• CLONING, EXPRESSION, AND CHARACTERIZATION OF THE NUCLEOCAPSID PROTEIN OF INFECTIOUS BRONCHITIS VIRUS IN ESCHERICHIA COLI AND PICHIA PASTORIS Artigo Científico

    Gibertoni, A.M.; Gonçalves, M.C.M.; Montassier, M.F.S.; Fernandes, C.C.; Montassier, H.J.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO O gene da proteína de nucleocapsídeo (1.230 pb) da estirpe M41 do vírus da bronquite infecciosa (VBI) foi amplificado pelas reações de transcrição reversa e em cadeia da polimerase (RT-PCR) e clonado, em seguida, em dois sistemas; pET28a - Escherichia coli e pFLD -Pichia pastoris. Os produtos recombinantes construídos para expressão (pET28a-N ou pFLD-N) foram identificados por análises de PCR e de sequenciamento de nucleotídeos. Os clones transformantes da linhagem BL21 de E. coli e da linhagem GS115 de P. pastoris foram submetidos aos protocolos apropriados de indução. A expressão da proteína N de fusão com etiqueta de poli-histidina e com massa molecular de 54 kDa foi determinada pelas técnicas de SDS-PAGE e de Western blotting, confirmando-se que ambas proteínas N recombinantes apresentaram tamanhos e antigenicidade compatíveis com a proteína N nativa do próprio VBI. O sistema E. coli expressou uma quantidade relevante da proteína N recombinante, enquanto que o sistema P. pastoris produziu uma baixa recuperação dessa proteína recombinante. A proteína N recombinante gerada pelo sistema bacteriano foi purificada em resina de níquel-sepharose. O conjunto de resultados indica que o sistema de expressão constituído por pET28a – E. coli é mais efetivo para produzir a proteína N recombinante do VBI destinada ao uso como antígeno para detectar anticorpos anti-virais específicos em ensaios de imunodiagnóstico para essa infecção viral.

    Abstract in English:

    ABSTRACT The nucleocapsid protein (N) gene (1,230 bp) of the M41 strain of infectious bronchitis virus (IBV) was amplified by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR), and cloned in two systems; pET28a Escherichia coli and pFLD Pichia pastoris. The recombinant expression constructs (pET28a-N or pFLD-N) were identified by PCR and sequencing analysis. The transformant clones of BL21 strain of E. coli or GS115 of P. pastoris were submitted to appropriate inducting protocols. Expression of histidine-tagged fusion N proteins with a molecular mass of 54 kDa was determined by SDS-PAGE and Western blotting analysis, confirming that both recombinant N proteins were comparable in size and antigenicity to native IBV N protein. The E. coli system overexpressed the recombinant N protein, while the P. pastoris system produced a low yield of this recombinant protein. The bacteria expressed N protein was purified by chromatography on nickel-sepharose resin. These results indicated that the pET28a E. coli expression system is more effective to generate N recombinant protein for using as an antigen to detect anti-IBV antibodies in immuno-assays for this viral infection.
  • ESTUDO COMPARATIVO ENTRE OS TESTES ADOTADOS PELO PNCEBT PARA O DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO DA BRUCELOSE EM BOVINOS* Artigo Científico

    Meirelles-Bartoli, R.B.; Mathias, L.A.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Avaliaram-se comparativamente as provas do antígeno acidificado tamponado (AAT), a combinação das provas de soroaglutinação lenta e 2-mercaptoetanol (2-ME) e a reação de fixação de complemento (RFC), provas preconizadas pelo Programa Nacional de Controle e Erradicação de Brucelose Tuberculose (PNCEBT). Para tanto, foram alisadas 1.061 amostras de soros bovinos. Os dados foram analisados pelo indicador kappa, adotando-se como ponto de corte o título 25 no 2-ME e 4 na RFC. Constatou-se sensibilidade relativa de 99,6%, 98,8% e 91,1%, respectivamente, para o AAT, a 2-ME e a RFC, e especificidade relativa de 83,9%, 96,2% e 100,0%. A comparação entre os testes adotados pelo programa apontou concordância boa entre o teste de triagem (AAT) e os testes confirmatórios (kappa: 2-ME = 0,80; e RFC = 0,73) e concordância ótima quando os testes confirmatórios foram comparados entre si (kappa = 0,86). No entanto foram encontrados soros com título elevado em um dos testes confirmatórios e resultado negativo no outro, o que reforça a ideia de que o diagnóstico sorológico da brucelose é mais confiável quando obtido por meio dos resultados de vários testes.

    Abstract in English:

    ABSTRACT Serum samples from 1,061 bovine were analyzed by serological diagnostic techniques adopted by the Brazilian Program for Animal Brucellosis and Tuberculosis Control and Eradication in order to compare, as a screening test, the rose Bengal plate test (RBPT), and as confirmatory tests, the 2-mercaptoethanol plus standard tube agglutination test (2-ME), and the complement fixation test (CFT). Relative sensitivity of 99.6%, 98.8% and 91.1% were observed, respectively, for RBPT, 2-ME and CFT, and relative specificity of 83.9%, 96.2% and 100.0%. The agreement between tests was analyzed by the kappa statistic (2-ME cut-off = titer 25, and CFT cutoff = titer 4). RBPT showed a substantial agreement (kappa: 2-ME = 0.80; and RFC = 0.73) with the confirmatory tests, and excellent agreement between the confirmatory tests (kappa = 0.86) was observed. However sera with a negative result in one of the confirmatory tests and a high titer in the other were observed, reinforcing that the serological diagnosis of bovine brucellosis is more reliable when based on the results of several tests.
  • CARACTERIZAÇÃO GENÉTICA E DISTRIBUIÇÃO GEOGRÁFICA DO VÍRUS RÁBICO ISOLADO DE BOVINOS NO ESTADO DE MATO GROSSO, BRASIL Artigo Científico

    Matta, G.C.A.; Nociti, D.L.P.; Carvalho, A.A.B; Samara, S.I.; Ito, F.H; Sakai, T; Itou, T; Sato, G; Kobayashi, Y; Mochizuki, N

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Foram caracterizados, geneticamente e geograficamente, o sequenciamento parcial da nucleoproteína (gene N) de 53 isolados do vírus da raiva (VR) originários do Estado de Mato Grosso, Brasil. Os isolados de bovinos, que se encontravam no grupo do VR relacionado a morcegos hematófagos, foram posteriormente subdivididos em sete subgrupos genéticos. Estes subgrupos foram distribuídos em regiões de terras planas, com alguns subgrupos separados por formações de pequenas montanhas e hidrografia. Estes resultados indicam que a raiva em bovinos é derivada de diversas variantes regionalmente definidas, o que sugere que sua distribuição geográfica está relacionada as populações de morcegos hematófagos.

    Abstract in English:

    ABSTRACT A total of 53 rabies virus (RV) isolates originating from cattle in the state of Mato Grosso, Brazil, were genetically characterized. Partial nucleoprotein gene sequences of these isolates were phylogenetically and geographically analyzed. Cattle isolates, which clustered with the vampire bat related RV group, were further subdivided into 7 subgroups. These subgroups were distributed widely in lowland regions, with some subgroups separated from each other by small mountains and hydrographical features. These results indicate that cattle rabies is derived from several regionally-defined variants, which suggests that its geographical distribution is related to that of the vampire bat population.
  • COCCIDIOSE CLÍNICA EM FRANGOS DE CORTE INFECTADOS NATURALMENTE E IMUNOSSUPRIMIDOS COM DEXAMETASONA Artigo Científico

    Galha, V.; Bondan, E.F.; Bonamin, L.V.; Lallo, M.A.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO A ocorrência de coccidiose clínica em aves está relacionada com a competência do sistema imune. Com o objetivo de avaliar a ocorrência natural de coccidiose em aves imunossuprimidas, foram selecionados frangos de corte, de ambos os sexos, com a 35 a 38 dias de vida para constituir 3 grupos - grupo I (n = 25), formado por aves sem coccidiose e negativas para coccídias no exame de fezes; grupo II (n = 25), formado por aves com coccidiose e positivas para coccídias no exame de fezes, e grupo III (n = 25), formado por aves sem coccidiose, negativas para coccídias no exame de fezes e submetidas à imunossupressão com dexametasona (4 mg/kg/dia por 4 dias, via subcutânea). Realizou-se o diagnóstico de coccidiose com a técnica de centrífugo-flutuação com solução saturada de sacarose para investigação de oocistos nas fezes e pela análise macro e microscópica das lesões intestinais observadas após a necropsia. A resposta imune foi avaliada pela reação de hipersensibilidade basofílica cutânea (CBH) à fitoemaglutinina (PHA) e pela relação entre o peso corporal e o peso da bursa de Fabricius ou do baço. Os frangos dos grupos II e III apresentaram menor reação CBH à PHA que os do grupo I, evidenciando-se diminuição da resposta imune. As aves do grupo III mostraram diminuição significante do peso da bursa de Fabricius e do baço em relação aos animais dos outros grupos. As espécies de coccídias encontradas foram E. acervulina e E. maxima nos animais dos grupos II e III, sendo ainda observada E. tenella nas aves do grupo III. A imunossupressão induzida pela dexametasona aumentou a suscetibilidade à coccidiose de ocorrência natural em frangos de corte criados comercialmente.

