Efeito da idade sobre a fertilidade e perdas embrionárias de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado a 5ºC por 12 horas de armazenamento

Effect of age on fertility and embryonic loss of mares inseminated with jackass semen diluted and cooled at 5ºC for 12 hours

Resumos

Estudou-se o efeito da idade sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído, resfriado e armazenado. Os ciclos foram acompanhados por palpação transretal e rufiação, sendo as inseminações realizadas às terças, quintas e sábados, a partir da detecção de um folículo de 3,0 a 3,5cm de diâmetro, em um dos ovários, até a ovulação. O sêmen de cinco jumentos da raça Pêga foi diluído nos diluidores de leite em pó desnatado-glicose ou glicina-gema de ovo, resfriado a 5ºC e armazenado por 12 horas, sendo a dose inseminante de 400 x 10⁶ espermatozoides móveis (no momento da diluição final, pré-resfriamento). Os resultados de 195 ciclos estrais, referentes a 141 éguas, foram agrupados em classes, de acordo com a idade das éguas: 2,5 a 6 anos, 6,5 a 10 anos, 10,5 a 14 anos e 14,5 a 19 anos. As taxas de concepção, ao primeiro ciclo, foram de 68,42%, 50,75%, 46,88% e 52,17% e, após quatro ciclos, de 69,57%, 47,92%, 46,34% e 45,71% para as faixas etárias de 2,5 a 6, 6,5 a 10, 10,5 a 14 e 14,5 a 19 anos, respectivamente (P>0,05). A idade não teve efeito sobre a fertilidade das éguas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado.

jumento; idade; sêmen resfriado; fertilidade; perda embrionária

The effect of the mare age on fertility of mares inseminated with diluted, cooled and stored jackass semen was studied. The females were controlled by transrectal palpation and teasing, and inseminated every Tuesday, Thursday and Saturday, since the detection of a 3.0 to 3.5cm follicle diameter, in one of the ovaries, until ovulation. The semen of five Pêga jackasses was diluted in skim milk-glucose or in egg yolk-glicine extender and cooled at 5ºC for 12 hours, with the inseminate dose of 400 x 10⁶ motile spermatozoa (at the moment of the final dilution, before cooling). The results of 195 cycles of 141 mares were grouped, in accordance with the age: 2.5 to 6 years, 6.5 to 10 years, 10.5 to 14 years and 14.5 to 19 years. The pregnancy rates for the first cycle were 68.42%, 50.75%, 46.88% and 52.17%, and after four cycles, the pregnancy rates/cycle were 69.57%, 47.92%, 46.34% and 45.71%, respectively for 2.5 to 6, 6.5 to 10, 10.5 to 14 and 14.5 to 19 years (P>0,05). The mare age had no influence on fertility, using diluted and cooled jackass semen.

jackass; age; cooled semen; fertility; embryonic loss

INTRODUÇÃO

Diferentemente do que acontece com outras espécies criadas para o consumo humano, em que as fêmeas são abatidas ainda jovens, na espécie equina ocorre seleção genética pelo desempenho atlético nas pistas, mantendo as éguas por período prolongado em atividades esportivas sendo, assim, afastadas temporariamente da reprodução (Pycock, 2006). Em virtude do ingresso tardio na reprodução, éguas de idade avançada fazem parte de diversos rebanhos e constituem importante fonte de variação nos índices de fertilidade obtidos. O valor afetivo e financeiro do animal influencia no tempo de permanência no rebanho, sendo que o apego e a preferência individual por certos animais, além do valor genético continuam sendo fatores importantes na escolha de matrizes que serão utilizadas na reprodução, mesmo após os 20 anos de idade. Esta tendência é uma realidade em muitos haras brasileiros, aumentando o desafio dos veterinários em utilizar éguas cada vez mais velhas na reprodução. Por outro lado, tem sido proposto que fêmeas de menor valor, como as utilizadas na produção de muares, são mantidas no rebanho, principalmente, enquanto produzirem boas crias, independentemente da sua idade.

