• A simplified DNA extraction method for PCR analysis of Camarotella spp. Agriculture, Agribusiness and Biotechnology

    Vitória, Nadja Santos; Bezerra, José Luiz; Gramacho, Karina Peres

    Abstract in Portuguese:

    A extração e amplificação de DNA são etapas fundamentais para a aplicação de métodos moleculares e para tal, a origem do material é relevante. As espécies do gênero Camarotella que causam as lixas do coqueiro e outras palmeiras são biotróficas e o crescimento em meio artificial é controverso, embora Oliveira et. al, (2004) tenham registrado seu cultivo in vitro, utilizando meio líquido completo. No entanto, não ficou provado que o micélio formado correspondia ao micélio de Camarotella. Em conseqüência das dificuldades com o cultivo dos agentes etiológicos das lixas, foi otimizado um protocolo para extração de DNA genômico a partir do himênio ascógeno in natura e um protocolo de PCR para sua amplificação. Nossos resultados são importantes para o estudo da família Phyllachoraceae, pois possibilitará a análise molecular que, nessa família, é limitada pela dificuldade de obtenção de DNA.

    Abstract in English:

    This work aimed to optimize an efficient and simple protocol for DNA extraction of Camarotella species, an obligate plant pathogen that cause verrucosis or "lixa" on coconut tree and other palms, facilitating the molecular studies of these biotrophic microorganisms. The method proposed enabled a fast, reproducible and reliable DNA extraction from Camarotella species.
  • Biochemical and morphological responses to abiotc elicitor chitin in suspension-cultured sugarcane cells Agriculture, Agribusiness and Biotechnology

    Gallão, Maria Izabel; Cortelazzo, Ângelo Luiz; Fevereiro, Manuel Pedro Salema; Brito, Edy Sousa de

    Abstract in Portuguese:

    Células de Saccharum officinarum quando submetidas a quitina hidrolisada por 1 a 8h produziram material fenólico. Essas alterações foram observadas por meio de métodos citoquímicos como o Azul de Toluidina e Floroglucinol/HCl. Após 4 h, além das mudanças nas paredes celulares houve uma mudança no padrão nuclear das células tratadas com quitina. Por observação da reação de Feulgen, houve um aumento de 96% na área nuclear no material em 6h. Para as células tratadas foram observadas regiões de cromatina compactada e um processo de degeneração do nucléolo. Nas áreas externas da parede celular existia uma desagregação dos polisacarídios confirmando os resultados obtidos para diferentes plantas com o uso de outros elicitores. A atividade da peroxidase foi maxima após 4 h e então decresceu progressivamente. A atividade da PAL aumentou a partir de 4 h de incubação. Estes resultados mostram que o hidrolisado de quitina estimula as respostas de defesa em células de cana.

    Abstract in English:

    Cells of Saccharum officinarum submitted to hydrolyzated chitin for 1 to 8h produced phenolic compounds. These alterations were observed through cytochemical methods using Toluidine Blue and Phloroglucinol/HCl. After 4 h, besides cell wall change, there was a change in nuclear pattern of chitin treated cells. There was a 96% increase in nuclear area in 6 h chitin treated material, as observed by Feulgen reaction. The treated cells showed chromatin compacted regions and a degeneration process of nucleoli. In the outer areas of cell wall, there was a polysaccharide desagregation, confirming results obtained for different plants with the use of other elicitors. Peroxidase activity was maximal after 4 h and decreased progressively. PAL activity started to increase at 4 h of incubation. These results showed that chitin hydrolyzate stimulated a defense response in sugarcane cells.
  • Coffee Berry Borer Resistance in Coffee Genotypes Agriculture, Agribusiness and Biotechnology

    Sera, Gustavo Hiroshi; Sera, Tumoru; Ito, Dhalton Shiguer; Ribeiro Filho, Claudionor; Villacorta, Amador; Kanayama, Fabio Seidi; Alegre, Clayton Ribeiro; Del Grossi, Leandro

    Abstract in Portuguese:

    O objetivo deste trabalho foi identificar fontes de resistência genética a H. hampei em diferentes espécies de café do banco de germoplasma do Instituto Agronômico do Paraná (IAPAR), Londrina, PR. Foram realizadas avaliações preliminares de campo, para posterior testes de confinamento e de livre escolha, em laboratório, instalados em delineamento inteiramente casualizado com três repetições. Os genótipos foram avaliados quinze dias após a infestação com uma broca por fruto em placas de petri. Os dados foram analisados pelo teste de médias Scott-Knott a 1 % e pelo teste de χ2. Foi observado que C. eugenioides, C. kapakata e P. bengalensis constituem importantes fontes de resistência à broca, pois apresentaram menor freqüência de grãos brocados. Os dois primeiros podem apresentar substâncias voláteis antagônicas à broca na casca e a resistência de P. bengalensis pode estar também no grão.

    Abstract in English:

    The aim of this study was to evaluate the coffee germplasm of the Paraná Agronomic Institute (IAPAR) for resistance to the coffee-berry-borer. Preliminary field evaluation was performed in August 2004 and the fruits of less damaged genotypes in the field were evaluated under controlled condition with obligated and free choice experiments established in a randomized complete design with three replications. The genotypes were evaluated fifteen days after infestation with one borer per fruit in Petri dishes. The data were analyzed by the Scott-Knott means test at 1 % and by the χ2 test. Statistical analysis indicated that Coffea kapakata, Psilanthus bengalensis, C. eugenioides and genotypes with C. eugenioides genes were resistant. These genotypes presented low frequency of bored grains. C. eugenioides and C. kapakata could present resistance at epicarp level but not in the grain. P. bengalensis could present resistance also in the grains.
  • Effect of Agaricus brasiliensis and Lentinula edodes mushrooms on the infection of passionflower with Cowpea aphid-borne mosaic virus Agriculture, Agribusiness and Biotechnology

    Di Piero, Robson Marcelo; Novaes, Quelmo Silva de; Pascholati, Sérgio Florentino

    Abstract in Portuguese:

    O endurecimento dos frutos do maracujazeiro, causado pelo Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV), é um dos problemas mais sérios que atingem a cultura. Tentativas de se obter plantas resistentes ao vírus ou estirpes fracas premunizantes não apresentaram sucesso até o momento. O objetivo do presente estudo foi o de avaliar a proteção das plantas de maracujá contra o CABMV, utilizando preparações dos cogumelos Lentinula edodes e Agaricus blazei, através da indução de resistência. Em experimentos conduzidos no interior de casa de vegetação, os extratos de basidiocarpos de ambos os cogumelos reduziram significativamente a incidência da virose em plantas de maracujá que tiveram as folhas pré-tratadas com esses extratos e que foram posteriormente inoculadas mecanicamente com o CABMV. No entanto, os extratos não protegeram as plantas em experimentos envolvendo a transmissão do CABMV pelo afídeo-vetor. O efeito inibidor dos extratos foi confirmado inoculando-se Chenopodium quinoa com uma mistura de extratos e suspensão viral. Ainda em C. quinoa, um hospedeiro de lesão local do CABMV, os extratos de alguns isolados dos cogumelos induziram resistência sistêmica contra o vírus. Os resultados mostram que os extratos aquosos de basidiocarpos de L. edodes e A. blazei contêm substâncias inibidoras da infectividade do CABMV, mas isso não é o suficiente para o controle pleno da virose em plantas de maracujá, considerando que elas são infectadas através de um vetor.

