Brazilian Journal of Microbiology, Volume: 33, Issue: 3, Published: 2002
  • Recent updated aspects of colicins of Enterobacteriaceae Mini-Review

    Cursino, Luciana; Šmarda, Jan; Chartone-Souza, Edmar; Nascimento, Andréa M.A.

    Abstract in Portuguese:

    As colicinas são compostos proteináceos produzidos por Escherichia coli e outros membros da família Enterobacteriaceae, sendo ativas, principalmente, contra bactérias mais relacionadas. São conhecidos pelo menos 34 tipos diferentes de colicinas, apresentando algumas delas características intrigantes. Nesta revisão são abordados os principais aspectos das colicinas das bactérias gram-negativas, explorando desde sua produção até ass suas aplicações práticas.

    Abstract in English:

    The colicins are protein compounds produced by, and active against, Escherichia coli and others members of Enterobacteriaceae family. At least 34 different colicins have been described and found to share an interesting number of features. In the present review we focus on the major characteristics of colicins of gram-negative bacteria and explore their production and practical applications.The colicins are protein compounds produced by, and active against, Escherichia coli and others members of Enterobacteriaceae family. At least 34 different colicins have been described and found to share an interesting number of features. In the present review we focus on the major characteristics of colicins of gram-negative bacteria and explore their production and practical applications.
  • Infleunce of pH on the partition of glucose-6-phosphate dehydrogenase and hexokinase in aqueous two-phase system Industrial Microbiology

    Silva, Daniel Pereira da; Pontes, Marcela Zanella Ribeiro; Souza, Maria Aparecida de; Vitolo, Michele; Silva, João Batista de Almeida e; Pessoa-Junior, Adalberto

    Abstract in Portuguese:

    Glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH) e hexoquinase (HK) são importantes enzimas usadas em estudos bioquímicos e médicos e em diversos métodos analíticos. Sistema de duas fases aquosas (SDFA) formado por uma solução polimérica e uma solução eletrolítica proporciona um método para separação e purificação de enzimas com diversas vantagens, incluindo biocompatibilidade, que pode ser facilmente escalonado para nível industrial. Neste trabalho, os efeitos de diferentes valores de pH na estabilidade e na partição (K, coeficiente de partição) por SDFA das enzimas G6PDH e HK, obtidas através de levedura de panificação, foram investigados. Os resultados, obtidos do sistema constituído por 17,5% de PEG 400 e 15,0% de fosfato, mostraram que com a elevação do pH de 5,0 para 8,8, o K HK aumentou 26 vezes e o K G6PDH 2,2 vezes. No sistema 20,0% PEG 1500 : 17,5% fosfato, quando o valor do pH variou de 3,8 para 8,8. os valores de K HK e K G6PDH aumentaram e 13 vezes e 1,2 vez, respectivamente. Isto permite concluir que o coeficiente de partição, para ambas as enzimas, é favorecido pela elevação do pH. Uma análise estatística dos resultados foi conduzida para confirmar esta conclusão.

    Abstract in English:

    Glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH) and hexokinase (HK) are important enzymes used in biochemical and medical studies and in several analytical methods. Aqueous two-phase system (ATPS) formed by a polymer solution and an electrolyte solution provides a method for the separation and purification of enzymes with several advantages, including biocompatibility and easy scale up of the process. In this work, the effects of different pH values on the storage stability and partitioning behavior (K, partition coefficient) of the enzymes G6PDH and HK from baker's yeast extract were investigated in ATPS. The results, obtained from the 17.5% PEG 400 : 15.0% phosphate system, showed that when the pH was increased from 5.0 to 8.8, the K HK increased 26-fold and the K G6PDH 2.2-fold. In the 20.0% PEG 1500 : 17.5% phosphate system, the K HK and K G6PDH increased 13 and 1.2-fold, when the pH value was increased from 3.8 to 8.8, respectively. This leads to the conclusion that the partition coefficient for both enzymes is favored by high pH values. A statistical analysis of the results was conducted to confirm this conclusion.
  • Trehalose accumulation, invertase activity and physiological characteristics of yeasts isolated from 24 h fermentative cycles during the production of artisanal Brazilian cachaça Industrial Microbiology

    Pataro, Carla; Guerra, Juliana B.; Gomes, Fátima C.O.; Neves, Maria J.; Pimentel, Patrícia F.; Rosa, Carlos A.

    Abstract in Portuguese:

    As características fisiológicas, acúmulo de trealose e produção de invertase de 86 leveduras isoladas do ciclo fermentativo durante a produção artesanal de cachaça em três destilarias no Estado de Minas Gerais foram estudadas. Destes isolados 70% foram capazes de crescer acima de 40 e 42ºC. Somente os isolados de Saccharomyces cerevisiae foram capazes de crescer acima de 40ºC. Baixas temperaturas (<40ºC) favoreceram o crescimento de leveduras como Candida parapsilosis-like, C. maltosa-like, Kloeckera japonica, S. exiguus and C. bombicola-like. Os isolados das três destilarias foram tolerantes ao etanol, produziram invertase e acumularam trealose na presença de glicose. As linhagens isoladas da destilaria A apresentaram maior resistência ao etanol (cerca de 84.2% das linhagens foram capazes de crescer na presença de 12% de etanol) quando comparadas àquelas das destilarias B e C (nenhuma linhagem e 9,5%, respectivamente). As linhagens de S. cerevisiae isoladas das três destilarias apresentaram uma alta capacidade para produzir invertase e acumular trealose na presença de glicose. Com base nos resultados dos experimentos de estresse térmico e de etanol, foi possível observar uma forte relação entre acúmulo de trealose intracelular e viabilidade celular. O aumento da viabilidade celular foi mais pronunciado quando as linhagens foram submetidas a um pré-tratamento em temperaturas sub-letais.

