[Prenatal toxicity assessment: teratogenicity study of the insecticide pyriproxyfen in Wistar rats]

This study investigated the prenatal toxicity of the insecticide pyriproxyfen in Wistar rats to detect the possible changes in the fetal development of the progeny exposed during the organogenic period. Three doses of pyriproxyfen (100, 300, and 500mg.kg^-1) were administered orally to the progenitors, from day 6 to 15 of gestation. The fetuses were processed using the Taylor and Van Dyke modified diaphanization technique to evaluate malformations and skeletal changes. The results did not demonstrate the occurrence of systemic maternal toxicity or changes in the reproductive indexes evaluated. Malformations or teratogenic changes were not detected, however, skeletal changes suggestive of developmental delay were observed, especially in the highest doses tested (300 mg.kg^-1 and 500 mg.kg^-1). Owing to the potentially complex situation regarding its risk to human health, it is important that further studies be performed to contribute to the risk assessment of the addition of pyriproxyfen in drinking water.

Keywords:
pyriproxyfen; Zika virus; toxicology; teratogenicity; microcephaly

Authorship

A.S. Sartori

Instituto de Ciências Básicas da Saúde - Universidade Federal do Rio Grande do Sul - Porto Alegre, RSUniversidade Federal do Rio Grande do SulBrazilPorto Alegre, RS, BrazilInstituto de Ciências Básicas da Saúde - Universidade Federal do Rio Grande do Sul - Porto Alegre, RS

http://orcid.org/0000-0002-9171-9357

C.B. Hollenbach

http://orcid.org/0000-0001-6743-504X

L.H. Jardim

http://orcid.org/0000-0002-0214-9285

P. Silva

Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre - UFCSPA - Porto Alegre, RSUniversidade Federal de Ciências da Saúde de Porto AlegreBrazilPorto Alegre, RS, BrazilUniversidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre - UFCSPA - Porto Alegre, RS

http://orcid.org/0000-0002-1712-7046

F.B. Mello

http://orcid.org/0000-0002-2787-1768

J.R.B. Mello

http://orcid.org/0000-0002-7120-7709

E-mail: amandassartori@hotmail.com

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Tables

Tables (6)

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Tabela 1
Evolução da massa corporal relativa de ratas Wistar tratadas com 100mg.kg^-1 (1P), 300mg.kg^-1 (3P) e 500mg.kg^-1 (5P) de piriproxifeno e 300mg.kg^-1 de tween 80 (CN), por via oral, com sonda orogástrica, do sexto ao 15° dia de gestação

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Tabela 2
Índices reprodutivos de ratas Wistar expostas a 100mg.kg^-1 de piriproxifeno (1P), 300mg.kg^-1 de piriproxifeno (3P), 500mg.kg^-1 de piriproxifeno (5P) e tween 80 (300mg.kg^-1) (CN), do sexto ao 15° dia de gestação

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Tabela 3
Índices fetais de ratas Wistar tratadas com 100mg.kg^-1 (1P), 300mg.kg^-1 (3P) e 500mg.kg^-1 (5P) de piriproxifeno e 300mg.kg^-1 de tween 80 (CN), com sonda orogástrica, do sexto ao 15° dia de gestação

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Tabela 4
Ocorrência de anormalidades nos ossos da cabeça dos fetos de ratas Wistar tratadas com 100mg.kg^-1 (1P), 300mg.kg^-1 (3P) e 500mg.kg^-1 (5P) de piriproxifeno e 300mg.kg^-1 de tween 80 (CN), do sexto ao 15° dia de gestação

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Tabela 5
Ocorrência de anormalidades nos ossos da região cervical, do tórax, da lombar e da pelve dos fetos de ratas Wistar tratadas com 100mg.kg^-1 (1P), 300mg.kg^-1 (3P) e 500mg.kg^-1 (5P) de piriproxifeno e 300mg.kg^-1 de tween 80 (CN), com sonda orogástrica, do sexto ao 15° dia de gestação

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Tabela 6
Ocorrência de anormalidades nos ossos dos membros torácicos e pélvicos dos fetos de ratas Wistar tratadas com 100mg.kg^-1 (1P), 300mg.kg^-1 (3P) e 500mg.kg^-1 (5P) de piriproxifeno e 300mg.kg^-1 de tween 80 (CN), com sonda orogástrica, do sexto ao 15° dia de gestação

Tabela 1 Evolução da massa corporal relativa de ratas Wistar tratadas com 100mg.kg^-1 (1P), 300mg.kg^-1 (3P) e 500mg.kg^-1 (5P) de piriproxifeno e 300mg.kg^-1 de tween 80 (CN), por via oral, com sonda orogástrica, do sexto ao 15° dia de gestação