    Abstract in English:

    ABSTRACT The purpose of this study was to evaluate the occurrence of clinical coccidiosis in broilers immunosuppressed with dexamethasone. Male and female broiler chickens, from 35 to 38 days old were divided into 3 groups – group I (n = 25), including chickens without coccidiosis and negative for coccidia in fecal examination; group II (n = 25), including birds with coccidiosis and positive for coccidia in fecal examination; group III (n = 25), constituted by chickens with no coccidiosis, negative for coccidia in fecal examination and immunosuppressed with dexamethasone (4 mg/kg/day for 4 days, subcutaneous route). The diagnosis of coccidiosis was achieved using the centrifugal floatation technique in sucrose solution to investigate the presence of oocystis in stools, as well as by the observation of macroscopic and microscopic changes in the gut after necropsy. The immune response was evaluated by determination of cutaneous basophil hypersensitivity (CBH) response to phytohemagglutinin (PHA) and of the weight ratio of bursa of Fabricius and spleen in relation to body weight. Broilers from group II and III presented decreased CBH reaction to PHA in relation to group I, suggesting a decrease of the immune response. In addition, chickens from group III presented a significant decrease in the weight of the bursa of Fabricius and of the spleen. The coccidian types were E. acervulina and E. maxima in chickens from groups II and III, as well as E. tenella in chickens treated with dexamethasone. Immunosuppression induced by dexamethasone increased susceptibility to natural coccidiosis in commercially raised broiler chicks.
  • ANÁLISE FAUNÍSTICA E FLUTUAÇÃO POPULACIONAL DE MOSCAS-DASFRUTAS (DIPTERA: TEPHRITIDAE) EM POMARES COMERCIAIS DE GOIABA NA REGIÃO DO CARIRI CEARENSE Artigo Científico

    Azevedo, F.R.; Guimarães, J.A.; Simplício, A.A.F.; Santos, H.R.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Devido à importância das moscas-das-frutas como pragas da fruticultura, este trabalho teve como objetivos caracterizar as populações das moscas-das-frutas em pomares comerciais de goiaba na região do Cariri, Estado do Ceará, por meio de índices faunísticos e estudar a flutuação populacional dessas moscas ao longo do ano. Para isso, foram instaladas armadilhas McPhail nos Municípios de Barbalha, Crato e Juazeiro do Norte. As armadilhas foram examinadas semanalmente e as moscas capturadas foram triadas, conservadas em álcool a 70% e identificadas. Constatou-se que Anastrepha zenildae (Wiedemann), A. sororcula Zucchi, A. fraterculus (Wiedemann), A. obliqua (Macquart) e Ceratitis capitata (Wiedemann) foram as moscas-das-frutas associadas à goiaba. Dessas, A. zenildae. A. sororcula e A. obliqua foram dominantes e constantes na região estudada, enquanto que A. fraterculus e C. capitata foram não-dominantes, mas também constantes. A. zenildae ocorreu em quase todos os meses do ano, exceto em outubro e dezembro de 2008, nos três pomares de goiaba do Cariri e com picos populacionais nos meses mais chuvosos e com temperaturas amenas.

    Abstract in English:

    ABSTRACT Due to the importance of fruit-flies as pests in fruit growing, the present study was aimed to characterize the populations of fruit-flies in commercial guava orchards in the Cariri region (state of Ceará), Brazil, by means of faunistic indexes and to study their population fluctuation during the year. For this purpose, McPhail traps were installed in the counties Barbalha, Crato and Juazeiro do Norte. The traps were examined weekly and the captured flies were separated, preserved in 70% alcohol and identified. Anastrepha zenildae (Wiedemann), A. sororcula Zucchi, A. fraterculus (Wiedemann), A. obliqua (Macquart) and Ceratitis capitata (Wiedemann) were associated with guava fruits. Of them, A. zenildae. A. sororcula and A. obliqua were dominant and constant in the studied region, while A. fraterculus and C. capitata were non-dominant but constant. A. zenildae occurred in almost all months of the year, except October and December of 2008, with population peaks in the rainy season with its milder temperatures.
  • ÁCAROS (ARACHNIDA: ACARI) ASSOCIADOS A PLANTAS ORNAMENTAIS TROPICAIS NA REGIÃO LITORAL SUL DA BAHIA Artigo Científico

    Santos, R.M.V.; Noronha, A.C.S.; Oliveira, A.R.; Bittencourt, M.A.L.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Em razão da expansão do agronegócio de flores tropicais na região Litoral Sul da Bahia e da inexistência de estudos com ácaros associados a essas culturas na região foram realizadas coletas no período de setembro de 2006 a junho de 2007 em 34 espécies/cultivares de plantas ornamentais tropicais das famílias Costaceae, Heliconiaceae, Musaceae e Zingiberaceae de onze propriedades localizadas em seis municípios (13º 21’ a 14º 58’ de latitude Sul e 39º 04’ a 39º 27’ de longitude Oeste), com o objetivo de se determinar a composição de grupos funcionais nos cultivos analisando-se a comunidade no nível de família por meio de índices faunísticos. Os ácaros foram coletados, mensalmente, em folhas e inflorescências. Foram registradas 22 famílias. Mais da metade dos ácaros pertenceu a famílias predominantemente predadoras, com destaque para os fitoseídeos. Com base em índices faunísticos, as famílias Phytoseiidae e Tetranychidae atingiram os índices máximos de dominância, abundância, frequência e constância. Tetraniquídeos (Tetranychus aff. abacae Baker & Pritchard) foram registrados em Alpinia purpurata (Viell.) Schum, Etlingera elatior (Jack) R. M. Smith, Musa coccinea H.C. Andrews, Strelitzia reginae Aiton, Zingiber spectabilis Griffith, Heliconia latispatha Benth., Heliconia rivularis L. Emygd. & E. Santos, Heliconia rostrata Ruiz & Pavon, Heliconia wagneriana Petersen e nos cultivares de helicônias ‘Nappi Yellow’, ‘Jacquinii’, ‘She’, ‘Golden Torch’, ‘Red Opal’, ‘Alan Carle’, ‘Fire Bird’ e ‘Nappi Red’. As espécies/cultivares com maior número de famílias de ácaros foram H. latispatha. H. rostrata. M. coccinea, ‘Fire Bird’, E. elatior ‘Vermelha’, Z. spectabilis. E. elatior ‘Rosa’, A. purpurata ‘Vermelha’ e helicônias ‘Alan Carle’, ‘Sassy’ e ‘She’. Não foram detectados nas plantas danos que causassem prejuízos econômicos aos produtores. As pequenas populações de fitófagos sugerem um eficiente controle natural por predadores, patógenos ou outros fatores.

    Abstract in English:

    ABSTRACT Due to the expansion of the tropical flower agribusiness in the southern coastal region of Bahia State, Brazil, and the lack of studies on mites associated to these cultures in the region, mite surveys were conducted from September 2006 to June 2007 in 34 species/cultivars of ornamental plants of the families Costaceae, Heliconiaceae, Musaceae and Zingiberaceae on 11 properties located in 6 counties (13º 21’ to 14º 58’ of south latitude and 39º 04’ to 39º 27’ of west longitude) with the aim of determining the composition of functional groups in the field through the analysis of the community at the family level using faunistic indexes. Mites were collected monthly from leaves and inflorescences. Twenty-two families were recorded. More than half of the mites pertained to predominantly predatory families, mainly to phytoseiids. Based on faunistic indexes, the families Phytoseiidae and Tetranychidae showed the maximum indexes of dominance, abundance, frequency and constancy. Tetranychids (Tetranychus aff. abacae Baker & Pritchard) were reported on Alpinia purpurata (Viell.) Schum, Etlingera elatior (Jack) R. M. Smith, Musa coccinea H.C. Andrews, Strelitzia reginae Aiton, Zingiber spectabilis Griffith, Heliconia latispatha Benth., Heliconia rivularis L. Emygd. & E. Santos, Heliconia rostrata Ruiz & Pavon, Heliconia wagneriana Petersen and on the cultivars of heliconia ‘Nappi Yellow,’ ‘Jacquinii,’ ‘She,’ ‘Golden Torch,’ ‘Red Opal,’ ‘Alan Carle,’ ‘Fire Bird’ and ‘Nappi Red.’ The species/cultivars with the largest number of mite families were H. latispatha. H. rostrata. M. coccinea, ‘Fire Bird,’ E. elatior ‘Vermelha,’ Z. spectabilis. E. elatior ‘Rosa,’ A. purpurata ‘Vermelha’ and heliconias ‘Alan Carle,’ ‘Sassy’ and ‘She.’ No mite-induced economic losses on tropical flower cultures were observed. The low population levels of phytophagous mites suggest an efficient natural control by predators, pathogens and other factors.
  • EFEITO DO TRATAMENTO DE SEMENTES COM INSETICIDAS NO CONTROLE DE PRAGAS INICIAIS E NA QUALIDADE FISIOLÓGICA DAS SEMENTES EM GIRASSOL Artigo Científico