    Abstract in English:

    The objective of the present study was to evaluate the protection of passion fruit plants against CABMV by using preparations from Agaricus brasiliensis and Lentinula edodes mushrooms. In experiments carried out in the greenhouse, the fruiting body extracts from some of the isolates of both mushrooms significantly reduced CABMV incidence in passion fruit plants. This protective effect occurred when the plant leaves, pre-treated with extracts, were later inoculated mechanically with the virus. However, the extracts did not protect the plants in experiments involving CABMV transmission by aphid vectors. An inhibitory effect of mushroom extracts on the virus particles was also demonstrated on Chenopodium quinoa, a CABMV local lesion host, by inoculating the plants with a mixture of extracts and virus suspension. Still in C. quinoa, the mushroom extracts from some isolates induced systemic resistance against the virus. These results showed that aqueous extracts from A. brasiliensis and L. edodes fruiting bodies had CABMV infectivity inhibitors, but that was not enough to control the viral disease on passion fruit plants at all, considering they were infected through a vector.
  • Hemocyte quantitative changes in Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae) larvae infected by AgMNPV Agriculture, Agribusiness and Biotechnology

    Andrade, Fábio Goulart de; Negreiro, Maria Cláudia Cordeiro de; Levy, Sheila Michele; Fonseca, Inês Cristina de Batista; Moscardi, Flávio; Falleiros, Ângela Maria Ferreira

    Abstract in Portuguese:

    Os efeitos iniciais da infecção por AgMNPV nas contagens total e diferencial dos hemócitos em Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae) foram estudados. O número total de hemócitos não diminuiu nas larvas infectadas, como ocorreu nas larvas não infectadas. Nas larvas infectadas, os tipos de hemócitos apresentaram as seguintes freqüências: plasmatócitos - 47,8%, esferulócitos - 25,9%, granulócitos - 15,8%, oenocitóides - 7,2%, prohemócitos - 2,8%, vermiformes - 0,5%. Apenas a porcentagem de granulócitos foi diferente entre larvas infectadas e não infectadas, indicando que estas células responderam rapidamente à infecção viral inicial. Estes resultados mostraram o papel efetivo que dos hemócitos na resposta de A. gemmatalis à infecção por AgMNPV. A compreensão dos mecanismos imunológicos deste inseto é uma ferramenta importante para compreender seu controle biológico.

    Abstract in English:

    The initial effects of the infection by AgMNPV in the total and differential counts of the hemocytes in Anticarsia gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae) larvae were studied. The total number of the hemocytes did not decrease in infected larvae, as it occurred in non infected larvae. In infected larvae, the hemocyte types showed the following frequencies: plasmatocytes - 47.8%, esferulocytes - 25.9%, granulocytes - 15.8%, oenocytoids - 7.2%, prohemocytes - 2.8%, vermicytes - 0,5%. Only the percentage of the granulocytes was different among infected and non infected larvae, indicating that these cells responded quickly to the initial viral infection. These results showed the effective role of the hemocytes in the response of the A. gemmatalis to the infection by AgMNPV. The comprehension of the immunological mechanisms of this insect is an important tool to understand its biological control.
  • Kinetic analysis of in vitro production of wild-type Spodoptera frugiperda nucleopolyhedrovirus Agriculture, Agribusiness and Biotechnology

    Almeida, Andréa Farias de; Macedo, Gorete Ribeiro de; Chan, Leslie Chee Loong; Pedrini, Márcia Regina da Silva

    Abstract in Portuguese:

    Neste trabalho, analisou-se o comportamento cinético das células Sf9 e Sf21 utilizadas na produção de biopesticida para o controle de Spodoptera frugiperda. Variáveis cinéticas, como velocidade específica máxima de crescimento, produtividade em células, velocidade média de infecção e a velocidade média de produção de OB foram determinadas durante a infecção destas linhagens com o vírus extracelular do nucleopoliedrovirus de S. frugiperda. A linhagem Sf9 resultou em melhores resultados de produção do baculovírus (5 x 10(8) OB/mL), quando comparada à linhagem Sf21 (2,5 x 10(8) OB/mL) e outras linhagens da literatura.

    Abstract in English:

    In this study, the kinetic behavior of Sf9 and Sf21 cells used in the production of a baculovirus biopesticide to control the pest of corn Spodoptera frugiperda was analyzed. Kinetic variables such as maximum specific growth rate, cell productivity, mean rate of infection, as well as the mean rate of occlusion body production were determined during the infection of these cell-lines with the extracellular virus of the S. frugiperda nucleopolyhedrovirus (SfMNPV). The Sf9 cell-line resulted in better viral production results (5.0 x 10(8) OB/mL) than the Sf21 cell-line (2.5 x 10(8) OB/mL).
  • Nodulation and N2 fixation effectiveness of Bradyrhizobium strains in symbiosis with Adzuki Bean, Vigna angularis Agriculture, Agribusiness and Biotechnology

    Delić, Dušica; Stajković, Olivera; Rasulić, Nataša; Kuzmanović, Djordje; Jošić, Dragana; Miličić, Bogić

    Abstract in English:

    In pot experiment, one isolate Knj from a Serbian soil, four strains of Bradyrhizobium japonicum and three strains of Bradyrhizobium spp. were examined for the effect on adzuki bean nodulation and effectiveness in symbiotic N2 fixation. All the tested strains produced root nodules in adzuki bean. Strains of B. japonicum showed high potential of N2 fixation, particularly 525 and 542. B. japonicum strains resulted 65-71% shoot dry weight and 99-138% total N content of uninoculated control with full N content (100%). No significant difference was found between the plants inoculated with Bradyrhizobium spp. strains and uninoculated control plants without N (40-42 and 42% shoot dry weight, respectively), which indicated symbiotic N2 fixation inactivity of the Bradyrhizobium spp. strains. Knj strain had the middle position (56% shoot dry weight). These data showed that B. japonicum 525 and 542 strains could be used in further investigations in order to apply them as inoculants in microbiological N fertilizers.
  • Optimization of thermostable α- amylase production by Streptomyces erumpens MTCC 7317 in solid-state fermentation using cassava fibrous residue Agriculture, Agribusiness and Biotechnology

    Shaktimay, Kar; Datta, Tapan Kumar; Ray, Ramesh Chandra

    Abstract in English:

    Production of α- amylase under solid state fermentation by Streptomyces erumpens MTCC 7317 was investigated using cassava fibrous residue, one of the major solid waste released during extraction of starch from cassava (Manihot esculenta Crantz). Response surface methodology (RSM) was used to evaluate the effect of the main variables, i.e., incubation period (60 h), moisture holding capacity (60%) and temperature (50(0)C) on enzyme production by applying a full factorial Central Composite Design. Varying the inoculum concentration (5-25%) of S. erumpens showed that 15% inoculum (v/w, 2.5 x 10(6) CFU/ml) was the optimum for α- amylase production. Among the different nitrogen sources supplemented, beef extract was most suitable for enzyme production. The application of S. erumpens enzyme in liquefaction of soluble starch and cassava starch was studied. The maximum hydrolysis of soluble starch (85%) and cassava starch (70%) was obtained with the application of 5 ml crude enzyme (17185 units) after 5 h of incubation.
  • Plant regeneration from cotyledonary explants of Eucalyptus camaldulensis dehn and histological study of organogenesis in vitro Agriculture, Agribusiness and Biotechnology

