Acta Cirúrgica Brasileira, Volume: 25, Issue: 1, Published: 2010
  • O CBC e a SOBRADPEC

    Ferraz, Edmundo Machado
  • Papers of the XI National Congress of Experimental Surgery, and the XXIV Research Forum of the Brazilian College of Surgeons and the First Meeting of Postgraduation Programs in Surgery, Brazil, 2009 Editorial

    Schanaider, Alberto
  • Enterocyte ultrastructural alterations following intestinal obstruction in rats Original Articles

    Leite Junior, Rubens; Mello, Natalia Bernardes; Pereira, Lara de Paula Miranda; Takiya, Cristina Maeda; Oliveira, Carlos Alberto Basílio de; Schanaider, Alberto

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Analisar as alterações ultra-estruturais da mucosa do intestino delgado e caracterizar a severidade das lesões causadas por uma obstrução intestinal mecânica, associada ou não a isquemia da arcada marginal mesentérica. MÉTODOS: Foram utilizados 47 ratos, da linhagem Wistar, distribuídos em quatro grupos, da seguinte forma: Grupo 1 - Controle (C), Grupo 2- Simulação (S), Grupo 3- Ratos com obstrução intestinal sem inclusão de vaso marginal (OEV), Grupo 4 - Obstrução intestinal com inclusão de vaso marginal (OIV). Os animais dos grupos 3 e 4 foram redistribuídos em dois subgrupos com coleta de amostras do intestino delgado, à montante (P) e à jusante (D) do ponto de obstrução. Nos grupos 2, 3 e 4, as amostras foram colhidas com 24, 48 e 72 horas de pós-operatório. No grupo 1, este material foi retirado após laparotomia. Realizaram-se estudos morfológicos e morfométricos dos microvilos através das Microscopias Óptica e Eletrônica de Transmissão. Os resultados foram analisados mediante os testes estatísticos de ANOVA e Newman-Keuls. RESULTADOS: Não foram observadas lesões irreversíveis. No grupo 3 com 24 horas, o volume dos microvilos diminuiu, à montante, com discreto aumento em 72 horas. Á jusante, houve redução significante até 48 horas, com recuperação em 72 horas. No grupo 4, o volume dos microvilos quase dobrou em relação ao grupo 1, com 24 horas, mas reduziu-se, drasticamente, em especial à jusante, com 72 h de evolução, apresentando deformidade e achatamento severos, achados estes estatisticamente significantes. CONCLUSÕES: A obstrução intestinal mecânica do íleo terminal, associada ou não a isquemia da arcada mesentérica marginal, causa alterações ultra-estruturais reversíveis dos enterócitos, cuja gravidade é diretamente proporcional à duração do processo mórbido obstrutivo, até 72 horas de evolução. Aduz-se que, os vasos mesentéricos da arcada marginal exercem um papel relevante na preservação da mucosa intestinal, na presença destes quadros obstrutivos.

    Abstract in English:

    PURPOSE: To analyze the small intestinal mucosa ultrastructure, and to characterize the enterocyte lesion severity caused by mechanical intestinal obstruction combined or not with an ischemia of the mesenteric marginal vessels arch. METHODS: It was used 47 Wistar rats divided into 4 groups as follows: Group 1- Control rats (C), Group 2- sham rats (S), Group 3- rats submitted to intestinal obstruction excluding marginal vessel (OEV), Group 4- Intestinal obstruction including marginal vessels (OIV). Rats of groups 3 and 4 were allotted into two subgroups for the removal of small intestinal tissue samples, one at the proximal (P), and the other at the distal (D) segments from the obstruction site. Samples of groups 2, 3, 4 were obtained 24, 48, and 72 hours after post operation care. Small intestinal tissue samples of group 1 were excised following laparotomy. Imaging in Light and Transmission Electronic Microscopy were used for morphological and morphometric studies. The results were analyzed by using the ANOVA and Newman-Keuls tests. RESULTS: No irreversible lesion was observed. In the 24 hours microvilli volume of group 3 turned down at the proximal site henceforth enlarging very slowly within the next 72 hours. At the distal site significant microvilli shrinkage was observed up to 48 hours. Then they recovered their volume after 72 hours. In the 24 hours microvilli volume of group 4 grew twice in comparison with the microvilli of group 1 rats but after 72 hours there was drastic volume shrinkage, shape alterations, and severe flatness, especially in the distal segments of the obstruction site. CONCLUSIONS: Terminal ileum mechanical obstruction with mesenteric marginal arch ischemia led to reversible ultrastructural alterations after 72 hours, and the injury is proportional to the persistence of the obstructive process. Furthermore the mesenteric vessels of the marginal arcade play an important role in the maintenance of mucosal integrity, when such obstructive disorder is present.
  • Biodistribution of technetium-99m pertechnetate after Roux-en-Y gastric bypass (Capella technique) in rats Original Articles

    Rêgo, Amália Cínthia Meneses do; Araújo-Filho, Irami; Azevedo, Ítalo Medeiros; Jácome, Daniel Tôrres; Ramalho, Rachel de Alcântara Oliveira; Medeiros, Aldo Cunha

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Avaliar o efeito da cirurgia de desvio gástrico em Y de Roux (BGYR) na biodistribuição do pertecnetato de sódio (Na99mTc) em órgãos e tecidos de ratos. MÉTODOS: Doze ratos Wistar foram aleatoriamente distribuidos em dois grupos de seis animais cada. O grupo BGYR foi submetido a técnica cirúrgica do desvio gástrico em Y de Roux e o grupo controle não foi operado. No 15º dia de pós-operatório foi administrado 0,1 ml IV de Na99mTc aos animais dos dois grupos, com atividade radioativa média de 0,66MBq. Após 30 minutos os ratos foram mortos e retirados fragmentos de fígado, estômago, tireóide, coração, pulmão, rim e fêmur. As amostras foram lavadas com solução salina 0,9% pesadas e submetidas ao Contador Gama 1470, WizardTM Perkin-Elmer para se determinar o percentual de atividade radiotiva por grama (%ATI/g) de cada órgão. Empregou-se o teste t de Student para análise estatística, considerando p<0,05 como significante. RESULTADOS: Redução significante na média de %ATI/g foi observada no fígado, estômago e fêmur nos animais submetidos a cirurgia de BGYR comparado com o grupo controle (p<0,05). Nos demais órgãos não houve diferença significante no %ATI/g entre os dois grupos. CONCLUSÃO: A cirurgia BGYR em ratos modificou a biodistribuição do Na99mTc em alguns órgãos, podendo ter implicações clínicas na interpretação de exames cintilográficos.

    Abstract in English:

    PURPOSE: The biodistribution of sodium pertechnetate, the most used radiopharmaceutical in nuclear medicine, has not been studied in details after bariatric surgery. The objective was to investigate the effect of Roux-en-Y gastric bypass (RYGB) on biodistribution of sodium pertechnetate (Na99mTc-) in organs and tissues of rats. METHODS: Twelve rats were randomly divided into two groups of 6 animals each. The RYGB group rats were submitted to the Roux-en-Y gastric bypass and the control group rats were not operated. After 15 days, all rats were injected with 0.1mL of Na99mTc- via orbital plexus with average radioactivity of 0.66 MBq. After 30 minutes, liver, stomach, thyroid, heart, lung, kidney and femur samples were harvested, weighed and percentage of radioactivity per gram (%ATI/g) of each organ was determined by gama counter Wizard Perkin-Elmer. We applied the Student t test for statistical analysis, considering p<0.05 as significant. RESULTS: Significant reduction in mean %ATI/g was observed in the liver, stomach and femur in the RYGB group animals, compared with the control group rats (p<0.05). In other organs no significant difference in %ATI/g was observed between the two groups. CONCLUSION: This work contributes to the knowledge that the bariatric surgery RYGB modifies the pattern of biodistribution of Na99mTc-.
  • Characterization of pseudarthrosis with ultrasound backscattered signals in rats Original Articles

    Ferreira, Manoel Luiz; Matusin, Daniel Patterson; Machado, Christiano Bittencourt; Silva, Paulo César; Mello, Natalia Bernades; Amaral, Alessandra Cintra; Franco, Renata Schueler; Pereira, Wagner Coelho de Albuquerque; Schanaider, Alberto

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Propor um novo modelo de pseudoartrose em animais de pequeno porte e investigar o potencial de parâmetros de retroespalhamento de ultrassônico em diferenciar osso normal e com pseudoartrose. MÉTODOS: Doze Rattus norvegicus albinus (SPF) foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos, tendo cada grupo seis animais. No grupo Controle realizou-se uma abordagem cirúrgica ao fêmur, seguida da síntese por planos do músculo e da pele. O grupo Experimental foi submetido à osteotomia do fêmur aduzida da confecção de um retalho pediculado de fascia lata para interposição entre os segmentos resultantes da fratura induzida cirurgicamente. Prosseguiu-se com o alinhamento e estabilização óssea, mediante a confecção de um nó com fio de náilon em formato de U, introduzido em orifícios efetuados nas extremidades proximal e distal à fratura. As amostras ósseas foram irradiadas pelo ultrassom e sinais foram coletados para cada uma no intuito de analisar o parâmetro Retroespalhamento Integrado Aparente - AIB. RESULTADOS: Estudos radiológicos e anatomopatológicos evidenciaram a ausência de consolidação óssea com persistência de tecido fibro-osteóide. Os valores de AIB para ossos normais foram estatisticamente diferentes em relação aos ossos com pseudoartrose. CONCLUSÃO: O modelo experimental apresentou-se adequado para a formação de pseudoartrose em ratos e o parâmetro de retroespalhamento de ultrassom foi capaz de detectar tal doença óssea, in vitro.