    Bueno, A.F.; Sales, J.F; Bueno, R.C.O.F.; Costa, R.G. da; Vieira, S.S.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Avaliou-se o uso de inseticidas em tratamento de sementes de girassol no controle das pragas Cerotoma arcuatus (Olivier) (Coleoptera: Chrysomelidae), Bemisia tabaci (Gennadius) (Hemiptera: Aleyrodidae), Anticarsia gemmatalis Hübner (Lepidoptera: Noctuidae) e Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) e a influência desses inseticidas na qualidade fisiológica das sementes, durante o armazenamento. Os resultados obtidos mostraram que tiodicarbe 600 g i.a./ 100 kg de sementes proporcionou aproximadamente 80, 100 e 85% de controle de A. gemmatalis de 1º ínstar, S. frugiperda de 2º ínstar e adultos de C. arcuatus, respectivamente. Entretanto, esse mesmo tratamento foi ineficiente no controle de lagartas de S. frugiperda de 3º ínstar e de B. tabaci. No controle de adultos de C. arcuatus, além de tiodicarbe 600 g i.a./100 kg sementes que apresentou bons resultados, tiodicarbe + imidacloprido 157,5 + 52,5 g i.a., tiametoxam 210 e 280 g i.a., imidacloprido 245 e fipronil 50 g i.a./100 kg de sementes apresentaram eficiência acima de 80% no controle dessa praga. No controle da A. gemmatalis apenas fipronil 50 g i.a./100 kg sementes e azadiractina 10 e 20 g. i.a./100 kg de sementes proporcionaram valores menores que 80% de controle, nas doses testadas, enquanto que, para o manejo da mosca-branca, nenhum dos tratamentos estudados proporcionou controle superior a 80%. Nenhum dos inseticidas avaliados nos diferentes tempos de armazenamento (até quatro meses após o tratamento) prejudicou a germinação e a emergência das sementes.

    Abstract in English:

    ABSTRACT The aim of this study was to test various insecticides in the treatment of sunflower seeds for the control of Cerotoma arcuatus (Olivier) (Coleoptera: Chrysomelidae), Bemisia tabaci (Gennadius) (Hemiptera: Aleyrodidae), Anticarsia gemmatalis Hübner (Lepidoptera: Noctuidae) and Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae), and assessing their influence on the physiological quality of seeds during storage. The results showed that tiodicarb 600 g.a.i./100 kg of seeds achieved close to 80, 100 and 85% of control against first-instar A. gemmatalis, second instar S. frugiperda and adult C. arcuatus, respectively. However, this treatment was inefficient against third instar S. frugiperda and B. tabaci. Tiodicarb + imidacloprid 157.5 + 52.5; thiamethoxan 210; thiamethoxan 280; imidacloprid 245 and fipronil 50 g.a.i./100 kg of seeds also achieved 80% control against C. arcuatus adults. Against A. gemmatalis, only fipronil 50 g.a.i. and azarachtin 10 and 20 g.a.i./100 kg of seeds did not achieve more than 80% control. Against B. tabaci no tested treatment reached 80% of efficacy. None of the tested insecticides harmed seed germination or emergence during the different storage periods (up to 4 months after seed treatment).
  • EFFECT OF NEEM (AZADIRACHTA INDICA) OIL ON THE FRUIT-FLY CERATITIS CAPITATA (DIPTERA: TEPHRITIDAE) AND ITS PARASITOID DIACHASMIMORPHA LONGICAUDATA (HYMENOPTERA: BRACONIDAE) Artigo Científico

    França, W.M; Alvarenga, C.D; Giustolin, T.A; Oliveira, P.R; Cruz, P.L.; Lopes, G.N.; Paranhos, B.A.J.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Este trabalho teve como objetivo avaliar a ação do inseticida botânico nim em larvas de Ceratitis capitata, bem como no parasitismo destas larvas por Diachasmimorpha longicaudata. Para tanto, larvas de 3o ínstar de C. capitata foram mergulhadas por 30 segundos em soluções contendo as concentrações de 0,5%, 1% e 1,5% de um produto comercial à base de óleo de nim a 0,37% (3.686 ppm), além da testemunha mergulhada apenas em água destilada. Em seguida, as larvas foram expostas ao parasitismo de D. longicaudata por um período de 2 horas e 30 minutos. No experimento sem chance de escolha, para cada tratamento, uma única “unidade de parasitismo” foi pendurada no interior da gaiola. No experimento com livre escolha, as “unidades de parasitismo” foram penduradas no interior de uma mesma gaiola, de forma que os parasitoides tivessem livre acesso a todos os tratamentos. No experimento sem livre escolha, foi constatado que o aumento da concentração de nim diminuiu a atração das fêmeas, o número de fêmeas que efetuaram postura, o índice de parasitismo e a emergência dos parasitoides. No experimento com livre escolha, verificou-se que a emergência dos parasitoides e o índice de parasitismo também foram prejudicados nas maiores concentrações de nim. A ação isolada do nim, quando em contato com as larvas de 3o instar, não afetou a emergência de C. capitata.

    Abstract in English:

    ABSTRACT The purpose of this work was to evaluate the action of the botanic insecticide neem oil on larvae of Ceratitis capitata, as well as in the parasitism of these larvae by Diachasmimorpha longicaudata. Third-instar larvae were immersed for 30 seconds in a neem solution, in concentrations of 0.5%, 1% and 1.5% of a commercial product composed of 0.37% (3.686 ppm) neem oil, while the controls were immersed only in distilled water. Soon afterwards the larvae were exposed to parasitism of D. longicaudata for 2 hours and 30 minutes. In the no-choice experiment, for every treatment, a single “parasitism unit” was hung inside the cage. In the experiment with free choice, “parasitism units” were hung inside another cage, so that the parasitoids had free access to all treatments. In the no-choice experiment, it was ascertained that the increase of the neem oil concentration decreased the attraction of the females, the number of females that lay, the parasitism rate and parasitoid emergency. In the experiment with free choice, it was ascertained that the emergence of parasitoids and parasitism rate were harmed at the larger neem oil concentrations. The isolated action of neem oil, when in contact with the third-instar larvae, did not affect the emergence of C. capitata.
  • FUNGOS VEICULADOS POR SEMENTES COMERCIAIS DE BRAQUIÁRIA Artigo Científico

    Marchi, C.E.; Fernandes, C.D.; Bueno, M.L.; Batista, M.V.; Fabris, L.R.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Este trabalho objetivou avaliar a qualidade sanitária de 50 lotes comerciais de sementes de braquiária, produzidos em diferentes regiões nas safras de 2004-2005 e 2005-2006. Sementes de Brachiaria brizantha cvs. Marandu e Xaraés, B. decumbens cv. Basilisk, B. humidicola cv. Humidicola e B. ruziziensis cv. Ruziziensis, destinadas ao comércio interno, foram submetidas ao teste de sanidade pelo método de papel de filtro. Adicionalmente, avaliou-se a sanidade de sementes de ‘Marandu’ (2 lotes) e ‘Basilisk’ (1 lote) destinadas à exportação. As sementes foram distribuídas sobre papel de filtro acondicionado em gerbox e incubadas a 20º C, com fotoperíodo de 12h, durante sete dias. Os fungos secundários ou de armazenamento (FSA) mais frequentemente detectados nos lotes de braquiária foram Aspergillus sp. e Rhizopus sp. Quanto aos fungos potencialmente patogênicos (FP), constatou-se elevada frequência dos gêneros Bipolaris. Curvularia. Fusarium e Phoma. Em geral, foi elevada a incidência de Bipolaris sp., Fusarium sp. e Phoma sp. nas sementes. A ocorrência de Phoma sp. foi crítica, pois 42% dos lotes registraram índices superiores a 70%. Bipolaris sp., Fusarium sp. e Phoma sp. também foram associados às sementes de braquiária tipo exportação, em alguns casos, com incidência considerável. Os resultados revelaram que as sementes comerciais de braquiária apresentam baixa qualidade sanitária e que, em todas as regiões produtoras, existe pelo menos um fator afetando a sanidade dessas sementes.

