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Impacto sinérgico do ácido α-linolênico e α-tocoferol na maturação in vitro e cultura de oócitos de búfalo

Resumo

O objetivo do presente estudo foi investigar o impacto sinérgico do α-tocoferol e do ácido α-linolênico (100 µM) na MIV e CIV de oócitos de búfala Nili Ravi. Os oócitos foram obtidos dos ovários de búfalos abatidos duas horas após o abate e levados ao laboratório. Complexos de oócitos cumulus de búfalo foram colocados aleatoriamente nos cinco grupos experimentais incluídos; GRUPO 1: Meio de maturação (MM) + 100 µM ALA (controle), GRUPO 2: MM + 100 µM ALA + 50 µM α-tocoferol, GRUPO 3: MM + 100 µM ALA + 100 µM α-tocoferol, GRUPO 4: MM + 100 µM ALA + 200 μM α-tocoferol e GRUPO 5: MM + 100 µM ALA + 300 μM α-tocoferol sob uma atmosfera de 5% de CO2 em ar a 38,5 °C por 22-24 h. A expansão cumulus e o estado de maturação nuclear foram determinados (Experimento 1). No experimento 2, os oócitos foram maturados como no experimento 1. Os oócitos maturados foram então fertilizados em meio de Tyrode's Albumina Lactato Piruvato (TALP) por cerca de 20 h e cultivados em meio de fluido oviductal sintético (SOF) para determinar o efeito do ácido α-linolênico (100 µM) e α-tocoferol em meio IVM em IVC de presumíveis zigotos. Para estudar o efeito do ácido α-linolênico (100 µM) em meio IVM e aumentar a concentração de α-tocoferol no meio de cultura no desenvolvimento inicial do embrião (Experimento 3), os presumíveis zigotos foram distribuídos aleatoriamente nos cinco grupos experimentais com concentração crescente de α-tocoferol em meios de cultura. Maior porcentagem de oócitos em estágio MII no experimento 1 (65,2 ± 2,0), embriões em estágio de mórula no experimento 2 (30,4 ± 1,5) e experimento 3 (22,2 ± 2,0) foram obtidos. No entanto, os resultados gerais para a expansão das células do cumulus, maturação do oócito para o estágio MII e desenvolvimento embrionário subsequente entre os tratamentos permanecem estatisticamente semelhantes (P> 0,05). A suplementação de α-tocoferol em meios de maturação com ácido α-linolênico e / ou em meios de cultura de embriões não aumentou ainda mais a maturação in vitro de oócitos ou a produção de embriões.

Palavras-chave:
ácido α-linolênico; α-tocoferol; búfalo; maturação nuclear; desenvolvimento embrionário

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