    Abstract in English:

    PURPOSE: To propose a novel model of pseudarthrosis in a small animal and to investigate the ability of backscatter parameters from ultrasound signals in differentiating normal bone from those ones with pseudarthorsis. METHODS: Twelve Rattus norvegicus albinus free from pathogenic species (SPF) were randomly divided in two groups, with six animals each. In the Control group a surgical approach to the femur was made, followed by the synthesis of the muscle and skin layers. The Experimental group was submitted to an osteotomy of the femur and a vascularized flap of the fascia lata was interposed in the line of the fractured bone. Then the alignment and bone stabilization were accomplished, by using nylon stitch in U shape introduced in holes made in the proximal and distal fractured bone. Bone samples were scanned with ultrasound and signals were collected for each one to analyze the parameter Apparent Integrated Backscatter - AIB. RESULTS: Radiological and anatomopathologic studies revealed the absence of bone consolidation with persistence of fiber-osteoid tissue. Values of the ultrasound parameter AIB from normal bones were statistically different from those with pseudarthrosis. CONCLUSION: The experimental model was suitable for pseudarthrosis development in rats and the ultrasound backscatter parameters were able to identify such a bone disease in vitro.
  • The use of amniotic membrane in the repair of duodenal wounds in Wistar rats Original Articles

    Schimidt, Luciano Rodrigues; Cardoso, Edson José; Schimidt, Rogério Rodrigues; Back, Luiz Augusto; Schiazawa, Maria Beatriz; d'Acampora, Armando José; Sousa, Monique Viana de

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Na busca de um novo material para o reparo dos ferimentos duodenais, foi efetuado um estudo para avaliar o comportamento da membrana amniótica humana no reparo da parede duodenal em ratos. MÉTODOS: Foram utilizados 50 ratos Wistar, com peso entre 250 e 350g, machos, distribuídos, aleatoriamente, em dois grupos. Grupo A (n=8), submetido à duodenotomia sem tratamento, utilizados como controle. Grupo B (n=42), submetido a um remendo de membrana amniótica humana para tratamento de ferimento duodenal provocado. RESULTADOS: Todos os animais do grupo A foram a óbito. No grupo B não foram observadas alterações quanto a óbito ou formação de fístula duodenal. Observaram-se em todos os animais aderências peritoneais à região do reparo da parede do duodeno e obstrução intestinal em dois animais. O reparo da parede duodenal na área do remendo ocorreu de maneira progressiva com o aumento do período pós-operatório, com regeneração da mucosa e da camada muscular. CONCLUSÃO: A análise da membrana amniótica, do ponto de vista clínico, mostrou ser um tecido biológico que serviu para selar.

    Abstract in English:

    Purpose: In the search of a new material to repair duodenal wounds, a trial was conducted to assess the behavior of human amniotic membrane in the repair of the duodenal wall in rats. METHODS: Fifty Wistar rats weighing between 250 and 350g, male, were submitted to duodenotomy and randomly distributed into two groups. Group A (n=8) had no treatment and was used as the control group. In Group B (n=42) the duodenal wound was treated with a patch of human amniotic membrane. RESULTS: All animals in Group A died. In Group B no changes were observed with regards to death or the formation of duodenal fistula. All animals presented peritoneal adherences in the region on the duodenal wall repair and intestinal obstruction was observed in two animals. Healing of the duodenal wall in the region of the patch took place progressively as the post-operatory period increased, with regeneration of the mucosa and of the smooth muscle layer. CONCLUSION: From the clinical standpoint, the amniotic membrane proved to be a biological tissue which served as a temporary seal and allowed the wound to heal by second-intention, with re-establishment of the duodenal wall structure.
  • Qualitative and quantitative analysis of rabbit's fat mesenchymal stem cells Original Articles

    Mazzetti, Marcelo Paulo Vaccari; Oliveira, Isis Sousa; Miranda-Ferreira, Regiane; Fauaz, Grasiele; Ribeiro, Chaibe Nunes; Gomes, Paulo Oliveira; Pontes, Paulo; Ferreira, Alice Teixeira; Eça, Lilian Piñero

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Apresentar um modelo experimental de análise qualitativa e quantitativa de células tronco mesênquimais proveniente da gordura de coelhos obtido por lipectomia. A gordura poderia ser uma grande fonte de obtenção de células tronco mesenquimais, criando condições para a reparação de tecidos lesados. MÉTODOS: Foram removidos os panículos adiposos (2-3 cm) da região cervical de Coelhos Nova Zelândia (n = 10) por lipectomia. Os panículos foram fragmentados e lavados com PBS e, posteriormente, dissociados enzimaticamente com tripsina / EDTA. As células extraídas do panículo adiposo foram incubadas em meio de cultura DMEM e após 20 dias, foi realizada uma análise quantitativa da adesão de primeira e segunda passagem das células mesênquimais em garrafas de cultura. RESULTADOS: Foram extraídas 1,62 x106 cel/ mL células totais de gordura (CTG) with 98% de viabilidade. Essas células foram levadas para o cultivo e após 20 dias, foi realizada a primeira passagem (1pd) sendo quantificadas 2,88 x10(6) cel/mL células tronco mesênquimais (CTM). Na segunda passagem (2pd) foi obtido 4,28 x10(6) cel/mL CTM. CONCLUSÃO: A lipectomia do paniculo adiposo é um método muito satisfatório para extrair células tronco a partir de gordura, quantitativamente e qualitativamente.

    Abstract in English:

    PURPOSE: To present an experimental model of qualitative and quantitative analysis of mesenchymal stem cells from fat of rabbits obtained by lipectomy. The fat could be a great source for obtaining mesenchymal stem cells and to create conditions for repairing injured tissues by bioengineering. METHODS: New Zealand rabbits (n= 10) adipose panicle (2-3 cm) were removed by lipectomy, fragmented and washed with PBS and enzymatically dissociated with trypsin/EDTA. Lately, these cells were incubated in culture medium DMEM and after 20 days, was performed quantitative analysis of the accession of first and second mesenchymal cells in cell culture bottles. RESULTS: The fat total cells (CTF) were 1.62 x10(6) cells/mL and presented 98% of viability. These cells were taken for cultivation and after 20 days were counted 2.88 x10(6) cells/mL MSC. The same was done and after 20 days we quantified 4.28 x10(6) cells/mL MSC. CONCLUSION: The lipectomy of adipose panicule is a very satisfactory method to extract stem cells from fat, quantitatively and qualitatively.
  • Effects of a highly concentrated platelet-rich plasma on the bone repair using non-critical defects in the calvaria of rabbits Original Articles

    Oliveira Filho, Marco Antonio de; Nassif, Paulo Afonso Nunes; Malafaia, Osvaldo; Ribas Filho, Jurandir Marcondes; Ribas, Carmen Austrália Paredes Marcondes; Camacho, Alex Coronel; Stieven Filho, Edmar; Giovanini, Allan Fernando

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Verificar os efeitos do plasma rico em plaquetas altamente concentrado (hPRP) sobre o reparo ósseo, utilizando defeitos não críticos na calvária de coelhos. MÉTODOS: O concentrado de plaquetas foi produzido a partir de sangue venoso coletado de 21 coelhos. Quatro defeitos não críticos de 8 mm de diâmetro foram criados na calvária de cada animal. Os defeitos foram tratados de modo distinto: osso autógeno particulado (grupo 1), osso autógeno particulado associado com hPRP (grupo 2), hPRP de modo isolado (grupo 3) e coágulo sangüineo (controle, grupo 4). Os animais foram mortos na 2º, 4º e 6º semanas do pós-operatório. Análises histológicas e histomorfométricas foram realizadas. RESULTADOS: Em duas semanas, os grupos 1 e 2 estavam num estado de reparação mais adiantado que os grupos 3 e 4. Neste período, quando comparados os grupos 1 e 2, não foram observadas diferenças estatísticamente significativas, o mesmo acontecendo quando a comparação foi entre os grupos 3 e 4. Após quatro e seis semanas, contudo, o grupo1 mostrou um estágio mais avançado de reparo, isto quando comparado com todos os outros grupos estudados, enquanto o grupo 2 apresentou sinais mais avançados de reparo que os grupos 3 e 4. Comparando os grupos 3 e 4, após 4 e 6 semanas, um estágio menos avançado do reparo ósseo foi observado no grupo 3. CONCLUSÃO: O uso do plasma rico em plaquetas altamente concentrado foi considerado prejudicial ao reparo de defeitos não críticos na calvária de coelhos, tanto quando em associação com enxerto ósseo autógeno em partículas (quando comparado com enxerto ósseo em partículas de forma isolada) quanto em sua forma isolada (quando comparado com o coágulo sangüíneo-controle).

