Isolamento de Pasteurella spp. e Vibrio spp. em robalos (Dicentrarchus labrax): susceptibilidade a diferentes grupos de antibióticos

Isolation of Pasteurella spp. and Vibrio spp. in European sea bass (Dicentrarchus labrax): susceptibility to different antibiotic groups

Dicentrarchus labrax; antibiotics; resistant; bacteria; pasteurellosis

Dicentrarchus labrax; antibióticos; resistência; pasteurelose

COMUNICAÇÃO

Isolamento de Pasteurella spp. e Vibrio spp. em robalos (Dicentrarchus labrax). Susceptibilidade a diferentes grupos de antibióticos

Isolation of Pasteurella spp. and Vibrio spp. in European sea bass (Dicentrarchus labrax). Susceptibility to different antibiotic groups

M.J. Saavedra; R.D. Brito; M. Sousa; A. Alves; P. Rema

Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro – CECAV Apt.1013, 5000-911 Vila Real, Portugal

Palavras-chave:Dicentrarchus labrax, antibióticos, resistência, pasteurelose

ABSTRACT

The most frequent infectious diseases that affect fish are those of bacterial origin. In European sea bass fish farms (Dicentrarchus labrax) are included Vibrio spp., Pasteurella piscicida and Myxobacter spp. In addition to these, it is also possible to find, although lesser frequently, other pathogenic agents such as Pseudomonas spp., Aeromonas spp., Staphylococcus epidermis, Streptococcus spp. and Enterobacter spp. The presence of these micro-organisms in fish farms contributes for a significant decrease in fish production and subsequent loss of profitability in these aquaculture units. The use of antibiotics may therefore be necessary as a prophylactic measure although their systematic utilization leads to the development of strains of antibiotic resistant bacteria. Bearing that in mind, a survey was conducted on the susceptibility of isolated strains of bacteria found in juvenile European sea bass. It was concluded that chloranphenicol and tetracycline are two important antibiotic alternatives for therapy against isolated bacterial agents.

Keywords:Dicentrarchus labrax, antibiotics, resistant, bacteria, pasteurellosis

O robalo (Dicentrarchus labrax) é uma espécie de interesse comercial reconhecido, ocupando posição de destaque no consumo de peixe nos países europeus (Blanquet, 1998).

Diversos estudos demonstram que grande parte dos surtos bacterianos ocorridos em explorações de D. labrax, sem sinais exteriores da doença, são devidos às deficiências de manejo, factores de estresse ambiental e qualidade da água de cultivo.

As doenças infecciosas mais freqüentes nos cultivos de peixes são as de origem bacteriana, com predominância de Vibrio spp., Pasteurella piscicida e Myxobacter spp. A pasteurelose, cujo agente é a P. piscicida em peixes de água salgada, é a doença infecciosa bacteriana de maior freqüência (Schmidt et al., 2000). A presença desses microrganismos determina quebras significativas na produção e na rentabilidade da exploração de peixes. Para prevenir a morbilidade e mortalidade na exploração recorre-se ao uso de antibióticos. Todavia, a utilização sistemática de antibióticos como prática veterinária de tratamento conduz ao aparecimento de estirpes resistentes.

Os objetivos deste trabalho foram determinar a resistência de agentes bacterianos isolados aos antibióticos beta-lactâmicos e aminoglicosídeos, às tetraciclinas e ao cloranfenicol (Adams et al., 1998; Schmidt et al., 2000; Teo et al., 2000) e estimar a correlação entre as alterações histopatológicas e os isolados bacterianos.

O experimento foi realizado na unidade experimental de piscicultura da Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro durante um ensaio de crescimento feito com juvenis de robalo, onde foi observada mortalidade anormal. Após os primeiros indícios de doença, o ensaio foi interrompido e procedeu-se à recolha aleatória de 10 peixes para posterior análise.

A necropsia dos cadáveres e isolamento de estirpes bacterianas foi feita a partir de amostras de água e de peixes (pele e rins). Foram utilizados meios selectivos e diferenciais (TCBS, GSP, ágar-MacConkey, ágar-sangue) de acordo com as espécies bacterianas. Durante a necropsia procedeu-se à execução de esfregaços frescos de pele e de brânquias para detecção de formas parasitárias. Após a incubação a 22ºC, verificou-se o desenvolvimento de diferentes colónias sendo a identificação das estirpes efectuada pelo sistema API20NE (bioMérieux), seguindo a metodologia indicada pelo fabricante.

O estudo da susceptibilidade aos agentes antibacterianos foi efectuado pela técnica de difusão em ágar, seguindo as normas do National Committee for Clinical Labortory Standards (National..., 1997), com 19 antibióticos: carbenicilina, piperacilina, piperacilina + tazobactan, amoxicilina, amoxicilina + ác. clavulânico, ticarcilina, ticarcilina + ác. clavulânico, ampicilina, cefalotina, cefoperazona, cefepime, cefotaxime, aztreonamo, imipenemo, tetraciclina, norfloxacina, estreptomicina, tobramicina, canamicina e cloranfenicol.

As amostras de tecidos recolhidas foram fixadas em formol tamponado a 10%, incluídas em parafina e posteriormente cortadas com 3µm de espessura e corados pela hematoxilina-eosina.

Nas brânquias foram encontradas inúmeras formas parasitárias de Dactylogyrus spp. Não foram observadas quaisquer alterações macroscópicas externas ou nos órgãos internos. O exame microscópico revelou inflamação aguda moderada das brânquias e esteatose hepatocitária exuberante em alguns dos animais.

A identificação dos agentes bacterianos presentes na água e na pele permitiu classificar as estirpes como Pasteurella haemolytica (50%), Pasteurella multocida (25%) e Vibrio spp.(25%). Nas amostras de rins não foram isoladas estirpes bacterianas. Cerca de 66,7% das Pasteurella spp. apresentaram resistência à amoxicilina e ticarcilina (Fig. 1).

Em relação aos aminoglicosídeos, as Pasteurella spp. apresentaram resistência à estreptomicina (66,7%). Observou-se elevada susceptibilidade à oxitetraciclina e ao cloranfenicol, respectivamente, 93% e 87%. Nas estirpes de Vibrio spp. observou-se resistência de 80% à carbenicilina e de 40% à amoxicilina e ampicilina (Fig. 2). Todos os isolados apresentaram susceptibilidade ao aztreonamo. Especialmente relevante foi a elevada resistência das estirpes de Vibrio à estreptomicina (100%). Todos os isolados apresentaram susceptibilidade à tetraciclina e ao cloranfenicol.

Os resultados sugerem que o estado de morbilidade dos robalos (D. labrax) pode ser atribuído à elevada carga parasitária, com agravamento pela presença de bactérias, factores que estiveram na origem do elevado índice de mortalidade. Foram realizados testes bioquímicos para complementar a biotipificação numérica realizada pelos testes comerciais API 20NE. Concluiu-se que o cloranfenicol e a tetraciclina foram os antimicrobianos mais eficazes para o tratamento da infecção por esses agentes. Ressalta-se que o uso do cloranfenicol não é recomendado para ser usado em animais destinados ao consumo humano.

Recebido para publicação em 23 de abril de 2003

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  17 Jun 2004
• Data do Fascículo
  Abr 2004

Histórico

• Recebido
  23 Abr 2003