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New tools to study biophysical properties of single molecules and single cells

Apresentamos uma revisão de duas novas técnicas para estudar propriedades biofísicas de moléculas únicas e células únicas. Um laser incidindo em uma objetiva de microscópio de grande abertura numérica é capaz de aprisionar pequenas partículas dielétricas na região próxima ao foco. Este aparato é chamado de pinça óptica. Esta técnica tem a grande vantagem de permitir a manipulação de um objeto individual. Usamos a pinça óptica para medir a elasticidade entrópica de uma molécula única de DNA em sua interação com o fármaco Psoralen. A pinça óptica também é usada para segurar uma célula renal MDCK fora do substrato, permitindo medidas precisas do volume dessa célula única durante um choque osmótico. Este processo nos permite obter informações sobre a permeabilidade osmótica da membrana e o crescimento do volume regulatório. A microscopia de desfocalização é uma técnica recente inventada em nosso laboratório, que nos permite observar objetos transparentes simplesmente desfocalizando o microscópio de uma maneira controlada. Nosso modelo físico de um microscópio desfocalizado mostra que o contraste da imagem observado neste caso é proporcional à distância da desfocalização e à curvatura do objeto transparente. A microscopia de desfocalização é muito útil para estudar a motilidade e as propriedades mecânicas das células. Mostramos aqui a aplicação da microscopia de desfocalização em medidas de flutuações na superfície de macrófagos e sua influência na fagocitose.

pinça óptica; microscopia de desfocalização; moléculas únicas; macrófagos; transporte de água; motilidade celular


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