    Abstract in English:

    PURPOSE: To verify the effect of highly concentrated platelet-rich plasma (hPRP) in the pathways of bone repair using non-critical defects in the calvaria of rabbits. METHODS: The hPRP was produced from collected venous blood of 21 rabbits. Four non-critical defects of 8 mm in diameter were created on the calvaria of each animal. The defects were all treated differently: autogenous particled bone (APB, group 1), autogenous particled bone associated with hPRP (APB + hPRP, group 2), isolated hPRP (group 3), and blood clot (control, group 4). Animals were submitted to euthanasia on the 2nd, 4th and 6th week postoperatively. Histological and histomorphometric analysis were carried through. RESULTS: After two weeks, groups 1 and 2 were in more advanced stage of repair than 3 and 4. At this period, comparing the groups 1 and 2, no significant differences were found between both, which also happened between the groups 3 and 4. However, after four and six weeks, the group 1 showed a more advanced stage of repair among all the other studied groups, while group 2 was in more advanced signs of bone repair than groups 3 and 4. Comparing groups 3 and 4, after four and six weeks, the least advanced stage of bone repair was found to be within group 3. CONCLUSION: The use of a highly concentrated PRP was considered prejudicial to the repair of non-critical defects in the calvaria of rabbits, either in the association of autogenous particled bone, when compared to autogenous particled bone alone, or in its isolated form, when compared to blood clot (control).
  • Experimental model of the formation of pelvic adhesions by videolaparoscopic in female rabbits Original Articles

    Balbinotto, Rosi Pereira; Trindade, Manoel Roberto Maciel; Muller, Ana Lucia Letti; Nunes, André Gorgen; Silva, Rodrigo Da; Meyer, Fabíola Schons; Cerski, Carlos Thadeu Schmidt

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Verificar a freqüência da formação de aderências pélvicas pós-cirúrgicas, em um modelo experimental animal, por videolaparoscopia. MÉTODOS: Estudo experimental, em uma amostra de 11 coelhas, não prenhas, com idade entre cinco e sete meses. Após anestesia geral, o acesso da cavidade abdominal foi efetuado por técnica de punção aberta, com óptica de 10 mm, colocando-se outros dois trocateres de 5 mm, sob visão direta, nas fossas ilíacas. Realizou-se, então, ressecção de fragmento de peritônio, seguida de cauterização com eletrocautério. Em 21 dias, foi repetida a videolaparoscopia, verificando-se a formação e escore de aderências e realizando-se biópsias do local da cirurgia. RESULTADOS: Observou-se 54,5% de formação de aderências, sendo o escore total mediano de aderências seis (mínimo de três e máximo de 10), todas encontradas na bexiga e na parede abdominal anterior. CONCLUSÃO: O procedimento utilizado apresentou alta freqüência de formação de aderências intra-abdominais.

    Abstract in English:

    PURPOSE: To verify the frequency of postsurgical pelvic adhesion formation in an experimental animal model using videolaparoscopy. METHODS: Experimental study in a sample of 11 non-pregnant female rabbits, aged 5 to 7 months. After general anesthesia, access to the abdominal cavity was performed by an open puncture technique, with 10mm optics, placing two other 5 mm trochars under direct visualization, in the iliac fossae. Then a fragment of peritoneum was resected, followed by electrocauterization. In 21 days, the videolaparoscopy was repeated, and adhesion formation and score was looked at, with biopsies at the surgical site. RESULTS: 54 % of adhesion formation was observed, and the median score of adhesions was 6 (minimum of 3 and maximum of 10), all of them found in the bladder and the anterior abdominal wall. CONCLUSION: The method used presents a high frequency of intra-abdominal adhesion formation.
  • Effect of the oral administration of monosodium glutamate during pregnancy and breast-feeding in the offspring of pregnant Wistar rats Original Articles

    von Diemen, Vinicius; Trindade, Manoel Roberto Maciel

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Avaliar o efeito do glutamato monossódico (GMS) nos fetos de ratas prenhes por meio da comparação do peso, comprimento nasal-anal (CNA) e índice de Lee (IL) ao nascimento e com 21 dias de vida. MÉTODOS: Foram utilizadas ratas prenhes da linhagem Wistar distribuídas em três grupos: grupo controle (GC), G10 e G20. Estes, respectivamente, foram alimentados com ração contendo 0, 10 e 20% de GMS desde o período de acasalamento até o final da amamentação. RESULTADOS: O peso e o CNA não foram diferentes entre os grupos ao nascimento. O grupo G20, ao nascimento, teve IL menor que o grupo GC (p < 0,05) e, aos 21 dias de vida, apresentou peso e CNA menores que o grupo G10, o qual foi menor que o GC (p < 0,01). O grupo G20, aos 21 dias de vida, teve IL semelhante aos outros dois grupos. O percentual de ganho de peso do nascimento ao 21º dia de vida foi menor no G20 em relação aos outros dois grupos (p < 0,01). O grupo G20 teve percentual de aumento de CNA do nascimento ao 21º dia de vida menor que o grupo G10, e este menor que o grupo GC (p < 0,01). CONCLUSÕES: O GMS nas concentrações de 10 e 20% na ração de ratas prenhes Wistar apresentou uma relação dose-dependente nas variáveis peso e CNA. Houve diminuição no padrão de ganho de peso e de aumento de CNA do nascimento ao 21º dia de vida com uso de GMS. O IL na prole do grupo G20 aumentou em relação ao do grupo GC após 3 semanas de acompanhamento.

    Abstract in English:

    PURPOSE: Determine the effects of the MSG (monosodium glutamate) in the offspring of pregnant rats through the comparison of the weight, NAL (nasal-anal length) and IL (Index of Lee) at birth and with 21 days of life. METHODS: Pregnant Wistar rats and their offspring were divided into 3 groups: GC, G10 and G20. Each of the groups received 0%, 10% and 20% of MSG, respectively from coupling until the end of the weaning period. RESULTS: Neither weight nor NAL were different among the groups at birth. The group G20 at birth had an IL lower than the group GC (p<0,05) and with 21 days of life presented weight and NAL lower than the groups G10 and this lower than the GC (p<0,01). Otherwise the G20 at 21 days of life had the IL similar to the other two groups. The weight profit percentage from birth to the 21st day of life was lower in the G20 regarding the other two groups (p<0,01). The G20 had a NAL increase percentage from birth to the 21st day of life lower than the G10 and this lower than the GC (p<0,01). CONCLUSIONS: MSG presented a dose-dependent relation in the variables weight and NAL. It caused a decrease in the growth pattern as well as in the weight gain pattern until the 21st day of life. The IL of the group 20% had an increased in relation to the control group after 3 weeks of follow up.
  • Protective effect of simvastatin in the cyclophosphamide-induced hemohrragic cystitis in rats Original Articles

    Dantas, Anna Carolina Batista; Batista-Júnior, Francisco Fábio de Araújo; Macedo, Larissa Freitas; Mendes, Mariana Noronha Castro; Azevedo, Ítalo Medeiros; Medeiros, Aldo Cunha

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Ciclofosfamida (CF) é um agente antineoplásico frequente implicado na etiologia da cistite hemorrágica. Vários estudos mostram que a sinvastatina tem importantes efeitos pleiotrópicos (anti-inflamatórios e imunomoduladores). O objetivo do trabalho foi estudar os efeitos da sinvastatina na prevenção de cistite hemorrágica e lesões uroteliais induzidas por CF em modelo experimental. MÉTODOS: Doze ratos Wistar foram distribuídos de forma randomizada em três grupos: nos ratos do grupo experimental (CF/SINV), foi administrada microemulsão de sinvastatina 10mg/Kg, por via oral (gavagem), durante 7 dias antes da administração de CF e os ratos do grupo controle (CF/SAL), foram tratados com solução salina 0,9% nas mesmas doses e prazos. O grupo controle não foi tratado. Todos os ratos foram tratados com CF 200mg/Kg intraperitonial (dose única) e 24 horas após foram sacrificados. Exame macro e microscópico foi feito na bexiga e os rins e ureteres foram avaliados microscopia. Foram realizadas dosagens plasmáticas de TNF-α, IL-1β, IL-6 (ELISA). RESULTADOS: O escore para avaliação macroscópica do dano à bexiga e o escore para avaliação do dano histológico na bexiga e nos ureteres mostraram-se significativamente menores no grupo CF/SINV em comparação ao grupo CF/SAL (p<0,05). Os rins não foram afetados. A expressão de TNF-α, IL-1β, IL-6 também foi significativamente menor (p<0,05) no grupo CF/SINV (164,8±22, 44,8±8 e 52,4±13) em comparação ao grupo CF/SAL (378,5±66, 122,9±26 e 123,6±18), respectivamente. CONCLUSÃO: O estudo demonstrou eficácia da sinvastatina na atenuação da cistite hemorrágica e lesão ureteral induzidas por CF em ratos Wistar, através da interferência nas citocinas plasmáticas e nas lesões uroteliais.