    Abstract in English:

    Trehalose accumulation, invertase activity and physiological characteristics of 86 yeast isolates from short fermentative cycles during the production of cachaça in three artisanal distilleries of the State of Minas Gerais were studied. Among these isolates, 70% were able to grow at temperatures between 40 and 42ºC. Only Saccharomyces cerevisiae isolates were able to grow over 40ºC. Lower temperatures (<40ºC) favoured the growth of yeasts such as Candida parapsilosis-like, C. maltosa-like, Kloeckera japonica, S. exiguus and C. bombicola-like. The isolates from all three distilleries were ethanol tolerant, produced invertase, and accumulate trehalose in the presence of glucose. The strains isolated from distillery A presented more resistance to ethanol (around 84.2% of the strains were able to grow in the presence of 12% ethanol) when compared to the ones from distilleries C and B (9.5% and no strain, respectively). The strains of S. cerevisiae isolated from the three distilleries presented a higher capacity to produce invertase and accumulate trehalose in the presence of glucose. Based on the results of thermal and ethanol stress experiments, it was possible to identify strong relationship between intracellular trehalose accumulation and cell viability. The increase in cell viability was even more pronounced when the strains were subjected to a pre-treatment at sublethal temperatures.
  • Hyphal-like extension and pseudohyphal formation in industrial strains of yeasts induced by isoamyl alcohol Industrial Microbiology

    Ceccato-Antonini, Sandra Regina; Silva, Paula Cristina da

    Abstract in Portuguese:

    As leveduras podem produzir pseudohifas e extensões semelhantes a hifas sob certas condições de crescimento, como a adição de álcool isoamílico. Esse álcool é o constituinte principal do óleo fusel, um subproduto da fermentação etanólica. A mudança de morfologia da levedura para a forma filamentosa pode causar problemas ao processo fermentativo. Neste trabalho, foi estudada a influência dos álcoois fusel (isoamílico e isopropílico), fontes de nitrogênio (sulfato de amônio e leucina) e glifosate (um maturador químico para cana-de-açúcar) adicionados a um meio complexo sobre linhagens industriais de leveduras isoladas do processo fermentativo. Duas linhagens industriais mostraram transição para pseudohifas (grupos de células) ou extensões semelhantes a hifas após adição de álcool isoamílico, de 0,3% a 0,9% v/v. Todas as alterações foram reversíveis quando as leveduras foram reinoculadas em YEPD sem adição de álcool. Apesar das pseudohifas serem comumente resultantes de meios com limitação de nitrogênio, observou-se que esta morfologia resultou da adição de álcool isoamílico. Não foi detectada nenhuma influência da fonte de nitrogênio ou álcool isopropílico ou glifosate para quaisquer linhagens estudadas.

    Abstract in English:

    Yeasts can produce pseudohyphae and hyphal-like extensions under certain growth conditions like isoamyl alcohol (IAA) induction, a chief constituent of fusel oil, which is a subproduct from the ethanolic fermentation. The morphology switch from yeast to a filamentous form can be troublesome to the process. In this work it was studied the influence of fusel alcohols, nitrogen sources (ammonium sulphate and leucine) and glifosate (a chemical maturator for sugar cane) added to a complex medium on some industrial strains of yeasts isolated from the fermentative process. Two industrial strains showed transition to hyphal-like extensions or pseudohyphae (clusters of cells) upon addition of IAA from 0.3 to 0.9% /v. The alterations were reversible when the yeasts were reinoculated in YEPD without IAA. Although pseudohyphae are a result of nitrogen-limited medium, we observed them as a result of IAA addition. No influence of the nitrogen source or isopropilic alcohol or glifosate was detected for any strain studied in the concentrations used.
  • Cellulase and xylanase productions by isolated Amazon Bacillus strains using soybean industrial residue based solid-state cultivation Industrial Microbiology

    Heck, Júlio X.; Hertz, Plinho F.; Ayub, Marco A.Z.

    Abstract in Portuguese:

    No Brasil, uma grande quantidade de resíduos fibrosos de soja (Glycine max) são gerados no processo de produção de proteína de soja. Estes materiais, ricos em celulose e hemicelulose, podem ser usados como substratos para cultivos microbianos visando a produção de valiosos metabólitos e enzimas. Neste trabalho, estudou-se a produção de enzimas, utilizando estes resíduos, por bactérias isoladas da água e do solo da região amazônica. Cinco cepas, dentre 87 iniciais, foram selecionadas e crescidas em cultivo semi-sólido (CSS). Preparações obtidas do isolado BL 62, identificado como Bacillus subtilis, apresentaram a maior atividade específica para celulase, 1,08 UI/ mg de proteína, em 24 horas de cultivo. No que se refere às xilanases, preparações obtidas do isolado BL 53, também identificado como Bacillus subtilis, apresentaram a maior atividade específica para esta enzima, com um valor de 5,19 UI/ mg de proteína, em 72 horas de cultivo. Também foi demonstrada a produção simultânea de proteases, o que pode ser associado à perda das atividades de celulase e xilanase durante o cultivo. Os resultados indicam que os microrganismos selecionados e o processo de cultivo empregado utilizando resíduo da soja apresentam grande potencial biotecnológico.