O efeito da idade da égua sobre a fertilidade tem sido demonstrado na literatura, sendo os piores resultados atribuídos aos animais mais velhos (Jordão e Gouveia, 1950; Woods et al., 1987; Chevalier-Clément, 1989; Fleury et al., 1989; Mattos et al., 1991; McDowell et al.,1992; Camillo et al., 1997; Valle et al., 1999; Morris e Allen, 2002; Buiten et al., 2003; Allen et al., 2006). No entanto, éguas muito jovens também podem contribuir negativamente para a fertilidade do rebanho, uma vez que a imaturidade uterina dessas está relacionada a altas taxas de perdas gestacionais e a baixas taxas de nascimento (Mitchell e Allen, 1975; Lucas et al., 1991).

Diversos fatores tem sido associados à síndrome do envelhecimento, sendo importante ressaltar o desequilíbrio endócrino com alteração da função hipotalâmica-hipofisária-gonadal (Carnevale et al., 1993, 1994), o desarranjo das estruturas do oócito (Hunter, 1990; Rambags et al., 2006), as alterações dos ambientes tubárico (Brinsko et al., 1994; Brinsko et al., 1996) e uterino (Carnevale e Ginther, 1992; LeBlanc, 2003) e as alterações de conformação vulvar (Greenhoff e Kenney, 1975; Pascoe, 1979). Estes fatores estão interligados e podem ocorrer de forma associada, em um mesmo animal, com consequente redução da eficiência reprodutiva.

Nesse sentido, foi objetivo do estudo avaliar o efeito da idade sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado, em fazenda destinada à produção comercial de muares.

MATERIAL E MÉTODOS

O presente estudo foi conduzido na Fazendo do Váu, no Município de Lagoa Dourada, Minas Gerais, região sudeste do Brasil, no período de outubro de 2007 a janeiro de 2008. A unidade experimental localiza-se a 1124 metros de altitude e 20º 54' 50'' de latitude S e 44º 4' 40'' de longitude W.

Foram utilizadas 141 fêmeas equinas mestiças, de 2,5 a 19 anos de idade, que resultaram em 195 ciclos estrais inseminados. As fêmeas equinas foram agrupadas em classes por idade, de acordo com a faixa etária a que pertenciam e analisadas quanto à fertilidade sendo: 2,5 a 6 anos (n = 23), 6,5 a 10 anos (n = 96), 10,5 a 14 anos (n = 41) e 14,5 a 19 anos (n = 35).

A partir da detecção de um folículo de 2,0 a 2,5cm de diâmetro, em um dos ovários, as fêmeas equinas foram examinadas diariamente por meio de palpação transretal e rufiação. As inseminações foram iniciadas quando se detectou folículo com 3,0 a 3,5cm de diâmetro, em um dos ovários, sendo realizadas em dias fixos às terças, quintas e sábados (três vezes/semana), até a ovulação, sendo o sêmen depositado no corpo do útero.

Para o diagnóstico de gestação, palpações transretais e rufiações de retorno foram realizadas, a partir do 15° dia pós-ovulação, sendo complementadas pelo uso de ultrassonografia, realizada a cada 14 dias (SSD500, Aloka, probe de 7,5 MHz). O diagnóstico por imagem iniciava-se num período mínimo de 11 dias pós-ovulação, sendo que cada égua positiva era submetida à, pelo menos, dois diagnósticos subsequentes, até o final da estação de monta. Das éguas que reabsorveram, apenas aquelas com período gestacional inferior aos 35 dias retornaram para o programa reprodutivo, de acordo com Penzhorn et al. (1986).