    Abstract in English:

    ABSTRACT This work aimed to evaluate the sanitary quality of 50 commercial lots of seeds of braquiaria grass, produced in different regions in the crop of 2004–2005 and 2005–2006. The lots consisted of seeds of the cultivars Brachiaria brizantha cvs. Marandu and Xaraes, B. decumbens cv. Basilisk, B. humidicola cv. Humidicola and B. ruziziensis cv. Ruziziensis. Additionally, seeds of ‘Marandu’ (2 lots) and ‘Basilisk’ (1 lot) for exportation were analyzed. The blotter test was used, at 20º C under alternating light and darkness in a 12h photoperiod, for 7 days. Aspergillus sp. and Rhizopus sp. were the secondary or storage fungi with greatest frequency in lots of seeds. High frequency of potential pathogenic fungi, specifically of the Bipolaris. Curvularia. Fusarium and Phoma genera, was observed. In general, there was a high incidence of Bipolaris sp., Fusarium sp. and Phoma sp. in braquiaria grass seeds. The occurrence of Phoma sp. was severe, because 42% of the lots showed incidence superior to 70%. Bipolaris sp., Fusarium sp. and Phoma sp. were associated to braquiaria grass seeds for exportation, in some cases, with significant incidence. The results evidenced the low sanitary quality of commercial seeds of braquiaria grass, and demonstrated that in all producer regions there is at least one factor affecting the sanitary quality of these seeds.
  • SELECTION OF ISOLATES OF THE ENTOMOPATHOGENIC FUNGUS METARHIZIUM ANISOPLIAE (METSCH.) SOROK., AIMING AT THE CONTROL OF THE SUGARCANE BORER DIATRAEA SACCHARALIS (FABR., 1794) Artigo Científico

    Zappelini, L.O.; Almeida, J.E.M.; Batista, A.; Giometti, F.H.C.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Este trabalho teve por objetivo testar alguns isolados do fungo entomopatogênicos Metarhizium anisopliae em condições de laboratório. Inicialmente, foi calculado o valor da concentração letal (CL90), que ficou estabelecido em 5 x 108 conídios/mL. Na continuidade, foram utilizados 27 isolados diferentes, sendo estes testados quanto a sua patogenicidade e virulência em lagartas de Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Crambidae) com aproximadamente 1,5 cm, onde os melhores isolados (mortalidades confirmadas acima de 80%) foram novamente testados, a fim de se obter uma confirmação dos resultados. Em seguida, foram calculados os valores do tempo letal (TL50) para os melhores isolados, sendo estes submetidos à produção massal em arroz pré-cozido, verificando-se a esporulação média desses isolados. De uma maneira geral, as mortalidades confirmadas entre os 27 isolados variaram entre 54 a 100%, sendo que os IBCB 167, 351, 383, 384, 410, 417, 418, 425 e 481 foram capazes de provocar mortalidades superiores a 80%. Quanto ao tempo letal (TL50), o IBCB 383 apresentou o menor tempo com 6,83 dias e a maior conidiogênese foi registrada para o IBCB 417 com 2,52 x 109 conídios/g.

    Abstract in English:

    ABSTRACT Aiming to improve the methods for controlling the sugarcane borer, Diatraea saccharalis, this study tested some strains of the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae under laboratory conditions. Initially, the value of the lethal concentration (LC90) was calculated, and set at 5 x 108 conidia/mL. Next, 27 different strains were tested for their pathogenicity and virulence in regard to larvae of D. saccharalis of approximately 1.5 cm, with retesting of the best isolates (confirmed mortalities above 80%) to confirm the results. Next, the values of lethal time (LT50) were calculated for the best strains, which were mass produced on pre-cooked rice, verifying the average sporulation of these isolates. Generally, the mortality confirmed among the 27 isolates ranged from 54 to 100%, with IBCB 167, 351, 383, 384, 410, 417, 418, 425 and 481 able to generate mortality over 80%. In terms of lethal time (LT50), IBCB 383 showed a shorter time of 6.83 days, while the greatest conidiogenesis was recorded for IBCB 417, with 2.52 x 109 conidia/g.
  • HISTOPATHOLOGY OF THE INTERACTION OF BACILLUS THURINGIENSIS AND PLANT EXTRACTS IN THE MIDGUT OF SPODOPTERA FRUGIPERDA (LEPIDOPTERA: NOCTUIDAE) Artigo Científico

    Knaak, N; Tagliari, M.S.; Fiuza, L.M.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Plantas são fontes naturais de substâncias inseticidas, já que podem ser produzidas pelo vegetal em resposta a ataques de insetos podendo representar uma alternativa no manejo de insetos-praga, como Spodoptera frugiperda. Dessa forma, o presente trabalho objetivou a análise histopatológica do intestino médio de lagartas de S. frugiperda, após a ingestão dos extratos obtidos por maceração e infusão de Petiveria alliacea. Zingiber officinale. Cymbopogon citratus. Malva silvestris. Baccharis genistelloides e Ruta graveolens, assim como a associação desses extratos com Bacillus thuringiensis aizawai. As lagartas foram tratadas in vivo com cada extrato e a bactéria, mais a associação desses extratos com B. thuringiensis e após, uma reação de cinética entre 3 e 27 horas, foram fixadas para o preparo de cortes histológicos, os quais foram corados e analisados comparativamente às testemunhas em microscopia óptica. Os resultados mostraram mudanças na histologia do intestino médio das lagartas de S. frugiperda, 3 horas após a aplicação dos tratamentos à base de alliacea. Z. officinale. C. citratus e M. silvestris, enquanto que para B. genistelloides e R. graveolens só foram observados alterações após 6h. Na interação dos extratos com B. thuringiensis observou-se alterações nas microvilosidades, desorganização do intestino médio e a hipertrofia das células epiteliais que projetaram-se para o lúmen. Os resultados desse trabalho mostram que o efeito histopatológico de Z. officinale. M. silvestris. R. graveolens e B. genistelloides, foram mais ativos quando comparados aos extratos de P. alliacea e C. citratus, os quais apresentaram uma interação positiva com B. thuringiensis.

    Abstract in English:

    ABSTRACT The natural insecticidal substances produced by plants in response to insect attack may represent an alternative for the management of pest insects such as Spodoptera frugiperda. This study was therefore aimed to histopathologically analyze the midgut of larvae of S. frugiperda, after ingestion of extracts obtained by maceration and infusion of Petiveria alliacea. Zingiber officinale. Cymbopogon citratus. Malva silvestris. Baccharis genistelloides and Ruta graveolens, and the association of these extracts with Bacillus thuringiensis aizawai. The larvae were treated in vivo with each extract, B. thuringiensis, and the combination of these extracts with the bacteria, and after a reaction kinetics of between 3 to 27 hours they were fixed for the preparation of histological sections, which were stained and analyzed in comparison to the controls with light microscopy. The results showed changes in the histology of the midgut of the larvae of S. frugiperda, 3 hours after application of treatments based on P. alliacea. Z. officinale. C. citratus and M. silvestris, while for B. genistelloides and R. graveolens changes were observed only after 6h. In the interaction of extracts with B. thuringiensis the analysis revealed changes in microvilli, disorganization of the midgut and hypertrophy of epithelial cells that projected into the lumen. The findings show that the histopathological effects of Z. officinale. M. silvestris. R. graveolens and B. genistelloides were more active when compared to extracts of P. alliacea and C. citratus, which showed a positive interaction with B. thuringiensis.
  • INDUCTION OF PHYTOALEXINS IN SOYBEAN AND SORGHUM BY SACCHAROMYCES BOULARDII Artigo Científico

    Stangarlin, J.R.; Schulz, D.G.; Franzener, G.; Assi, L.; Schwan-Estrada, K.R.F.; Kuhn, O.J.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO O gênero Saccharomyces tem sido usado como indutor de resistência ou para controle biológico em muitos patossistemas. Neste trabalho objetivou-se a indução de fitoalexinas em mesocótilos de sorgo e cotilédones de soja pela levedura Saccharomyces boulardii na forma do produto comercial Floratil (Merck) (com 2 x 106 células/mg produto comercial - pc) e massa de células obtidas de meio líquido YEPG (primeiramente com 14 dias de cultivo e, posteriormente, com 7, 14, 21, 28 e 35 dias) ambos em concentrações de 0,005; 0,05; 0,5; 5; 15 e 25 mg/mL, além de filtrado desse meio nas concentrações de 0,01; 0,1; 1; 5; 10 e 20%. Como tratamentos controle utilizou-se água e S. cerevisiae (25 mg/mL de pc) para soja e água e acibenzolar-S-metil (ASM) (125 mg i.a./L) para sorgo. Em soja os três produtos apresentaram efeito dose-dependente, com ajustes de equações de 1° grau e R2 de 0,64; 0,94 e 0,98 não tendo efeito do tempo de cultivo da levedura na indução de fitoalexinas. Em sorgo apenas o filtrado e Floratil tiveram efeito dose-dependente com equação de 1° grau e R2 de 0,63 e 0,94 respectivamente e obteve-se nos diferentes dias de cultivo R2 de 0,62 com a massa de células somente. Portanto, pode-se evidenciar o potencial indutor de fitoalexinas dos produtos a base de S. boulardii para ensaios com indução de resistência em patossistemas envolvendo sorgo e soja.