    Dibax, Roberson; Quisen, Regina Caetano; Bona, Cleusa; Quoirin, Marguerite

    Abstract in Portuguese:

    Este trabalho teve como objetivo a obtenção de plantas de Eucalyptus camaldulensis a partir de folhas cotiledonares e o estudo da anatomia dos tecidos durante a calogênese e organogênese para determinar a origem das gemas. Folhas cotiledonares foram cultivadas em meios de cultura MS, WPM e JADS suplementados com 2,7 µM de ANA e 4,44 µM de BAP. Os melhores resultados para a regeneração de gemas foram obtidos com os meios MS e WPM. Para o alongamento e enraizamento, o meio de cultura MS/2 contendo 0,2% de carvão ativado apresentou-se eficiente para ambas as etapas. A aclimatização foi realizada mediante a abertura dos frascos na sala de crescimento por 48 horas, seguido da transferência para casa-de-vegetação com nebulização intermitente. Estudos histológicos foram conduzidos e revelaram que a calogênese teve início nas células do parênquima paliçádico e que as gemas adventícias formaram-se a partir dos calos, indicando a organogênese indireta.

    Abstract in English:

    The present work aimed at regenerating plants of Eucalyptus camaldulensis from the cotyledonary explants and describing the anatomy of the tissues during callogenesis and organogenesis processes, in order to determine the origin of the buds. The cotyledonary leaves of E. camaldulensis were cultured in Murashige and Skoog (MS), WPM and JADS media supplemented with 2.7 µM NAA and 4.44 µM BAP. The best results for bud regeneration were obtained on MS and WPM media (57.5 and 55% of calluses formed buds, respectively). Shoot elongation and rooting (80%) were obtained on MS/2 medium (with half-strength salt concentration) with 0.2% activated charcoal. Acclimatization was performed in the growth chamber for 48 h and then the plants were transferred to a soil:vermiculite mixture and cultured in a greenhouse. Histological studies revealed that the callogenesis initiated in palisade parenchyma cells and that the adventitious buds were formed from the calluses, indicating indirect organogenesis.
  • Recent progress in the methods of genome sequencing Agriculture, Agribusiness and Biotechnology

    Ning-wei, Zhao

    Abstract in Portuguese:

    Sequenciação do genoma foi um instrumento muito importante para o desenvolvimento do diagnóstico genético, a droga da engenharia genética, farmacogenética, etc. Como o HGP entrar em ouvidos do povo, há uma necessidade emergente para a sequenciação do genoma. Durante os últimos anos, há duas diferentes estratégias tradicionais disponíveis para este objectivo: seqüenciamento shotgun hierárquico e sequenciação. Além desses, muitos esforços estão a prosseguir novas idéias para facilitar a rápida e eficaz em termos de custos sequenciação do genoma, incluindo 454 GS sistema, polony seqüenciamento, único molecular array, nanopore seqüenciamento, com cada um dos quais com diferentes características únicas, e que resta para ser mais desenvolvido.

    Abstract in English:

    Genome sequencing is a very important tool for the development of genetic diagnosis, drugs of gene engineering, pharmacogenetics, etc. As the HGP comes into people's ears, there is an emerging need for the genome sequencing. During the recent years, there are two different traditional strategies available for this target: shotgun sequencing and hierarchical sequencing. Besides these, many efforts are pursuing new ideas to facilitate fast and cost-effective genome sequencing, including 454 GS system, polony sequencing, single molecular array, nanopore sequencing, with each having different unique characteristics, but remains to be fully developed.
  • Apoptosis induction by E2F decoy DNA of the prostate cancer cell line Human and Animal Health

    Wang, Tao; Jiang, An -li; Zhang, Jian-ye; Jing, Fei

    Abstract in English:

    To observe effect of E2F decoy DNA on proliferation and apoptosis of androgen-independent prostate cancer cell line PC-3M the binding specificity of the E2F decoy DNA to the PC-3M nuclear protein was detected by electrophoretic mobility shift assay (EMSA). E2F decoy DNA, ARE decoy DNA and Control decoy DNA were respectively transfected into PC-3M cells with lipofectamine.Their influence on cell proliferative activity was detected by MTT assay.The cell apoptotic rate was determined by flow cytometric(FCM) analysis and chromosome DNA ladder was detected by DNA gel electrophoresis.The change of mRNA expression of C-myc and CyclinD1 were detected by RT-PCR.The change of mRNA expression of C-myc and CyclinD1 were detected by Western-blot. EMSA demonstrated specific binding of the E2F decoy to E2F transcription factor.The PC-3M cell growth was inhibited after transfection. The apoptotic rate was 26.35% and DNA ladder could be observed after transfection.The expression of C-myc and CyclinD1 were inhibited. All these results indicated that E2F decoy DNA induced apoptosis of androgen-independent prostate cancer cell lines PC-3M and inhibited cell proliferation via inhibiting expression of C-myc and CyclinD1.
  • Evaluation of toxic effects with transition metal ions, EDTA, SBTI and acrylic polymers on Aedes aegypti (L., 1762) (Diptera: Culicidae) and Artemia salina (artemidae) Human and Animal Health

    Arruda, Eduardo José de; Rossi, Ana Paula Leão; Porto, Karla Rejane de Andrade; Oliveira, Lincoln Carlos Silva de; Arakaki, Andrea Haruko; Scheidt, Gessiel Newton; Soccol, Carlos Ricardo

    Abstract in Portuguese:

    Aedes aegypti é inseto de grande interesse na Saúde Pública por transmitir o vírus da Dengue, Febre Amarela e Febre Hemorrágica da Dengue. No controle do mosquito utilizam-se inseticidas organoclorados, organofosforados, carbamatos e piretróides que guiam à seleção de insetos resistentes. A combinação de íons metálicos de transição, EDTA, STI e SAP são propostos como estratégia efetiva e persistente para o controle de larvas de Ae. aegypti através de danos ao sistema digestório por radicais livres. A toxicidade dos compostos foi avaliada para Ae. aegypti e A. salina (organismo não alvo). Os bioensaios foram conduzidos para avaliar o efeito tóxico dos compostos e associações após 24 e 72 horas. As CL10, CL50 e CL90 foram obtidas para comparações de toxicidade. Para Ae. aegypti a CL50 foi 32,65 mg L-1 em 24 horas para Na2[EDTA-Cu(II)] e mortalidade total a 62,5 mg.L-1para quelato em polímero acrílico de liberação lenta SAP-Na2[EDTA-Cu(II)] em até 72 horas.