    Abstract in English:

    In Brazil, a large amount of a fibrous residue is generated as result of soybean (Glycine max) protein production. This material, which is rich in hemicellulose and cellulose, can be used in solid state cultivations for the production of valuable metabolites and enzymes. In this work, we studied the bioconversion of this residue by bacteria strains isolated from water and soil collected in the Amazon region. Five strains among 87 isolated bacteria selected for their ability to produce either celullases or xylanases were cultivated on the aforementioned residue. From strain BL62, identified as Bacillus subtilis, it was obtained a preparation showing the highest specific cellulase activity, 1.08 UI/mg protein within 24 hours of growth. Concerning xylanase, the isolate BL53, also identified as Bacillus subtilis, showed the highest specific activity for this enzyme, 5.19 UI/mg protein within 72 hours of cultivation. It has also been observed the production of proteases that were associated with the loss of cellulase and xylanase activities. These results indicated that the selected microorganisms, and the cultivation process, have great biotechnological potential.
  • Susceptibility of Nasutitermes ehrhardti (Isoptera: Termitidae) to Bacillus thuringiensis subspecies Environmental And Soil Microbiology

    Castilhos-Fortes, Raquel de; Matsumura, Aida T.S.; Diehl, Elena; Fiuza, Lidia M.

    Abstract in Portuguese:

    O efeito de Bacillus thuringiensis sobre o cupim Nasutitermes ehrhardti (Isoptera, Termitidae) foi avaliado em condições laboratoriais. Ensaios in vivo com 55 cepas do patógeno, cedidas pelo Instituto Pasteur de Paris foram realizados em condições controladas onde sete destas foram consideradas patogênicas, sendo que B. thuringiensis subsp. yunnanensis, B. thuringiensis subsp. huazhongiensis, B. thuringiensis subsp. brasiliensis, B. thuringiensis subsp. colmeri, B. thuringiensis subsp. kurstaki, provocaram mortalidade inferior a 72% em isópteros. Os isolados B. thuringiensis subsp. sooncheon e B. thuringiensis subsp. roskildiensis causaram 100% de mortalidade ao sétimo dia após a aplicação das bactérias. As CL50 para B. thuringiensis subsp. sooncheon corresponderam a 47x10(8); 66,2x10(6) e 5,1x10(5) células/ml. Os valores correspondem aos três, cinco e sete dias, respectivamente. Para B. thuringiensis subsp. roskildiensis, no terceiro dia a CL50 correspondeu a 30,8x10(5), no quinto dia a 48,4x10(6) e no sétimo dia a 16,8x10(4) células/ml. Os dados obtidos mostram que as duas subespécies com maior patogenicidade podem ser estudadas, considerando o controle do cupim N. ehrhardti.

    Abstract in English:

    The effects of Bacillus thuringiensis (Bt) Berliner on the termite Nasutitermes ehrhardti (Isoptera, Termitidae) were evaluated under laboratory conditions. From 55 Bt subspecies assayed in vivo under controlled conditions seven were found to be pathogenic in the subspecies yunnanensis, huazhongiensis, brasiliensis, colmeri and kurstaki (less than 72% of mortality), particularly sooncheon and roskildiensis (100% mortality at the seventh day after the bacteria application). The LC50 for subspecie sooncheon corresponded to 47x10(8),()66.2x10(6) and 5.1x10(5) cells/ml, at the third, fifth and seventh day, respectively. For the subspecie roskildiensis the LC50 corresponded to 30.8x10(5), 48.4x10(6) and 16.8x10(4) cells/ml, at the third, fifth and seventh day, respectively. The results show that the two most pathogenic subspecies effectively may be studied with regard to control the termite N. ehrhardti.
  • Nitrogenase activity of Beijerinckia derxii is preserved under adverse conditions for its growth Environmental And Soil Microbiology

    Barbosa, Heloiza R.; Moretti, Marcos A.; Thuler, Daniela S.; Augusto, Elisabeth F.P.

