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Fisiologia pós-colheita de frutos da palmeira Syagrus oleracea (Mart.) Becc. (Arecaceae)

Post-harvest physiology of palm fruits of Syagrus oleracea (Mart.) Becc. (Arecaceae)

Resumos

Objetivou-se avaliar algumas das mudanças fisiológicas ocorridas durante o processo de amadurecimento pós-colheita dos frutos de Syagrus oleracea (gueroba), palmeira nativa da região Centro-Oeste brasileira, tais como: a perda de massa, volumes gasosos intercelulares, a concentração interna de CO2 e de O2 e a firmeza, as evoluções de CO2 e etileno tanto à temperatura ambiente (25 ºC) quanto à baixa temperatura (8 ºC). Para as análises foram utilizados frutos verdes desta palmeira, coletados no campus da Universidade de Brasília (UnB). Os frutos da gueroba se mostraram sensíveis à injúria por resfriamento. Quando armazenados à temperatura de 8 ºC, apresentaram sinais de injúria pelo frio e não amadureceram mesmo quando foram recolocados à temperatura ambiente (25 ºC). A ocorrência de pico de evolução de etileno e CO2 coincidente, no mesmo dia, e os padrões das curvas de concentração de CO2 e O2 na atmosfera interna com pico são evidências de que se trata de um fruto climatérico, bem como o fato da produção de etileno ter aumentado 12 vezes entre o verde-maduro e o pico. O valor obtido para os volumes gasosos intercelulares da gueroba coloca os seus frutos dentro da faixa de órgãos com média quantidade de volumes gasosos, média susceptibilidade à injúria de impacto e média susceptibilidade as injúrias de amassamento.

amadurecimento; atmosfera interna; climatério; volumes gasosos intercelulares


Several aspects of post-harvest changes in fruits of a native palm species from the Central Plateau in mid-western Brazil were studied. Fruits of Syagrus oleracea (Mart.) Becc., commonly known as "gueroba", were evaluated regarding aspects such as: weight loss, internal gaseous volume, internal concentration of CO2 and O2, firmness, chilling injury and CO2 and ethylene evolution. Fruits of S. oleracea are sensitive to chilling injury when stored at low temperatures such as 8 ºC where they failed to ripen after storage. The occurrence of a simultaneous climateric peak for CO2 and ethylene plus the internal CO2 and O2 concentration patterns are strong evidence that this is a climateric fruit. The gaseous intercellular volumes obtained for S. oleracea fruits place them together with other organs that have medium quantity of these volumes, which means that this fruit may have medium susceptibility to impact injury and medium susceptibility to injury by compression.

chilling injury; climateric; internal atmosphere; ripening


Fisiologia pós-colheita de frutos da palmeira Syagrus oleracea (Mart.) Becc. (Arecaceae)1 1 Parte da Dissertação de Mestrado do primeiro Autor

Post-harvest physiology of palm fruits of Syagrus oleracea (Mart.) Becc. (Arecaceae)

Paulo SantelliI; Maria Elisa Ribeiro CalboI, 2 2 Autor para correspondência: mecalbo@unb.br ; Adonai Gimenez CalboII

IUniversidade de Brasília, Departamento de Botânica, Laboratório de Fisiologia Vegetal, C. Postal 04457, 70910-970 Brasília, DF, Brasil

IIEMBRAPA Hortaliças, Laboratório de Pós-colheita, C. Postal 218, 70359-970 Brasília, DF, Brasil

RESUMO

Objetivou-se avaliar algumas das mudanças fisiológicas ocorridas durante o processo de amadurecimento pós-colheita dos frutos de Syagrus oleracea (gueroba), palmeira nativa da região Centro-Oeste brasileira, tais como: a perda de massa, volumes gasosos intercelulares, a concentração interna de CO2 e de O2 e a firmeza, as evoluções de CO2 e etileno tanto à temperatura ambiente (25 ºC) quanto à baixa temperatura (8 ºC). Para as análises foram utilizados frutos verdes desta palmeira, coletados no campus da Universidade de Brasília (UnB). Os frutos da gueroba se mostraram sensíveis à injúria por resfriamento. Quando armazenados à temperatura de 8 ºC, apresentaram sinais de injúria pelo frio e não amadureceram mesmo quando foram recolocados à temperatura ambiente (25 ºC). A ocorrência de pico de evolução de etileno e CO2 coincidente, no mesmo dia, e os padrões das curvas de concentração de CO2 e O2 na atmosfera interna com pico são evidências de que se trata de um fruto climatérico, bem como o fato da produção de etileno ter aumentado 12 vezes entre o verde-maduro e o pico. O valor obtido para os volumes gasosos intercelulares da gueroba coloca os seus frutos dentro da faixa de órgãos com média quantidade de volumes gasosos, média susceptibilidade à injúria de impacto e média susceptibilidade as injúrias de amassamento.