    Abstract in English:

    ABSTRACT Saccharomyces yeast compounds have been used as a resistance elicitor or for biological control in many pathosystems. Thus, the aim of this research was to verify the induction of phytoalexins in sorghum mesocotyls and soybean cotyledons by using Saccharomyces boulardii in the form of the commercial product Floratil (Merck) (with 2 x 106 cells/mg) and yeast-cell mass obtained from liquid culture in YEPG medium (with 7, 14, 21, 28 and 35 days old), both at concentrations of 0.005, 0.05, 0.5, 5, 15 and 25 mg/mL, as well as the filtrate of this medium in concentrations of 0.01, 0.1, 1, 5, 10 and 20%. The control treatments consisted of distilled water and S. cerevisiae (25 mg of commercial product per mL) for the soybean tests and distilled water and acibenzolar-S-methyl (125 mg of active ingredient per L) for the sorghum tests. In soybeans the three tested S. boulardii products presented a dose-dependent effect with R2 of 0.64, 0.94 and 0.98 for the culture filtrate, cell suspension and commercial product of S. boulardii, respectively, with no effect of culture time of yeasts on phytoalexin induction. In sorghum, only the culture filtrate and Floratil presented a dose-dependent effect, with R2 of 0.63 and 0.94, respectively, and the cell suspension of S. boulardii showed dependence of culture time with R2 of 0.62. Thus, S. boulardii and its derivates induce phytoalexins and have potential to be used as an elicitor for assays with induction resistance in pathosystems involving sorghum and soybean plants.
  • CONTROL OF BACTERIAL BLIGHT (XANTHOMONAS AXONOPODIS PV. PHASEOLI) AND BIOCHEMICAL ANALYSES OF BEAN RESISTANCE TREATED WITH PYCNOPORUS SANGUINEUS EXTRACTS Artigo Científico

    Toillier, S.L.; Iurkiv, L.; Meinerz, C.C.; Baldo, M.; Viecelli, C.A.; Kuhn, O.J.; Schwan-Estrada, K.R.F.; Stangarlin, J.R.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO O objetivo deste trabalho foi verificar as atividades antibacteriana e indutora de resistência de extratos de Pycnoporus sanguineus para controle do crestamento bacteriano comum, causado por Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli, em feijoeiro. In vitro foram utilizados extratos aquosos de basidiocarpo, micélio e filtrado de cultura de P. sanguineus nas concentrações de 1, 5, 10, 15 e 20%, além das testemunhas água, acibenzolar-S-metil (ASM - 125 mg i.a. L-1) e antibiótico (22,5 mg L-1 de oxitetraciclina + 225 mg L-1 de estreptomicina). In vivo foram realizadas avaliações de severidade e atividade de peroxidase, polifenoloxidase, β-1,3 glucanase e fenilalanina amônia-liase, com o uso de extrato aquoso de micélio e de basidiocarpo e filtrado de cultura de P. sanguineus a 5% e 10%. Verificou-se atividade antibacteriana apenas para o filtrado de cultura em concentrações acima de 15% e para o extrato de basidiocarpo nas concentrações de 1 a 20%. In vivo, os resultados indicaram o potencial de extratos de basidiocarpos de P. sanguineus para o controle de X. axonopodis pv. phaseoli em feijoeiro, com redução média de 56% na severidade, o que pode ter ocorrido tanto por atividade antimicrobiana direta quanto por indução de resistência, envolvendo principalmente a ativação das enzimas de defesa vegetal peroxidase e polifenoloxidase.

    Abstract in English:

    ABSTRACT The aim of this work was to verify the antimicrobial and resistance induction activities of Pycnoporus sanguineus extracts for the control of common bacterial blight caused by Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli. In vitro assays were performed using aqueous extracts from basidiocarp, mycelium and culture filtrate of P. sanguineus in concentrations of 1, 5, 10, 15 and 20%, with water, acibenzolar-S-methyl (ASM - 125 mg a.i. L-1) and antibiotic (oxytetracycline 22.5 mg L-1 + streptomycin 225 mg L-1) as control treatments. For the in vivo assays the disease severity and the activities of peroxidase, polyphenol oxidase, β-1,3 glucanase and phenylalanine ammonia-lyase were evaluated using extracts of mycelium, basidiocarp and culture filtrate of P. sanguineus at 5% and 10%. Antibacterial activity was verified only for culture filtrate in concentrations above 15% and for concentrations of 1% to 20% of basidiocarp extract. The results of the in vivo assays indicated the potential of basidiocarps extracts from P. sanguineus for the control of X. axonopodis pv. phaseoli in beans, with an average severity reduction of 56%, which may have been due either to direct antimicrobial activity or to resistance induction involving mainly the activation of the plant defense enzymes peroxidase and polyphenol oxidase.
  • SELECTIVITY OF INSECTICIDES USED IN CORN CROPS TO EGGS AND NYMPHS OF THE EARWING DORU LINEARE (ESCHSCHOLTZ, 1822) (DERMAPTERA: FORFICULIDAE) Artigo Científico

    Zotti, M.J.; Grützmacher, A.D.; Grützmacher, D.D.; Castilhos, R.V.; Martins, J.F.S.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO O objetivo do trabalho foi avaliar a seletividade de inseticidas usados na cultura do milho para o controle de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae) sobre ninfas de primeiro ínstar e ovos do predador Doru lineare (Scudder, 1876) (Dermaptera: Forficulidae). Para os bioensaios foi utilizada a metodologia padronizada da IOBC/WPRS, em condições de laboratório, com temperatura de 25 ± 1º C, umidade relativa de 70 ± 10% e fotofase de 14 horas. No bioensaio com ninfas para contato residual, a aplicação dos inseticidas foi realizada com um equipamento pressurizado a CO2, pressão de 50 psi. Para aplicação dos inseticidas sobre os ovos foi utilizada torre de Potter, com pressão de 10 psi. Em ambas as formas de aplicação o depósito foi de 1,75 ± 0,25 mg de calda cm-2 conforme metodologia da IOBC/WPRS. A mortalidade de ninfas foi utilizada para classificar os inseticidas como inócuo (< 30%), levemente nocivo (30-79%), moderadamente nocivo (80-99%) e nocivo (> 99%). Os dados de viabilidade de ovos e sobrevivência de ninfas que eclodiram deles foram comparados com os dados das testemunhas positiva (Sevin 480 SC) e negativa (água). Certero, Dimilin, Engeo Pleno, Karate Zeon 250 SC, Lorsban 480 BR, Match EC e Sevin 480 SC reduziram a viabilidade de ovos. A sobrevivência de ninfas provenientes dos ovos tratados teve redução para os inseticidas: Decis 25 EC, Dimilin, Engeo Pleno, Karate Zeon 250 CS, Lorsban 480 BR e Sevin 480 SC. Para ninfas de D. lineare em contato residual, todos os inseticidas foram nocivos em 96 horas após a exposição.

    Abstract in English:

    ABSTRACT The goal of this work was to evaluate the selectivity of insecticides used in corn crops for the control of Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae) on first-instar nymphs and eggs of the earwig Doru lineare. For the bioassays the standardized methodology of IOBC/WPRS was used in terms of temperature (25 ± 1º C), relative humidity (70 ± 15%) and photophase (14 hours). In the bioassay with nymphs for residual contact, the applications of insecticides was conducted with equipment pressurized by CO2 to 50 psi. For applications of insecticides on eggs, a Potter’s tower was used, with pressure of 10 psi. In both forms of spraying the deposit was 1.75±0.25 mg cm-2 of aqueous solution in accordance with the IOBC/WPRS methodology. The mortality of nymphs was used to classify insecticides as harmless (< 30%), slightly harmful (30-79%), moderately harmful (80-99%) and harmful (> 99%). Viability of eggs and survival of hatched nymphs were both evaluated by comparing with the positive (Sevin 480 SC) and negative (water) controls. The viability of eggs was reduced by Certero, Dimilin, Engeo Pleno, Karate Zeon 250 SC, Lorsban 480 BR, Match EC and Sevin 480 SC. The survival of nymphs from treated eggs was reduced by the insecticides Decis EC, Dimilin, Engeo Pleno, Karate Zeon 250 CS, Lorsban 480 BR and Sevin 480 SC. For nymphs of D. lineare in residual contact, all the insecticides were harmful.
  • PHYSIOLOGIC SELECTIVITY OF PESTICIDES USED ON COFFEE PLANTATIONS ON EGGS AND ADULTS OF CRYPTOLAEMUS MONTROUZIERI MULSANT Artigo Científico

    Rocha, L.C.D.; Carvalho, G.A.; Moura, A.P.; Moscardini, V.F.; Rezende, D.T.; Santos, O.M.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Em cafeeiros, a associação de inimigos naturais com produtos fitossanitários seletivos é uma importante estratégia no manejo de pragas. O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos letais e subletais de produtos fitossanitários utilizados na cultura cafeeira sobre ovos e adultos de Cryptolaemus montrouzieriMulsant em laboratório. Os bioensaios foram realizados sob 25 ± 2º C, UR de 70 ± 10% e fotofase de 12h. Os inseticidas utilizados e suas respectivas dosagens de aplicação, em g ou mL de i.a. L-1 foram: tiametoxam (0,5), imidacloprido (0,7), óleo mineral (13,3), endossulfam (2,63) e dimetoato (0,48). A testemunha foi composta apenas por água destilada. A aplicação dos produtos foi realizada por meio de torre de Potter. Avaliaram-se a viabilidade de ovos, a sobrevivência dos espécimes e os efeitos dos compostos sobre os parâmetros reprodutivos do predador. Tiametoxam provocou prolongamento na duração do período embrionário (7,1 dias) em ovos tratados e junto com imidacloprido foram classificados como nocivos, seguidos do endossulfam e dimetoato que apresentaram toxicidade intermediária e do óleo mineral que foi seletivo. Em função da seletividade do óleo mineral, pode-se recomendá-lo visando à compatibilização com o predador C. montrouzieri em programas de manejo integrado de pragas na cultura cafeeira.