    Abstract in English:

    PURPOSE: Cyclophosphamide (CYP) is an antineoplastic agent used for the treatment of many neoplastic and inflammatory diseases. Hemorrhagic cystitis is a frequent side effect of CYP. Several studies show that simvastatin has important pleiotropic (anti-inflammatory and immunomodulatory) effects. The purpose of the study was to investigate the effect of simvastatin on bladder, ureter and kidney injury caused by CYP. METHODS: Adult male Wistar rats were randomly divided into three groups. The CYP/SIM group received simvastatin microemulsion by gavage during 7 days (10 mg/kg body wt) before the administration of CYP and the CYP/SAL group rats received saline 0.9%. The control rats were not treated. After that, all rats were treated with a single dose of CYP 200 mg/kg body wt intraperitoneally. The rats were killed 24 h after CYP administration. Plasma cytokines (TNF-α, IL-1β, IL-6) were measured by ELISA. Macro and light microscopic study was performed in the bladder, kidney and ureter. RESULTS: In the bladders of CYP/SIMV treated rats edema of lamina propria with epithelial and sub-epithelial hemorrhage were lower than in CYP/SAL treated rats. The scores for macroscopic and microscopic evaluation of bladder and ureter were significantly lower in CYP/SIMV rats than in CYP/SAL rats. The kidney was not affected. The expression of TNF-α, IL-1β and IL-6 was significatly lower in CF/SINV rats (164.8±22, 44.8±8 and 52.4±13) than in CF/SAL rats (378.5±66, 122.9±26 e 123.6±18), respectively. CONCLUSION: The results of the current study suggest that simvastatin pretreatment attenuated CYP-induced urotelium inflammation and decreased the activities of cytokines.
  • Effect of finasteride on serum prostate-specific antigen (PSA) and on prostate of hamster Mesocricetus auratus (hMa) Original Articles

    Vidigal, Dimas José Araújo; Silva, Alcino Lázaro da; Vasconcelos, Anilton César; Fazito, Dilermando Resende; Verçosa, Bárbara Lanice Araújo; Santana, Nathália Gonsalves; Vidigal, Felipe Eduardo Costa

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Avaliar o efeito da finasterida no PSA sérico e na próstata do hamster-Mesocricetus auratus (hMa). MÉTODOS: 20 hMa adultos machos foram divididos em grupos de 10 animais. No experimento foram administrados 7,14 ng/mL de finasterida, subcutâneo (SC), no dorso, três vezes por semana, por 90 dias, dose equivalente a 5,0 mg usada em homem de 70Kg. Ao final da pesquisa, grupo experimento apresentou idade média de 17,7 ± 0,67 meses. O grupo controle apresentou idade média de 15,2 ± 1,13 meses. O valor de t na comparação das médias das idades entre os dois grupos foi de 5,98 e p=0.0001. Os animais-controle pesaram em média 129,0 ± 18,8g e o experimento 145,0 ± 15,5g; t=1,88 e p=0,0514. Na microscopia óptica de luz e estudo morfométrico: avaliaram-se o diâmetro dos ácinos e epitélio acinar prostáticos, a apoptose, a expressão AgNORs e a celularidade. RESULTADOS: O grupo-experimento apresentou média de PSA de 0,003 ng/mL e o grupo-controle de 0,763 ng/mL, H=7,982 e p=0,0047. A área dos ácinos do grupo-experimento foi de 238,000±24,600 μm² versus 398,600±55,320 μm²; t= 2,653; p= 0,0122. A área do epitélio acinar no grupo-experimento foi de 111,900±12,820 μm² versus 160,400±18,430 μm² t= 2,162; p= 0,0361. A expressão de AgNORs foi menor no grupo-experimento 2,846±0,877 versus 3,68 ±1,07 grumos argilófilos por μm², p= < 0,0001. A apoptose foi mais freqüente no grupo-experimento, 53,62±1,389 versus controle, 14,76 ± 2,137, p= 0,0408. Não houve diferença na celularidade entre os grupos de animais, 74,75±5,5 células no grupo-controle versus 65,07±13,24, no grupo-experimento, p= 0,5105. CONCLUSÕES: A finasterida diminuiu o PSA sérico, a área do lúmen, o epitélio acinar, a expressão de AgNORs e promoveu a apoptose nos ácinos da próstata dos hamsteres experimento e não houve diferença na celularidade acinar entre os animais estudados.

    Abstract in English:

    PURPOSE: Evaluate the effects of finasteride on the serum PSA and on the prostate of hamster-Mesocricetus auratus(hMa). METHODS: Twenty hMa male adults were split in groups control and experimental (n=10). Animals of the experimental group received 7.14ng/mL of finasteride, subcutaneously (SC) on the back three times per week, during 90 days. The finasteride dose was equivalent to 5.0mg administered to a 70kg man. At the end of the experiment the mean age for the animals in the control group was 15.2±1.13months and for the experimental group was 17.7±0.67 months. There was a statistically significant difference between mean ages of both groups (t value=5.98; p=0.001). The animals of the control group weighted 129.0±18.8g and the experimental group weighted 145.0±15.5g, t=1.88 e p=0.0514. The serum PSA was assessed through ELISA method. Prostates of those animals were collected and processed to histology and morphometry: the diameter of the acinous glands and the acinous epithelium, apoptosis, AgNORs and cellularity were assessed in both groups. RESULTS: Serum PSA decreased in the experimental group, 0.003ng/mL versus 0.763ng/mL, H= 7.982 e p= 0.0047. Decrease in the acinous area occurred in animals that received finasteride, 238.000±24.600 μm² versus 398.600±55.320 μm²; t= 2.653; p= 0.0122. A remarkable decrease in the area of the acinous epithelium occurred in the animals that received finasteride, 111.900±12.820 μm² versus 160.400±18.430 μm² t= 2.162; p= 0.0361. AgNORs were less expressed in finasteride treated animals, 2.846±0.877 versus 3.68 ±1.07 argyrophilic clusters for μm², p= < 0.0001. Apoptosis was more intense in the experimental group, 53.62±1.389 than in controls, 14.76 ± 2.137, p= 0.0408. However, there was no statistical difference in the cellularity between both groups, 74.75±5.5 cells, in controls versus 65.07±13.24, in treated animals, p=0.5105. CONCLUSIONS: Use of finasteride decreased serum PSA and several histological parameters of the Hamster's prostate, such as lumen area, acinous and epithelium area, and AgNORs expression. Finasteride increased apoptosis in the prostate acinous cells although no significant difference in the cellularity could be found between the two groups of animals under study.
  • Metabolic programming of lipid profile and reproductive organs weight by leptin treatment on early life Original Articles

    Marques, Durval Santos; Gombar, Flávia Meireles; Pereira, Jorge Luiz Alves; Sampaio, Francisco José Barcellos; Ramos, Cristiane da Fonte

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Avaliar se o tratamento neonatal com leptina durante os primeiros dias de vida poderia programar o peso dos orgãos do sistema reprodutor masculino e o perfil lipídico. MÉTODOS: Ao nascimento seis ratas-mãe foram distribuídas em dois grupos: Leptina - cada filhote recebeu 50μL de leptina recombinante (80ng/gPC, SC) nos primeiros 10 dias de lactação; Controle - cada filhote recebeu o mesmo volume de salina. Após o desmame, todos os filhotes tiveram acesso ilimitado a ração até 190 dias de idade quando foram mortos. Os dados são expressos como média ± erro padrão e foram analisados pelo teste t Student. RESULTADOS: O tratamento com leptina resultou em aumento significativo no peso corporal (Control= 411.8±16.31; Leptin= 481.8±11.29, p=0.005) e consumo alimentar (Control= 25.32±0.09; Leptin= 32.42±0.15, p=0.0001) e redução significativa nos níveis séricos de triglicerídeos (Control= 540.0±117.9; Leptin= 93.25±15.21, p=0.006), no peso do hipotálamo (Control= 0.234±0.016; Leptin= 0.154±0.015, p=0.007), hipófise (Control= 0.104±0.0120; Leptin= 0.033±0.012, p=0.003), testículo (Control= 3.75±0.055; Leptin= 3.19±0.10, p=0.002) e próstata (Control=1.641±0.1389; Leptin= 0.91±0.07, p=0.001). CONCLUSÃO: O tratamento com leptina nos primeiros dias de vida pode programar o peso dos órgãos do sistema reprodutor e o perfil lipídico da prole.

    Abstract in English:

    PURPOSE: To evaluate whether the neonatal leptin treatment during the first days of life can program the male reproductive organs weight and the lipid profile. METHODS: At birth 6 dams were divided into 2 groups: Leptin - each pup was injected with 50μL of recombinant rat leptin (80ng/g BW, sc), for the first 10 d of lactation; Control - each pup received the same volume of saline. After weaning, all pups received unlimited access to food until 190 days of age when they were killed. Values are given as mean ± SEM of 6 animals and Test t Student was used to analyze the results. RESULTS: The leptin treatment resulted in a significant increase in body weight (Control= 411.8±16.31; Leptin= 481.8±11.29, p=0.005) and food consumption (Control= 25.32±0.09; Leptin= 32.42±0.15, p=0.0001) and a significant reduction in triglycerides levels (Control= 540.0±117.9; Leptin= 93.25±15.21, p=0.006) and in the weight of hypothalamus (Control= 0.234±0.016; Leptin= 0.154±0.015, p=0.007), pituitary (Control= 0.104±0.0120; Leptin= 0.033±0.012, p=0.003), testis (Control= 3.75±0.055; Leptin= 3.19±0.10, p=0.002) and prostate (Control=1.641±0.1389; Leptin= 0.91±0.07, p=0.001). CONCLUSION: Leptin treatment on the first days of life can program the reproductive organs weight and the lipid profile of the progeny.
  • Blood carbonyl protein measurement as a specific oxidative stress biomarker after intestinal reperfusion in rats Original Articles

    Jamel, Márcio José; Pereira, Lara de Paula Miranda; Mello, Natália Bernardes; Eleuthério, Elis Cristina Araújo; Schanaider, Alberto

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Realizou-se um estudo experimental com a finalidade de investigar o uso da proteína carbonilada como um marcador biológico específico do estresse oxidativo em um modelo de isquemia e reperfusão intestinal, em ratos. MÉTODOS: Vinte e quarto ratos da linhagem Wistar, machos foram distribuídos, aleatoriamente, em três grupos compostos por oito animais cada: Grupo 1 - Controle; Grupo 2 - Simulação e Grupo 3 - Submetido à isquemia, mediante clampeamento de ramos ileais da artéria mesentérica superior por uma hora, seguida de reperfusão, por igual período. Amostras sanguíneas obtidas foram utilizadas para analise dos níveis de proteína carbonilada, através do método Slot blotting. RESULTADOS: No grupo 3 houve uma elevação significante da concentração de proteína carbonilada sérica se comparada aos níveis sanguíneos homogêneos encontrados nos grupos 1 e 2. CONCLUSÃO: Fundamentado nos resultados é possível concluir que, a carbonilação protéica pode ser utilizada como um marcador específico para a mensuração do estresse oxidativo em modelos de reperfusão intestinal, em ratos.