    Abstract in English:

    This work aimed to evaluate the toxicity of some insecticides compounds on Aedes aegypti and Artemia salina larvae. Bioassays were carried out to evaluate the toxic effect after of 24 and 72 h using the compounds or associations. The LC10, LC50 and LC90 values were obtained and utilized for toxicity comparations. For Ae. aegypti, LC50 were 32.65 mg L-1 in 24 h for Na2[EDTA-Cu(II)] and total mortality in 72 h for SAP-Na2[EDTA-Cu(II)].
  • Morphological alterations and G0/G1 cell cycle arrest induced by curcumin in human SK-MEL-37 melanoma cells Human and Animal Health

    Carneiro, Marcella Lemos Brettas; Porfírio, Elaine Paulucio; Otake, Andréia Hanada; Chammas, Roger; Báo, Sônia Nair; Guillo, Lidia Andreu

    Abstract in Portuguese:

    O melanoma é um tipo agressivo de câncer cujo tratamento culmina com o estabelecimento de resistência aos quimioterápicos empregados. Portanto, é importante o desenvolvimento de novos agentes farmacológicos que sejam menos tóxicos e que não provoquem quimiorresistência. As inúmeras propriedades terapêuticas da curcumina vêm sendo confirmadas através de estudos sobre o seu mecanismo de ação em células cultivadas. No presente estudo, empregamos células de melanoma humano da linhagem SK-MEL-37, que desenvolveram resistência in vitro à doxorubicina e cisplatina, drogas normalmente utilizadas na clínica. Investigamos o efeito da curcumina sobre o ciclo celular através de citometria de fluxo. Além disso, análises morfológicas e estruturais também foram realizadas. Os resultados demonstraram que o tratamento com uma concentração de 5 ?M de curcumina provocou uma parada na subfase G0/G1. Além disso, observou-se um aumento dose-dependente na proporção de células hipodiplóides em sub-G0. Eventos apoptóticos típicos foram observados por microscopia de fluorescência, microscopia eletrônica de transmissão e microscopia eletrônica de varredura. Não foi detectada alteração no potencial de membrana mitocondrial. Os resultados indicam que futuros estudos poderão tornar possível a utilização da curcumina como um modulador para agentes quimioterápicos empregados na clínica no tratamento do melanoma.

    Abstract in English:

    The aim of this work was to study the effect of curcumin on cell cycle in the human SK-MEL-37 melanoma cell line. In addition, morphological and structural analyses were also performed. Flow cytometric analysis showed a G0/G1 arrest at 5 µM after 24 h exposure and a concentration-dependent increase in the proportion of sub-G0 hypodiploid cells. Typical apoptotic events were also observed by the fluorescence microscopy, transmission and scanning electronic microscopy. Loss of mitochondrial membrane potential was not detected. Results suggested that curcumin could arrest human melanoma cells at G0/G1 phase and induce a mitochondrial-independent apoptotic pathway.
  • New method for early detection of two random amplified polymorphic DNA (RAPD) groups of Staphylococcus aureus causing bovine mastitis infection in Paraná State, Brazil Human and Animal Health

    Gonçalves, Dicezar; Gabriel, Jane Eire; Madeira, Humberto Maciel França; Schühli, Guilherme Schnell e; Vicente, Vânia Aparecida

    Abstract in Portuguese:

    Esta pesquisa objetivou o desenvolvimento de técnica rápida e eficiente para diagnosticar precocemente diferentes linhagens de S. aureus causadoras de mastite bovina. Como resultados da metodologia empregada, foram isoladas duas linhagens destas bactérias que causam diferentes tipos de mastite bovina. Os fragmentos de DNA genômico caracterizando ambas as linhagens, por meio de RAPD foram inseridos em vetor plasmidial pGEM e clonados por meio de clones T10 F1 de Escherichia coli. As seqüências obtidas permitiram desenhar iniciadores específicos para o reconhecimento de ambas as linhagens, os quais foram testados com amostras de S. aureus e com outras linhagens próximas. O diagnóstico por meios moleculares, pode ser realizado diretamente de amostras coletadas de rebanhos leiteiros assim como dos equipamentos de ordenha. A significância deste estudo consiste em um rápido e acurado método para localizar animais infectados, representando importante ferramenta no manejo do rebanho, na redução de custos com tratamentos e, rápida recuperação de rebanhos infectados.

    Abstract in English:

    The aim of this work was to develop a fast and accurate molecular approach to allow early detection of two RAPD groups of S. aureus causing bovine mastitis. Seventy five S. aureus isolates from infected animals were characterized by RAPD. Genomic fragments isolated from the unique bands present in either group were cloned and sequenced. Based on the DNA sequences, specific primers were designed to allow for the simultaneous detection of either group by multiplex PCR of S. aureus DNA isolated from clinical and subclinical bovine mastitis. Results showed that these proposed primers set could be used to detect various clinical and subclinical S. aureus isolates as well as the detection of the microorganism in bulk milk. Their use as a specific method for effective and early diagnostic tool for S. aureus infection in dairy herds is suggested.
  • Cytochrome P450 detection in liver of the catfish Ancistrus multispinis (Osteichthyes, Loricariidae) Biological and Applied Sciences

    Klemz, Claudio; Salvo, Ligia Maria; Bastos Neto, Jayme da Cunha; Bainy, Afonso Celso Dias; Assis, Helena Cristina da Silva de

    Abstract in Portuguese:

    Respostas biológicas sensíveis aos contaminantes ambientais são úteis para prever efeitos prejudiciais devido a exposições crônicas. Padronização de protocolos para quantificar parâmetros bioquímicos em diferentes espécies de peixes é necessária para validar o uso como biomarcador. Estudos comparativos de diferentes espécies de peixe e sua interpretação são um avanço para a validação do uso de biomarcadores gerais, representativos do impacto ambiental. Neste estudo o protocolo para a análise do citocromo P450 (CYP) do peixe nativo brasileiro Ancistrus multispinis foi estabelecido. Cyp é um biomarcador de exposição principalmente de hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (HAP), bifenilas policloradas (PCB) e dioxinas. A contaminação do microssomo pela hemoglobina durante as análises do CYP no fígado foi detectada, levando a uma interpretação errônea dos resultados. O método espectrofotométrico para análise do CYP foi adaptado para diminuir a interferência da hemoglobina. Além disso, o método de western blotting para análise de CYP1A foi testado com sucesso para essa espécie de peixe.

    Abstract in English:

    Sensitive biological responses to environmental contaminants are useful as early warning signals to predict the damages by long-term exposure. Protocols standardization to quantify biochemical parameters in different fish species is required to validate its use as biomarkers. Comparative studies from different fish species and its interpretation are a challenge for the validation of its use as general biomarkers, representative of environmental impact. In this study, the protocol for liver cytochrome P450 (CYP) analysis from the native Brazilian fish Ancistrus multispinis was established. The microsome contamination by hemoglobin during the analysis of CYP in liver was detected, leading to misinterpretation of the results. The spectrophotometric method for CYP analysis was adapted in order to diminish the hemoglobin interference. Additionally, the western blotting method for CYP1A analysis was tested with success for this fish species.
  • Effect of three different types of culture conditions on Spirulina maxima growth Biological and Applied Sciences

    Monteiro, Maria Paula da Costa; Luchese, Rosa Helena; Absher, Theresinha Monteiro

    Abstract in Portuguese:

    O crescimento de Spirulina máxima foi estudado em três condições de cultivo: 1) agitação manual com iluminação natural; 2) agitação manual com iluminação artificial e; 3) agitação constante feita por compressor de aquário e iluminação artificial. O maior crescimento foi observado nesta última condição, onde após 185 dias foram observados valores médios de densidade ótica de 3,7 enquanto, valores de 1,8 e 1,9 foram obtidos no primeiro e segundo experimento, respectivamente. Diferentemente do ocorrido com os outros tratamentos, não foi observado declínio no crescimento após 185 dias, o que foi atribuído ao fato de que, sob constante agitação os sais ficam suspensos e não cristalizam, fato que acarretaria diminuição da disponibilidade de nutrientes necessários ao crescimento. Também a agitação constante permite que todas as células recebam a mesma iluminação, promovendo fotossíntese e consequentemente um maior crescimento e coloração verde característica. Conclui-se que o emprego do compressor de aquário é não somente viável, mas recomendável, pois além de diminuir a mão de obra ainda se mostrou mais eficaz, melhorando o rendimento.