    Abstract in Portuguese:

    Os parâmetros utilizados para se avaliar a ação de diferentes fatores ambientais sobre Beijerinckia derxii foram curvas de crescimento e medidas de atividade específica de nitrogenase. As condições estudadas foram: a) meios com os valores de pH 2,5, 2,8, 4,2 e 5,7; b) meio suplementado com 230 mM de sulfato de alumínio; c) meio com as concentrações de fosfato de potássio: 50 mM and 100 mM; d) culturas agitada e estacionada; e) meio suplementado com 40 mM de tiossulfato de sódio. O crescimento e a atividade da nitrogenase foram muito similares em meio com pH 4,2 e 5,7 (condição padrão). Em pH 2,5 não se observou crescimento. As seguintes condições provocaram alterações no perfil da curva de crescimento ou na atividade da enzima ou ambos: pH 2,8 (diminuição do número inicial de UFC, redução da máxima velocidade especifica de crescimento, redução no número de gerações e estímulo na atividade da nitrogenase), presença de alumínio (fase de declínio precoce), 50 mM PO4(3-) (redução da velocidade especifica de crescimento máxima), 100 mM PO4(3-) (redução da velocidade especifica de crescimento máxima e no número de gerações e fase de declínio precoce), baixa disponibilidade de O2 (estímulo na atividade da nitrogenase) e presença de tiossulfato (redução da velocidade especifica de crescimento máxima, elevado estímulo na atividade da nitrogenase e fase de declínio precoce). Ocorreu uma variação no perfil das curvas de crescimento em resposta à ação dos fatores ambientais. A atividade da nitrogenase foi sempre mantida, mesmo quando o crescimento foi reduzido.

    Abstract in English:

    In order to evaluate the response of Beijerinckia derxii ICB-10 to different environmental factors, growth curves and specific nitrogenase activity were studied. Tested conditions were as follows: a) media with different pH values (2.5, 2.8, 4.2 and 5.7); b) medium supplemented with 230 µM aluminium sulphate; c) media with two different potassium phosphate concentrations (50 mM and 100 mM); d) shaken or still cultures; e) medium supplemented with 40 mM sodium thiosulphate. Growth curves and specific nitrogenase activity at pH 4.2 were closely similar to those for cultures at pH 5.7 (standard condition), whereas no growth occurred at pH 2.5. Changes in growth curves and/or specific nitrogenase activity were observed under the following conditions: I) pH 2.8 (decrease in initial CFU number, reduction of maximum specific growth rate, reduced number of generations and stimulation of nitrogenase activity), II) presence of aluminium (early death phase), III) 50 mM PO4(3-) (reduction of maximum specific growth rate), IV) 100 mM PO4(3-) (reduction of both number of generations and maximum specific growth rate as well as early death phase), V) low O2 availability (increasing nitrogenase activity), and VI) presence of thiosulphate (reduction of maximum specific growth rate; early death phase and high stimulation of nitrogenase activity). The data obtained showed the high variability of the cell growth response to environmental factors. Nitrogenase activity was always preserved even when population growth was affected.
  • Mycocinogenic yeasts isolated from Amazon soils of the Maracá Ecological Station, Roraima-Brazil Environmental And Soil Microbiology

    Vital, Marcos José Salgado; Abranches, Jacqueline; Hagler, Allen Norton; Mendonça-Hagler, Lêda Cristina

    Abstract in Portuguese:

    Duzentos e quarenta linhagens de leveduras foram isoladas de amostras de solos da Estação Ecológica de Maracá, na Amazônia Brasileira, as quais representam 82% de leveduras de afinidade ascomicética e 18% basidiomicética. As especies dominantes foram Candida etchellsii, Candida famata, Candida robusta, Candida rugosa, Candida valida, Debaryomyces hansenii, Cryptococcus albidus, Cryptococcus laurentii, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula minuta and Rhodotorula mucilaginosa. A capacidade das leveduras produzirem e excretarem toxinas letais a cepas sensíveis de leveduras, atividade micocinogênica, foi investigada. Seis linhagens foram capazes de produzir micocinas: Issatchenkia sp., Saccharomyces exiguus?, Williopsis saturnus var. subsufficiens, e 3 W. saturnus identificadas conforme os dados de taxonomia molecular baseados nas seqüências da região D1/D2 do 26S rDNA.

    Abstract in English:

    The 240 yeasts isolated from soils of the Maracá Ecological Station in the Brazilian Amazon were identified and screened for mycocin production. These strains included 82% of ascomycetous and 18% basidiomicetous affinities and the prevalent species were Candida etchellsii, Candida famata, Candida robusta, Candida rugosa, Candida valida, Debaryomyces hansenii, Cryptococcus albidus, Cryptococcus laurentii, Rhodotorula glutinis, Rhodotorula minuta and Rhodotorula mucilaginosa. Mycocins able to kill some yeasts were produced by 6 strains identified as Issatchenkia sp., Saccharomyces exiguus?, Williopsis saturnus, var. subsufficiens, and 3 W. saturnus according to 26S rDNA D1/D2 region sequence and phenotypic data.
  • Presence of Staphylococcus spp. and Candida spp. in the human oral cavity Medical Microbiology

    Martins, Clélia Aparecida de Paiva; Koga-Ito, Cristiane Yumi; Jorge, Antonio Olavo Cardoso

    Abstract in Portuguese:

    A presença de leveduras do gênero Candida e Staphylococcus na cavidade bucal humana é de extrema importância, pois podem atuar como microbiota suplementar e em determinadas situações causar doença bucal ou sistêmica. O objetivo do presente trabalho foi estudar a prevalência de Candida spp. e Staphylococcus spp. na cavidade bucal humana. Enxagüe bucal foi coletado de 68 indivíduos segundo a técnica proposta por Samaranayake e MacFarlane e a seguir semeados em ágar Sabouraud dextrose com cloranfenicol e ágar Baird-Parker. Após crescimento, os microrganismos foram isolados e identificados através de provas bioquímicas. Os dados foram analisados através de análise de variância (ANOVA). Leveduras do gênero Candida foram encontradas em 61,76% dos indivíduos examinados, sendo C. albicans a mais frequentemente isolada. Staphylococcus spp. foram isolados em 95,60% das cavidades bucais, sendo 41 cepas (63%) coagulase-negativas. Das cepas coagulase-positivas, nove eram S. aureus, 11 S. hyicus, e quatro S. schleiferi subespécie coagulans. Não foi observada correlação entre as contagens (UFC) de Candida spp. e Staphylococcus spp. encontradas nos enxagües bucais dos indivíduos examinados.