Foram utilizados cinco jumentos da raça Pêga, como doadores de sêmen, avaliados em um período anterior ao experimento para comprovação da qualidade do sêmen fresco e pós- resfriamento. O sêmen foi coletado por meio de vagina artificial modelo Hannover, as terças, quintas e sábados (três vezes/semana). Após a avaliação da motilidade e vigor espermáticos, procedeu-se a contagem das células espermáticas em câmara de Neubauer, para cálculo da concentração, com posterior diluição do sêmen em diluidor à base de leite em pó desnatado-glicose (Kenney et al., 1983) ou de glicina-gema de ovo (Foote, 2002). As doses inseminantes, de 20mL e 400 x 10⁶ espermatozoides móveis, foram resfriadas a 5ºC por 12 horas de armazenamento, em contêiner especial (Palhares, 1997).

A fertilidade das éguas não foi influenciada (P>0,05) pelos diluidores de sêmen utilizados, pelo número de inseminações realizadas por ciclo, pelo intervalo IA-ovulação ou pela categoria reprodutiva das éguas (Rossi, 2008). Assim, com esses fatores balanceados, foi possível analisar o efeito da idade sobre a fertilidade das fêmeas equinas, agrupando-se os dados em classes por idade, segundo a faixa etária à qual pertenciam: 2,5 a 6, 6,5 a 10, 10, 5 a 14 e 14,5 a 19 anos.

A eficiência de prenhez foi calculada pela conversão de dados qualitativos em quantitativos, segundo proposta de Voss et al. (1975). Os dados foram submetidos à análise de variância utilizando-se para a comparação das médias o teste de Student-Newman-Keuls (SNK). Os demais dados quantitativos foram também submetidos à análise de variância e teste SNK. Os dados proporcionais (número de ciclos/concepção, taxa de concepção/ciclo, taxa de concepção total e ciclos/égua gestante) foram analisados por dispersão de frequência e comparados pelo teste de Qui-Quadrado para detecção de diferenças entre os grupos.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Observa-se, na Tab. 1, que as taxas de concepção, ao primeiro ciclo, e que as taxas de concepção/ciclo, após quatro ciclos, foram similares entre os grupos de diferentes faixas etárias (P>0,05).

Tabela 1
Efeito da idade sobre a fertilidade, por ciclo estral, de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado

Ciclo	Idade das Éguas (anos)
	2,5 - 6,0		6,5 - 10		10,5 - 14,0		14,5 - 19,0		Total
	№ de Ciclos	Taxa Concepção (%)	№ de Ciclos	Taxa Concepção (%)	№ de Ciclos	Taxa Concepção (%)	№ de Ciclos	Taxa Concepção (%)	№ de Ciclos	Taxa Concepção (%)
1	19(13)a	68,42	67(34)	50,75	32(15)	46,88	23(12)	52,17	141(74)	52,48
2	3(3)	100,00	20(8)	40,00	9(4)	44,44	8(3)	37,50	40(18)	45,00
3	1(0)	0,00	8(3)	37,50	….	….	3(1)	33,33	12(4)	33,33
4	….	….	1(1)	100,00	….	….	1(0)	0,00	2(1)	50,00
Total	23(16)	69,57	96(46)	47,92	41(19)	46,34	35(16)	45,71	195(97)	49,74

• Números entre parênteses indicam as fêmeas que conceberam

Na Tab. 2 estão apresentadas as variáveis de controle e de resultados, de acordo com Valle (1997), observando-se diferenças (P<0,05) entre os grupos, no que diz respeito apenas à faixa etária, como era de se esperar. Todas as demais variáveis reprodutivas foram semelhantes (P>0,05) entre os grupos. Também não houve influência da idade (P>0,05) sobre a eficiência de prenhez (Tab. 2) das éguas inseminadas.