    Abstract in English:

    Growth of Spirulina maxima was studied in three types of culture conditions with four replicates each: 1) manual aeration with natural sunlight; 2) manual aeration with artificial light; and 3) constant aeration with an aquarium compressor and artificial light. After 185 days of incubation, growth declined in the first two treatments, while in the third treatment, higher growth was observed with average optical density of 3.7 against 1.8 and 1.9 in the first and second treatment, respectively. This was probably due to the fact that under constant aeration the salts were suspended avoiding the crystallization what could cause a decrease in the availability of the necessary nutrients for the growth. Also, the constant stirring allowed all the cells to receive the same amount of light promoting photosynthesis and consequently, a larger growth and characteristic green coloration. Culture with constant aeration under artificial light should be used for S. maxima cultivation because, besides reducing labor hours, it could be a more effective method for improving the economic income.
  • Genetic analysis of species in the Genus Catasetum (ORCHIDACEAE) using RAPD Markers Biological and Applied Sciences

    Oliveira, Luciana do Valle Rego; Faria, Ricardo Tadeu de; Ruas, Claudete de Fátima; Ruas, Paulo Maurício; Santos, Melissa de Oliveira; Carvalho, Valdemar P.

    Abstract in Portuguese:

    Neste trabalho, marcadores moleculares de RAPD foram utilizados para acessar a variabilidade genética e estudar as relações interespecíficas e intraespecífica em um grupo de 37 espécies, compreendendo 56 plantas individuais. Um total de 15 primers foram selecionados para amplificação do DNA. De um total de 221 bandas analisadas, 209 (95%) foram polimórficas. O nível de similaridade genética interespecífica variou de 37% entre Catasetum complanatum e Catasetum laminatums a 83% entre Catasetum triodon e Catasetum uncatum. A similaridade genética intraespecífica variou de 88% entre os indivíduos de Catasetum triodon a 93% entre os indivíduos de Catasetum atratum e Catasetum macrocarpum. Os resultados deste trabalho contribuem para o entendimento das relações interespecíficas no gênero Catasetum, para definir estratégias para o estabelecimento de um banco de germoplasma e para dar suporte a programas de melhoramento.

    Abstract in English:

    In this work, RAPD molecular markers were used to access the genetic variability and to study the inter and intraespecifc relationship in a group of 37 species, including 56 individuals. A total of 15 RAPD primers were selected for DNA amplification. From a total of 221 bands analyzed, 209 (95%) were polymorphics. The level of interespecifc genetic similarity ranged from 37% between Catasetum complanatum and Catasetum laminatum to 83% between Catasetum triodon and Catasetum uncatum. The intraspecifc genetic similarity varied 88% for the individuals of Catasetum triodon to 93% between the individuals of Catasetum atratum and Catasetum macrocarpum. These results would contribute to understand the genetic relationship in Catasetum, to define the strategies to establish a germplasm core collection for the genus and to provide support for breeding programs.
  • Microsatellite analysis of the parental contribution of Piaractus mesopotamicus to the production of offspring in the semi-natural system of reproduction Biological and Applied Sciences

    Povh, Jayme Aparecido; Ribeiro, Ricardo Pereira; Sirol, Rodolfo Nadez; Streit Jr., Danilo Pedro; Moreira, Heden Luiz Marques; Siewerdt, Frank; Lopera-Barrero, Nelson Mauricio; Mangolin, Claudete Aparecida; Vargas, Lauro

    Abstract in Portuguese:

    O objetivo deste trabalho foi avaliar a diversidade genética e a contribuição parental de Piaractus mesopotamicus na produção de descendência no sistema seminatural de reprodução. Vinte peixes parentais (onze machos e nove fêmeas) e o total de 100 larvas foram avaliados por meio do marcador microssátelite. Os parentais e a progênie tiveram trinta e um alelos e heterozigosidade de 0,550 e 0,563, respectivamente. As fêmeas foram fertilizadas por dois até seis machos enquanto machos fertilizaram três até cinco fêmeas. A contribuição de fêmeas e machos para a descendência seja 66,6 e 58,0%, respectivamente. Tais resultados não indicam diminuição da variabilidade genética na progênie e os parentais apresentaram paternidade múltipla e razoável contribuição à produção de descendência.

    Abstract in English:

    The objective of this study was to evaluate the genetic diversity and the parental contribution of Piaractus mesopotamicus in the production of offspring in the semi-natural system of reproduction. Twenty parental fishes (eleven males and nine females) and the total of 100 larvae were evaluated by microsatellite marker. The parents and offspring had thirty-one alleles and heterozygosity of 0.550 and 0.563, respectively. The females were fertilised by two up to six males while the males fertilised three up to five females. The contribution of the females and males to the offspring were 66.6 and 58%, respectively. Such results indicated no loss in the genetic variability in the offspring, and the parents had multiple paternity and reasonable contribution to the offspring production.
  • Morphological and molecular identification of four Brazilian commercial isolates of Pleurotus spp. and cultivation on corncob Biological and Applied Sciences

    Menolli Junior, Nelson; Asai, Tatiane; Capelari, Marina; Paccola-Meirelles, Luzia Doretto

    Abstract in Portuguese:

    Espécies de Pleurotus têm grande importância comercial e adaptabilidade para crescimento e frutificação em uma ampla variedade de resíduos agro-industriais lignocelulósicos. Neste trabalho foram testados dois substratos à base de sabugo de milho triturado, suplementados com farelo de arroz e carvão vegetal, para avaliação da cinética de crescimento micelial em tubos de ensaio e produção em sacos de polipropileno, utilizando quatro isolados comerciais. O estudo taxonômico foi realizado com a análise da morfologia dos basidiomas obtidos em cultivo e pelo seqüenciamento do gene nLSU do DNAr, para certificar a identificação taxonômica. Os isolados tiveram melhor desenvolvimento micelial em profundidade no substrato suplementado com carvão vegetal. Em relação à produção, os isolados reagiram de formas distintas em função dos substratos, sendo significativamente melhor o substrato contendo carvão. Três isolados foram identificados como P. ostreatus e o outro foi identificado como P. djamor.