Palavras-chave: amadurecimento, atmosfera interna, climatério, volumes gasosos intercelulares

ABSTRACT

Several aspects of post-harvest changes in fruits of a native palm species from the Central Plateau in mid-western Brazil were studied. Fruits of Syagrus oleracea (Mart.) Becc., commonly known as "gueroba", were evaluated regarding aspects such as: weight loss, internal gaseous volume, internal concentration of CO2 and O2, firmness, chilling injury and CO2 and ethylene evolution. Fruits of S. oleracea are sensitive to chilling injury when stored at low temperatures such as 8 ºC where they failed to ripen after storage. The occurrence of a simultaneous climateric peak for CO2 and ethylene plus the internal CO2 and O2 concentration patterns are strong evidence that this is a climateric fruit. The gaseous intercellular volumes obtained for S. oleracea fruits place them together with other organs that have medium quantity of these volumes, which means that this fruit may have medium susceptibility to impact injury and medium susceptibility to injury by compression.

Key words: chilling injury, climateric, internal atmosphere, ripening

Introdução

As espécies da família Arecaceae, plantas conhecidas como palmeiras, apresentam grande importância econômica e são exploradas comercialmente na produção de óleo, amido, palmito, cera e fibras. São também utilizadas como fonte de alimentos, bebidas e como matéria-prima para construção de barcos, pontes e casas. As plantas são utilizadas na ornamentação de praças, jardins e ambientes internos há vários séculos. As palmeiras são de ocorrência predominantemente tropical (Henderson et al. 1995), têm a capacidade de se estabelecer em diversos tipos de hábitat, como mata de terra firme, matas periodicamente inundadas, cerrado, e em ambientes degradados. No Brasil encontram-se extensamente distribuídas (Lorenzi et al. 2004).

A realização de estudos fisiológicos é fundamental para o conhecimento da ecofisiologia dessa família e pode, ainda, contribuir para a preservação e propagação de suas espécies. Foi então selecionada uma espécie muito comum no Distrito Federal (DF), Syagrus oleracea (Mart.) Becc., para estudos fisiológicos de seus frutos.

A palmeira Syagrus oleracea (Mart.) Becc., popularmente conhecida como gueroba, é comum nos campos sujos de cerrado. Ocorre nos estados de São Paulo, Minas Gerais, Mato Grosso, Goiás, Mato Grosso do Sul, Bahia e no Distrito Federal (Lorenzi 1992). O gênero Syagrus é um dos três mais freqüentes em número de espécies de palmeiras no Brasil, e o de maior representatividade na região do Cerrado (Henderson et al. 1995). A gueroba é uma palmeira de tronco simples, com folhas perenes, dispostas em forma de espiral e levemente arqueadas. Os frutos são ovalados e possuem cerca de 6 a 7 cm de comprimento e sua coloração externa é verde-amarelada. Os frutos possuem polpa fibrosa amarelada quando madura, contendo amêndoa sólida, dura, branca e oleaginosa, são comestíveis e de sabor agradável e servem de alimento também à fauna. A gueroba é uma palmeira muito ornamental, apresentando bom potencial para o uso em paisagismo. Seu cultivo é fácil porque é pouco exigente quanto à fertilidade do solo (Correa 1931; Henderson et al. 1995; Lorenzi 2004).

Para frutos nativos do cerrado, existem poucos trabalhos em que se tenha avaliado a respiração e a evolução de etileno. Dentre estes, podem ser citados os estudo da cagaita (Eugenia dysenterica) (Calbo et al. 1990) e do pequi (Caryocar brasiliense) (Calbo & Miranda 1991). A carência é maior ainda para os frutos das palmeiras brasileiras que precisam ser ainda estudados quanto à respiração e à evolução de etileno e ao seu comportamento em ambientes de armazenamento.

