Detecção de sequência 16S rRNA, específica de Borrelia, em RNA total extraído de Ixodes ricinus

Ž. Radulović M. Milutinović S. Tomanović A. Mulenga Sobre os autores

Para a detecção de espécies de Borrelia em carrapatos, desenvolveu-se a técnica da transcrição reversa, seguida da reação em cadeia da polimerase (RT-PCR). A técnica baseou-se na amplificação de 552 bases de nucleotídeos de 16S rRNA, utilizando-se primers específicos de Borrelia. O RNA total extraído de amostras de carrapatos Ixodes ricinus foi usado como modelo. Verificou-se maior sensibilidade da RT-PCR, para a detecção de Borrelia, em comparação com a microscopia de campo escuro padrão. A especificidade da técnica foi confirmada por clonagem e sequenciamento dos 552 pares de base obtidos. A análise filogenética das sequências obtidas revelou que pertencem a B. lusitaniae e genospecies B. afzelii. A RT-PCR apresentada neste trabalho poderá ser muito útil como teste de triagem para detectar a presença do patógeno. Especialmente quando em investigações, é necessária a extração total de RNA de carrapatos.

Borrelia; RT-PCR; 16S rRNA; Ixodes ricinus


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