Dias	Grupos
	1P (n = 27)	3P (n = 25)	5P (n = 25)	CN (n = 22)
	Média	Média	Média	Média	Valor-P*
2	101,55 ± 0,309	101,11 ± 0,259	101,36 ± 0,293	101,85 ± 0,317	0,385
7	106,57 ± 0,733^a	105,95 ± 0,366^a/b	104,23 ± 0,580^b	106,60 ± 0,494^a	0,012
14	117,64 ± 0,832^a	117,56 ± 0,589^a	114,18 ± 0,645^b	117,08 ± 0,829^a	0,002
21	147,41 ± 1,673	147,22 ± 1,284	142,75 ± 1,204	144,00 ± 1,222	0,038

Os dados são expressos em média ± erro-padrão. *ANOVA para medidas repetidas. Teste de comparações pareadas com ajuste de Bonferroni. Valores com a mesma letra, na segunda e terceira linhas, não são significativamente diferentes, considerando-se P<0,05.

Tabela 2 Índices reprodutivos de ratas Wistar expostas a 100mg.kg^-1 de piriproxifeno (1P), 300mg.kg^-1 de piriproxifeno (3P), 500mg.kg^-1 de piriproxifeno (5P) e tween 80 (300mg.kg^-1) (CN), do sexto ao 15° dia de gestação

Índices reprodutivos	Grupo
Índices reprodutivos	1P	3P	5P	CN	P
Número de progenitoras	27	25	25	22
Número total de fetos	305	275	298	241
Nº de fetos/genitora¹	11,3 ± 0,500	11,0 ± 0,327	11,92 ± 0,294	10,91 ± 0,509	0,325
Perdas pós-implantação (%)²	1,27 ± 0,608	3,32 ± 1,695	1,86 ± 0,811	1,89 ± 1,218	0,868

Os dados representam a média ± erro-padrão. ANOVA¹ ou Kruskal-Wallis².

Tabela 3 Índices fetais de ratas Wistar tratadas com 100mg.kg^-1 (1P), 300mg.kg^-1 (3P) e 500mg.kg^-1 (5P) de piriproxifeno e 300mg.kg^-1 de tween 80 (CN), com sonda orogástrica, do sexto ao 15° dia de gestação

Índices fetais	Grupo
Índices fetais	1P	3P	5P	CN	P
Número total de fetos	305	275	298	241
Massa corporal ao nascimento (g)¹	4,92 ± 0,028^a,b	4,89 ± 0,027 ^a,b	4,99 ± 0,024^a	4,90 ± 0,026^b	0,010
Proporção de sexo (macho:fêmea)²	0,8485:1	0,8333:1	0,8089:1	0,9127:1	0,919
Taxa de malformações externas (%)	0	0	0	0

Os dados são expressos em média ± erro-padrão. ¹Kruskal-Wallis/Dunn-Bonferroni. Valores com a mesma letra não são significativamente diferentes, considerando-se P<0,05. ²Qui-quadrado.

Tabela 4 Ocorrência de anormalidades nos ossos da cabeça dos fetos de ratas Wistar tratadas com 100mg.kg^-1 (1P), 300mg.kg^-1 (3P) e 500mg.kg^-1 (5P) de piriproxifeno e 300mg.kg^-1 de tween 80 (CN), do sexto ao 15° dia de gestação

	Grupo
Anormalidades (%)	1P (n = 305)	3P (n = 275)	5P (n = 298)	CN (n = 241)	P*
Alargamento de fontanela	44,92^a,c	49,09^a	66,33^b	35,68^c	< 0,001
Redução de fontanela	4,92	4,73	2,69	5,81	0,335
Supraoccipital
Formato irregular	0,98	2,18	1,01	0,83	0,462
Ossificação incompleta	20,33^a,b	20,36^a,b	27,95^a	17,01^b	0,014
Centro adicional de ossificação	0	0,36	0	1,24	0,026
Interparietal
Ossificação incompleta	1,31	1,09	1,68	0,83	0,853
Centro adicional de ossificação	5,25^a	3,64 ^a	13,47 ^b	6,22^a	< 0,001
Parietais
Formato irregular	0,33	0	0	0	1,000
Ossificação incompleta	2,30	2,18	2,36	0	0,130
Centro adicional de ossificação	0,98^a	0	5,72^b	0,4^a	< 0,001
Frontais
Formato irregular	0,33	0	0	0	1,000
Ossificação incompleta	0,33	0	0,67	0	0,568
Nasal
Ossificação incompleta	0,33	0	0	0	1,000
Incisivo
Ossificação incompleta	0,33	0	0	0	1,000
Zigomático
Ossificação incompleta	1,64	1,82	2,02	0,41	0,462
Fusão	1,64	0,73	3,03	0	0,016
Mandíbula
Ossificação incompleta	13,11^a,b	10,18^a,c	19,87^b	4,56^c	< 0,001
Encurtada	1,97	4,36	3,70	5,39	0,189
Basisfenoide
Formato irregular	0	0,36	0	0,41	0,357
Ossificação incompleta	0	2,18	2,36	0,41	0,016
Áxis
Formato irregular	0	0,36	0	1,24	0,026
Justaposição de parietais e frontais	4,92	4,36	6,73	4,56	0,560
Calota pobremente ossificada	3,93^a	13,09^b	4,71^a	0,83^a	< 0,001