Este trabalho foi desenvolvido para ampliar o conhecimento da fisiologia e do comportamento pós-colheita dos frutos de Syagrus oleracea. Para este fim, foi estudada a evolução de CO2 e etileno em duas temperaturas; foi acompanhada a composição da atmosfera interna dos frutos; foram quantificados os volumes gasosos intercelulares e foi acompanhada a firmeza dos frutos durante o amadurecimento.

Material e métodos

Foram colhidos frutos maturos, com desenvolvimento máximo. Para a determinação da maturidade dos frutos, foi considerado o aspecto visual dos frutos a serem coletados. Coletaram-se frutos que já possuíam pequenas rajadas amarelas.

Os frutos da Syagrus oleracea (Mart.) Becc. (gueroba) foram coletados no campus da UnB (15º45,987'S e 47º 52,066'W) e transportados, seja para o laboratório de Fisiologia Vegetal do Departamento de Botânica da UnB, seja para o Laboratório de Pós-Colheita da Embrapa Hortaliças. Houve cuidado para não expô-los à elevada temperatura e luz solar direta durante o trajeto, bem como à ventilação excessiva. Os frutos foram selecionados quanto à homogeneidade de cor e tamanho.

Cromatografia – Para medidas de evolução de etileno e CO2, os tratamentos avaliados foram 8 ºC ± 3 ºC e 25 ºC ± 3 ºC de temperatura para frutos armazenados em conjunto; foram feitas seis repetições por tratamento e cada repetição continha seis frutos. Foi feito também um estudo com frutos individuais, com seis repetições. Este último tratamento com frutos individuais foi feito para evitar que caso houvesse a evolução de etileno de frutos amadurecidos precocemente esta não viesse a antecipar o amadurecimento dos demais frutos, caso os frutos fossem climatéricos.

A evolução de CO2 e etileno foi avaliada em um sistema fechado, no qual os frutos em conjunto foram colocados em frascos de 1.350 ml e os frutos individuais em frascos de 131 ml. Amostras de 1cm3 foram extraídas com seringa hipodérmica graduada, e injetadas em cromatógrafo a gás Finnigan modelo 9001, equipado com uma coluna "poropak N" e uma coluna de exclusão molecular. Foi usado o gás hidrogênio como gás de arraste a um fluxo de 30 ml min-1 para as medições das concentrações de CO2 e etileno.

Os frutos foram pesados diariamente após a realização das medições para acompanhar a perda de massa em cada uma das repetições.

Atmosfera interna – Para acompanhar a evolução da concentração de O2 e CO2 na atmosfera interna dos frutos armazenados a 25 ºC, foram utilizados a câmara externa de Devaux, para a retirada de amostras da atmosfera interna, e o método FACILI (Calbo 2004) para a sua quantificação. A câmara externa de Devaux é uma técnica de equilíbrio difusivo, baseada na obtenção de um equilíbrio gasoso dinâmico, por difusão, entre o volume da câmara e a atmosfera interna do órgão (A.C. Cameron, dados não publicados). Foram feitas coletas diariamente de amostras com 0,1 a 0,5 ml e estas amostras foram analisadas no FACILI. Após a injeção da amostra gasosa, foi medido o seu volume inicial (V1), seguido do volume gasoso remanescente após a captura do CO2 em NaOH (V2) e, finalmente, foi medido o volume gasoso remanescente após a captura do O2 em pirogalol (V3). Com esses dados foram calculadas as porcentagens de CO2 e de O2: % CO2 = 100. (V1 – V2)/V1 e % O2 =100. (V2 – V3)/V1.

Constante de conversão (r) – Foi calculada como a razão entre a concentração de CO2 da atmosfera interna (ci) contida nos espaços intercelulares em ml L1, obtida nas medidas com o FACILI, e a taxa de evolução de CO2 (R) em ml kg-1 h-1, obtida na medida de CO2 no cromatógrafo. r = ci/R

Com essa constante pode-se estimar a concentração interna de CO2, sabendo-se a taxa de evolução CO2, ou pode-se calcular a taxa de respiração, conhecendo-se a concentração da atmosfera interna. A constante de conversão também é denominada de resistência difusiva do órgão vegetal.

