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Isolation of alkalophilic CGTase-producing bacteria and characterization of cyclodextrin-glycosyltransferase

Foram coletadas 125 amostras de solo de raízes de milho, mandioca, batata, feijão, cana-de-açúcar, soja e abóbora. Destas, 75 cepas foram isoladas por desenvolverem um halo amarelo ao redor das colônias, devido a formação do complexo fenoftaleína-ciclodextrina (CD) sendo selecionadas como bactérias alcalofílicas produtoras de CGTase (EC 2.4.1.19).Todas as 75 cepas foram identificadas como Bacillus firmus por microscopia e testes bioquímicos. Quando ensaiada por precipitação com tricloroetileno a atividade da CGTase variou de diluição de 2² a 2(10). A cepa 31 foi selecionada devido a elevada produção de enzima, sendo esta parcialmente purificada por adsorção em amido (17 vezes) com uma recuperação de 51%. A máxima atividade enzimática ocorreu em pH 5,5 e 8,5. Em pH 5,5, a temperatura ótima foi de 60° C. Sob o aumento de 30° C a 85° C, o parâmetro de energia de ativação foi de 8,27 kcal.mol-1. A enzima foi inibida por Ca2+, Mg2+, Fe2+, Cu2+, Mn2+ e Zn2+.


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