    Abstract in English:

    The presence of yeasts and staphylococci in the oral cavity is important because they can act as supplementary microbiota and in certain situations can cause oral or systemic diseases. The aim of this work was to study the prevalence of Candida spp. and Staphylococcus spp. in the human oral cavity. Oral rinses were collected from sixty-eight individuals according to the technique described by Samaranayake and MacFarlane and then cultured on Sabouraud medium supplemented with chloramphenicol and Baird-Parker agar. After the incubation period, the microorganisms were isolated and identified through biochemical tests. The data obtained were statistically analysed by ANOVA. Candida spp. were isolated from 61.76% of the examined individuals and C. albicans was the more frequently isolated specie. Staphylococcus spp. were isolated from 95.60% of the individuals and 41 strains were coagulase negative (63%). Among the coagulase positive strains, nine were S. aureus, 11 S. hyicus and 4 S. schleiferi subspecie coagulans. No correlation was observed between the counts (cfu) of the isolated Candida spp. and Staphylococcus spp.
  • Trichosporon pullulans (Lidner) Diddens & Lodder isolated from the oral cavity of AIDS patient Medical Microbiology

    Neves, Rejane Pereira; Cavalcanti, Maria Auxiliadora de Queiroz; Chaves, Guilherme Maranhão; Magalhães, Oliane Maria Correia

    Abstract in English:

    Trichosporon has been reported as a remarkable emerging pathogen and usually occurs in imunodrepressed patients. An oropharyngeal secretion sample was collected from a patient with AIDS, at the Sector of Infectious and Parasitic Diseases, Osvaldo Cruz University Hospital, Pernambuco State, Brazil. No yeast cells or arthroconidia were observed in the direct exam, but a culture was positive for Trichosporon pullulans, which is being reported in an AIDS patient for the first time.
  • Sensitivity of rabbit fibrochondrocytes to mycoplasmas Medical Microbiology

    Nascimento, Carlos Manuel de Oliveira; Figueiredo, Cristina Adelaide; Timenetsky, Jorge

    Abstract in Portuguese:

    Cultura primária de menisco de coelho (Fibrocondrócito-FcrC) foi infectada por 24 horas com diferentes inóculos (10² to 10(7) Unidade Formadoras de Colonias-UFC) de Mycoplasma hominis PG-21, M. pneumoniae FH e 1428 ou M. arthritidis PG-6. A severidade dos diferentes efeitos citopáticos-EC foram dependentes do inóculo, espécie e cepa de micoplasma. Estas bactérias foram reisoladas de todos os FcrC infectados e o meio SP4 para micoplasmas também causou efeito tóxico para os FcrC. Concluiu-se que os fibrocondrócitos de coelho foram sensíveis à infecção por micoplasmas e também ao meio SP4.

    Abstract in English:

    Primary cell culture from rabbit meniscus (fibrochondrocytes-FcrC) was infected for 24 hours with different inocula (10² to 10(7) Colony Forming Units-CFU) of Mycoplasma hominis PG-21, M. pneumoniae FH and 1428 or M. arthritidis PG-6. The severity of the different obtained cytophatic effects-CPE was inoculum, Mycoplasma species and strain dependant. These bacteria were recovered from all infected FcrC and the SP4 medium for mycoplasmas also caused toxic effect on the FcrC. It was concluded that rabbit fibrochondrocytes were sensitive to mycoplasma infection, as well as to the SP4 mycoplasma medium.
  • Antifungal properties of Brazilian cerrado plants Micology

    Souza, Lúcia Kioko Hasimoto e; Oliveira, Cecília Maria Alves de; Ferri, Pedro Henrique; Santos, Suzana Costa; Oliveira Júnior, Juldásio Galdino de; Miranda, André Thiago Borges; Lião, Luciano Morais; Silva, Maria do Rosário Rodrigues

    Abstract in Portuguese:

    A atividade antifúngica de extratos etanólicos de folhas de Hyptis ovalifolia, H. suaveolens, H. saxatilis, Hyptidendrum canum, Eugenia uniflora, E. dysenterica, Caryocar brasiliensis e Lafoensia pacari sobre isolados de dermatófitos foi verificada. Os extratos mais ativos foram os de H. ovalifolia e E. uniflora, enquanto que Trichophyton rubrum foi o dermatófito mais sensível a ação das plantas. Estes dados demonstram as propriedades antifúngicas de plantas do Cerrado em ensaios in vitro.