Volumes gasosos intercelulares – O método utilizado para as medidas de porosidade ou a quantificação dos volumes gasosos intercelulares foi o de Jensen et al. (1969) com modificações. Nesse método, denominado picnométrico, a fração de espaços de ar nos tecidos foi determinada com base na remoção da fase gasosa. A modificação introduzida ao método original refere-se à substituição do uso de um homogeneizador por trituração da amostra em almofariz.

Firmeza – Foi medida a firmeza dependente da turgidez celular pelo método de aplanação, proposto por Calbo & Nery (1995). Foram acompanhados 15 frutos de gueroba armazenados a 25 ºC, fazendo-se diariamente uma medida por fruto, durante o período de amadurecimento.

A área da elipse aplanada (A) foi calculada com a fórmula: A = D1.D2.p/4, onde D1 é o diâmetro maior (cm) e D2 é o diâmetro menor (cm) e o número considerado foi de 3,1416. A firmeza (Fz), então, foi calculada dividindo-se o massa da placa de prova (P) em kgf pela área aplanada (A) em cm2, tendo como resultado a unidade de pressão em kgf cm-2, com a fórmula: Fz = P/A.

Análise estatística – Foi utilizado o software SANEST (Zonta & Machado 1995). Foi empregada a análise de variância pelo Teste F e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey ao nível de probabilidade de erro de 5%.

Resultados e discussão

Respiração e evolução de etileno – Nos frutos armazenados em conjunto e individualmente a 25 ºC, a evolução de etileno e de CO2 atingiu o valor máximo ao 6º dia de armazenamento (Fig. 1, 2). Os valores no pico foram de 120 ml kg-1 h-1 de CO2 e 17 µl kg-1 h-1 de etileno para frutos em conjunto e de 98 ml kg-1 h-1 de CO2 e 12 µl kg-1 h-1 de etileno para frutos individuais. Em frutos armazenados a 25 ºC a evolução de etileno aumentou entre o verde-maduro e o pico de etileno mais de 12 vezes.



Valores semelhantes foram encontrados em frutos que apresentaram um padrão climatérico com picos de CO2, como por exemplo, frutos de manga (Mangifera indica) mantidos a 20 ºC (130 ml kg-1 h1). Esses valores foram superiores, porém, aos de frutos do mamão-papaia (Caryca papaya) que apresentaram um valor de 88 ml kg-1 h-1 quando mantidos a 25 ºC (Biale et al. 1954).

No que diz respeito à produção de etileno, pode-se comparar os frutos de gueroba com frutos de maçãs (Malus sp.) que têm valores de referência de 0,02 a 100 µl kg-1 h-1, segundo Burg & Thimann (1960). Nos frutos armazenados em conjunto a 8 ºC, a evolução de CO2 e de etileno foi muito menor, sem produção de picos, sendo que a evolução de CO2 variou entre 7 e 11 ml kg-1 h-1 e a de etileno, entre 1,0 e 1,5 µl kg-1 h-1 (Fig. 1, 2).

Houve diferença significativa entre o tratamento com frio a 8 ºC e os demais tratamentos, tanto na evolução de CO2 quanto na de etileno. Essa diferença foi marcante, sendo que os frutos que foram armazenados a 8 ºC apresentaram uma evolução, tanto de CO2 quanto de etileno, sem o aparecimento de picos contrastante com os demais tratamentos ao longo do processo de armazenamento. Houve uma correlação positiva entre a produção de etileno e de CO2, ou seja, as evoluções avaliadas tiveram um padrão semelhante.

A 25 ºC, observou-se ao longo do período de armazenamento o amadurecimento e amolecimento dos frutos, seguidos de senescência e deterioração. A 8 ºC, os frutos apresentaram sinais de injúrias por resfriamento, como coloração amarronzada, pontos pretos na superfície externa e no interior a partir do 8º dia de armazenamento. Não ocorreu também o amadurecimento e amaciamento dos frutos. Sugerese que pelo fato dos frutos terem sido mantidos por um período de tempo superior a uma semana, expostos a temperatura baixa, estes tenham começado a apresentar os sintomas de injúria por resfriamento antes mesmo de terem sido retirados da condição de frio. Segundo Wang (2002), em geral os frutos que apresentam esse tipo de injúria mantêm-se com aparência praticamente inalterada quando mantidos a baixas temperaturas e somente percebem-se sinais de injúria por resfriamento ("chilling") quando são expostos a temperaturas mais altas. No caso da gueroba, os frutos apresentaram sinais de injúrias ainda sob a condição de temperatura reduzida.