    Abstract in English:

    The species of Pleurotus have great commercial importance and adaptability for growth and fructification within a wide variety of agro-industrial lignocellulosic wastes. In this study, two substrates prepared from ground corncobs supplemented with rice bran and charcoal were tested for mycelium growth kinetics in test tubes and for the cultivation of four Pleurotus commercial isolates in polypropylene bags. The identification of the isolates was based on the morphology of the basidiomata obtained and on sequencing of the LSU rDNA gene. Three isolates were identified as P. ostreatus, and one was identified as P. djamor. All isolates had better in-depth mycelium development in the charcoal-supplemented substrate. In the cultivation experiment, the isolates reacted differently to the two substrates. One isolate showed particularly high growth on the substrate containing charcoal.
  • Polyamine patterns in haploid and diploid tobacco tissues and in vitro cultures Biological and Applied Sciences

    Carone, Sílvia Bicudo; Santa-Catarina, Claudete; Silveira, Vanildo; Floh, Eny Iochevet Segal

    Abstract in Portuguese:

    O objetivo deste trabalho foi determinar os níveis de PAs em tecidos de medula e cultura de calos de plantas haplóides e diplóides de tabaco, obtidas da região apical e basal do caule. Estes explantes foram cultivados em meio RM-64 suplementado com AIA e cinetina, na luz e no escuro, durante vários subcultivos. Nos tecidos medulares, os níveis de PAs apresentam um decréscimo basípeto em diplóides e um aumento em haplóides.Um padrão similar nos níveis de PAs totais (livres+ conjugadas) foi observado em calos haplóides e diplóides mantidos na luz, e haplóides no escuro, enquanto os diplóides cultivados no escuro mostraram um aumento constante até o final do cultivo. O aumento no conteúdo de PAs nos calos diplóides no escuro, foi devido ao aumento do conteúdo de Put livre. Foi observado que a ploidia da planta pode expressar diferentes gradientes de PA ao longo do tecido medular e nas culturas de calos in vitro.

    Abstract in English:

    The aim of this work was to determine PAs levels in pith tissues and callus cultures from haploid and diploid tobacco plants, explanted from the apical and basal regions of the stem. These explants were cultured in an RM-64 medium supplied with IAA and kinetin, under light or in the dark, during successive subcultures. PAs levels followed a basipetal decrease in diploid and an increase in haploid, pith tissues. A similar pattern of total PAs (free + conjugated) was observed for the callus of diploid and haploid plants maintained in the light, and for the haploid callus in the dark, whereas the diploid callus in the dark showed a constant increase in total PAs levels until the end of culture. The PA increase in the diploid callus in the dark was related to free Put levels increase. The ploidy status of the plants could express different PA gradients together with the plant pith and in vitro callus cultures.
  • Surviving probability indicators of landing juvenile magellanic penguins arriving along the southern Brazilian coast Biological and Applied Sciences

    Rodrigues, Sandra Carvalho; Adornes, Andréa Corrado; Santos Filho, Euclydes Antônio dos; Silva Filho, Rodolfo Pinho; Colares, Elton Pinto

    Abstract in Portuguese:

    O hematócrito e o peso de pingüins juvenis, com e sem óleo, encontrados vivos na costa do sul do Brasil, foram monitorados após sua captura, bem como antes de sua morte ou liberação do centro de reabilitação. Os pingüins juvenis liberados apresentaram o último peso e hematócrito (3.65 ± 0.06 kg e 44.63 ± 0.29%, respectivamente) maiores do que os pingüins que morreram (2.88 ± 0.08 kg e 34.42 ± 1.70%, respectivamente). Pingüins juvenis com maior hematócrito e peso após a captura tiveram maior ganho médio de peso do que os pingüins com menor hematócrito e peso após a captura. Além disso, os juvenis com maior hematócrito e peso após a captura tiveram maiores taxas de sobrevivência, independente da presença ou ausência de óleo. Os resultados sugerem que os pingüins juvenis com óleo poderiam estar mais saudáveis do que os juvenis sem óleo. Os animais sem óleo provavelmente morreram em decorrência de doenças, endoparasitas ou outros distúrbios. Por outro lado, os animais com óleo possivelmente estavam mais saudáveis antes do contato com o óleo no mar.

    Abstract in English:

    The aim of this work was to monitor and study the hematocrit and weight of juvenile penguins, with and without oil cover, found alive along the southern coast of Brazil, after capture, as well as before eventual death or release. Released juvenile penguins showed higher weight and hematocrit (3.65 ± 0.06 kg and 44.63 ± 0.29%, respectively) than those that died (2.88 ± 0.08 kg and 34.42 ± 1.70%, respectively). Penguins with higher hematocrit and weight after capture had higher mean weight gain than their counterparts with smaller hematocrit and weight after the capture. Besides, juveniles with higher hematocrit and weight after the capture had higher survival rates, independent of the presence or absence of oil. The results suggested that juveniles covered with oil might have been healthier than the juveniles without oil. The animals without oil probably died as a consequence of health disturbances, while the animals with oil possibly were healthy before contact with oil in the sea.
  • The abiotic environment of Heliamphora nutans (Sarraceniaceae): pedological and microclimatic observations on Roraima Tepui Biological and Applied Sciences

    Adlassnig, Wolfram; Pranji, Kornelija; Mayer, Edith; Steinhauser, Georg; Hejjas, Flora; Lichtscheidl, Irene K.

    Abstract in English:

    The aim of this study was the study of the abiotic environment of the carnivorous pitcher plant Heliamphora nutans (Sarraceniaceae), including the microclimate and the geochemistry of the soil of the growing sites on Roraima Tepui and discuss their relevance within the recent model of carnivorous plant ecology. The soil was peaty and low in nutrients. The microclimate on the site was very balanced, with moderately cool temperatures, a constant high humidity and very low wind speed. Heliamphora was not exposed to any recognizable climatic stress. Previous macroclimatic measurements reflected the growth conditions of Heliamphora only incorrectly, since humidity decreased drastically with height. The apparent conflict with the common model of carnivorous plant ecology was caused by the dense surrounding vegetation. However, the leaf coverage of these non carnivorous plants was too low to cause significant insolation decrease for Heliamphora. Furthermore, the temperature regime of the pitcher fluid was more balanced than the temperature of the leaf. This may improve conditions for the growth of microorganisms in the pitcher fluid that contribute to the degredation of the plant's prey.
  • The contribution of Andreas Mayer for the natural history of the State of Paraná, Brazil: V. Reptiles: relevant addenda and corrigenda Biological and Applied Sciences

    Bérnils, Renato Silveira; Moura-Leite, Julio Cesar de

    Abstract in Portuguese:

    Um estudo sobre o legado herpetológico do naturalista alemão Andreas Mayer (1907-1986) para o estado do Paraná (Bérnils & Moura-Leite, 1990) levantou 83 exemplares de 20 espécies de répteis, obtidos por ele no Paraná e no Mato Grosso do Sul (anos 40, 50 e 60) e tombados no atual Museu de História Natural Capão da Imbuia (Curitiba). Acreditava-se serem os únicos répteis coletados por Mayer e guardados em coleção científica, mas justamente no centenário de seu nascimento foram encontradas 15 serpentes coletadas por ele e não listadas na publicação anterior. O material é relevante, pois procede de áreas que atualmente se encontram ambientalmente degradadas, foi obtido numa época com raros registros de répteis para o Paraná, e contém espécies de difícil captura no Estado, entre as quais se destaca a primeira ocorrência de Phimophis cf. guerini para o Paraná. As 15 serpentes são arroladas com seus dados de etiqueta e tombo, e são corrigidas informações incompletas ou equivocadas no artigo de 1990, com a devida atualização taxonômica.