    Abstract in English:

    Ethanolic extracts from leaves of Hyptis ovalifolia, H. suaveolens, H. saxatilis, Hyptidendrum canum, Eugenia uniflora, E. dysenterica, Caryocar brasiliensis and Lafoensia pacari were investigated for their antifungal activity against dermatophytes. The most effective plants were H. ovalifolia and E. uniflora, while Trichophyton rubrum was the most sensitive among the four dermatophytes species evaluated. This study has demonstrated antifungal properties of Brazilian Cerrado plant extracts in "in vitro" assays.
  • Distribution of aflatoxins in corn fractions visually segregated for defects Micology

    Piedade, Fabiana Segatti; Fonseca, Homero; Gloria, Eduardo Micotti da; Calori-Domingues, Maria Antonia; Piedade, Sônia Maria Stefano; Barbin, Décio

    Abstract in Portuguese:

    A distribuição de aflatoxinas em frações de milho obtidas após segregação visual de defeitos em 30 amostras, sabidamente contaminadas, foi estudada. Cada amostra foi passada em peneiras de crivos redondos de 5,0 mm de diâmetro, classificadas por tipo e então separadas em grãos sadios (regulares) e não sadios (ardidos, avariados, brotados, mofados carunchados, chochos, quebrados, descoloridos e avariados por outras causas) definidos pela Classificação Oficial Brasileira para milho. Os grãos não sadios mostraram contaminação maior em todas as amostras. O nível de contaminação dos grãos não sadios (20% do peso total) variou de 23 a 1365 µg/kg de aflatoxinas (B1, B2, G1 e G2) e foram mais elevados que nos grãos sadios (p<1%), que variaram de não detectada (ND) a 125 µg/kg e, em 87% destas os conteúdos de aflatoxinas foram menores que 20 µg/kg. Foram encontrados índices estatisticamente significativos entre as percentagens de grupos de defeitos, tais como, fermentados, imaturos, mofados, ardidos, brotados, total de grãos avariados, com os níveis estimados de contaminação para as frações sadias e não sadias. Concluiu-se que a fração de grãos não sadios, mesmo apresentando pequeno peso, contribuiu com 84% da contaminação estimada das amostras e que a separação dos grãos não sadios poderá favorecer uma redução na contaminação dos lotes de milho. Os tipos 3 e AP predominaram nas amostras do experimento.

    Abstract in English:

    The aflatoxin distribution in corn fractions obtained after visual segregation for defects in 30 samples, known to be contaminated, was studied. Each sample was passed through a 5.0 mm round holes sieve, graded for defects and then segregated in sound kernels (regular kernels) and non-sound kernels (injured, germinated, fermented, moldy, heated, insect damaged, immature, broken, hollow, fermented up to ¼, discolored, extraneous materials, and injured by other causes), as defined by the Brazilian Official Grading rules for corn. The non-sound kernels showed the highest contamination levels in all samples. The contamination levels of non-sound kernels (20% of total weight) ranged from 23 to 1,365 µg/kg of aflatoxins (B1, B2, G1 and G2) and were higher than sound kernels (p<1%) ranging from not detected (ND) to 126 µg/kg and in 87% of these the aflatoxin contents were lower than 20 µg/kg. Statistically significant correlation indexes were found among the percentage of defective groups like fermented, heated and sprouted kernels or the total injured kernels, and the estimated contamination levels for the sound and non sound fractions. It was concluded that the non-sound kernels fraction, even being small in weight, has contributed with 84% of the estimated contamination of the samples. The segregation of the non-sound kernels would favor a reduction in the contamination of corn lots. The poorer quality corn types (types 3 and Bellow Standart) have predominated among samples of the experiment.
  • Doxorubicin and etoposide induce somatic recombination in diploid cells of Aspergillus nidulans Micology

    Chiuchetta, Simone Jurema Ruggeri; Castro-Prado, Marialba Avezum Alves de

    Abstract in Portuguese:

    Doxorubicina e etoposida são agentes intercalantes que inibem a ação da enzima topoisomerase II. Ambas drogas são amplamente utilizadas no tratamento de neoplasias. O potencial recombinagênico destes agentes e seus efeitos sobre o ciclo assexual de Aspergillus nidulans foram avaliados no presente trabalho. Duas linhagens diplóides heterozigotas foram utilizadas: uma selvagem (uvsH+//uvsH+) e outra deficiente para o reparo do DNA (uvsH//uvsH). O potencial recombinagênico destas drogas foi avaliado pela indução de homozigose de genes recessivos a partir de células heterozigotas. Doxorubicina e etoposida apresentaram efeitos recombinagênicos em ambas linhagens utilizadas. Os resultados permitem concluir que doxorubicina e etoposida são agentes potencialmente capazes de induzir malignidades secundárias, mediadas pelo crossing-over mitótico, em células diplóides eucariotas.