    Abstract in English:

    PURPOSE: An experimental study was performed to investigate the use of protein carbonyl group as a specific biological marker for oxidative stress in a rat model of intestinal ischaemia-reperfusion. METHODS: Twenty four male Wistar rats were randomly distributed into three groups with eight animals each: Group 1 - Control group; Group 2 - Sham; Group 3 - Intestinal ischaemia by clamping ileal branches of the superior mesenteric artery for one hour, followed by another hour of reperfusion. Blood samples were taken in order to analyze the protein carbonyl level by Slot blotting assay. RESULTS: In group 3 a significant increase of protein carbonyl level was observed if compared to the homogenous levels of groups 1 and 2. CONCLUSION: From the results it may be concluded that the protein carbonylation may be used as a specific marker for measuring oxidative stress in rat intestinal reperfusion model.
  • The influence of methylene blue on the healing of intestinal anastomoses subjected to ischemia and reperfusion in rats Original Articles

    Miranda, Eron Fabio; Greca, Fernando Hintz; Noronha, Lucia; Kotze, Luiz Roberto; Rubin, Michel Risnic

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Investigar a influência do azul de metileno, na cicatrização de anastomoses intestinais de ratos submetidas a isquemia e à reperfusão. MÉTODOS: Quarenta e cinco ratos foram divididos em três grupos: controle (G1); isquemia sem azul de metileno (G2) e isquemia com azul de metileno (G3). Foi feita uma laparotomia e a artéria mesentérica cranial isolada. Enquanto a artéria mesentérica cranial foi ocluída por 45 minutos nos grupos G2 e G3, antes da anastomose, no grupo G1 a anastomose foi realizada sem esta lesão prévia. Em seguida 2 mL de azul de metileno 0,5% foi instilado na cavidade peritoneal dos animais do grupo G3, 2 mL de solução salina isotônica na cavidade dos animais do grupo G2. Após a reperfusão uma enterectomia seguida de anastomose foi realizada. Os animais foram submetidos à eutanásia no 7.º dia após a operação, a cavidade abdominal foi examinada e um segmento intestinal que continha a anastomose foi ressecado. Este serviu para a medida de resistência e para exame anátomo-patológico. RESULTADOS: Líquido livre ou abscessos foram raros. A análise da inflamação mostrou que o grupo submetido à isquemia sem azul de metileno apresentou maior score para células mononucleares (p=0,021) e tecido de granulação (0,044). Não se observou diferença significante na análise do colágeno I e III. CONCLUSÃO: O azul de metileno não mostrou efeitos benéficos na cicatrização de anastomoses intestinais submetidas à isquemia e à reperfusão em ratos.

    Abstract in English:

    PURPOSE: To investigate the influence of methylene blue, on the healing of intestinal anastomoses subjected to ischemia and reperfusion in rats. METHODS: Forty-five rats divided into the following three groups were used: control (G1); ischemia without methylene blue (G2); and ischemia with methylene blue (G3). A laparotomy was performed and the cranial mesenteric artery isolated. Whereas the cranial artery was temporarily occluded for 45 minutes in groups G2 and G3, prior to enterotomy and intestinal anastomosis, in group G1 the enterotomy and intestinal anastomosis were performed without prior lesion. Afterwards, 2mL of 0.5% methylene blue were instilled in the peritoneal cavities of the animals in group G3, and 2mL of isotonic saline solution in the peritoneal cavities of the animals in group G2. After the reperfusion, an enterectomy and intestinal anastomosis were performed. After the animals had been sacrificed on the seventh day after the operation, the abdominal cavity was examined by resection of a segment of the intestine containing the anastomosis in order to measure its strength and for histopathological examination. RESULTS: Free fluid or abscesses in the peritoneal cavity were rare. When inflammation was analyzed, the group subjected to ischemia without methylene blue had a higher score for mononuclear cells (p=0.021) and granulation tissue (p=0.044). No significant difference was observed in the density of type I or type III collagens. CONCLUSION: The methylene blue did not show beneficial effect on the healing of intestinal anastomoses subjected to ischemia and reperfusion in rats.
  • Influence of ingaalp laser (660nm) on the healing of skin wounds in diabetic rats Original Articles

    Carvalho, Paulo de Tarso Camillo de; Silva, Iandara Schettert da; Reis, Filipe Abdalla dos; Perreira, Daniel Martins; Aydos, Ricardo Dutra

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Determinar a influência do diodo laser InGaAlP (660 nm) sobre o percentual de colágeno e macrófagos em feridas cutâneas de ratos diabéticos. MÉTODOS: Para tanto 30 ratos machos Wistar foram distribuídos em dois grupos: diabético tratado com laser (n=15), diabético não tratado (n = 15). O diabetes foi induzido por injeção intravenosa de aloxana na veia dorsal do pênis, a uma taxa de 0,1 ml de solução por 100 g de peso corporal. A lesão foi confeccionada no dorso de todos os animais utilizando um punch de 8mm. 2 grupos foram tratados com o diodo laser arsenieto de gálio e alumínio dopado com, fosforeto de índio - InGaAlP (tipo Photon Laser III DMC®) com uma potência contínua de 100 mW e comprimento de onda (?) de 660 nm (4 J/cm²) por 24 s. cinco animais de cada grupo foi sacrificado no 3, 7 e 14 dias após a lesão. As amostras obtidas foram emblocadas em parafina, coradas com hematoxilina-eosina, tricrômico de Masson, e para a analise dos macrófagos foi realizado um imunohistoquímico. Os resultados foram avaliados morfometricamente pelo programa Image Pro Plus 4.5. RESULTADOS: Os dados foram tratados estatisticamente pela análise de variância (ANOVA) e pós-teste de Tukey. O nível de significância foi fixado em 0,05 ou 5%. CONCLUSÃO: O laser de baixa potência (660 nm) mostrou-se capaz de influenciar o percentual de colágeno em feridas cutâneas, aumentando a quantidade média de fibras colágenas e macrófagos.

    Abstract in English:

    PURPOSE: To determine the influence of low-power laser (660 nm) on the collagen percentage and macrophages in skin wounds in diabetic rats. METHODS: 30 male Wistar rats were used, distributed in two groups: laser treated diabetic (n= 15); untreated diabetic (n = 15). The diabetes was induced by intravenous injection of alloxan into the dorsal vein of the penis, at a rate of 0.1 ml of solution per 100 g of body weight. A wound was made on the back of all the animals. Groups 2 were treated with Aluminium Gallium Indium Phosphide - InGaAlP type diode laser (Photon Laser III DMC®) with a continuous output power of 100 mW and wavelength (?) of 660 nm (4 J/cm²) for 24 s. five animal from each group was sacrificed on the 3rd, 7th and 14th days after wounding. Samples were taken, embedded in paraffin, stained with hematoxylin-eosin, Masson's trichrome, and immunohistochemical macrophage. morphometrically analyzed using the Image Pro Plus 4.5 software. The percentages of collagen fibers and macrophages were determined from the samples from the euthanasia animals. RESULTS: The data were treated statistically using analysis of variance (ANOVA) and the Post-hocTukey test. The significance level was set at 0.05 or 5%. CONCLUSION: The low-power laser (660 nm) was shown to be capable of influencing the collagen percentage in skin wounds by increasing the mean quantity of collagen fibers and macrophages.
  • Angiogenesis, fibrinogenesis and presence of synechiae after exeresis of a swine vocal fold mucosal microflap and use of topical mitomycin-C Original Articles

    Fonseca, Vinicius Ribas de Carvalho Duarte; Malafaia, Osvaldo; Ribas Filho, Jurandir Marcondes; Nassif, Paulo Afonso Nunes; Czeczko, Nicolau Gregori; Marcondes, Carmen Austrália Paredes; Nascimento, Marcelo Mazza do

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Avaliar a cicatrização de pregas vocais de suínos utilizando mitomicina-C tópica, em 30 dias. MÉTODOS: Doze suínos foram submetidos à exérese de mucosa do bordo livre do terço anterior de ambas as pregas vocais com instrumental frio (tesoura curva) e divididos em dois grupos: Grupo E (GE), composto por seis animais com utilização tópica de mitomicina-C(4 mg/dL) na área cruenta por quatro minutos e Grupo Controle (GC), composto por seis animais com utilização tópica de soro fisiológico na área cruenta por quatro minutos. Após 30 dias os animais foram sacrificados e coletadas amostras das pregas vocais para avaliação de sinéquias e análise histológica com quantificação da deposição de colágeno maduro e imaturo, quantificação do número de vasos sanguíneos e miofibroblastos, por método imunoistoquímico. RESULTADOS: A deposição do colágeno maduro no GE foi de 452,12 μm² e 1332,31μm² no GC. A do colágeno imaturo foi de 1511,73μm² no GE e de 1020,61μm² no GC. O número de miofibroblastos foi de 1,556 no GE e de 3,583 no GC. O número de vasos sanguíneos foi de 2,565 no GE e de 6,917 no GC. Não houve formação de sinéquias nos grupo s estudados. CONCLUSÕES: No grupo experimento, quando comparado ao controle, houve significativamente aumento da deposição do colágeno imaturo e diminuição da deposição do colágeno maduro, do número de miofibroblastos e de vasos sanguíneos. Não houve formação de sinéquias em ambos os grupos.

