No presente trabalho foram analisadas três espécies do gênero Oligosarcus: O. paranensis, O. pintoi e O. longirostris. As três espécies possuem número diplóide de 50 cromossomos e mesma fórmula cariotípica (4M + 10SM + 16ST + 20A). A impregnação por nitrato de prata revelou RONs simples para O. longirostris e RONs múltiplas para O. paranensis e O. pintoi. A heterocromatina desempenha um importante papel na caracterização das espécies. Hipóteses sobre a especiação do grupo são apresentadas com base nos dados citogenéticos obtidos neste trabalho, reforçando a importância destes estudos para uma melhor compreensão da evolução tanto do gênero Oligosarcus quanto da família Characidae.