    Abstract in English:

    Doxorubicin and etoposide are intercalating agents that inhibit the action of the enzyme topoisomerase II. Both drugs present therapeutic activity in numerous human neoplasms In the present work the recombinagenic potential of these drugs was evaluated by ascomycete Aspergillus nidulans. Their effects on the asexual cycle of A. nidulans was also appraised. Two heterozygous diploid strains of A. nidulans, a wild (uvsH+//uvsH+) and a defective to the DNA repair (uvsH//uvsH) were used. The drugs' recombinagenic potential was evaluated by their capacity to induce homozygosis of recessive genes from heterozygous cells. Both drugs have a recombinagenic effect on diploid cells of A. nidulans. Doxorubicin and etoposide are potentially capable to induce secondary malignancies, mediated by the mitotic crossing-over in eukaryotic cells.
  • Detection of Mycoplasma pulmonis in laboratory rats Veterinary Microbiology

    Barreto, Maria Lucia; Nascimento, Elmiro Rosendo do; Campos, Carlos Augusto de Martino; Nascimento, Maria da Graça Fichel do; Lignon, Gilberto Brasil; Lira, Marie Luce Flores; Silva, Ricardo G.

    Abstract in Portuguese:

    O presente estudo foi desenvolvido em ratos de dois biotérios, um em Niterói e outro no Rio de Janeiro, sendo um classificado como convencional controlado e o outro como convencional. O objetivo foi verificar a presença do Mycoplasma pulmonis em animais que apresentavam sintomas de doença respiratória e baixa produtividade. No biotério convencional controlado foram necropsiados 16 ratos da linhagem Wistar-Furth enquanto no biotério convencional a necrópsia foi realizada em 12 ratos da linhagem Hooded Lister. Os espécimes de pulmão, traquéia, orofaringe, ouvido médio, útero e ovário foram submetidas ao cultivo e o soro obtido ao teste de ELISA. Dos 28 ratos que foram submetidos ao cultivo para micoplasmas, 57,14% (16/28) foram positivos para M. pulmonis sendo 81,25% (13/16) provenientes do biotério convencional controlado, enquanto no biotério convencional a taxa foi de 25,00% (3/12). O teste de ELISA foi realizado em soro de 20 animais, de ambos os biotérios, verificando-se que no biotério convencional controlado, 92,86% (13/14) dos ratos examinados, foram positivos enquanto 7,14% (1/14) foram considerados suspeitos. No biotério convencional, 100% (6/6) dos ratos foram positivos. Esses resultados confirmaram que M.pulmonis era o agente etiológico da doença respiratória que acometia os animais estudados e que a sensibilidade do ELISA foi maior do que a do isolamento.

    Abstract in English:

    This work was conducted on rats in two premises located in Niterói and Rio de Janeiro, Brazil. One is classified as conventional controlled and the other, conventional. The objective of the present study was to detect the presence of Mycoplasma pulmonis in animals with symptoms of respiratory disease and low reproductive performance. In the conventional controlled premises, 16 rats of Wistar-Furth strain were necropsied while in the conventional premises necropsy was performed on 12 rats of Hooded Lister strain. The clinical samples of lungs, trachea, oropharynx, middle ear, uterus and ovaries were subjected to culturing while the sera were tested for antibody detection. From 28 rats, 57.14% (16/28) were culture positive for M. pulmonis, being 81.25% (13/16) from the conventional controlled premises, and 25.00% (3/12) from the conventional premises. The ELISA test was carried out in 20 animals of both colonies. In the conventional controlled premises, 92.86% (13/14) were positive for M. pulmonis, and 7.14% (1/14) were suspicious, while in the conventional premises, 100% (6/6) of the samples were positive. The results confirmed that M. pulmonis was the etiologic agent of the disease that affected the rats under study, and that the ELISA positivity rated higher than culture.
  • Cross neutralizing antibodies in hamsters vaccinated with leptospiral bacterins produced with three serovars of serogroup Sejroe Veterinary Microbiology

    Tabata, Rosana; Scanavini Neto, Hugo; Zuanaze, Marcelo Alexandre Fagnani; Oliveira, Eugenia Márcia de Deus; Dias, Ricardo Augusto; Morais, Zenaide Maria de; Ito, Fumio Honma; Vasconcellos, Silvio Arruda

    Abstract in English:

    Three leptospiral bacterins, produced with different serovars of Serogroup Sejroe, namely the hardjo (bacterin A), wolffi (bacterin B) and guaricura (bacterin C), were evaluated in male hamsters (Mesocricetus auratus) by comparing the agglutinating and neutralizing antibodies titers using microscopic agglutination (MAT) and in vitro growth inhibition (GIT) tests. The immunization schedule was based on two 1.0 mL doses of non-diluted formalininactivated whole culture bacterin given through subcutaneous route with 10-day interval. The challenge was performed ten days after the second vaccine dose, when the animals were inoculated with 0.2 mL of non-inactivated cultures of each serovar through intraperitoneal route. On the 21st post-challenge day (PCD), all animals were bled and their sera were joined in pools (n=8) and tested by MAT and GIT. All vaccinated and control animals presented no clinical signs of leptospirosis after the challenge, but the serovar guaricura was isolated from the kidneys of control animals on the 21st PCD. The MAT results showed cross agglutinins between serovars hardjo and wolffi, and between wolffi and guaricura. The GIT results revealed the presence of cross neutralizing antibodies between serovars wolffi or guaricura against hardjo, wolffi and guaricura. It was found that the tested strain of serovar hardjo did not produce detectable levels of neutralizing antibodies, indicating its poor immunogenicity.
  • The development of an analytical method for two mycotoxins, patulin and verruculogen, and survey of their presence in commercial tomato pulp Food Microbiology