    Abstract in English:

    PURPOSE: To evaluate swine vocal fold healing in a period of 30 days after topical mitomycin-C application. METHODS: Twelve swine underwent exeresis of mucosal flaps from the free edge of the anterior third of both vocal folds with a cold instrument (laryngeal scissors). The animals were divided into two groups: EG (Experimental Group), consisting of 6 animals undergoing topical MMC application (4 mg/dL) on the operated area for 4 minutes; CG (Control Group), 6 animals undergoing topical saline solution application on the operated area for 4 minutes. After 30 days, the animals were sacrificed and the larynges were collected and examined for the presence of synechiae as well as a histological immunohistochemical assessment of immature and mature collagen deposition, number of blood vessels and myofibroblasts. RESULTS: Mature collagen deposition in the EG was 452.12 μm² and 1332.31μm² in the CG; immature collagen deposition was 1511.73μm² in the EG and 1020.61μm² in the CG. The number of myofibroblasts was 1.556 in the EG and 3.583 in the CG. The number of blood vessels was 2.565 in EG and 6.917 in the CG. There were no synechiae in the two studied groups. CONCLUSIONS: There was an increase in immature collagen deposition in the experimental group when compared with the control group. There was a decrease in mature collagen deposition in the experimental group when compared with the control group. There was a decrease in the number of myofibroblasts in the experimental group when compared with the control group. A decrease in blood vessels was observed in the experimental group when compared with the control group. There was no synechia formation in either studied group.
  • Obesity and abdominal wound healing in rats Original Articles

    Biondo-Simões, Maria de Lourdes Pessole; Zammar, Guilherme Roberto; Fernandes, Rodrigo dos Santos; Biondo-Simões, Rachel; Mello, Flavia Stica Ritzdorf de; Noronha, Lucia de

    Abstract in Portuguese:

    INTRODUÇÃO: O tratamento da obesidade é baseado essencialmente na perda de peso, e isto pode ser conseguido por meio de procedimentos cirúrgicos. Apesar do grande aumento no número destes procedimentos, a relação entre obesidade e o processo de cicatrização ainda não está totalmente elucidada. OBJETIVO: Investigar a cicatrização da parede abdominal de ratos Wistar obesos, sete e 14 dias após laparotomia. MÉTODOS: Ratos Wistar, em número de 36 foram alocados em dois grupos, controle e experimento. Os do grupo controle receberam dieta padrão para a espécie e os do experimento dieta hipercalórica. Depois de 116 dias, todos os animais foram submetidos à laparotomia seguida de laparorrafia. Após a eutanásia com sete ou 14 dias, fragmentos da parede abdominal contendo a cicatriz receberam análise histopatológica e tensiométrica. RESULTADOS: O peso médio dos animais do grupo experimento foi maior do que o do grupo controle (p<0,001). A diferença da resistência das cicatrizes cutâneas não foi significante. As cicatrizes aponeuróticas foram mais resistentes no grupo controle aos sete dias (p=0,011) e aos 14 dias (p=0,040). Não houve diferença quanto à intensidade da reação inflamatória e a densidade de colágeno foi semelhante nos dois grupos. CONCLUSÃO: Em ratos, a obesidade diminuiu a resistência das cicatrizes aponeuróticas, mas não a das cicatrizes da pele. Não interferiu na reação inflamatória tardia e nem na densidade do colágeno.

    Abstract in English:

    INTRODUCTION: Treatment for obesity essentially has to do with weight loss, which can be achieved through surgical procedures. Despite the considerable rise in the number of such procedures, the relationship between obesity and the healing process has not been totally clarified. PURPOSE: To investigate abdominal wound healing in obese Wistar rats on the seventh and fourteenth days following a laparotomy. METHODS: Thirty-six Wistar rats were randomly distributed into two groups, the control and experiment group. The control group were fed on either a standard diet for the species and the experiment group were put on a high calorie diet. After 116 days, all the animals were submitted to a laparotomy followed by laparorrhaphy. After euthanasia on the seventh or fourteenth day, fragments of the abdominal wound containing the scar were submitted to histopathological and tensiometric analysis. RESULTS: The average weight of the animals from the experiment group was higher than that of the control group (p<0.001). The difference in the resistance of the cutaneous scars was not significant. The aponeurotic scars were more resistant in the control group after seven days (p=0.011) and fourteen days (p=0.040). There was no difference in terms of intensity of the inflammatory reaction and the collagen density was similar in both groups. CONCLUSION: In rats, obesity lowered the resistance of the aponeurotic scars but not the skin scars. It did not interfere with the delayed inflammatory response and the collagen density.
  • Keratinocyte growth factor protected cultured human keratinocytes exposed to oxidative stress Original Articles

    Gragnani, Alfredo; Rossi, Marina Bertelli; Albuquerque, Janne Cely Medeiros; Brito, Gabriela Soares Silva; Aloise, Antonio Carlos; Ferreira, Lydia Masako

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Avaliar os efeitos do estresse oxidativo e da suplementação do fator de crescimento de queratinócitos (KGF) em queratinócitos humanos cultivados. MÉTODOS: O estresse oxidativo foi produzido através da adição de peróxido de hidrogênio (H2O2) ao meio de cultura. Os queratinócitos humanos cultivados foram divididos em quatro grupos: grupo controle (G C), grupo KGF (G KGF), grupo H2O2 (G H2O2), grupo H2O2 e KGF (G H2O2-KGF). Cada experimento foi realizado com a mesma linhagem celular, em triplicata. A viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio da exclusão do azul de tripan. RESULTADOS: Os resultados mostraram que o meio de cultura suplementado com o KGF apresentou menor taxa de viabilidade celular quando comparado às células do grupo controle (p<0,001). Isso mostra que somente o fator de crescimento de queratinócitos não apresentou efeito protetor às células em cultura. Entretanto, frente ao estresse oxidativo produzido pela adição do peróxido de hidrogênio ao meio de cultura, o KGF mostrou efeito benéfico, protegendo as células quando comparado ao grupo que sofreu a ação do estresse oxidativo, mas que não foi exposta ao KGF (p<0,001). CONCLUSÃO: O KGF determinou a proteção aos queratinócitos humanos primários cultivados expostos ao estresse oxidativo.

    Abstract in English:

    PURPOSE: To evaluate effects of oxidative stress and supplementation of keratinocyte growth factor (KGF) on cultivated human keratinocytes. METHODS: Oxidative stress was produced through addition of hydrogen peroxide (H2O2) to the culture medium. Cultivated human keratinocytes were divided in 4 groups: Group control (G C), Group KGF (G KGF), Group H2O2 (G H2O2), Group H2O2 and KGF (G H2O2-KGF). Each experiment was accomplished with the same lineage cultivated keratinocytes, in triplicate. Cell viability was evaluated by trypan blue exclusion assay. RESULTS: The results showed that the culture medium supplemented with KGF presented a small rate of cell viability when compared to cells only in culture medium (p<0,001). It demonstrated that only the growth factor does not have protector effects for cells in vitro. However, in front of the oxidative stress produced by addition of hydrogen peroxide to the medium, KGF showed a beneficial effect, protecting cells when compared to the group that suffered hydrogen peroxide action but had not been exposed to KGF (p<0,001). CONCLUSION: KGF determined protection to the primary human keratinocytes exposed to oxidative stress.
  • Action of tacrolimus on Wistar rat kidneys implanted with Walker 256 carcinosarcoma Original Articles

    Inácio, Cristiano Machado; Dietz, Ulrich Andréas; Malafaia, Osvaldo; Ribas Filho, Jurandir Marcondes; Nassif, Paulo Afonso Nunes; Czeczko, Nicolau Gregori; Marcondes, Carmen Australia Paredes