    Abstract in English:

    ABSTRACT On coffee plantations, the association between selective compounds and natural enemies composes an important tool for the pest management. The objective of this study was to evaluate some pesticides used on coffee plantations in regard to their lethal and sublethal effects on eggs and adults of Cryptolaemus montrouzieri Mulsant under laboratory conditions. The bioassays were carried out in the Laboratory of Selectivity Studies, Department of Entomology of the Universidade Federal de Lavras – UFLA, Brazil, under controlled conditions (climatic chamber) at 25 ± 2º C, RH of 70 ± 10% with a 12 h photophase. The pesticides and doses in g or mL of i.a. L-1 were: thiamethoxam (0.5), imidacloprid (0.7), mineral oil (13.3), endosulfan (2.63) and dimethoate (0.48). Distilled water was used as a control. The sprayings of the pesticides were accomplished using a Potter’s tower. The parameters evaluated were: specimen survival after the application of the compounds, oviposition and eggs viability. Thiamethoxam, imidacloprid and endosulfan were the most harmful to the treated individuals. When sprayed on eggs, thiamethoxam increased the embryonic period length (7.1 days). Mineral oil was the only compound that did not affect the reproduction of C. montrouzieri. In function of the selectivity presented by mineral oil, it can be recommended to be used in integrated pest management on coffee plantations in association with this predator.
  • PESQUISA DE SOROVARES DE LEPTOSPIRAS EM REBANHO BOVINO LEITEIRO NO ESTADO DO PIAUÍ, BRASIL Comunicação Científica

    Mineiro, A.L.B.B.; Vieira, R.J; Feitosa, L.C.S.; Bezerra, E.E.A.; Costa, F.A.L.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Este trabalho teve como objetivo relatar a pesquisa de sorovares de leptospiras em animais de uma fazenda localizada no Município de Buriti dos Lopes, integrante da Bacia Leiteira de Parnaíba, Piauí, Brasil. Foram colhidas amostras de sangue de 18 vacas da raça Girolando que abortaram no período de julho de 2004 a abril de 2005. As amostras foram submetidas ao teste de soroaglutinação microscópica (SAM) utilizando-se antígenos vivos de 23 sorovares de leptospiras patogênicas. 83,33% (15/18) das amostras apresentaram aglutininas anti-leptospira, sendo 53,33% de sorovar Hardjoprajitno (8/15), 6,67% para Hardjobovis (1/15), Wolffi (1/15) e Shermani (1/15) e quatro (4/15) co-agluitinações. A amostra do reprodutor apresentou aglutininas antileptospira para o sorovar Hardjobovis com titulação 1:400 o que sugere que este animal teve participação na disseminação da infecção no rebanho.

    Abstract in English:

    ABSTRACT This study aimed to report the leptospira serovar varieties in animals from a farm located in the county of Buriti dos Lopes, within the so-called “milk basin” of Parnaíba, state of Piauí, Brazil. Samples of blood were collected from 18 Girolando cows who aborted between July 2004 and April 2005, and a sample was taken from a breeder bull. The samples were subjected to the microscopic agglutination test (SAM), using live antigens of 23 pathogenic leptospira serovars. Serum samples were screened in the dilution of 1:100. Data analysis revealed that 83.33% (15/18) of the samples showed anti-leptospira agglutinins, of which 53.33% were for the Hardjoprajitno serovar (8/15), 6.67% each for Hardjobovis (1/15), Wolffi (1/15) and Shermani (1/15), along with 4 (4/15) coagglutinations. The breeder-bull sample showed anti-leptospira agglutinins for serovar Hardjobovis with titration of 1:400, suggesting that this animal had participated in the spread of the infection in the herd.
  • AVALIAÇÃO DE ANTÍGENOS PARA O DIAGNÓSTICO DE LENTIVÍRUS EM REBANHO CAPRINO SOB PROGRAMA DE CONTROLE Comunicação Científica

    Pinheiro, R.R.; Andrioli, A.; Gouveia, A.M.G.; Aragão, M.A.C.; Martinez, P.M.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Este trabalho teve como objetivo comparar os resultados do diagnóstico do Lentivírus Caprino, por Imunodifusão em Gel de ágar - IDGA, utilizando o kit comercial americano e o kit nacional produzido com cepa CAEV Cork. Foram utilizados dois rebanhos, sendo um da Embrapa Caprinos submetido a doze anos de programa de controle e um outro rebanho infectado pelo CAEV, que não teve nenhuma ação prévia de controle. Analisando os resultados dos antígenos (nacional e americano) no rebanho não controlado, verificou-se que o antígeno comercial americano, quando foi utilizado pela primeira vez para o diagnóstico apresentou resultados mais significativos do que o nacional. Já no rebanho controlado, o antígeno nacional detectou um número maior de positivos. Analisando os dados do trabalho verificou-se a importância da alternância de proteínas imunogênicas presentes no antígeno dos kits de diagnóstico usados em programas de controle da Artrite Encefalite Caprina, haja vista a variação das respostas ao diagnóstico segundo a proteína expressa pelo vírus.

    Abstract in English:

    ABSTRACT Caprine arthritis encephalitis is an infection caused by lentivirus and found on all the continents with a high prevalence in the more technified milk production flocks, causing considerable economic losses for goat production. The aim of this work was the comparison, by Agar gel immunodiffusion (AGID), between the diagnosis using a national test produced with the strain CAEV Cork and an American commercial kit in a controlled flock and in another flock without a control program for goat lentivirosis. The controlled flock had been under control for twelve years by Embrapa Goats, while the other flock was infected by CAEV and had not undergone any previous program of control. Analyzing the results of the antigens (national and American) in the uncontrolled flock, it was verified that when the antigen was used for the first time, the American commercial antigen showed more significative results than the national one. In the controlled flock the national antigen detected a higher number of cases. Analysis of the data revealed the importance of the diagnosis kits in caprine arthritis encephalitis control programs, as seen in the variation of the responses to the diagnosis according to the expressed protein for the virus.
  • ISOLATION OF CORYNEBACTERIUM PSEUDOTUBERCULOSIS FROM THE SEMEN OF A SHEEP IN THE CENTRAL REGION OF RIO GRANDE DO SUL, BRAZIL Comunicação Científica

    Camargo, E.V.; Barboza, C.S.; Krewer, C.; Vargas, A.P.C; Cecim, M.; Leal, M.L.R.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO O presente trabalho descreve o isolamento do Corynebacterium pseudotuberculosis no sêmen de um carneiro da raça Suffolk proveniente do Município de São Martinho da Serra, RS. Ao exame físico constatou-se aumento de volume subcutâneo aderido à pele, junto à inserção do escroto, próximo ao plexo pampiniforme esquerdo. Realizou-se exame andrológico com coleta de sêmen e, posteriormente, punção no local da lesão, obtendo-se material viscoso de coloração amarelo esverdeado. As amostras coletadas (sêmen e material obtido da punção) foram enviadas ao LABAC (Laboratório de Bacteriologia Veterinária da Universidade Federal de Santa Maria) para realização de cultura bacteriana. Em ambas as amostras, foi isolado o cocobacilo Gram positivo denominado C. pseudotuberculosis.

    Abstract in English:

    ABSTRACT The present paper describes the isolation of Corynebacterium pseudotuberculosis from a semen sample of a Suffolk ram from São Martinho da Serra County, state of Rio Grande do Sul, Brazil. Physical examination revealed a subcutaneous mass close to the insertion of the scrotum, more specifically around the left pampiniform plexus. A routine andrological exam with semen collection was performed. Also, the mass was aspirated yielding a viscous greenish material. Samples were sent to a bacteriology lab for culture and identification. Gram positive coccobacillus C. pseudotuberculosis was isolated from both samples.
  • DIRECT DETECTION OF ACTINOBACILLUS PLEUROPNEUMONIAE IN SUIDAE ORGANS IN SÃO PAULO STATE, BRAZIL, BY POLYMERASE CHAIN REACTION (NESTED-PCR) Comunicação Científica

    Ferraz, M.I.C.P.; Ferreira, D.R.; Goes, A.C.; Gregori, F.; Miyashiro, S.; Ruiz, V.L.A.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO A pleuropneumonia suína, causada pelo Actinobacillus pleuropneumoniae, é uma importante doença respiratória, responsável por prejuízos e queda de produtividade nas criações. Este trabalho teve como objetivo determinar a ocorrência de A. pleuropneumoniae em amostras de campo, mediante a adaptação e emprego de uma técnica de nested-PCR dirigida ao gene Apx IV. Definiu-se a sensibilidade analítica das técnicas de PCR e nested-PCR utilizando a amostra padrão A. pleuropneumoniae sorotipo III, em concentrações de DNA variando entre 30 µg/mL a 0,01 ng/ mL. Um total de trinta e sete amostras de campo encaminhadas ao Instituto Biológico entre 1995 a 2007 foram analisadas pelas técnicas de PCR e nested-PCR. A avaliação da sensibilidade analítica revelou que a PCR possui capacidade de gerar sinal a partir de 2 ng/mL de DNA extraído e a nested-PCR a partir de 0,4 ng/mL. Uma vez que a nested-PCR apresentou sensibilidade analítica cinco vezes maior se comparada à PCR para detecção de A. pleuropneumoniae em amostra padrão, o seu emprego pode minimizar a ocorrência de resultados tipo “falso-negativo”. Dentre as amostras testadas, dez foram positivas à nested-PCR, sendo observada a ocorrência de A. pleuropneumoniae em nove diferentes animais, um deles javali. A presente técnica de nested-PCR pode ser utilizada para detecção direta de A. pleuropneumoniae em amostras de campo, mesmo após congelamento da amostra por longos períodos e sem necessidade de isolamento bacteriano prévio.