    Kawashima, Luciane M.; Soares, Lucia M. Valente; Massaguer, Pilar R. de

    Abstract in Portuguese:

    A micotoxina patulina causa distúrbios gastrointestinais e efeitos neurotóxicos e imunotóxicos em animais. Pode ser produzida por várias espécies de Penicillium, Aspergillus e Byssochlamys e tem sido encontrada em frutas, verduras e cereais. Verruculogeno é uma toxina produzida principalmente por espécies de Penicillium e Aspergillus e causa fortes tremores em animais afetados. Tomates são especialmente susceptíveis a invasão fúngica e seus produtos precisam ser investigados com relação a possíveis contaminações por micotoxinas. Um método para determinação de patulina e verruculogeno em produtos de tomate foi desenvolvido envolvendo uma extração com acetato de etila, uma limpeza em coluna de sílica gel e determinação e confirmação por cromatografia de alta eficiência com detector de arranjo de diodos. Os limites de quantificação foram de 10 ng/g e 20 ng/g e as recuperações medias foram de 89% e 65% para patulina e verruculogeno, respectivamente. O processamento de duas fábricas de produtos de tomate foi amostrado durante 1996, 1997 e 1998. Oitenta e quatro amostras de polpa de tomate foram analisadas para patulina e verruculogeno. As toxinas não foram detectadas em nenhuma das amostras.

    Abstract in English:

    The mycotoxin patulin causes gastroinstestinal distress, neurotoxic and immunotoxic effects in animals. It can be produced by several species of Penicillium, Aspergillus and Byssochlamys and it has been found in fruits, vegetables and cereals. Verruculogen is a toxin produced mainly by Penicillium and Aspergillus spp. and causes severe tremors in affected animals. Tomatoes are especially susceptible to fungi invasion and their products need to be investigated for possible mycotoxin contamination. A method for the determination of patulin and verruculogen in tomato products was developed involving an extraction with ethyl acetate, a cleanup by silica gel column and determination and confirmation by high performance liquid chromatography with diode array detector. The quantification limits of the method, defined as the minimum amount that allowed quantification and confirmation by the DAD detector, were 10 ng/g and 20 ng/g. The average recovery for patulin at five levels of addition (from 20 to 200 ng/g) was 75% and at the single level of 100 ng/g was 90 % .The average recovery for verruculogen at five levels of addition (from 50 to 300 ng/g) was 54% and at the single level of 100 ng/g was 52%. The processing of two tomato plants was followed during 1996, 1997, and 1998. Eighty-four samples of tomato pulp were analyzed for patulin and verruculogen. The toxins were not detected in any of the samples.
  • Construction and characterization of a glycoprotein E deletion mutant of bovine herpesvirus type 1.2 strain isolated in Brazil Virology

    Franco, Ana C.; Rijsewijk, Frans A.M.; Flores, Eduardo F.; Weiblen, Rudi; Roehe, Paulo M.

    Abstract in Portuguese:

    Este artigo descreve a construção e caracterização de uma amostra de um herpesvírus bovino tipo 1.2a (BoHV-1.2a) que apresenta uma deleção na região genômica que codifica a glicoproteína E (gE). A deleção gênica foi induzida através da co-transfecção de um fragmento de deleção, contendo as regiões 5´e 3´flanqueadoras da gE, com o DNA viral intacto de uma amostra viral isolada de um animal que apresentava doença respiratória. O isolamento do vírus gE negativo (gE-) foi realizado com auxílio da técnica de imunoperoxidase em que foi utilizado como anticorpo primário um anticorpo monoclonal anti-gE. O vírus gE- foi purificado e o DNA isolado desta amostra foi examinado através das técnicas de análise por enzimas de restrição e "Southern blot". Esta amostra gE- será avaliada como candidata para compor uma vacina diferencial contra a rinotraqueíte infecciosa dos bovinos.

    Abstract in English:

    This paper describes the construction and characterization of a Brazilian strain of bovine herpesvirus type 1.2a (BoHV-1.2a) with a deletion of the glycoprotein E (gE) gene. The deletion was introduced by co-transfection of a deletion fragment containing the 5´and 3´gE flanking regions and genomic DNA of wild type BoHV-1 into bovine cells. Isolation of gE deletion mutant was performed by immunoperoxidase staining with an anti-gE monoclonal antibody. Viral clones were plaque purified and further examined by restriction endonuclesase digestion and Southern blot hybridization. This gE deletion mutant will be evaluated as a vaccinal virus, in order to determine its potential use for a differential vaccine.
  • Sampling plan for the analysis of aflatoxin in peanuts and corn: an update Erratum

    Fonseca, Homero
Sociedade Brasileira de Microbiologia USP - ICB III - Dep. de Microbiologia, Sociedade Brasileira de Microbiologia, Av. Prof. Lineu Prestes, 2415, Cidade Universitária, 05508-900 São Paulo, SP - Brasil, Ramal USP 7979, Tel. / Fax: (55 11) 3813-9647 ou 3037-7095 - São Paulo - SP - Brazil
E-mail: bjm@sbmicrobiologia.org.br