Tabela 2
Variáveis de controle e de resultados de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado, agrupadas de acordo com a idade

Variável	Idade das Éguas (anos)
	2,5-6,0	6,5-10	10,5-14	14,5-19
№ de ciclos	23	96	41	35
Idade das éguas (anos)	4,17±1,33d	7,71±1,00c	12,34±0,93b	16,07±1,22ª
№ de IA/ciclo	1,91±1,20	1,96±0,79	1,95±0,95	2,17±1,10
Volume de sêmen (mL)	3,03±1,39	2,84±1,74	3,03±1,75	2,93±1,31
Volume de diluidor (mL)	16,97±1,39	17,17±1,75	16,99±1,76	17,07±1,31
Tempo colheita/diluição (min)	19,64±3,98	18,84±2,97	19,03±3,38	18,83±2,76
Tempo colheita/resf. (min)	24,82±3,29	24,64±4,19	24,39±3,41	24,07±3,06
Tempo colheita/abertura (h)	13,15±0,68	13,16±0,76	13,10±0,76	13,25±0,90
Tempo colheita/IA (h)	13,30±0,69	13,32±0,75	13,25±0,78	13,41±0,94
№ de IA/ciclo positivo	1,88±1,36	1,98±0,68	1,84±0,90	2,19±1,05
№ de IA/ciclo negativo	2,00±0,82	1,94±0,89	2,05±1,00	2,16±1,17
№ de ciclos/concepção	1,44	2,09	2,16	2,19
Taxa de concepção/ciclo	0,7	0,48	0,46	0,46
№ de ciclos/égua gestante	1,19±0,40	1,37±0,71	1,21±0,42	1,31±0,60
Eficiência de Prenhez	6,70±4,58	4,44±4,75	4,44±4,87	4,29±4,81

• Médias seguidas por letras diferentes na mesma linha, diferem entre si (P<0,05)

Observou-se percentual total de perdas gestacionais de 8,51% (12/141), em todo o rebanho, com a seguinte distribuição por faixa etária: 2,5-6,0 anos (1/12 - 8,33%); 6,5-10 anos (5/12- 41,67%); 10,5-14,0 anos (1/12 - 8,33%); 14,5-19,0 anos (5/12 - 41,67%). Não foi possível comparar as perdas gestacionais estatisticamente, devido ao pequeno número de ocorrências nas diferentes faixas etárias estudadas. Além disso, os dados foram coletados até o final da estação de monta, não sendo possível observar aumento da incidência de perdas gestacionais, acompanhando o aumento da idade.

No presente estudo, a idade não influenciou (P>0,05) a fertilidade das fêmeas equinas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado. Deve-se considerar que o número de ciclos para a faixa de 2,5-6,0 foi abaixo do ideal, tanto para o primeiro ciclo, quanto para o total de ciclos, e que o teste de qui-quadrado utilizado pode causar sobreposição dos intervalos de confiança. O mesmo ocorre para a faixa de 14,5-19,0 anos, apenas nos dados do primeiro ciclo. No entanto, a idade é um fator de extrema importância a ser considerado quando se avaliam resultados de fertilidade, notadamente no que se refere às perdas embrionárias e fetais, tanto em éguas mais velhas (Vanderwall, 2011), quanto em fêmeas equinas muito jovens (Lucas et al., 1991; Mitchell e Allen, 1975).

Resultados de diferentes estudos divergem quanto à idade em que se observa início do declínio da fertilidade, em fêmeas equinas. Jordão e Gouveia (1950) verificaram redução da fertilidade em éguas a partir dos 10 anos de idade e McDowell et al. (1992) e Barron (1995), aos 11 anos de idade. Mattos et al. (1991) verificaram ser a taxa de gestação inversamente proporcional à idade da égua, com redução pronunciada da fertilidade aos 13 anos. Silva (1991), a partir da mesma faixa etária, observou aumento de patologias do sistema genital nas fêmeas equinas. Além disso, de acordo com a autora, observou-se maior somatório de transtornos ligados ao envelhecimento, em um mesmo animal, acompanhando o aumento da idade. Carnevale e Ginther (1992), Camillo et al. (1997) e Valle et al. (1999) observaram fertilidade inferior para éguas acima de 15 anos. Já Woods et al. (1987) observou redução aparente da fertilidade a partir dos 18 anos. Em um único estudo conduzido por Brandão (2001), similarmente ao que foi observado no presente experimento, não foram observadas diferenças de fertilidade entre as diferentes idades (P>0,05), o que contrasta com a literatura consultada.

