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Exopolysaccharide matrix of developed candida albicans biofilms after exposure to antifungal agents

Este estudo avaliou o efeito da exposição de fluconazol ou nistatina a biofilmes de Candida albicans desenvolvidos, considerando a matriz de polissacarídeos extracelulares. Inicialmente uma cepa referência de C. albicans (ATCC 90028) foi submetida ao teste de concentração inibitória mínima (CIM) utilizando-se o fluconazol ou nistatina como agentes antifúngicos. Após, espécimes foram confeccionados em resina acrílica de polimetilmetacrilato (PMMA) de acordo com as recomendações do fabricante e tiveram sua rugosidade de superfície padronizada. Após, biofilmes de C. albicans foram desenvolvidos na superfície dos espécimes durante 48 h. Em seguida, os biofilmes foram expostos a fluconazol ou nistatina nas concentrações de CIM, 10 x CIM ou 100 x CIM, por 24 h. A atividade metabólica dos biofilmes foi avaliada pelo teste de XTT. A produção de polissacarídeos extracelulares solúveis e insolúveis, bem como dos polissacarídeos intracelulares foi avaliada pelo método fenol-sulfúrico. A arquitetura dos biofilmes e proporção de células vivas e mortas foi investigada utilizando-se microscopia confocal a laser. Os resultados foram analisados por ANOVA seguido do teste de Tukey, utilizando-se o nível de significância de 5%. A presença do fluconazol ou nistatina em concentrações maiores que CIM resultaram em uma redução significativa da atividade metabólica (p<0,001). Nas concentrações de CIM e 10 x CIM, biofilmes expostos ao fluconazol apresentaram quantidades significativas de polissacarídeos intracelulares (p<0,05), enquanto não houve alterações na quantidade de polissacarídeos extracelulares (p>0,05). A presença de nistatina também não alterou a matriz de polissacarídeos extracelulares em todas as concentrações investigadas (p>0,05). A arquitetura dos biofilmes não foi afetada por ambos os agentes antifúngicos, em qualquer concentração testada (p>0,05). A nistatina apresentou maior proporção de células mortas (p<0,05). Conclui-se que tanto para o fluconazol quanto para a nistatina, concentrações maiores que CIM reduziram a atividade metabólica dos biofilmes de C. albicans; no entanto, tais concentrações não alteraram a matriz de polissacarídeos extracelulares nem a arquitetura dos biofilmes.


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