Os sintomas de injúria por resfriamento, observados em frutos de gueroba, são similares aos descritos por Hardenburg et al. (1986); Pesis et al. (2002) e Wang (2002), e são de ocorrência comum em frutos de origem tropical. Wang (2002) coloca como temperatura segura para a maioria dos frutos tropicais, dentre os quais a banana (Musa sp.), o maracujá (Passiflora sp.), a fruta-pão (Artacarpus altilis), alguns cultivares de abacate (Persea americana) e a manga (Mangifera indica), o patamar mínimo de 10 ºC. Valores inferiores a estes, de maneira geral, dão origem a injúrias de resfriamento.

A perda de massa dos frutos de gueroba (Fig. 3) foi gradual nos três tratamentos. Para os frutos armazenados em conjunto (seis frutos com massa média igual a 162 g) a 25 ºC esta foi em média de 3 g dia-1. Em frutos individuais, armazenados a 25 ºC, a perda média de massa foi de 0,8 g dia-1. Em frutos de gueroba em conjunto (seis frutos) a 8 ºC a média diária de perda de massa foi de 2 g dia-1. A média dos frutos armazenados a 25 ºC apresentou forte queda no último dia, devido ao descarte de frutos que já se encontravam em deterioração, tanto para frutos armazenados em conjunto quanto para frutos individuais. Os frutos armazenados em conjunto a 25 ºC perderam até o 10º dia aproximadamente 20% de sua massa inicial ou cerca de 17,3 g kg-1 dia-1; valores semelhantes foram observados para frutos individuais. Os frutos armazenados a 8 ºC perderam 17% de sua massa inicial ou ao redor de 17 g kg-1 dia-1.


A perda de massa a 8 ºC poderia ter sido bem menor, porém a umidade relativa na câmara foi em média de 85% ao longo do período de armazenamento e a ventilação possivelmente foi maior do que na câmara a 25 ºC. De maneira geral, sob condições semelhantes de UR e ventilação, um órgão como um fruto perde água mais rapidamente a temperaturas mais elevadas (Pantastico 1975).

Atmosfera interna – A concentração interna de O2 e CO2 variou em função do tempo e pôde-se verificar as mudanças ocorridas na atmosfera interna do fruto da gueroba ao longo do amadurecimento (Fig. 4). No caso do O2, parte-se de valores ao redor de 15% no primeiro dia e tem-se um decréscimo até que seja atingido um mínimo de 12 e 12,3% no quinto e sexto dias, respectivamente, voltando novamente ao patamar inicial em torno dos 15% nos dias subseqüentes. Esses valores se aproximam de frutos como a maçã (Malus sp.) que chega a ter 16,4% de O2 na atmosfera interna, ou mesmo de tubérculos, como a batata (Solanum tuberosum) armazenada, segundo Burton (1982).


Com o CO2 ocorre o oposto, parte-se de valores tão baixos quanto 5,5% e, no quinto e sexto dias, têmse um ponto de máximo entre 9 e 10% de CO2. Logo após, a concentração de CO2 retorna a valores em torno de 5%. Estes valores são próximos dos citados por Burton (1982) para maçãs (Malus sp.), entre 2,7 e 5,6%, ou mesmo para maracujá (Passiflora sp.), cerca de 7% de CO2.

Com o auxílio da análise estatística, foi possível identificar uma correlação negativa entre CO2 e O2. Isto significa que estes dois fatores foram, durante o período de armazenamento dos frutos da gueroba, inversamente proporcionais: à medida que a concentração interna de CO2 aumentava, a de O2 diminuía. Isto se deve ao fato de que o fruto continua a realizar diversos processos para a sua manutenção, como por exemplo a respiração, em que ocorre o consumo de O2 e a liberação de CO2.

O padrão observado era esperado e condiz com outros encontrados na literatura como, por exemplo, em melões (Cucumis melo) (Lyons et al. 1964) e em abacate (Persea americana) (Biale 1964).