*Qui-quadrado. Valores com a mesma letra não apresentam diferença significativa pelo teste Z, considerando-se P<0,05.

Tabela 5 Ocorrência de anormalidades nos ossos da região cervical, do tórax, da lombar e da pelve dos fetos de ratas Wistar tratadas com 100mg.kg^-1 (1P), 300mg.kg^-1 (3P) e 500mg.kg^-1 (5P) de piriproxifeno e 300mg.kg^-1 de tween 80 (CN), com sonda orogástrica, do sexto ao 15° dia de gestação

	Grupo
Anormalidades (%)	1P (n = 305)	3P (n = 275)	5P (n = 298)	CN (n = 241)	P*
Vértebras cervicais
Pobremente ossificadas	1,97	2,18	0,34	0	0,027
Clavícula
Posição irregular	0	0,36	0,34	0	0,721
Escápula
Formato irregular	0,66	0	2,69	0	0,001
Ossificação incompleta	4,59^a,b	7,27^a	1,68^b	2,07^b	0,002
Parte ausente	5,25^a	12,00^b	2,02^a	12,03^b	< 0,001
Vértebras torácicas
Ossificação incompleta	0,98	1,45	0,34	0,41	0,458
Centro bipartido	2,30	2,55	2,69	0,83	0,448
Costelas
Onduladas	3,61	2,55	4,71	6,64	0,124
Ausentes	0,33	0,73	2,02	0,83	0,171
14º vestigial	27,87	24,73	29,97	20,33	0,065
14º.rudimentar	1,31	0,73	0,34	0,83	0,605
Estérnebras
Formato irregular	72,46^a,b	76,73^a	75,08^a	64,32^b	0,009
Pobremente ossificadas	26,89^a	26,9^a	14,81^b	22,41^a,b	0,001
Ausente	3,61	4,73	2,69	1,66	0,231
Vértebras lombares
Ossificação incompleta	0,66	1,45	2,69	0	0,024
Pobremente ossificadas	1,64	1,82	0	0	0,024
Ílio
Pobremente ossificado	1,64	0,73	0	0	0,033
Ísquio
Pobremente ossificado	2,30	1,82	0	0,41	0,022
Púbis
Pobremente ossificado	2,30	1,82	0,34	0,83	0,148
Vértebras sacrais
Pobremente ossificadas	3,28	3,64	0,67	1,24	0,039

*Qui-quadrado. Valores com a mesma letra não apresentam diferença significativa pelo teste Z, considerando-se P<0,05.

Tabela 6 Ocorrência de anormalidades nos ossos dos membros torácicos e pélvicos dos fetos de ratas Wistar tratadas com 100mg.kg^-1 (1P), 300mg.kg^-1 (3P) e 500mg.kg^-1 (5P) de piriproxifeno e 300mg.kg^-1 de tween 80 (CN), com sonda orogástrica, do sexto ao 15° dia de gestação

	Grupo
Anormalidades (%)	1P (n = 305)	3P (n = 275)	5P (n = 298)	CN (n = 241)	P*
Úmero	0	0	0	0
Rádio e ulna	0	0	0	0
Metacarpos
Pobremente ossificados	1,31	2,91	0,34	0,41	0,020
Falanges (membros torácicos)
Não ossificadas	53,44^a	55,64^a	68,35^b	60,58^a,b	0,001
Fêmur
Pobremente ossificado	1,31	2,91	0,67	0,00	0,017
Tíbia e fíbula
Pobremente ossificadas	2,62^a,b	4,36^a	4,04 ^a	0,41^b	0,034
Metatarsos
Pobremente ossificados	5,57^a,b	8,73^a	5,39^a,b	2,49^b	0,024
Falanges (membros pélvicos)
Não ossificadas	76,07^a	78,18^a,b	80,13^a,b	86,31^b	0,024

*Qui-quadrado. Valores com a mesma letra não apresentam diferença significativa pelo teste Z, considerando-se P<0,05.

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E-mail: abmvz.artigo@gmail.com

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