíveis, principalmente em indivíduos com baixa microfilaremia e utilizados frequentemente como controle de cura para filariose sanguínea (Dreyer & Norões 1997), não recomendamos sua utilização de forma isolada em levantamentos preliminares de filarioses no Amazonas. Enfatizamos que no Amazonas, o método da gota espessa de sangue ainda é o mais confiável e de baixo custo, pois permite visualizar com nitidez algumas características, como comprimento das microfilárias, tamanho e largura do espaço cefálico e caudal, formato da cauda e disposição dos núcleos caudais, que diferenciam as espécies de microfilárias sanguíneas, e assim administrar de forma correta o tratamento. Também reforçamos que esse método é o mais apropriado para a identificação de novas espécies, já que os outros métodos mencionados (filtragem em membrana e Knott) comprometem morfologicamente as microfilárias.

Bibliografia citada

Recebido em 08/12/2009

Aceito em 18/05/2010

• Deane, M.P. 1949. About the incidence of human filariae in Manaus, Amazonas States. Revista do SESP, 2: 849-858 (in Portuguese, with abstract in English).
• Bell, D. 1967. Membrane filters and microfilarial surveys on day blood. Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene, 61: 220-223.
• Dreyer, G.; Norões, J. 1997. Dietilcarbamazine in the treatment of bancroftian filariasis. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, 30(3): 229-240 (in Portuguese, with abstract in English).
• Knott, J.A. 1939. Method for making microfilarial surveys on day blood. Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene, 32: 191-196.
• Medeiros, J.F.; Py-Daniel, V. 2009. Mansoneliasis. In: Marcondes, C.B. (Ed). Diseases transmited and caused by arthropods. Atheneu Press. p. 277-282 (in Portuguese).
• Rocha, E.M.M.; Fontes, R. 2000. Diagnosis of bancroftian filariasis. Revista de Patologia Tropical, 29(2): 61-73 (in Portuguese, with abstract in English).

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  03 Jan 2011
• Data do Fascículo
  Dez 2010

Histórico

• Aceito
  18 Maio 2007
• Recebido
  08 Dez 2009