    Abstract in English:

    A study about the herpetological legacy of the German naturalist Andreas Mayer (1907-1986) (Bérnils & Moura-Leite, 1990) raised 83 specimens from 20 reptile species captured in the Brazilian states of Paraná and Mato Grosso do Sul (years 40, 50, and 60) and currently housed at the Museu de História Natural Capão da Imbuia (Curitiba). Just in Mayer's birth centenary, 15 more snakes collected by him and not presented in the former publication were founded. This material is relevant because (1) came from areas currently under human-altered environments; (2) was collected in areas that were poorly sampled at that time; and (3) embraced some species hard to find in Paraná, including the first occurrence of Phimophis cf. guerini for the state. Label data for the added snakes and some important corrections to the former article, with taxonomic and geographic updates, are being presented.
  • Design of a three-dimensional hand/forearm model to apply computational fluid dynamics Engineering, Technology and Techniques

    Marinho, Daniel Almeida; Reis, Victor Machado; Vilas-Boas, João Paulo; Alves, Francisco Bessone; Machado, Leandro; Rouboa, Abel Ilah; Silva, António José

    Abstract in Portuguese:

    O objetivo do presente estudo foi desenvolver um modelo digital tridimensional de uma mão e um antebraço humano para aplicar a Dinâmica Computacional de Fluidos ao estudo da propulsão em natação. Foram aplicados procedimentos computorizados de tomografia axial na mão e antebraço de um nadador Olímpico. Através de técnicas de processamento de imagem, os dados foram convertidos em coordenadas tridimensionais, que podem ser utilizadas em programas de simulação computacional. Através dos resultados encontrados, foi possível verificar uma semelhança quase perfeita entre o segmento humano e o modelo digital. Esta técnica pode ser utilizada como uma forma de ultrapassar as dificuldades em desenvolver um modelo digital tridimensional de um segmento específico do corpo humano. Complementarmente, pode ser bastante útil na melhoria da utilização da Dinâmica Computacional de Fluidos no Desporto, de uma forma geral, e, mais especificamente, nos estudos em natação, diminuindo a diferença entre a investigação experimental e a investigação computacional.

    Abstract in English:

    The purpose of this study was to develop a three-dimensional digital model of a human hand and forearm to apply Computational Fluid Dynamics to propulsion analysis in swimming. Computer tomography scans of the hand and forearm of an Olympic swimmer were applied. The data were converted, using image processing techniques, into relevant coordinate input, which could be used in Computational Fluid Dynamics software. From that analysis, it was possible to verify an almost perfect agreement between the true human segment and the digital model. This technique could be used as a means to overcome the difficulties in developing a true three-dimensional model of a specific segment of the human body. Additionally, it could be used to improve the use of Computational Fluid Dynamics generally in sports and specifically in swimming studies, decreasing the gap between the experimental and the computational data.
  • Effect of lactic acid and UV irradiation on the cassava and corn starches Food/Feed Science and Technology

    Franco, Célia Maria Landi; Ogawa, Cristina; Rabachini, Taís; Rocha, Thais de Souza; Cereda, Marney Pascoli; Jane, Jay-lin

    Abstract in Portuguese:

    Amido de mandioca modificado com ácido lático e radiação ultravioleta antes da secagem artificial têm mostrado boa capacidade de expansão, a exemplo da encontrada para o polvilho azedo. Neste trabalho, os efeitos do ácido lático e radiação UV sobre as características físico-químicas e estruturais de amidos de mandioca e milho foram investigados. Apenas o amido de mandioca modificado apresentou capacidade de expansão durante o forneamento. Do RVA, redução dos valores de viscosidade, boa estabilidade interna e nenhuma tendência a retrogradação para este amido modificado foi observado. O amido de milho não apresentou qualquer pico de viscosidade após modificação. Não foram observadas diferenças significativas nas propriedades térmicas, determinadas em DSC, entre os amidos nativos e modificados de ambas as fontes. As moléculas de amilopectina e amilose de ambos os amidos modificados mostraram alguma degradação. O peso molecular da amilopectina do amido de mandioca foi mais preservado, enquanto a amilopectina do amido de milho foi mais atacada em todo o grânulo. As cadeias ramificadas longas da amilopectina de mandioca, com DP~37, foram degradadas, enquanto as de milho mantiveram-se inalteradas.

    Abstract in English:

    In this work, the effect of lactic acid and UV irradiation on the physicochemical and structural characteristics of cassava and corn starches was evaluated. Only the modified cassava starch presented baking expansion capacity. From RVA, reduction of viscosity values, greater internal stability and none set back for modified cassava starch were observed. Modified corn starch did not show any peak viscosity. There were no significant differences in DSC thermal properties of treated and native starches. Amylopectin and amylose molecules from both the modified starches displayed some degradation. Molecular weight of cassava amylopectin was mostly preserved, whereas corn amylopectin was evenly attacked through the granule. Nevertheless, the B long branched chains of cassava amylopectin, with DP~37, were degraded whereas they were unchanged for corn amylopectin.
  • Neural modeling of bromelain extraction by reversed micelles Food/Feed Science and Technology

    Fileti, Ana Maria Frattini; Fischer, Gilvan Anderson; Tambourgi, Elias Basile

    Abstract in Portuguese:

    Uma micro-coluna com campânulas pulsantes foi utilizada para a extração de bromelina a partir de suco de abacaxi, usando micelas reversas. A solução catiônica micelar foi composta do surfactante BDBAC, do solvente iso-octano e do co-solvente hexanol. Seguindo um planejamento experimental, perturbações foram impostas à coluna de extração com o objetivo de capturar seu comportamento dinâmico e suas não-linearidades, usando a razão entre a vazão da fase leve e vazão total, e o intervalo de tempo entre os pulsos. Os efeitos das variáveis independentes sobre o fator de purificação e sobre o rendimento em proteínas totais foram modelados via redes neurais artificiais. A melhor topologia de rede obtida foi definida como 16-9-2, usando um esquema de janela móvel no tempo das variáveis independentes. O modelo neural obtido do histórico do processo se mostrou adequado para predizer simultaneamente o fator de purificação e o rendimento do processo em proteínas totais. No ponto ótimo de operação, foi encontrado um fator de purificação de 4.96, com produtividade de 1.29 mL/min.

    Abstract in English:

    A pulsed-cap microcolumn was used for bromelain extraction from pineapple juice by reversed micelles. The cationic micellar solution used BDBAC as the surfactant, isooctane as the solvent and hexanol as the co-solvent. In order to capture the dynamic behavior and the nonlinearities of the column, the operating conditions were modified in accordance with the central composite design for the experiment, using the ratio between the light phase flow rate and the total flow rate, and the time interval between pulses. The effects on the purification factor and on total protein yield were modeled via neural networks. The best topology was defined as 16-9-2, and the input layer was a moving window of the independent variables. The neural model successfully predicted both the purification factor and the total protein yield from historical data. At the optimal operating point, a purification factor of 4.96 and a productivity of 1.29 mL/min were obtained.
  • Safety of Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. to Gallus domesticus L. Food/Feed Science and Technology

    Haas-Costa, Jucelaine; Alves, Luis Francisco Angeli; Daros, Alaxsandra Aparecida

    Abstract in Portuguese:

    Beauveria bassiana é um importe entomopatógeno, sendo avaliado seu efeito sobre a alimentação, comportamento e histologia do sistema digestório de Gallus domesticus. O fungo (isolado Unioeste 4) foi administrado oralmente às aves, misturado à ração. Estas foram observadas por 28 dias e as fezes coletadas diariamente para análise. Também foi avaliado o peso das aves, bem como sinais de intoxicação ou modificação patológica. Amostras teciduais foram retiradas para verificar lesões com o microscópico óptico. Houve sobrevivência de 100% das aves avaliadas e nenhuma alteração comportamental ou lesão externa durante o experimento. O grupo teste apresentou o maior ganho de peso (1383,9±54,4g), sendo mais acentuado a partir da segunda semana. Observou-se a presença de conídios viáveis nas fezes somente até 24 horas após a ingestão do fungo, indicando que não houve germinação nas aves. Nenhuma lesão tecidual foi verificada, de forma que B. bassiana mostrou-se seguro para o organismo não-alvo G. domesticus.