    Abstract in English:

    ABSTRACT Porcine pleuropneumonia, caused by Actinobacillus pleuropneumoniae, is an important respiratory disease, responsible for economic losses and reduced productivity. The aim of this study was to determine occurrence of A. pleuropneumoniae in field samples, using an adapted nested-PCR reaction targeting the Apx IV gene. Different DNA concentrations (from 30 µg/mL to 0.01 ng/mL) of A. pleuropneumoniae serotype III reference strain were used to determine the level of sensitivity of first generation and nested-PCR reactions. Thirty-seven field samples sent to Instituto Biológico from 1995 to 2007 were tested by PCR and nested-PCR. Determination of the level of sensitivity showed that PCR could amplify to 2 ng/mL of extracted DNA and nested-PCR to 0.4 ng/mL. Since the nested reaction exhibited a level of sensitivity 5 times greater than the PCR reaction to detect a reference strain, using nested-PCR could minimize the occurrence of false-negative results. Among tested samples, 10 of them were nested-PCR positive, showing occurrence of A. pleuropneumoniae in 9 different animals (including one wild boar). This nested-PCR reaction can be used for direct detection of A. pleuropneumoniae in field samples, even after frozen storage for long periods, without the need for previous bacterial isolation.
  • DECTECCION OF SALMONELLA ALBANY, COAGULASE POSITIVE STAPHYLOCOCCUS E MESOPHILIC MICRORGANISMS IN CARCASSES CHICKEN IN NATURA. Comunicação Científica

    Brito, D.A.P.; Alves, L.M.C.; Costa, F.N.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Com o objetivo de avaliar as condições higiênico-sanitárias das carcaças de frango in natura comercializadas em mercados públicos do Município de São Luís, MA, foram colhidas quarenta amostras de carcaças de frango e analisadas quanto à pesquisa de Salmonella spp., Staphylococcus coagulase positivos e contagem padrão de micro-organismos mesófilos pelos métodos convencionais. Do total de amostras analisadas, 18 (45%) apresentaram contaminação por Staphylococcus coagulase positivos, 5 (12,5%) estavam contaminadas por Salmonella spp., identificadas como Salmonella Albany. A contagem padrão de micro-organismos mesófilos variou de 103 a 107 UFC/g no alimento analisado. Os resultados obtidos indicam que as condições higiênico-sanitárias das carcaças de frango in natura analisadas são insatisfatórias e que este produto pode ser um importante veículo de toxi-infecção alimentar.

    Abstract in English:

    ABSTRACT The objective of this study was to evaluate the hygienic-sanitary conditions of in natura broiler carcasses commercialized in the market from São Luiz City, MA. Forty samples were collected and analyzed to research of Salmonella spp., coagulase positive Staphylococcus and of mesophilic microorganisms count. Among the analyzed samples, eighteen (45%) were contaminated with coagulase positive Staphylococcus, five (12,5%) were contaminated with Salmonella sp, being identified Salmonella Albany and counting of 103 to 107 UFC/g of mesophilic microorganisms. The results showed the hygienic-sanitary conditions samples analyzed were unsatisfactory and the consumption of this products can lead to an intoxication.
  • PATHOGENICITY INDEX, PRODUCTION OF HEMOLYSIN AND SEROGROUP OF SAMPLES OF ESCHERICHIA COLI ISOLATED FROM COMMERCIAL LAYING HENS Comunicação Científica

    Guastalli, E.A.L.; Gama, N.M.S.Q.; Buim, M.R.; Oliveira, R.A.; Ferreira, A.J.P.; Leite, D.S.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Este estudo avaliou o índice de patogenicidade, a produção de hemolisina e a determinação de sorogrupos de cepas deEscherichia coli isoladas de fígado de aves de postura comercial com um dia de idade. Para este estudo, foram analisados 32 lotes, dos quais 15 foram positivos para o isolamento de E. coli no fígado, totalizando vinte e quatro amostras. A patogenicidade dos isolados foi determinada por inoculação no saco aéreo de pintinhos e classificada como alta, intermediária, baixa ou não-patogênica. Os sorogrupos foram identificados utilizando um conjunto de antissoros anti-O (O1 a O180). A produção de hemolisina foi determinada por semeadura em ágar sangue de galinha (8%) e em placas de ágar sangue de carneiro (8%). Do total de amostras estudadas, 17 (70,83%) foram classificadas como não patogênica, 6 (25%) como de baixa patogenicidade e 1 (4,17%) de alta patogenicidade. Foram identificados 14 sorogrupos diferentes: O1, O2, O5, O8, O15, O18, O22, O36, O64, O70, O75, O115, O132, O141. Cinco cepas não tiveram o sorogrupo identificado. Com relação ao teste de produção de hemolisina, todas as cepas foram consideradas negativas, tanto para o teste realizado com ágar sangue de galinha quanto para o de carneiro. Os resultados obtidos neste estudo demonstram a importância de se identificar as cepas prevalentes deE. colinas diferentes regiões produtoras, podendo ser utilizados em estudos epidemiológicos.

    Abstract in English:

    ABSTRACT This work evaluated the index of pathogenicity, the production of hemolysin and determination of serogroups in Escherichia coli strains isolated from liver of commercial laying hens with one day of age. Thirtytwo lots were analyzed, of which 15 were positive for the isolation ofE. coli in the liver, for a total of 24 samples. The pathogenicity in one-day-old chicks was determined by inoculation in air sac and was classified as high, intermediate or low pathogenicity, or non-pathogenic. Serogroups were identified using a set of anti-O antisera (O1 to O180). The production of hemolysin was determined by plating on chicken blood agar (8%) and sheep blood agar (8%). Of the samples studied, 17 (70.83%) were classified as non-pathogenic, 6 (25%) as low pathogenicity and 1 (4.17%) as high pathogenicity. Fourteen different serogroups were identified: O1, O2, O5, O8, O15, O18, O22, O36, O64, O70, O75, O115, O132 and O141, while 5 samples were non-typable. Regarding the test for production of hemolysin, all strains were considered negative for both the test performed with chicken blood agar and that with sheep blood agar. The results of this study demonstrate the importance of identifying the prevalent strains of E. coli in different producing regions, as this information can be used in epidemiological studies.
  • EFEITO FISIOLÓGICO DO INSETICIDA THIAMETHOXAM NA CULTURA DA CANA-DE-AÇÚCAR Comunicação Científica

    Pereira, J.M.; Fernandes, P.M.; Veloso, V.R.S.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Com a finalidade de avaliar o efeito fisiológico de thiamethoxam no desenvolvimento inicial de plantas de cana-de-açúcar, foram realizados dois experimentos. O primeiro conduzido em caixas plásticas do tipo gerbox (3,5 x 11 x 11 cm) contendo substrato, aplicou-se thiamethoxam em toletes de cana-de-açúcar, nas doses: 0, 100, 150 e 200 g de ingrediente ativo (i.a.).ha-1. O segundo experimento foi realizado em tubos de PVC (0,2 x 1,20 m), preenchido com solo, utilizaram-se seis doses de thiamethoxam (0, 50, 100, 150, 200 e 250 g i.a.ha-1) em mudas de duas variedades (RB867515 e SP80-1816). Avaliou-se a parte área e o sistema radicular das plantas aos 30 dias após a aplicação do inseticida, no primeiro experimento e aos 130 dias no segundo. Observou-se que no primeiro experimento as características altura, diâmetro e massa seca da parte área não foram alterados em razão da aplicação do inseticida nos toletes de cana-de-açúcar, porém, nos tratamentos com thiamethoxam houve um incremento na massa seca das raízes de até 3,7 vezes mais. No segundo experimento, thiamethoxam proporcionou aumento no diâmetro das plantas e incremento na massa seca das raízes da variedade RB867515 de até 72,69%. No entanto, o comprimento do sistema radicular e a massa seca da parte aérea não foram alterados pela aplicação do inseticida nas mudas.

    Abstract in English:

    ABSTRACT With the purpose to evaluate the physiological effect of thiamethoxam on the initial development of sugarcane, two experiments were carried out. In the first, carried out in Gerbox-type plastic boxes (3.5 x 11 x 11 cm) containing substrate, thiamethoxam was applied on sugarcane cuttings at the doses of 0, 100, 150 and 200 g of active ingredient per hectare (a.i.ha-1). The second experiment was carried in PVC pipes (0.2 x 1.20 m), filled with soil. Six doses of thiamethoxam (0, 50, 100, 150, 200 and 250 g a.i.ha -1) were used on two cultivars (RB867515 and SP80-1816).Roots and shoots were evaluated 30 days after the insecticide application in the first experiment and after 130 days in the second one. In the first experiment it was observed that the height characteristics, diameter and dry mass of shoots did not change through the use of the insecticide on sugarcane cuttings, however, in the treatments with thiamethoxam there was an increase on roots dry mass up to 3.7 times more. In the second experiment, thiamethoxam increased the diameter of shoots and the root dry mass of RB867515 cultivar up 72.69%. However, the length of the root system and the shoot dry mass were not changed by insecticide application in seedlings.
  • A MILLIPEDE INFESTATION OF AN URBAN AREA OF THE CITY OF CAMPINAS, BRAZIL AND PRELIMINARY TOXICITY STUDIES OF INSECTICIDE BENDIOCARB® TO THE UROSTREPTUS ATROBRUNNEUS PIEROZZI & FONTANETTI, 2006 Scientific Communication

    Fontanetti, C.S.; Calligaris, I.B.; Souza, T.S.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Infestações de milípedes em centros urbanos têm atraído a atenção de diversos pesquisadores preocupados em desvendar as causas desse fenômeno e em desenvolver métodos de controle desses animais. Este trabalho relata a invasão de grande número de milípedes da espécie Urostreptus atrobrunneus, num bairro da Cidade de Campinas, São Paulo, Brasil, durante as estações de primavera e verão dos últimos três anos, causando transtornos aos moradores do local. O inseticida Bendiocarb® foi testado em condições de laboratório em relação a sua toxicidade para U. atrobrunneu. Após 24h da aplicação ocorreu alta mortalidade dos diplópodos. Entretanto, esse inseticida pode causar contaminação ambiental (se utilizado para o controle de milípedes).