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Avaliar as alterações na evolução do carcinosarcoma 256 de Walker, inoculado no rim de ratos Wistar, sob tratamento imunossupressor com o tacrolimus. MÉTODOS: Foram utilizados 40 ratos Wistar, machos divididos em quatro grupos de 10: grupo Tumor (TU), Tumor-Tacrolimus (TT), Tacrolimus (TC) e Controle (C). Os ratos dos grupos TU e TT foram inoculados com 0,1 mL de solução contendo 2x10(6) células do tumor de Walker no parênquima do rim direito. Os dos grupos TC e TT receberam tratamento com tacrolimus na dose de 5mg/kg de peso, via gavagem orogástrica durante 15 dias. Os ratos do grupo TU receberam solução salina isotônica pH 7,2. Ao 15º dia de evolução, todos foram submetidos à eutanásia. Amostras de sangue eram coletadas para dosagem de creatinina (Cr) e uréia (Ur) e posteriormente realizada nefrectomia para avaliação histológica. RESULTADOS: As dosagens séricas de creatinina foram maiores no grupo TT (Cr = 1,013±0,3028 mg/mL), que diferiu significantemente dos grupos TU (Cr=0,5670 ± 0,03536 mg/dL) com p=0,00256 e do TC (Cr=0,711 ± 0,1653 mg/mL) com p=0,02832. As dosagens séricas de uréia foram maiores no grupo TT (71,32 ± 17,14 mg/mL), que diferiu significantemente do grupo TU (45,83 ± 5,046mg/dL) com p=0,000318, mas comparado ao grupo TC (61,23 ± 9,503 mg/mL) não houve diferença significante (p=0,7242). No inventário da cavidade abdominal dos grupos TU e TT, observou-se presença macroscópica de tumor em todos os rins direitos; não foram evidenciadas efusões ascíticas, formação de bridas ou metástases tumorais em outros órgãos ou tecidos adjacentes aos rins direitos. CONCLUSÃO: O tacrolimus exerceu efeito nefrotóxico e induziu exacerbação do crescimento do tumor de Walker 256, quando implantado no rim de ratos Wistar.

    Abstract in English:

    PURPOSE: To evaluate the development of Walker 256 tumor in male Wistar rats treated with tacrolimus using an experimental kidney tumor model. METHODS: 40 male Wistar rats were divided into four groups: Tumor group (TU) (n=10), Tacrolimus-Tumor group (TT) (n=10), Tacrolimus group (TC) (n=10) and Control group (C) (n=10). Treatment with tacrolimus was performed in groups TT and TC. Under anesthesia, the right kidney of each animal of TU and TT was accessed through a supraumbilical incision and inoculated with a 0.1mL solution containing 2x10(6) tumor cells (Walker 256 carcinosarcoma tumor cells). Group TC was treated with a saline solution. All the animals of groups TC and TT were treated with tacrolimus (5mg/kg/day) by gavage for 15 days. TU group animals received saline by gavage for 15 days. On the 15th postoperative day, all animals were submitted to euthanasia and blood sampling for analysis of serum creatinine (Cr) and blood urea nitrogen (BUN). Abdominal gross examination was performed, the right kidney removed and prepared for histological analysis by hematoxylin-eosin staining. The resulting data were submitted to statistical analysis by ANOVA. RESULTS: Statistical significance was found when comparing creatinine level between groups TU, TT and TC -TT group culminated with a marked increased in creatinine levels (Cr=1.013 ± 0.3028 mg/mL), TU group (Cr=0.5670 ± 0.03536 mg/dL) P=0.00256, TC group (Cr =0.711 ± 0.1653 mg/mL) P= 0.02832. Statistical significance was found when comparing BUN levels in TT group (71.32 ± 17.14 mg/mL), compared with TU group (45.83 ± 5.046 mg/dL), P=0.000318. There were no statistically significant differences between groups TT and TC (61.23 ± 9.503 mg/mL) P=0.7242. Histological analysis showed a poor evolution in TT group with multiple foci of hemorrhage and cortical invasion by the Walker tumor. CONCLUSION: The Tacrolimus-treated group developed a more aggressive tumor and a drug-related nephrotoxic effect.
  • Venous drainage from the tail of the pancreas to the lienal vein and its relationship with the distal splenorenal shunt selectivity Original Articles

    Piras, Cláudio; Paulo, Danilo Nagib Salomão; Paulo, Isabel Cristina Andreatta Lemos; Rodrigues, Hildegardo; Silva, Alcino Lázaro da

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Identificar as veias da cauda do pâncreas afluentes da veia lienal e a possível relação destes ramos com a perda de seletividade da derivação esplenorrenal distal. MÉTODOS: Foram estudadas 38 peças humanas, retiradas de cadáveres, contendo estômago, duodeno, baço, cólon e pâncreas, utilizando-se a técnica de repleção vascular com resina vinílica e posterior corrosão do tecido orgânico com o objetivo de se estudar o molde vascular da veia lienal e seus afluentes. RESULTADOS: O número de veias afluindo diretamente para a veia esplênica variou de sete a vinte dois (MA 14.52±3.53). Ramos pancreáticos da cauda do pâncreas afluindo para as veias segmentares do baço estavam presentes em 25 das peças estudadas (65,79%). Estes ramos variaram de um a quatro, predominando um ramo (60%) e dois ramos (24%). CONCLUSÕES: Em 65,79% das peças veias da cauda do pâncreas desembocavam em ramos segmentares da veia esplênica. Estes ramos poderiam ser responsáveis pela perda de seletividade da derivação esplenorrenal distal e a esqueletização completa da cauda do pâncreas poderia aumentar a seletividade neste procedimento.

    Abstract in English:

    PURPOSE: To identify the veins draining from the pancreatic tail to the lienal vein and its possible relationship with the loss of the distal splenorenal shunt selectivity. METHODS: Thirty eight human blocks including stomach, duodenum, spleen, colon and pancreas, removed from fresh corpses, were studied with the replenish and corrosion technique, using vinilic resin and posterior corrosion of the organic tissue with commercial hydrochloric acid, in order to study the lienal vein and its tributaries. RESULTS: The number of veins flowing directly to the splenic vein varied from seven to twenty two (14.52 ± 3.53). Pancreatic branches of the pancreatic tail flowing to the segmentary veins of the spleen were found in 25 of the anatomical pieces studied (65.79%). These branches varied from one to four, predominating one branch (60%) and two branches (24%). CONCLUSIONS: In 65.79% of the anatomical pieces studied, the veins of the pancreatic tail flowed in segmentary branches of the splenic vein. These branches could be responsible for the loss of distal splenorenal shunt selectivity. The complete disconnection of the pancreatic tail could increase the selectivity in this procedure.
  • Evaluation of acetone cyanohydrin effect in "in vitro" inativation of the Ehrlich ascites tumor cells Original Articles

    Ramalho, Rondon Tosta; Aydos, Ricardo Dutra; Cereda, Marney Pascoli

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Avaliar o efeito antitumoral da acetona cinidrina em células do tumor ascítico de Ehrlich in vitro. MÉTODOS: Células do tumor ascítico de Ehrlich e linfócitos foram incubadas com diferentes concentrações de acetona cianidrina (0, 0,5, 1,0, 2,0, 10,0, 20,0 e 30,0 μg.mL-1), depois de 1, 2, 3, 4, 18 e 24 horas foi verificada a viabilidade celular atravéz do método de azul de trypan. RESULTADOS: Os resultados demonstraram um efeito citotóxico dose dependente frente as células do tumor ascítico de Ehrlich. Nas concentrações de 20 e 30 μg.mL-1 ocorreu 100% de morte celular em apenas 1 e 2 horas respectivamente. Nas doses mais baixas de 0,5, 1,0 e 2,0 μg.mL-1 o efeito citotóxico foi menos intenso, aumentando gradativamente com o tempo. CONCLUSÕES: Nas concentrações baixas de 0,5. 1,0 e 2,0 μg.mL-1, foi observado mais de 90% de morte celular somente após 24 horas de incubação o que evidência a capacidade da célula tumoral de se intoxicar de maneira irreversível e acumulativa com a acetona cianidrina, quando comparadas com os resultados apresentados pelos linfócitos humanos que nas mesmas doses e nos mesmos tempos de incubação atingiram um máximo de 30% de morte celular, o que sugere uma atividade de rodanase diferenciada entre as duas células.