Os valores observados para o CO2 na atmosfera interna estão de acordo com os valores de evolução de CO2 ao longo do processo de armazenamento dos frutos à temperatura ambiente. Houve uma simultaneidade, uma correlação positiva, na variação da concentração interna (Fig. 4) e na evolução de CO2 (Fig. 2), o que é evidência do padrão climatérico de respiração no fruto da gueroba. Na medida em que o fruto respira e produz CO2, este se difunde para o ar exterior, contribuindo para a evolução desse gás de maneira diretamente proporcional.

A observação dos padrões de concentração de O2 e CO2 na atmosfera interna (Fig. 4) são consistentes com os padrões de evolução de etileno (Fig. 1) e de CO2 (Fig. 2) e reforçam a noção de que a gueroba realmente seja um fruto climatérico. O fato da evolução de etileno ter aumentado mais de 12 vezes entre o verde-maduro e o pico de etileno é um fator que reforça essa afirmativa.

A constante de conversão de CO2 para a gueroba foi de 0,96. Com este valor, pode-se estimar a concentração interna de CO2, conhecendo-se a sua taxa de produção, ou estimar a sua produção, pela concentração interna de CO2.

Volumes gasosos intercelulares – O volume médio de espaços gasosos intercelulares do fruto da gueroba foi de 5,18%, sendo que a polpa representa cerca de 61% desse valor, enquanto a semente, mais rígida e menos porosa, perfaz 39% do total. O valor obtido para os volumes gasosos intercelulares da gueroba colocam os seus frutos dentro da faixa de órgãos com quantidade média de volumes gasosos, como, por exemplo, a batata doce (Ipomea batatas) e a goiaba (Psidium guajava). Segundo Crisosto (2004), esta quantidade média de volumes gasosos está relacionada a uma resistência relativa a injúrias de impacto e a uma susceptibilidade moderada a injúrias de amassamento durante o armazenamento e o transporte.

Firmeza – Foi observada a redução da firmeza dos frutos em função do tempo de armazenamento (Fig. 5). A diminuição da firmeza foi gradual ao longo de todo o processo de amadurecimento. A firmeza dependente da turgidez celular apresentou inicialmente níveis ao redor de 0,35 kgf cm-2. Os frutos nos primeiros dias após a colheita suportavam a carga de peso sem apresentar deformações, apresentando apenas marcas reversíveis. Com o passar dos dias a sua resistência foi diminuindo e chegou-se ao fim do experimento a valores mais baixos que 0,1 kgf cm-2, em que os frutos passaram a apresentar pequenas fissuras quando submetidos ao método e apresentaram também deformações irreversíveis.


A firmeza inicial dos frutos da gueroba (0,35 kgf cm-2) é da mesma ordem, porém ligeiramente menor do que a firmeza de alguns outros frutos relatados na literatura, tais como tomate meio maduro (Lycopersicon esculentum), mamão (Caryca papaya), jiló (Solanum gilo) e uva (Vitis vinifera) (Luengo & Calbo 2001). O decréscimo da firmeza dependente do turgor celular no tempo, no entanto, foi bem maior que para outros frutos estudados, como tomate (Lycopersicon esculentum) (Freitas et al. 1999) e mamão (Jacomino et al. 2002).

Os frutos da gueroba (Syagrus oleracea) são sensíveis à injúria de resfriamento e quando armazenados à temperatura de 8 ºC apresentam sinais de injúria pelo frio e não amadurecem mesmo quando recolocados à temperatura ambiente.

Os picos de evolução de etileno e CO2 ocorreram de maneira coincidente no sexto dia de armazenamento.

Nos frutos de gueroba (Syagrus oleracea) as curvas de concentração de CO2 e O2 na atmosfera interna, também são evidências de que se trata de um fruto climatérico.

O valor obtido para os volumes gasosos intercelulares dos frutos da gueroba coloca-os dentro da faixa de órgãos com média quantidade de volumes gasosos, média susceptibilidade à injúria de impacto e média susceptibilidade a injúrias de amassamento.

Recebido em 22/06/2005. Aceito em 3/01/2006

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  • 1
    Parte da Dissertação de Mestrado do primeiro Autor
  • 2
    Autor para correspondência:
  • Datas de Publicação

    • Publicação nesta coleção
      27 Fev 2007
    • Data do Fascículo
      Set 2006

    Histórico

    • Aceito
      03 Jan 2006
    • Recebido
      22 Jun 2005
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