    Abstract in English:

    ABSTRACT Millipede infestations of urban centers have received the attention of several researchers interested in understanding the causes of this phenomenon and to develop control measures. A great numbers of millipede Urostreptus atrobrunneus have invaded a district of Campinas, São Paulo, Brazil, during the spring and summer of the last three years, apparently becoming a nuisance to local residents. The toxicity of Bendiocarb® insecticide for U. atrobrunneus was tested in laboratory. High mortality was observed 24 hours after the insecticide application. However, this insecticide may cause environmental contamination (if used for millipede control).
  • SELECTION OF BEAUVERIA BASSIANA STRAINS FOR THE CONTROL OF COTTON BOLL WEEVIL ANTHONOMUS GRANDIS (COLEOPTERA: CURCULIONIDAE) ADULTS Comunicação Científica

    Giometti, C.S.; Wenzel, I.M.I; Almeida, J.E.M.; Leite, L.G.; Zappelini, L.O.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO O bicudo-do-algodoeiro, Anthonomus grandis, é considerado uma das principais pragas da cultura do algodão, demandando uma grande quantidade de inseticidas para o seu controle. O objetivo do presente trabalho foi avaliar isolados deBeauveria bassianapara o controle deA. grandis. Para tanto, foram testados nove isolados provenientes de diferentes hospedeiros na concentração de 1 x 108 conídios/mL, em condições de laboratório. Todos os isolados testados foram patogênicos ao bicudo-do-algodoeiro, causando entre 50 e 85% de mortalidade confirmada. Os tempos letais para matar 50% dos insetos (TL50) variaram entre 2,30 e 8,66 dias. O isolado IBCB 241 destacou-se como o mais virulento, apresentando a maior percentagem de mortalidade confirmada e o menor TL50, podendo assim ser considerado um promissor agente de controle biológico para o bicudodo-algodoeiro A.grandis.

    Abstract in English:

    ABSTRACT The cotton boll weevil, Anthonomus grandis, is one of the most important pests of the cotton crop, requiring an elevated quantity of insecticides for its control.The objective of this work was to evaluate the effectiveness ofBeauveria bassianastrains for A. grandis control. In this assay, 9 strains from different hosts were tested in the concentration of 1 x 108 conidia/mL, under laboratory conditions. All strains evaluated were pathogenic to the cotton boll weevil, causing between 50 and 85% confirmed mortality. The lethal time to kill 50% of insects (LT50) ranged between 2.30 and 8.66 days. The IBCB 241 strain stood out as the most virulent, presenting the highest percentage of confirmed mortality and the shortest LT50, and can therefore be considered as a promising agent for the biological control of the cotton boll weevil A. grandis.
  • INTERACTION BETWEEN TELENOMUS REMUS NIXON (HYMENOPTERA: SCELIONIDAE) AND DORU LUTEIPES SCUDDER (DERMAPTERA: FORFICULIDAE) ON SPODOPTERA FRUGIPERDA (J.E. SMITH) (LEPIDOPTERA: NOCTUIDAE) EGGS Comunicação Científica

    Carneiro, T.R.; Fernandes, O.A.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Este trabalho teve por objetivo verificar a interação entre o parasitoide Telenomus remus e o predador Doru luteipes. Para tanto, posturas deS. frugiperda parasitadas porT. remus foram ofertadas a D. luteipes e ovos de D. luteipes foram ofertados a T. remus. Essa oferta levou em consideração diferentes fases do desenvolvimento embrionário do parasitoide e do predador. Constatou-se que quando as posturas de S. frugiperda foram expostas primariamente a T. remus. D. luteipes as consumiu, mas somente até o terceiro dia após o parasitismo.T. remus parasitou ovos deD. luteipes com até 48h de desenvolvimento embrionário, mas apenas quando as fêmeas do predador estavam ausentes. Diante disso, a interação intraguilda parece não ser um fator importante de regulação populacional destas espécies.

    Abstract in English:

    ABSTRACT This work aimed at evaluating the interaction between Telenomus remus andD. luteipes. S. frugiperda eggs previously parasitized by T. remus were offered to D. luteipes and D. luteipes eggs were offered to T. remus. To study the influence of different embryonic development stages of the parasitoid, we offered S. frugiperda previously parasitized eggs at different embryonic development stages to the predator. And we offered predator eggs at different embryonic development stages to the parasitoid. The behavior of insects was observed. When S. frugiperda eggs were exposed to T. remus previously, D. luteipes eat the eggs until three days after parasitism. T. remus parasitized D. luteipes eggs until 48h they were laid, but only when predator females were absent.
  • THERMAL REQUIREMENTS AND ESTIMATIVE OF NUMBER OF GENERATIONS OF SPALANGIA ENDIUS WALKER, 1839 (HYMENOPTERA, PTEROMALIDAE) IN PELOTAS, RS, BRAZIL Comunicação Científica

    Brandão, R.K.; Felchicher, F.; Ribeiro, P.B.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO O objetivo do trabalho foi estimar as exigências térmicas e o número de gerações, mensal e anual, de Spalangia endius em pupas de Musca domestica em quatro temperaturas constantes. O período de desenvolvimento de S. endius foi obtido por meio de 100 pupas de M. domestica, com idade entre 24-48 horas, expostas por 24 horas aos parasitoides, para cada temperatura, sendo feitas três réplicas. Após esse período, as pupas foram individualizadas em tubos de ensaio e acondicionadas em estufa B.O.D., nas temperaturas de 20, 25, 30 e 35° C com umidade ≥ 70% e fotofase (12h), onde foram observadas diariamente até a emergência dos parasitoides. A temperatura influenciou a duração do período de desenvolvimento de S. endius. O menor período de ovo a adulto foi a 35° C (16,84 dias) e a maior porcentagem de emergência foi a 20° C (37%). A temperatura base encontrada foi de 11,27° C, com uma constante térmica de 390,96 graus-dia (GD). O período de desenvolvimento foi inversamente proporcional à temperatura e a média de gerações por ano foi de 7,24, variando de 7,03 a 7,48.

    Abstract in English:

    ABSTRACT The aim of this work was to estimate the thermal requirements and the number of generations, monthly and annually, of Spalangia endius in pupae of Musca domestica at four constant temperatures. The development period of S. endius was obtained through 100 pupae of M. domestica, with ages between 24-48 hours, exposed for 24 hour to the parasitoids for each temperature, with three replicas. After this period the pupae were individualized in assay tubes and placed in B.O.D. with temperatures of 20, 25, 30 and 35º C and humidity ≥ 70% and photophase (12h), where they were observed daily until the emergence of the parasitoids. The temperature influenced the duration of the development period of S. endius. The shorter period form egg to adult was at 35º C (16.84 days) and the higher percentage of emergence was at 20º C (37%). The basis temperature was 11.27ºC with a thermal constant of 390.96 degrees-day (DD). The development period was inversely proportional to temperature and the medium of generations per year was 7.24, varying from 7.03 to 7.48.
  • INTRINSIC AND EXTRINSIC FACTORS IN THE CONSERVATION OF ANTS AND THEIR USE AS BIOINDICATORS Review Article

    Bution, M.L.; Tango, M.F. de A.; Caetano, F.H.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO Comunidades de formigas são sensíveis à fragmentação e respondem por meio: da extinção de espécies especialistas comparadas com grandes habitats, invasão de espécies generalistas, mudanças na composição da comunidade e na riqueza de espécies. Por causa dessas características, esta revisão pretende descrever os principais riscos que as formigas têm enfrentado para manter suas comunidades, como também descrever práticas atuais no Brasil e no mundo.

    Abstract in English:

    ABSTRACT Ant communities are sensitive to fragmentation responding through: extinction of specialist species compared with large habitats, invasion of generalist species, changes in community composition and richness of species. Because of these characteristics, this review aims at examining the main risks that ants have been facing to maintain their communities, as well as to report current conservation practices in Brazil and in the world.
Instituto Biológico Av. Conselheiro Rodrigues Alves, 1252 - Vila Mariana - São Paulo - SP, 04014-002 - São Paulo - SP - Brazil
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