    Abstract in English:

    PURPOSE: To evaluate the antitumor effect of acetone cyanohydrin in Ehrlich ascites tumor cells in vitro. METHODS: The Ehrlich ascites tumor cells and lymphocytes were incubated with different concentrations of acetone cyanohydrin (0, 0.5, 1.0, 2.0, 10.0, 20.0 and 30.0 μg.mL-1), After 1, 2, 3, 4, 18 and 24 hours cell viability tests were performed by the trypan blue method. RESULTS: The results demonstrated a dose-dependent cytotoxic effect against the cells of Ehrlich ascites tumor. The concentrations of 20 and 30 μg.mL-1 was 100% of cell death in only 1 and 2 hours respectively. In lower doses of 0.5, 1.0 and 2.0 μg.mL-1 the cytotoxic effect was less intense, increasing gradually with time. CONCLUSIONS: At low concentrations of 0.5, 1.0 and 2.0 μg.mL-1, more than 90% of cell death was observed only after 24 hours of incubation which is the evidence that the tumor cell has the ability to poison cumulatively and irreversibly itself with the acetone cyanohydrin when compared with the results presented by human lymphocytes that the same doses and at the same time of incubation reached a maximum of 30% of cell death, suggesting an activity of rhodanese differentiated between the two cells.
  • Lung apoptosis after intra-pulmonary instillation of Benzo(a)pyrene in Wistar rats Original Articles

    Silva, Baldomero Antonio Kato da; Aydos, Ricardo Dutra; Silva, Iandara Schettert; Pereira, Daniel Martins; Carvalho, Paulo de Tarso Camillo de; Dourado, Doroty Mesquita; Reis, Filipe Abdalla dos; Nacer, Renato Silva

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Avaliar a influência da instilação intrapulmonar de Benzo[a]pireno na apoptose pulmonar de ratos Wistar. MÉTODOS: Rattus norvegicus albinus, linhagem Wistar machos foram submetidos à instilação intra-pulmonar da diluição em álcool 70% de Benzo[a]pireno (B[a]P). Foram formados três grupos experimentais com 08 animais cada: Grupo Controle (álcool 70%); Grupo B[a]P 40 mg/kg; e Grupo B[a]P 80mg/kg, submetidos a eutanásia 16 e 18 semanas após o procedimento experimental. As secções pulmonares foram processadas pelo método TUNEL e submetidas à análise histomorfométrica para quantificação do número de células apoptóticas. RESULTADOS: Após 16 semanas, a média do número de células apoptóticas do grupo controle (19,3±3,2) mostrou-se maior que o grupo 40mg/Kg (11,8±1,9; p<0,01) e 80mh/Kg (7,0±1,4; p<0,01). Diferença significante foi também observada entre os grupos 40mg/Kg e 80mg/Kg (p<0,05). Após 18 semanas, a média do número de células apoptóticas do grupo controle (18,0±2,2) mostrou-se maior que o grupo 40mg/Kg (8,8±1,7; p<0,01) e 80mh/Kg (5,5±1,3; p<0,01). Não foi observada diferença significante entre os grupos 40 e 80mg/Kg (ns). CONCLUSÃO: A instilação intrapulmonar de Benzo[a]pireno induziu diminuição significativa da atividade apoptótica em tecido pulmonar.

    Abstract in English:

    PURPOSE: To evaluate the influence of pulmonary instillation of Benzo[a]pyrene in lung apoptosis of Wistar rats. METHODS: Male Rattus norvegicus albinus, Wistar lineage was carried through an intra-pulmonary instillation of the Benzo[a]pyrene (B[a]P) dilution in alcohol 70%. Three experimental groups had been formed with 08 animals each: Control Group (Alcohol 70%); B[a]P Group 40 mg/kg; e B[a]P Group 80mg/kg, submitted to euthanasia 16 and 18 weeks after the experimental procedure. The pulmonary sections had been processed by TUNEL method and submitted to the histomorphometric analysis to quantify the apoptotic cell number. RESULTS: After 16 weeks, mean of apoptotic cells number in control group (19,3±3,2) was greater than 40mg/Kg group (11,8±1,9; p<0,01) and 80mg/Kg group (7,0±1,4; p<0,01). Significant difference also observed between 40mg/Kg and 80mg/Kg (p<0,05). After 18 weeks, mean of apoptotic cells number in control group (18,0±2,2) was greater than 40mg/Kg group (8,8±1,7; p<0,01) and 80mg/Kg group (5,5±1,3; p<0,01). Significant difference wasn't observed between 40mg/Kg and 80mg/Kg (ns). CONCLUSION: Intra-pulmonary instillation of Benzo[a]pyrene induces significant decrease of apoptotic activity in lung tissue.
  • Anesthetic protocol for videolaparoscopic surgery in rabbits Original Articles

    Balbinotto, Rosi Pereira; Trindade, Manoel Roberto Maciel; Meyer, Fabíola Schons; Muller, Ana Lucia Letti; Rosa Jr, Arlindo da; Nunes, André Gorgen; Silva, Rodrigo da

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Descrever o protocolo anestésico e a técnica de intubação sem visualização da traqueia em coelhos, para viabilização de procedimento cirúrgico videolaparoscópico. MÉTODOS: O experimento foi realizado em 33 coelhas (Oryctolagus cuniculus), com idade entre 5 e 7 meses. Consistiu de anestesia geral e intubação endotraqueal por meio de palpação manual da traquéia das coelhas, sem o uso de laringoscópio, pela via oral, para posterior acesso cirúrgico videolaparoscópico da cavidade abdominal. RESULTADOS: Os valores médios e desvio padrão dos parâmetros vitais dos animais foram de 223,8±15,61 batimentos por minuto para freqüência cardíaca; 35±9 movimentos por minuto para frequência respiratória; 96,94±0,99% de oximetria e 42,82±4,02 mmHg para capnometria; 16,7±4,3 minutos para o pneumoperitônio (tempo de cirurgia) e 1 hora e 14±8,52 minutos para o tempo de observação (desde a indução até a recuperação anestésica). Todos os animais foram intubados em, no máximo, três tentativas. Não houve perda de animais após a introdução dessa técnica anestésica. CONCLUSÃO: Este protocolo mostrou-se adequado, seguro e de fácil realização, para a aplicação em coelhos submetidos à cirurgia videolaparoscópica.

    Abstract in English:

    PURPOSE: To describe the anesthetic protocol and the intubation technique without visualizing the trachea in rabbits, in order to enable the videolaparoscopic surgical procedure. METHODS: The experiment was performed on 33 female rabbits (Oryctolagus cuniculus), aged from 5 to 7 months. It consisted of general anesthesia and endotracheal intubation by manual palpation of the trachea of the rabbits, without using the laryngoscope, orally, for later videolaparoscopic surgical access to the abdominal cavity. RESULTS: The mean values and standard deviation of vital parameters of the animals were 223.8±15.61 beats per minute for heart rate; 35±9 movements per minute for respiratory rate; 96.94±0.99% of oxymetry and 42.82±4.02 mmHg for capnometry; 16.7±4.3 minutes for pneumoperitoneum (duration of surgery) and 1 hour and 14±8.52 minutes for time of observation (from induction to recovery from anesthesia). All animals were intubated in at most three attempts. No animals were lost after the introduction of this anesthetic technique. CONCLUSION: This protocol proved adequate, safe and easy to perform, on rabbits submitted to videolaparoscopic surgery.
  • Cardiocirculatory changes in hemorrhagic shock induced in pigs submitted to three distinct therapeutic methods Original Articles

    Abreu, Gilberto Fernandes Silva de; Coelho, Antônio Roberto Barros; Aguiar, José Lamartine de Andrade; Moura Filho, Sílvio Amorim

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVO: Avaliar e comparar as respostas cardiocirculatórias em suínos tratados por três terapias diferentes após choque hemorrágico. MÉTODOS: Trinta e cinco suínos Dalland foram divididos em quatro grupos: Controle; Sangria; Salina; Salina + Concentrado de hemácias. Parâmetros cardiocirculatórios avaliados: Frequência cardíaca (FC), pressão arterial média (PAM) e pressão venosa central (PVC). O choque hemorrágico foi induzido retirando (624,25±64,55) (619,30±44,94) e (664,23±39,96) ml do volume sanguíneo. Terapias: Grupo Sangria - Sem reposição volêmica; Grupo Salina - reposição com 676 ml de solução salina 0.9%; Grupo Salina + Concentrado de hemácias - reposição com 440 ml de solução salina 0,9% + 291 ml de concentrado de hemácias. A avaliação do tratamento foi realizada aos 10 (T3), 30 (T4), 45 (T5) e 60 minutos (T6). RESULTADOS: FC; Não houve diferença significativa entre os grupos Sangria e Salina [p=1,000]; Sangria e Salina + Concentrado de hemácias [p=1,000]; Salina e Salina + Concentrado de hemácias [p=0,721]. PAM; Houve diferença entre todos os grupos. PVC; Não houve diferença entre os grupos estudados. CONCLUSÃO: Os procedimentos sem reposição e com reposição euvolêmica mantiveram padrão hemodinâmico satisfatório no choque hemorrágico grave controlado em suínos. As estratégias de reposição euvolêmica ultrapassaram os valores de PAM considerados limites para o resangramento.

    Abstract in English:

    PURPOSE: To evaluate and compare the response of pigs submitted to hemorrhagic shock and treated using three different strategies. METHODS: Thirty-five Dalland pigs were divided into four groups: Control; Bleeding; Saline and Saline + Red Cell Concentrate. Parameters evaluated: heart rate (HR), mean arterial blood pressure (MAP) and central vein pressure (CVP).Hemorrhagic shock was induced by removing (624.25±64.55), (619.30±44.94) and (664.23±39.96) ml of blood respectively, with the following treatment: Bleeding Group - zero volume replacement; Saline Group - replacement with 676 ml of 0.9% saline solution; Saline + Red Cell Concentrate Group - replacement with 440 ml of 0.9% saline solution + 291 ml of red cell concentrate. The treatment was evaluated after 10 (T3), 30 (T4), 45 (T5) and 60 (T6) minutes. RESULTS: HR: No statistically significant difference was found between the Bleeding and Saline [p=1.000], Bleeding and Saline + Red Cell Concentrate [p=1.000], and Saline and Saline + Red Cell Concentrate [p=0.721] groups. MAP; Significant differences were found between all the groups studied. CVP: No significant difference was found between the groups. CONCLUSION: Non-replacement and euvolemic resuscitation maintained a satisfactory hemodynamic pattern in controlled severe hemorrhagic shock in swine. The euvolemic replacement strategies exceeded the limit values of MAP for rebleeding.
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