    Abstract in English:

    Beauveria bassiana, an important insect pathogen was used to evaluate its effect on the feeding, behavior, histology of the digestory system and anatomy of Gallus domesticus. The fungus (strain Unioeste 4) was administrated orally treated with chicken food. Chicken feces were collected, and the birds observed for 28 days. Also, were evaluated the weight of the birds, as well as any sign of intoxication or pathological modification. Tissue samples were withdrawn to test lesions with the optic microscope. There was 100% of survival of the birds, and no behavior alteration or external lesion was found. The test group presented the highest weight gain (1383.9±54.4g). Viable conidia were observed in the feces until 24 h after feeding the fungus, indicating that there was no germination inside the digestory system. No tissue lesion was observed, providing overwhelming evidence for the safety of B. bassiana to non-target organism G. domesticus.
  • Biodegradation of erythrosin B dye by paramorphic Neurospora crassa 74A Environmental Sciences

    Jesus, Gisele Jane de; Corso, Carlos Renato; Campos, Adriana de; Franchetti, Sandra Mara Martins

    Abstract in Portuguese:

    O presente trabalho utilizou formas paramorfogênicas de Neurospora crassa 74A linhagens, na remoção do corante "Erythrosin B". O fungo, induzido química e fisicamente em forma de "pellets", foi usado no estudo da biodegradação deste corante. A cultura fúngica foi crescida em meio contendo o corante, como única fonte de carbono por 2 e 90h de interação. As paredes celulares foram isoladas por um processo de lavagem em água destilada e o micélio fresco foi secado por 12 h a 105ºC, e transformado num pó fino, e analisado em FTIR. O sobrenadante foi analisado através de espectrofotômetro UV-VIS e FTIR. Diferenças significativas no espectro UV-VIS e no FTIR foram observadas entre o controle e o sobrenadante e entre o controle e as paredes coloridas de vermelho e em FTIR no tempo de 2 e 90 h. Algumas bandas foram modificadas sugerindo a possibilidade de uma biodegradação enzimática em função do tempo de contato entre o corante e a biomassa fúngica.

    Abstract in English:

    The present work used paramorphic forms of Neurospora crassa 74A to remove erythrosine. The fungus culture was grown in medium containing the dye, as only carbon source for 2 and 90 h of interaction. A washing process using distilled water isolated the cellular mass mycelia was dried for 12 h at 105ºC and transformed in fine powder and analyzed in FTIR. The supernatant was analyzed through spectrophotometer UV-Vis and FTIR. Significant differences in the spectrum of UV-VIS and FTIR were observed between the control and the supernatant and between wall control and the walls colored by red, in FTIR for 2 and 90 h. Some significant bands were modified, suggesting the possibility of enzymatic biodegradation in proportion to the time of contact between the dye and fungal biomass.
  • Catechol biodegradation kinetics using Candida parapsilopsis Environmental Sciences

    Rigo, Maurício; Alegre, Ranulfo Monte; Bezerra, José Raniere Mazile Vidal; Coelho, Narjara; Bastos, Reinaldo Gaspar

    Abstract in Portuguese:

    Neste trabalho foi estudada a biodegradação de catecol em frascos de Erlenmeyers em água residuária sintética pela levedura Candida parapsilopsis. As respostas dos ensaios cinéticos mostraram que altas concentrações de catecol ocasionaram uma fase lag longa para a levedura. Portanto, a aclimatização da cultura de levedura empregada para biodegradação de catecol é de fundamental importância, sendo possível reduzir toda a concentração inicial de catecol da água residuária sintética de 910 mg/L em 48 horas. Os dados experimentais da cinética de biodegradação do catecol foram ajustados pelo modelo de Haldane adequadamente, sobre a faixa de concentração de catecol investigada de 36 a 910 mg/L. Os parâmetros cinéticos obtidos do modelo de Haldane foram: µmax = 0,246 h-1, Ks = 16,95 mg/L e Ki = 604,85 mg/L.

    Abstract in English:

    This study evaluated the biodegradation of catechol by a yeast strain of Candida parapsilopsis in standard medium in Erlenmeyer flasks. Results shown that the highest concentration of catechol caused the longer lag period, demonstrating that acclimatized cultures could completely degrade an initial catechol concentration of 910 mg/L within 48 h. Haldane's model validated the experimental data adequately for growth kinetics over the studied catechol concentration ranges of 36 to 910 mg/L. The constants obtained for this model were µmax = 0.246 h-1, Ks = 16.95 mg/L and Ki = 604.85 mg/L.
  • New aspects on atrazine biodegradation Environmental Sciences

    Sene, Luciane; Converti, Attilio; Secchi, Geslaine Aparecida Ribeiro; Simão, Rita de Cássia Garcia

    Abstract in Portuguese:

    A prática mundial do uso de agroquímicos por períodos extensos, de maneira indiscriminada e abusiva, tem mobilizado as autoridades envolvidas em saúde pública e sustentabilidade de fontes naturais, como uma conseqüência da contaminação ambiental. Agroquímicos referem-se a uma ampla variedade de inseticidas, fungicidas e herbicidas, entre estes a atrazina, um herbicida intensivamente usado em culturas de cana-de-açúcar, milho, sorgo, entre outros. Pesquisadores têm demonstrado que a atrazina tem efeitos tóxicos em algas, plantas aquáticas, insetos aquáticos, peixes e mamíferos. Devido à toxicidade e à persistência da atrazina no ambiente, a busca de linhagens microbianas capazes de degradá-la é fundamental para o desenvolvimento de processos de biorremediação, com uma ferramenta corretiva para solucionar problemas decorridos do uso irracional de agroquímicos. Esta revisão relata os principais aspectos microbianos e pesquisas da degradação da atrazina por espécies microbianas isoladas e consórcio microbiano, bem como avanços no desenvolvimento de técnicas para remoção microbiana da atrazina no ambiente natural.

    Abstract in English:

    The world practice of using agrochemicals for long periods, in an indiscriminated and abusive way, has been a concern of the authorities involved in public health and sustainability of the natural resources, as a consequence of environmental contamination. Agrochemicals refer to a broad range of insecticides, fungicides and herbicides, and among them stands out atrazine, a herbicide intensively used in sugarcane, corn and sorghum cultures, among others. Researches have demonstrated that atrazine has toxic effects in algae, aquatic plants, aquatic insects, fishes and mammals. Due to the toxicity and persistence of atrazine in the environment, the search of microbial strains capable of degrading it is fundamental to the development of bioremediation processes, as corrective tools to solve the current problems of the irrational use of agrochemicals. This review relates the main microbial aspects and research on atrazine degradation by isolated microbial species and microbial consortia, as well as approaches on the development of techniques for microbial removal of atrazine in natural environments.
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