Carnevale et al. (1997) observaram menor atividade folicular no grupo de éguas velhas, em comparação ao de jovens, sendo que três de nove éguas, com idade acima de 20 anos, sequer apresentaram crescimento folicular acima de 20mm de diâmetro. Demonstrou-se que a senescência ocorreu em éguas acima de 20 anos de idade. No presente estudo, apenas cinco éguas tinham idade superior a 16 anos, sendo que uma, duas e duas apresentavam idades de 19,18 e 17 anos, respectivamente, com média de 16,07±1,22 anos. O pequeno número de éguas mais velhas e nenhuma no período de senescência, segundo a literatura, pode ter influenciado na obtenção de taxas de concepção similares entre as faixas etárias.

A utilização de boas práticas de manejo e higiene utilizadas, dando enfoque ao uso da IA com sêmen diluído em diluidores apresentando antibióticos em sua formulação, podem ter favorecido os resultados do presente estudo, notadamente no que se refere às éguas mais velhas e com problemas reprodutivos. Sustentação para esta proposta tem sido encontrada na literatura, como pode ser observado nos estudos realizados por Mattos et al. (1996) e Blanchard et al. (2004), nos quais foi observada superioridade da IA em relação a monta natural, no que se refere as taxas de gestação obtidas. Doig et al. (1981), também utilizando a IA, otimizaram as taxas de nascimento de potros, excetuando-se as éguas com danos severos no endométrio. O fracionamento do sêmen com sua diluição em diluidores que contenham antibióticos, para a produção das doses inseminantes, reduzem o número de contaminantes inoculados no útero e o desafio do ambiente uterino, principalmente em éguas susceptíveis, podendo ser as taxas de concepção superiores em até 30% com o uso da IA, em relação à monta natural (Pickett e Shiner, 1994).

Finalmente vale salientar que, em diversos estudos, a atuação eficiente do médico veterinário, aliada ao descarte dos animais de baixa fertilidade, influenciou positivamente os índices reprodutivos obtidos (Von Lepel, 1975; Morris e Allen, 2002; Blanchard et al., 2004). No presente estudo utilizou-se rebanho de éguas mestiças visando à produção comercial de muares, com baixo valor individual se comparado ao valor de éguas oriundas de raças puras, o que poderia ter facilitado descartes mais frequentes das fêmeas. Sendo assim, ficariam no rebanho as fêmeas mais férteis, independentemente da idade. Tal proposta merecerá uma avaliação crítica em outros estudos realizados em diferentes propriedades, com o mesmo sistema de criação.

CONCLUSÕES

A idade não influenciou a fertilidade das éguas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado. Assim deve-se realizar, sempre que possível, seleção do rebanho com enfoque na fertilidade. Aditivamente a um melhor controle reprodutivo das éguas, deve-se optar pela utilização de boas práticas de manejo e de higiene, com ênfase na utilização da IA com sêmen diluído em diluidores adequados, com o intuito de aumentar a eficiência reprodutiva, principalmente em éguas susceptíveis e de idade avançada.

AGRADECIMENTOS

À FAPEMIG, pelo financiamento parcial deste trabalho; ao Sr. Renato Resende pela cessão dos animais e instalações da Fazenda do Vau; à Hertape Calier e à Dra. Marcela Roscoe, pelos medicamentos concedidos para o trabalho.

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  Sep-Oct 2014

Histórico

• Recebido
  23 Set 2013
• Aceito
  21 Ago 2014